Abstract (Objective) Trypanosoma cruzi, a causal agent of Chagas’ disease, is a parasite whose life cycle alternates between an invertebrate (triatomine) and a vertebrate (mammal) host. Various studies have shown that in T. cruzi, HSP83 (a homolog of HSP90) is essential for cell division and control of the response to thermal stress. This investigation focused on studying the cloning, bioinformatic characterization, and expression of the heat shock protein HSP83 T. cruzi gene for further cell signaling studies. (Methodology) RNA was extracted from T. cruzi epimastigotes (EPm6 clone, MHOM/VE/2007/ 6c) using a commercial kit. The cDNA encoding HSP83 was determined using RT-PCR on extracted mRNA, for which the primers were designed based on the HSP83 sequence of T. cruzi strain CL Brener. Cloning was performed using pGEM®T-Easy and subcloned into the expression vector pQE30. Sequence and bioinformatic characterization were performed. The gene was expressed, and the recombinant protein was purified using affinity chromatography and identified through immunoblotting. (Results) Sequence analysis showed similarity to the gene encoding HSP83 from Trypanosoma cruzi, and HSP domains and B epitopes in the sequence were also observed. After 3 hours of induction with IPTG, a recombinant protein with an approximate weight of 83 kDa was obtained. The immunoblotting reaction with hyperimmune anti-T. cruzi epimastigote serum helped detect a single band with a molecular weight of nearly 83 kDa. (Conclusions) All results indicate that the cloning and characterization of HSP83 from Trypanosoma cruzi was achieved.

Resumo (Objetivo) O Tryapanosoma cruzi, agente causador da doença de Chagas, é um parasita que apresenta uma alternância em seu ciclo de vida entre um hospedeiro invertebrado triatomíneo) e um vertebrado(mamífero). Vários estudos demonstraram que, no T. cruzi, a HSP83 (homóloga da HSP90) é essencial para a divisão celular e o controle da resposta ao estresse térmico. Esta pesquisa concentrou-se no estudo da clonagem, caracterização bioinformática e expressão do gene da proteína de choque térmico HSP83 do T. cruzi para estudos adicionais de sinalização. (Metodologia) O RNA foi extraído de epimastigotas de T. cruzi (clone EPm6/MOHM/VE/2007/ 6c) usando um kit comercial. O cDNA que codifica a HSP83 foi obtido por meio de RT-PCR a partir do mRNA extraído, para o qual os primers foram projetados com base na sequência da HSP83 da cepa T. cruzi CL Brener. A clonagem foi realizada com o pGEM®T-Easy e subclonada no vetor de expressão pQE30. Foi realizada a caracterização bioinformática e de sequência. O gene foi expresso e a proteína recombinante foi purificada por cromatografia de afinidade e identificada por imunotransferência. (Resultados) A análise da sequência mostrou similaridade com o gene HSP83 do Trypanosoma cruzi e os domínios HSP, bem como os epítopos B, foram observados na sequência. Após 3 horas de indução com IPTG, foi obtida uma proteína recombinante com peso aproximado de 83 kDa. A imunotransferência com soro hiperimune antiepimastigota de T. cruzi permitiu a detecção de uma única banda com peso molecular de aproximadamente 83 kDa. (Conclusões) Todos os resultados indicam que a clonagem e a caracterização da HSP83 do Trypanosoma cruzi foram alcançadas.

Resumen (Objetivo) Tryapanosoma cruzi, un agente causal de la enfermedad de Chagas, es un parásito que presenta una alternancia en su ciclo de vida entre un hospedador invertebrado (triatomino) y uno vertebrado (mamífero). Varios estudios han demostrado que en T. cruzi, HSP83 (homólogo de HSP90) es esencial para la división celular y el control de la respuesta al estrés térmico. Esta investigación se concentró en el estudio de la clonación, la caracterización bioinformática y la expresión del gen de la proteína de choque térmico HSP83 de T. cruzi para estudios posteriores sobre señalización. (Metodología) El ARN fue extraído de epimagostigotes T. cruci (clon EPm6/MOHM/VE/2007/ 6c), utilizando un kit comercial. El ADNc que codifica HSP83 se obtuvo utilizando RT-PCR, a partir del ARNm extraído, para lo cual se diseñaron los cebadores con base en la secuencia HSP83 de la cepa T. cruzi CL Brener. La clonación se realizó usando pGEM®T-Easy y se subclonó en el vector de expresión pQE30. Se efectuó la caracterización bioinformática y de secuencias. El gen se expresó y la proteína recombinante se purificó por cromatografía de afinidad, igual que se identificó por inmunotransferencia. (Resultados) El análisis de secuencia mostró similitud con el gen HSP83 de Trypanosoma cruzi y se observaron dominios HSP, así como epítopos B en la secuencia. Después de 3 horas de inducción con IPTG, se obtuvo una proteína recombinante con un peso aproximado de 83 kDa. La reacción de inmunotransferencia con suero hiperinmune anti-epimastigote de T. cruzi permitió la detección de una sola banda con un peso molecular de aproximadamente 83 kDa. (Conclusiones) Todos los resultados indican que se logró la clonación y caracterización de HSP83 de Trypanosoma cruzi.

