Abstract Synthetic pesticides used to combat ticks lose their effectiveness against certain species and can affect human health. The present study evaluated in vitro and in vivo the effect of the aqueous extract of Pimpinella anisum (P. anisum) seeds against Rhipicephalus sanguineus and Ixodes affinis, domestic dog ticks. In the in vitro evaluations, concentrations of 1.25, 2.5, 5, 10, 25, 50, 75 and 100 % of the aqueous extract of P. anisum were applied directly to ticks. The concentrations that had the highest effectiveness in immobilization were 50 %, 75 % and 100 %, but the latter caused immobilization for a longer time (55.89 ± 0.16 min). In the in vivo evaluation, the concentrated aqueous extract was applied to ticks attached to the skin of domestic dogs. Amitraz, a commercial tickicide, was used as a positive control. Both the concentrated aqueous extract and Amitraz caused 100 % of tick detaching. Nonetheless, concentrated aqueous extract of P. anisum seeds was more effective in reducing the average time of tick detaching (60.81 ± 3.17 min) compared to the commercial tickicide Amitraz (145.12 ± 15.97 min). This research suggests that the p-anisaldehyde identified in the aqueous extract could be linked to the immobilization and detaching of R. sanguineus and I. affinis from domestic dogs, suggesting that this extract could be used as a biopesticide to control ticks in domestic dogs.

Resumen Los pesticidas sintéticos utilizados para combatir las garrapatas pierden su eficacia contra determinadas especies y pueden afectar la salud humana. En el presente estudio se evaluó in vitro e in vivo el efecto del extracto acuoso de semillas de Pimpinella anisum (P. anisum) contra Rhipicephalus sanguineus e Ixodes affinis, garrapatas del perro doméstico. En las evaluaciones in vitro se aplicaron directamente a las garrapatas concentraciones de 1.25, 2.5, 5, 10, 25, 50, 75 y 100 % del extracto acuoso de P. anisum. Las concentraciones que provocaron mayor efectividad en la inmovilización fueron 50%, 75% y 100%, pero esta última provocó una inmovilización por mayor tiempo (55.89 ± 0.16 min). En la evaluación in vivo, el extracto acuoso concentrado se aplicó sobre garrapatas adheridas a la piel de perros domésticos. Se utilizó Amitraz, un garrapaticida comercial, como testigo positivo. Tanto el extracto acuoso concentrado como el Amitraz provocaron el 100 % del desprendimiento de garrapatas. Sin embargo, el extracto acuoso concentrado de semillas de P. anisum fue más efectivo para reducir el tiempo promedio de desprendimiento de las garrapatas (60.81 ± 3.17 min) en comparación con el garrapaticida comercial Amitraz (145.12 ± 15.97 min). Esta investigación sugiere que el p-anisaldehído identificado en el extracto acuoso podría estar relacionado con la inmovilización y desprendimiento de R. sanguineus e I. affinis de los perros domésticos, lo que sugiere que este extracto podría usarse como biopesticida para controlar las garrapatas en perros domésticos.

Abstract The main objective of the research work was the identification of Rickettsias sp. and hemoparasites in ticks of the genus Rhipicephalus sanguineus in dogs. A total of 62 adult ticks carried by 62 dogs from the Concepción neighborhood (urban area) of the city of San Juan Bautista, department of Misiones, Paraguay, in 2017, were analyzed (regardless of age, race and sex). A direct smear of the tick hemolymph extracted from the canines and stained with Wright staining was performed. The results revealed that 13% of the ticks were positive for Rickettsias sp. and hemoparasites. In detail, 6.5% showed the presence of elemental bodies of Ehrlichia spp., while another 6.5% presented vermiform bodies of Babesia spp. The remaining 87% of the samples were negative for Rickettsias sp. and hemoparasites. Regarding the canines whose ticks tested positive for Rickettsias sp. and hemoparasites, 4 canines that represent 50 % were male, while 4 canines corresponded to the female sex that represented 50 %. Regarding the age range of the canines sampled, 25 % represented canines under 1 year, 50 % canines between 1 and 5 years old, and 25 % canines older than 5 years. Regarding the breed of canines whose ticks were positive for Rickettsias sp. and hemoparasites, 37,5 % of the canines were purebred and 62,5 % were mixed breed.