Abstract Triatoma jatai Gonçalves et al., 2013 is a wild triatomine known so far only from the state of Tocantins, Brazil. This work aims to report a new occurrence of T. jatai in the state of Ceará and update its geographic distribution in the country by means of a map. In August 2022, during sampling in Dr. José Maria Soares Barata private collection, a female specimen of T. jatai was found. This specimen was collected in 1998 at a wild environment in the locality of Coqueiro, municipality of Salitre, Ceará. The identification was based on the original description of T. jatai. The specimen was donated and deposited in the collection of the Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Unesp, Araraquara, São Paulo, Brazil. With this new first record, the distribution of the species is extended to the state of Ceará, which is represented by ten Triatominae species.

Resumen Triatoma jatai Gonçalves et al., 2013 es un triatomino silvestre conocido hasta el momento sólo del estado de Tocantins, Brasil. El presente trabajo tiene como objetivo reportar un nuevo registro de T. jatai en el estado de Ceará, actualizando su distribución geográfica en el país por medio de un mapa. En agosto de 2022, durante la revisión de la colección privada del Dr. José María Soares Barata, se encontró un ejemplar hembra de T. jatai. Este ejemplar fue recolectado en 1998 en un ambiente silvestre en la localidad de Coqueiro, municipio de Salitre, Ceará. La identificación se basó en la descripción original de T. jatai. El ejemplar fue donado y depositado en la colección de la Facultad de Ciencias Farmacéuticas, Unesp, Araraquara, São Paulo, Brasil. Con este nuevo primer registro se amplía la distribución de la especie al estado de Ceará, el cual queda representado por diez especies de Triatominae.

Abstract Triatoma melanocephala is an endemic species of Brazil. Phenotypic (external morphology) and molecular studies were performed to contribute to the taxonomy and phylogeny of triatomines, since few studies on the internal morphology of these were found. In order to contribute to the biological, morphological and taxonomic knowledge of the subfamily Triatominae, this work describes the internal morphology of the reproductive apparatus of adult males and females of T. melanocephala. For this work 30 specimens from Jequié, Bahia, Brazil were used. Triatoma melanocephala's reproductive system included slim spermathecae insertions, large/medium rounded terminal bodies, and irregular ellipsoid-shaped testicles with a transparent, vitreous appearance. These results contribute to the knowledge of the reproductive biology of this species of vectorial importance and show taxonomic relevance, as well as possible application in systematic studies.

Resumen Triatoma melanocephala es una especie endémica de Brasil. Se realizaron estudios fenotípicos (morfología externa) y moleculares para contribuir a la taxonomía y filogenia de los triatominos, ya que se encontraron pocos estudios sobre la morfología interna de estos. Con el fin de contribuir al conocimiento biológico, morfológico y taxonómico de la subfamilia Triatominae, este trabajo muestra la morfología interna del aparato reproductor de adultos machos y hembras de T. melanocephala. Para este trabajo se utilizaron 30 especímenes recolectados en Jequié, Bahía, Brasil. El sistema reproductivo de T. melanocephala incluye inserciones delgadas de espermatecas, cuerpos grandes/medianos con terminaciones redondeadas, y testículos de forma elipsoidal irregular con una apariencia transparente y vitrea. Estos resultados contribuyen al conocimiento de la biología reproductiva de esta especie de importancia vectorial y muestran relevancia taxonómica, así como su posible aplicación en estudios sistemáticos.

Abstract The occurrence of Panstrongylus geniculatus in a cave in Porto Velho in the state Rondônia, Brazil is reported for the first time. A triatomine specimen collected in Sr. Rena cave, was found to be a female of Panstrongylus geniculatus.

Resumen Se reporta por primera vez la presencia de Panstrongylus geniculatus en una cueva en Porto Velho en el estado de Rondonia, Brasil. Un ejemplar de triatomino recolectado en la cueva Sr. Rena, resultó ser una hembra de Panstrongylus geniculatus.

Abstract The occurrence of Belminus laportei Lent, Jurberg & Carcavallo, 1995 (Hemiptera: Reduviidae: Triatominae) in French Guiana is reported for the first time. A triatomine specimen collected in Belizon, French Guiana was found to be a female of Belminus laportei, a species known so far only from Para State, Brazil. The discovery of this species broadens its known geographic distribution and increases the number of triatomines recorded from the French Guiana to fifteen.

Resumen Se informa por primera vez la presencia de Belminus laportei Lent, Jurberg y Carcavallo, 1995 (Hemiptera: Reduviidae: Triatominae) en la Guayana Francesa. Se descubrió que un espécimen de triatomino recolectado en Bélizon, Guayana Francesa, era una hembra de Belminus laportei, una especie que hasta ahora solo era conocía del estado de Pará, Brasil. El hallazgo de esta especie amplía su distribución geográfica conocida e incrementa a quince el número de triatominos registrados para Guayana Francesa.

Resumen Introducción. Belminus ferroae es un triatomino de comportamiento entomófago, sin embargo, puede alimentarse de vertebrados ocasionalmente. No se ha demostrado infección natural por Trypanosoma cruzi en esta especie, como tampoco la metaciclogénesis del parásito. Objetivo. Examinar la metaciclogénesis de T. cruzi en B. ferroae y la capacidad infectiva de las heces o sus contenidos intestinales en roedores. Materiales y métodos. Se analizaron las heces y la orina expulsadas espontáneamente por los insectos o mediante compresión abdominal o extracción del contenido intestinal a los 10, 20, 30, 40, 50 y 60 días. Se cuantificó la carga parasitaria de T. cruzi y sus formas evolutivas se identificaron con tinción de Giemsa. Asimismo, se evaluó en ratones albinos la capacidad infectiva de los tripomastigotes metacíclicos de T. cruzi obtenidos de las heces o contenidos intestinales de los especímenes infectados. Resultados. El análisis parasitológico reveló tres (15 %) insectos infectados con T.cruzi a los 30 (n=1), 40 (n=1) y 50 (n=1) días después de la infección con cargas parasitarias de hasta 1,62 x 105 tripanosomas/mm3 y porcentajes de metaciclogénesis entre el 3,5 y el 6,78 %. Conclusiones. Se demuestra por primera vez, en una especie del género Belminus, la metaciclogenésis de T. cruzi en condiciones de laboratorio y la capacidad infectiva de las heces para un huésped vertebrado.

Abstract Introduction: Belminus ferroae is a triatominae with entomophagous behavior. However, it may occasionally feed on vertebrates. Currently, there is no evidence of natural infection with Trypanosoma cruzi or the occurrence of metacyclogenesis in this species. Objective: To test T. cruzi metacyclogenesis in B. ferroae and the infectivity of their feces or intestinal contents in rodents under laboratory conditions. Materials and methods: Twenty nymphs of B. ferroae were infected with an autochthonous strain of T. cruzi (M/HOM/VE/09/P6). Fecal and urine samples were collected from spontaneous droppings or by compressing the bugs' abdomens and, eventually, by removing their gut contents, and then examined at 10, 20, 30, 40, 50, and 60 days. We quantified T. cruzi parasitic load, as well as the evolutionary forms in feces, urine, and intestinal contents by Giemsa staining. Similarly, we evaluated the infectivity of T. cruzi metacyclic trypomastigotes in albino mice. Results: The parasitological analysis showed three insects (15%) infected with T. cruzi at 30 (n=1), 40 (n=1), and 50 (n=1) days post-infection. We observed parasitic loads of up to 1.62 x 105 trypanosomes/mm3 and metacyclogenesis percentages between 3.5% and 6.78%. Conclusions: This is the first time that T. cruzi metacyclogenesis is reported in a species of the genus Belminus under laboratory conditions and the infectivity of Belminus' feces is demonstrated on a vertebrate host.

RESUMO A doença de Chagas (DC) é uma enfermidade endêmica negligenciada. Sua forma clássica de transmissão ocorre por meio de insetos triatomíneos hematófagos. Há casos da doença em regiões não endêmicas ocorridos por transmissões alternativas, uma vez que também existe essa possibilidade. O objetivo deste estudo foi relatar um caso de membros da mesma família (natural e residente em Taquarituba, São Paulo, Brasil) diagnosticados com DC. A matriarca da família morava em uma casa de barro na zona rural e relatou contato com o triatomíneo na infância. Dois filhos também são sororreagentes; ambos relataram não terem tido contato com o inseto quando crianças. Análises de prontuário e novos testes laboratoriais foram feitos. O histórico clínico e os recentes exames confirmaram a positividade para DC, tanto na mãe quanto nos filhos. As técnicas parasitológicas demonstraram resultados negativos, constatando forma crônica da doença. Transmissão congênita pode ter ocorrido entre eles, assim como também não se pode descartar a possibilidade de ocorrência de transmissão vetorial por espécies secundárias, visto que os pacientes são oriundos de um município considerado endêmico para DC no passado.