Resumen El objetivo principal de esta investigación fue identificar la presencia de Rickettsias sp. y hemoparásitos en garrapatas de la especie Rhipicephalus sanguineus en perros. Se analizaron un total de 62 garrapatas adultas cargadas recolectadas de 62 perros del barrio Concepción, zona urbana de la ciudad de San Juan Bautista, en el departamento de Misiones, Paraguay, durante el año 2017. La muestra incluyó perros de diversas edades, razas y sexos. Para el análisis, se realizó un frotis directo de la hemolinfa de las garrapatas extraídas de los caninos, y posterior tinción Wright. Los resultados revelaron que el 13% de las garrapatas resultaron positivas para Rickettsias sp. y hemoparásitos. En detalle, el 6,5% mostró la presencia de cuerpos elementales de Ehrlichia spp., mientras que otro 6,5% presentó cuerpos vermiformes de Babesia spp. El 87% restante de las muestras resultaron negativas para Rickettsias sp. y hemoparásitos. En cuanto a los perros cuyas garrapatas dieron positivo para Rickettsias sp. y hemoparásitos, el 50% eran machos, y el otro 50% eran hembras. En cuanto a la edad de los perros muestreados, el 25% tenían menos de 1 año, el 50% tenían entre 1 y 5 años, y el 25% restante tenían más de 5 años. Con relación a la raza de los perros cuyas garrapatas resultaron positivas para Rickettsias sp. y hemoparásitos, el 37,5% eran de raza pura y el 62,5% eran de raza mestiza

ABSTRACT The present study determined the prevalence of Ehrlichia sp morulae and Hepatozoon sp gamonts in dogs treated at a veterinary medical centre in the city of Trujillo. Blood samples were taken from dogs infested with ticks or exposed in the three months prior to the study. Blood samples (3 mL) were collected from the cephalic vein of 95 dogs in EDTA tubes. The samples were centrifuged. A drop of the phlogistic layer of each sample was placed on a slide, which was extended with a coverslip and subjected to Wright staining. The smears were observed under an optical microscope at 40X and 100X. A prevalence of Ehrlichia sp of 31.6 ± 9.4% was found. No presence of Hepatozoon sp gamonts was observed.

RESUMEN El presente estudio determinó la prevalencia de mórulas de Ehrlichia sp y gamontes de Hepatozoon sp en perros atendidos en un centro médico veterinario de la ciudad de Trujillo. Se tomaron muestras sanguíneas de perros infestados con garrapatas o con exposición en los tres meses previos al estudio. Se colectó 3 mL de sangre de la vena cefálica de 95 perros en tubos EDTA. Las muestras fueron centrifugadas. Se colocó una gota de la capa flogística de cada muestra sobre una lámina portaobjetos la que se extendió con una laminilla cubreobjetos y fue sometida a la tinción Wright. Los frotis se observaron en microscopio óptico a 40X y 100X. Se halló una prevalencia a Ehrlichia sp de 31.6 ± 9.4%. No se observó presencia de gamontes de Hepatozoon sp.

Abstract. This publication aims to present new records of a parasite-host association between ticks (Acari: Ixodidae) and the Axis axis deer in Argentina. Sampling was conducted in Mercedes, Corrientes, Argentina, and identified ticks collected from two male specimens of A. axis were identified as two parthenogens, twelve nymphs, one neogina, and four males of Rhipicephalus (Boophilus) microplus. This work unveils the first recorded instance of R. microplus adults and nymphs infesting the A. axis in Argentina.

Resumen 16. El objetivo de esta publicación es dar a conocer nuevos registros de una asociación parásito- hospedador entre garrapatas (Acari: Ixodidae) y el ciervo Axis axis, en Argentina. Los muestreos fueron realizados en Mercedes, Corrientes, Argentina. Las garrapatas, colectadas sobre dos ejemplares machos de A. axis, fueron determinadas como dos partenoginas, doce metaninfas, una neogina y cuatro machos de Rhipicephalus (Boophilus) microplus. El hallazgo presentado en este trabajo representa el primer registro de adultos y ninfas de R. microplus parasitando A. axis para Argentina.