ABSTRACT Chagas disease (CD) is a neglected endemic disease. Its classic form of transmission occurs through hematophagous triatomine insects. Its classic form of transmission occurs through hematophagous triatomine insects. There are cases of the disease in non-endemic regions that occur through alternative transmissions, as this possibility also exists. The aim of this study was to report a case among members of a same family (born and resident in Taquarituba, São Paulo, Brazil) diagnosed with CD. The family matriarch lived in a mud house in the countryside and reported contact with the triatomine during childhood. Two grown-up children are also seroreactive; both reported not having contact with the insect as children. Medical record analyzes and new laboratory tests were performed. Clinical history and recent tests have confirmed positivity for CD in the matriarch and her grown-up children. Parasitological techniques have shown negative results, evidencing that they are in the chronic form of the disease. Congenital transmission may have occurred between them, as well as the possibility of vector transmission by secondary species cannot be ruled out, since the patients come from a municipality considered endemic for CD in the past.

RESUMEN La enfermedadde Chagas (EC) es una infección endémica que ha sido descuidada. Su forma clásica de transmisión ocurre mediante insectos triatominos hematófagos. Hay casos de la enfermedad en regiones no endémicas que ocurrieron por vías alternativas de transmisión, puesto que también hay esa posibilidad. El objetivo de este estudio fue reportar un caso de miembros de una misma familia diagnosticados con EC. La matriarca de la familia vivía en una casa hecha de barro en la zona ruraly reportó contacto con el triatomino en su infancia. Dos hijosson también sero-reactivos, pero no reportaron contacto con el insecto cuando eran ninos. Se hicieron análisis de historial médico y nuevaspruebas de laboratorio. El histórico clínico y laspruebas recientes confirmaran la positividad para EC, tanto en la madre como en los hijos. Las técnicasparasitológicas demostraron resultados negativos, comprobando la forma crónica de la enfermedad. Transmisión congénitapuede haber ocurrido entre ellos, así como no se puede descartar la posibilidad de ocurrencia de transmisión vectorial por especies secundarias, ya que los pacientes proceden de un municipio que fue considerado endémico para EC en el pasado.

ABSTRACT In the present study we evaluated entomological indicators (infection rates, colonization and natural infection) of Triatoma sordida specimens captured in the intra and peridomicile of households of the Paraguayan Chaco in the period 2014 to 2016. The objective was to compare with the previously reported findings in the period 2010 to 2013 in the same region. In addition, the detection of the blood meal source has been incorporated as a complement to define the risk of domiciliation of this secondary vector. Molecular techniques associated with entomological and epidemiological indicators were applied to 220 T. sordida specimens captured in 67 dwellings in 24 locations in the Chaco. Infestation and colonization by T. sordida was detected in the intradomicile 13/67 (19%) and 5/13 (38%) and in the peridomiciliary 54/67 (81%) and 43/54 (80%), respectively. Infection with T. cruzi was detected in 17.3% of the samples analyzed. The blood meal source could be detected in only 13 of 220 specimens (6%), all were positive for chicken blood and corresponded to capture in the peridomicile. The rate of intradomiciliary infestation was 19%, higher than in previous years and similar to the historically endemic areas of the Western Region (18%-20%). The risk of intradomiciliary transmission remains high because in 3 out of 5 dwellings with nymphs of T. sordida, the specimens were infected with T. cruzi. The entomological indicators obtained in the present study agree with previous results of our team, and confirm the vectorial capacity of this secondary triatomine in the transmission of Chagas disease.

RESUMEN En el presente estudio evaluamos indicadores entomológicos (índices de infección, colonización e infección natural) de ejemplares de Triatoma sordida capturados en el intra y peridomicilio de viviendas del Chaco Paraguayo en el período 2014 al 2016. El objetivo fue comparar con los hallazgos previamente reportados en el periodo 2010 al 2013 en la misma región. Además se ha incorporado la detección de fuente de alimentación como complemento para definir el riesgo de domiciliación de este vector secundario. Se aplicaron técnicas moleculares asociados a indicadores entomológicos y epidemiológicos a 220 ejemplares de T. sordida capturados en 67 viviendas de 24 localidades del Chaco. Se detectó infestación y colonización por T. sordida en el intradomicilio 13/67 (19%) y 5/13 (38%) y en el peridomicilio 54/67 (81%) y 43/54 (80%), respectivamente. Se detectó infección con T. cruzi en un 17,3% de los ejemplares analizados. La fuente de alimentación pudo detectarse en tan solo 13 de 220 ejemplares (6%), todos resultaron positivos para sangre de gallina y correspondían a captura en el peridomicilio. El índice de infestación intradomiciliar fue del 19%, superior al de años anteriores y similar a las zonas históricamente endémicas de la Región Occidental (18%-20%). El riesgo de transmisión intradomiciliar sigue siendo elevado porque en 3 de 5 viviendas con ninfas de T. sordida, los ejemplares estaban infectados con T. cruzi. Los indicadores entomológicos obtenidos en el presente estudio concuerdan con resultados previos de nuestro equipo, y confirman la capacidad vectorial de este triatomino secundario en la transmisión de la enfermedad de Chagas.

Resumo: O objetivo do artigo foi confirmar e descrever um surto da doença de Chagas aguda por transmissão oral na mesorregião Oeste Potiguar, Rio Grande do Norte, Brasil. Trata-se de um estudo descritivo do tipo série de casos, tendo como fonte de dados os registros de atendimentos médicos e entrevistas com os casos suspeitos entre 16 de setembro e 19 de novembro de 2015. Realizou-se pesquisa entomológica nas prováveis localidades de infecção dos casos de doença de Chagas aguda. Foram confirmados 18 casos de doença de Chagas aguda em residentes de quatro municípios do Rio Grande do Norte. Os sinais e sintomas mais relatados foram febre e fraqueza (n = 18), seguidos de mialgia (n = 17), prostração, inapetência e edema de membros inferiores (n = 15). A mediana de duração da febre foi de 20 dias (intervalo: 6 a 45 dias). Quinze casos foram confirmados por critério laboratorial e três por vínculo epidemiológico com clínica compatível. Todos os casos confirmados relataram ter consumido caldo de cana da mesma procedência. Foram capturados 110 triatomíneos na fazenda onde ocorreu a moagem da cana consumida. Os insetos estavam no peridomicílio, em amontoados de lenha e próximos ao engenho. A maioria dos exemplares capturados era da espécie Triatoma brasiliensis, e apresentou um índice de infecção natural de 63%. Foi confirmado surto da doença de Chagas de transmissão oral por ingestão de caldo de cana contaminado por triatomíneo infectado, evidenciado pelo vínculo epidemiológico entre os casos investigados e a pesquisa entomológica no local provável de infecção.

Abstract: The aim of this article was to confirm and describe an outbreak of acute Chagas disease involving oral transmission in the western region of Rio Grande do Norte State, Brazil. This was a descriptive case series study in which the data sources were medical records and interviews with suspected cases from September 16 to November 19, 2015. An entomological investigation was conducted in the probable sites of infection for acute Chagas disease cases. Eighteen cases of acute Chagas disease were confirmed in residents of four municipalities (counties) in Rio Grande do Norte State. The most frequently reported signs and symptoms were fever and weakness (n = 18), followed by myalgia (n = 17), prostration, loss of appetite, and edema of the lower limbs (n = 15). Median duration of fever was 20 days (range: 6 to 45 days). Fifteen cases were confirmed by the laboratory criterion and three by epidemiological link with consistent clinical characteristics. All confirmed cases reported having consumed sugar cane juice from the same mill. A total of 110 triatomines were captured on the plantation where the sugar cane had been crushed for juice. The insects were found in the peridomicile, in stacks of firewood and close to the sugar cane mill. The majority of the captured specimens were Triatoma brasiliensis and showed a natural infection rate of 63%. The Chagas disease outbreak was confirmed with oral transmission via ingestion of sugar cane juice contaminated with infected triatomines, as evidenced by the epidemiological link between the investigated cases and the entomological survey in the probable site where the infection occurred.

Resumen: El objetivo de este artículo fue confirmar y describir un brote de la enfermedad de Chagas aguda por transmisión oral en la mesorregión oeste de Rio Grande do Norte, Brasil. Se trata de un estudio descriptivo del tipo serie de casos, contando como fuente de datos los registros de atención médica y entrevistas en los casos sospechosos entre el 16 de septiembre y el 19 de noviembre de 2015. Se realizó una investigación entomológica en las probables localidades de infección de los casos de enfermedad de Chagas aguda. Fueron confirmados 18 casos de enfermedad de Chagas aguda en residentes de cuatro municipios de Rio Grande do Norte. Los signos y síntomas más informados fueron fiebre y debilidad (n = 18), seguidos de mialgia (n = 17), postración, inapetencia y edema de miembros inferiores (n = 15). La media de duración de la fiebre fue de 20 días (intervalo: 6 a 45 días). Quince casos fueron confirmados por criterio de laboratorio y tres por vínculo epidemiológico con clínica compatible. Todos los casos confirmados informaron haber consumido caldo de caña de la misma procedencia. Fueron capturados 110 triatominos en la hacienda donde se produjo la molienda de la caña consumida. Los insectos estaban en el peridomicilio, en montones de leña y cerca del ingenio azucarero. La mayoría de los ejemplares capturados era de la especie Triatoma brasiliensis, y presentó un índice de infección natural de un 63%. Se confirmó un brote de la enfermedad de Chagas de transmisión oral por ingestión de caldo de caña contaminado por triatomino infectado, evidenciado por el vínculo epidemiológico entre los casos investigados y la investigación entomológica en el lugar probable de infección.