Abstract 20. Dermacentor nitens is a Neotropical tick with reports from northern Argentina (provinces of Salta and Jujuy) to southern Mexico, with no records in Chile and Uruguay. Its main host is horses; likewise, this tick has veterinary importance due to its role as a vector of microorganisms. Thus, the aim of the present work is to provide new findings of D. nitens for the province of Corrientes, Argentina, thus expanding its distribution.

Resumen 16. Dermacentor nitens es una garrapata Neotropical con reportes desde el norte de Argentina (provincias de Salta y Jujuy), hasta el sur de México, sin registros en Chile y Uruguay. Tiene como principal hospedador a equinos, por ende, esta garrapata adquiere importancia veterinaria por su rol como vector de microorganismos. Por lo antes mencionado, el objetivo del presente trabajo es aportar nuevos hallazgos de D. nitens para la provincia de Corrientes, Argentina ampliando así su distribución.

Abstract Fusarium oxysporum is an entomopathogenic fungus, and it has anti-biological activity against arthropods. Ticks are blood sucking arthropods which are responsible for transmitting different diseases in humans and animals. The use of chemical insecticides against ticks is not eco-friendly option and results in the development of acaricide resistance. Previously, we had cultured a local isolate of Fusarium oxysporum from soil samples which were identified through microscopy and confirmed through molecular technique. In our previous experiments, we have prepared Silver nanoparticles (AgNP) at pH 7 and they had been characterized through X-Ray Diffraction (XRD), UV-visible and zeta-potential. In our current study, the AgNP were prepared at different pH conditions and characterized through Scanning Electron Microscopy (SEM) and Transmission Electron Microscopy (TEM). The protein molecules of F. oxysporum were charged with Ag ions. F. oxysporum NP were observed to enhance anti-biological activity by killing Rhipicephalus microplus and they caused 100% mortality at pH 4 and pH 5 in 24 h in anti-tick biological assay. Our study is the first report to do biological assay against Rhipicehalus ticks by using Fusarium AgNP at acidic pH. Biological control using entomopathogenic fungi can be the best alternative of the chemical method to control the tick population. fungus antibiological anti animals ecofriendly eco friendly resistance Previously technique experiments (AgNP XRay X Ray XRD, XRD , (XRD) UVvisible UV visible zetapotential. zetapotential zeta potential. potential zeta-potential SEM (SEM TEM. TEM . (TEM) F ions 100 2 antitick population (XRD (TEM 10 1

Resumo Fusarium oxysporum é um fungo entomopatogênico com atividade antibiológica contra artrópodes. Os carrapatos são artrópodes sugadores de sangue responsáveis pela transmissão de diversas doenças em humanos e animais. O uso de inseticidas químicos contra carrapatos não é uma opção ecologicamente correta e resulta no desenvolvimento de resistência acaricida. Anteriormente, havíamos cultivado um isolado local de Fusarium oxysporum a partir de amostras de solo que foram identificadas por microscopia e confirmadas por técnica molecular. Em nossos experimentos anteriores, preparamos nanopartículas de Prata (AgNP) em pH 7 e elas foram caracterizadas por Difração de Raios X (XRD), UV-visível e potencial zeta. No presente estudo, os AgNP foram preparados em diferentes condições de pH e caracterizados através de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e Microscopia Eletrônica de Transmissão (TEM). As moléculas de proteína de F. oxysporum foram carregadas com íons Ag. Assim, observou-se que F. oxysporum NP aumenta a atividade antibiológica matando Rhipicephalus microplus e causando 100% de mortalidade em pH 4 e pH 5 em 24h no ensaio biológico anticarrapato. Este estudo é o primeiro relato de caso a realizar um ensaio biológico contra carrapatos Rhipicehalus usando Fusarium AgNP em pH ácido. Nesse sentido, é possível concluir que o controle biológico utilizando fungos entomopatogênicos pode ser a melhor alternativa do método químico para controlar a população de carrapatos. animais acaricida Anteriormente molecular anteriores (AgNP XRD, XRD , (XRD) UVvisível UV visível zeta MEV (MEV TEM. TEM . (TEM) F Ag Assim observouse observou se 100 h anticarrapato ácido sentido (XRD (TEM 10 1