Resumo: O objetivo do artigo foi confirmar e descrever um surto da doença de Chagas aguda por transmissão oral na mesorregião Oeste Potiguar, Rio Grande do Norte, Brasil. Trata-se de um estudo descritivo do tipo série de casos, tendo como fonte de dados os registros de atendimentos médicos e entrevistas com os casos suspeitos entre 16 de setembro e 19 de novembro de 2015. Realizou-se pesquisa entomológica nas prováveis localidades de infecção dos casos de doença de Chagas aguda. Foram confirmados 18 casos de doença de Chagas aguda em residentes de quatro municípios do Rio Grande do Norte. Os sinais e sintomas mais relatados foram febre e fraqueza (n = 18), seguidos de mialgia (n = 17), prostração, inapetência e edema de membros inferiores (n = 15). A mediana de duração da febre foi de 20 dias (intervalo: 6 a 45 dias). Quinze casos foram confirmados por critério laboratorial e três por vínculo epidemiológico com clínica compatível. Todos os casos confirmados relataram ter consumido caldo de cana da mesma procedência. Foram capturados 110 triatomíneos na fazenda onde ocorreu a moagem da cana consumida. Os insetos estavam no peridomicílio, em amontoados de lenha e próximos ao engenho. A maioria dos exemplares capturados era da espécie Triatoma brasiliensis, e apresentou um índice de infecção natural de 63%. Foi confirmado surto da doença de Chagas de transmissão oral por ingestão de caldo de cana contaminado por triatomíneo infectado, evidenciado pelo vínculo epidemiológico entre os casos investigados e a pesquisa entomológica no local provável de infecção.

Abstract: The aim of this article was to confirm and describe an outbreak of acute Chagas disease involving oral transmission in the western region of Rio Grande do Norte State, Brazil. This was a descriptive case series study in which the data sources were medical records and interviews with suspected cases from September 16 to November 19, 2015. An entomological investigation was conducted in the probable sites of infection for acute Chagas disease cases. Eighteen cases of acute Chagas disease were confirmed in residents of four municipalities (counties) in Rio Grande do Norte State. The most frequently reported signs and symptoms were fever and weakness (n = 18), followed by myalgia (n = 17), prostration, loss of appetite, and edema of the lower limbs (n = 15). Median duration of fever was 20 days (range: 6 to 45 days). Fifteen cases were confirmed by the laboratory criterion and three by epidemiological link with consistent clinical characteristics. All confirmed cases reported having consumed sugar cane juice from the same mill. A total of 110 triatomines were captured on the plantation where the sugar cane had been crushed for juice. The insects were found in the peridomicile, in stacks of firewood and close to the sugar cane mill. The majority of the captured specimens were Triatoma brasiliensis and showed a natural infection rate of 63%. The Chagas disease outbreak was confirmed with oral transmission via ingestion of sugar cane juice contaminated with infected triatomines, as evidenced by the epidemiological link between the investigated cases and the entomological survey in the probable site where the infection occurred.

Resumen: El objetivo de este artículo fue confirmar y describir un brote de la enfermedad de Chagas aguda por transmisión oral en la mesorregión oeste de Rio Grande do Norte, Brasil. Se trata de un estudio descriptivo del tipo serie de casos, contando como fuente de datos los registros de atención médica y entrevistas en los casos sospechosos entre el 16 de septiembre y el 19 de noviembre de 2015. Se realizó una investigación entomológica en las probables localidades de infección de los casos de enfermedad de Chagas aguda. Fueron confirmados 18 casos de enfermedad de Chagas aguda en residentes de cuatro municipios de Rio Grande do Norte. Los signos y síntomas más informados fueron fiebre y debilidad (n = 18), seguidos de mialgia (n = 17), postración, inapetencia y edema de miembros inferiores (n = 15). La media de duración de la fiebre fue de 20 días (intervalo: 6 a 45 días). Quince casos fueron confirmados por criterio de laboratorio y tres por vínculo epidemiológico con clínica compatible. Todos los casos confirmados informaron haber consumido caldo de caña de la misma procedencia. Fueron capturados 110 triatominos en la hacienda donde se produjo la molienda de la caña consumida. Los insectos estaban en el peridomicilio, en montones de leña y cerca del ingenio azucarero. La mayoría de los ejemplares capturados era de la especie Triatoma brasiliensis, y presentó un índice de infección natural de un 63%. Se confirmó un brote de la enfermedad de Chagas de transmisión oral por ingestión de caldo de caña contaminado por triatomino infectado, evidenciado por el vínculo epidemiológico entre los casos investigados y la investigación entomológica en el lugar probable de infección.

Rhodnius prolixus is the main vector of Chagas disease in Venezuela. The present study aimed to evaluate the effect of aqueous and 50% soy bean oil-based formulations (1x107 conidia/ml) of 13 native Beauveria bassiana (Fungi: Ascomycota) isolates on fourth instar nymphs of Rhodnius prolixus. The conidial suspension were used under laboratory conditions (26 ºC; RH >90%). The treatment was by immersion and mortality and conidiation were evaluated daily for 24 days. The results showed that the fungal soy-bean oil formulations tested were more effective than the aqueous suspension, as attained significantly higher mortality and efficacy percentages and decreased LT50 in the 13 isolates (p<0.05). In all bioassays, the percentages of sporulation on fungus-killed cadavers of nymphs were elevated (>88%). LF14 and LF13 isolates showed a higher percentage of accumulated mortality, efficacy and a lowest LT50 in aqueous formulations as well as in oil-based ones. These B. bassiana isolates appears to be considered as good candidates to be tested under field conditions in biorational control programmes for Chagas disease vectors.

El triatomino Rhodnius prolixus es el principal vector de la enfermedad de Chagas en Venezuela. En el presente estudio se evaluó el efecto de formulaciones de conidias con base acuosa y aceitosa (soya 50%) de 13 aislamientos nativos del hongo entomopatógeno Beauveria bassiana (Fungi: Ascomycota) en ninfas estadio IV del triatomino Rhodnius prolixus. Se utilizó una concentración de 1x107 conidias/ml bajo condiciones de laboratorio (26 °C, HR >90%). Las suspensiones se aplicaron por inmersión. La mortalidad y la conidiación se evaluaron diariamente durante 24 días. Los resultados mostraron que las suspensiones de conidias aceitosas fueron significativamente más eficientes que las acuosas al incrementar la mortalidad y eficacia y disminuir el TL50 de los aislamientos (p<0.05). En todos los bioensayos, los porcentajes de esporulación en los cadáveres de las ninfas fueron elevados (>88%). Los aislamientos LF14 y LF13 mostraron los mayores porcentajes de mortalidad acumulada, eficacia y menores TL50, tanto en formulaciones acuosas como en las aceitosas. Estos aislamientos de B. bassiana aparecen como buenos candidatos para ser probados a nivel de campo en futuros programas de manejo biorracional de los vectores de la enfermedad de Chagas.

Se presentan comentarios y se complementan las ideas de un artículo de reciente publicación en la revista Saber [26(4):420-440, 2014], acerca del hallazgo in natura de tripomastigotes metacíciclos de Trypanosoma (Shizotrypanum) cruzi (Euglenozoa: Kinetoplastea, Trypanosomatidae), agente etiológico de la enfermedad de Chagas. Este protozoario fue encontrado en las heces de ejemplares adultos del insecto triatomino Psammolestes arthuri (Hemiptera: Reduviidae, Triatominae), capturados simpátricamente con los triatominos Rhodnius prolixus y Triatoma maculata en nidos de aves paseriformes en varias comunidades rurales del estado Anzoátegui, en la región Nororiental de Venezuela.

Comments are presented and complement the ideas of a recent study published in the journal Saber [26(4):420- 440, 2014], about the finding in natura of metacyclic trypomastigotes of Trypanosoma (Shizotrypanum) cruzi (Euglenozoa: Kinetoplastea, Trypanosomatidae), etiologic agent of Chagas disease. This protozoan was found in the faeces of adults of the triatomine insect Psammolestes arthuri (Hemiptera: Reduviidae, Triatominae), caught sympatrically with triatomines Rhodnius prolixus and Triatoma maculata within the nests of passerine birds from several rural communities of Anzoátegui state, in the Venezuelan northeastern region.

El seguimiento de las infecciones en triatominos es fundamental en la epidemiología de la enfermedad de Chagas. Demostramos la factibilidad de incorporar un nuevo diagnóstico molecular y detectar mediante LAMP, infecciones por T. cruzi y T. rangeli en muestras de contenido intestinal y hemolinfa preservadas en papel de filtro. La Amplificación Isotérmica mediada por asas (LAMP) es un nuevo método de amplificación de ácidos nucléicos que amplifica DNA con una alta especificidad, eficiencia y rapidez bajo condiciones isotérmicas, utilizando cuatro cebadores y DNA polime-rasa con actividad de cadena desplazante. Se ha aplicado un método que acelera la reacción LAMP mediante la utilización de cebadores aceleradores. El método LAMP utilizado en este trabajo produce una reacción en menos tiempo que el método original, esta reacción fue aplicada sobre muestras de Tripanosoma rangely y Tripanosoma cruzy. Regularmente el tiempo de detección es menor a una hora, este nuevo método nos facilita el análisis genético, incluyendo el diagnostico clínico genético en el laboratorio.

The monitoring of triatomino infections is a key step in the epidemiology of Chagas disease. We demonstrate the feasibility of incorporating new molecular identification tools, we obtained positive LAMP identification of infections by T. cruzi and T. rangeli in haemoliph and digestive track samples preserved in filter paper. Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) is a novel nucleic acid amplification method thatamplifies DNA with high specificity, efficiency and rapidity under isothermal conditions using a set of four specially designed primers and a DNA polymerase with strand displacement activity. We have applied a method that accelerates the LAMP reaction by using additional primers, termed loop primers. The LAMP method presented here uses loop primers to achieve reaction times of less than half that of the original LAMP method, this reaction was applied to samples from Tripanosoma rangely and Tripanosoma cruzy. Since the total time of analysis including detection is less than 1 h, this new method should facilitate genetic analysis, including genetic diagnosis in the clinical laboratory

Introducción: Panstrongylus geniculatus es un triatomino silvestre, vector del Trypanosoma cruzi, intruso en domicilios humanos. Determinar la susceptibilidad a insecticidas de uso común en esta especie es indispensable para detectar prematuramente cepas resistentes. Objetivo: Este estudio se propuso analizar la susceptibilidad a lambdacihalotrina y fenitrotión en dos cepas (laboratorio y campo) de P. geniculatus. Metodología: se estableció la susceptibilidad a lambdacihalotrina y fenitrotión por aplicación tópica, en la cepa de laboratorio-Molagavita 2003 y en la población de campo-Chorreras 2012 en ninfas del primer estadio de P. geniculatus. Se calcularon valores de dosis letal 50 y dosis letal 99 (DL50 y la DL99) para cada insecticida. También se determinaron valores de grado de resistencia (GR) para cada insecticida: DL50 población de campo/DL50 cepa de laboratorio. Resultados: Las DL50 y DL99 en la población de campo y la cepa de laboratorio (en ng/i), fueron: 1,194; 5,764 y 0,024; 0,131 para lambdacihalotrina y 1,476; 7,354 y 0,482; 5,471 para fenitrotión, respectivamente. Los grados de resistencia fueron: GR= 48,9 para lambdacihalotrina y GR= 3,06 para fenitrotión. Conclusiones: La población de campo mostró resistencia a lambdacihalotrina y fenitrotión, probablemente como consecuencia del uso de agroquímicos en la zona. Implementar medidas para la detección temprana de resistencia en triatominos es importante en el diseño de programas de control vectorial.

Introduction: Panstrongylus geniculatus, is a wild triatomine, vector of Trypanosoma cruzy, intruder in human homes. To determine the susceptibility to insecticides commonly used in this specie is essential to detect resistant strains prematurely. Objective: This study aimed to analyze the susceptibility to lambdacyhalothrin and fenitrothion in two strains (laboratory and field) of P. geniculatus. Methodology: susceptibility was established to lambdacyhalothrin and fenitrothion by topical application in the laboratory strain - Molagavita 2003 and field population - Chorreras 2012 in first instar nymphs of P. geniculatus. Values were calculated for lethal dosis 50 and lethal dosis 99 (LD50 and LD99) for each insecticide. Also values were determined to degree of resistance (GR) for each insecticide: field population LD50/LD50 laboratory strain. Results: The LD50 and LD99 in the field population and the laboratory strain (in ng/i) were: 1,194, 5,764 and 0,024, 0,131 for lambdacyhalothrin and 1,476, 7,354 and 0,482, 5,471 to fenitrothion, respectively. The degrees of resistance were: GR=48.9 for lambdacyhalothrin and GR=3.06 for fenitrothion. Conclusions: The field population showed resistance to lambdacyhalothrin and fenitrothion, probably as a result of the use of chemicals in the area. Implement measures for early detection of resistance in triatomines is important in the design of vector control programs.

Panstrongylus geniculatus está adquiriendo cada vez más importancia en la transmisión de la Tripanosomiasis americana o Enfermedad de Chagas tanto en el medio rural como en el medio urbano, mostrando una amplia distribución en casi toda Venezuela. Sin embargo en el Estado Amazonas, el segundo de mayor área, sólo se reporta su presencia en el Municipio Río Negro. Un triatomino de la especie Panstrongylus geniculatus se capturó en el peridomicilio de la comunidad indígena Piaroa de Betania de Topocho, Municipio Atures, y un segundo triatomino de la misma especie, fue capturado en la comunidad indígena Yanomami de Parima B del municipio Alto Orinoco, estado Amazonas, Venezuela. No se encontraron parásitos en el contenido intestinal de ambos triatominos, sin embargo, en el segundo espécimen se detectó por técnicas moleculares la presencia de ADN de Trypanosoma cruzi. Se discute la importancia epidemiológica de estos hallazgos para la transmisión de la Enfermedad de Chagas en esta región.

The importance of Panstrongylus geniculatus as an urban and rural vector of Chagas Disease is increasing in the northern part of South America, particularly in Venezuela where it is widely distributed in its territory. However, in the Amazonas state, the second largest in Venezuela, its presence has only been reported in the Rio Negro Municipality. A Panstrongylus geniculatus triatomine has been captured in the dwellings of a Piaroa indigenous community, called Betania de Topocho in the Municipality of Atures. A second triatomine of the same species was collected in Parima B, a Yanomami indigenous community, located in the Municipality of Alto Orinoco, Amazonas State, Venezuela. No parasites were found in the gut contents of both triatomines. However Trypanosoma cruzi DNA, was detected by molecular techniques in the second specimen. We discuss the epidemiological significance of these findings in terms of the possible role in the transmission of Chagas disease in this region.