Abstract The ixodicidal activity of the methanolic extracts of Artemisia ludoviciana (Astereceae), Cordia boissieri (Boraginaceae) and Litchi chinensis (Sapindaceae) against two field populations of Rhipicephalus (Boophilus) microplus from the state of Nuevo Leon (NL) and Veracruz (VER) was evaluated. The extract of L. chinensis in the concentration of 150 mg/ml showed efficacies of 100% and 99% against engorged females and mortalities of 98% and 99% against larvae. C. boissieri in the same concentration showed efficacies of 71% and 37% against engorged adults and mortalities of 33.04% and 10.33% against larvae and A. ludoviciana had efficacies of 94% and 83% in adults and mortalities of 89.39% and 89.21% against larvae in both populations respectively. The enzymatic activity of Acetylcholinesterase (AChE), Carboxylesterase (CaE), Glutathione-S-Transferase (GST) and Alkaline Phosphatase (ALP) was measured in both populations of ticks. As a result, a significant difference between both populations was shown, being the VER population the one that exhibited a higher enzymatic activity (p ≤ 0.05). It can be concluded that the methanolic extract of the seed of L. chinensis shows potential ixodicidal activity and can be used as an alternative source of tick control, however, prior characterization, toxicity and formulation studies are necessary. Astereceae, Astereceae , (Astereceae) Boraginaceae (Boraginaceae Sapindaceae (Sapindaceae Boophilus (Boophilus NL (NL (VER evaluated L 15 mgml mg ml 100 99 98 C 71 37 3304 33 04 33.04 1033 10 10.33 A 94 83 8939 89 39 89.39 8921 21 89.21 respectively AChE, AChE (AChE) CaE, CaE (CaE) GlutathioneSTransferase Glutathione S Transferase GST (GST ALP (ALP ticks result shown p 0.05. 005 0.05 . 0 05 0.05) control however characterization necessary (Astereceae 1 9 7 3 330 33.0 103 10.3 8 893 89.3 892 2 89.2 (AChE (CaE 00 0.0 33. 10. 89. 0.

Resumo No presente trabalho, a atividade ixodicida de extratos metanólicos de Artemisia ludoviciana (Astereceae), Cordia boissieri (Boraginaceae) e Litchi chinensis (Sapindaceae) contra Rhipicephalus (Boophilus) microplus foi avaliada em duas populações de campo nos estados de Nuevo León (NL) y Veracruz (VER). O extrato de L. chinensis na concentração de 150 mg/ml, apresentou eficácia de 100% e 99% contra fêmeas ingurgitadas, e taxas de mortalidade de 98% e 99% contra larvas. C. boissieri, na mesma concentração, apresentou eficácia de 71% e 37% contra adultas ingurgitados, e taxas de mortalidade de 33,04% e 10,33% contra larvas e A. ludoviciana apresentou eficácias de 94% e 83% em adultos e mortalidade de 89,39% e 89,21% contra larvas em ambas as populações respectivamente. Por outro lado, a atividade enzimática da Acetilcolinesterase (AChE), Carboxilesterase (CaE), Glutationa-S-Transferase (GST) e Fosfatase Alcalina (ALP) foi medida em ambas as populações de carrapatos. Como resultado, foi apresentada uma diferença significativa entre as populações, sendo a população VER a que apresentou maior atividade enzimática (p ≤ 0,05). Assim, pode-se concluir que o extrato metanólico da semente de L. chinensis apresenta potencial atividade ixodicida e pode ser utilizado como fonte alternativa de controle de carrapatos, porém estudos prévios de caracterização, toxicidade e formulação são necessários. trabalho Astereceae, Astereceae , (Astereceae) Boraginaceae (Boraginaceae Sapindaceae (Sapindaceae Boophilus (Boophilus NL (NL VER. . (VER) L 15 mgml mg ml mg/ml 100 99 ingurgitadas 98 C 71 37 ingurgitados 3304 33 04 33,04 1033 10 10,33 A 94 83 8939 89 39 89,39 8921 21 89,21 respectivamente lado AChE, AChE (AChE) CaE, CaE (CaE) GlutationaSTransferase Glutationa S Transferase GST (GST ALP (ALP carrapatos resultado p 0,05. 005 0,05 0 05 0,05) Assim podese se caracterização necessários (Astereceae (VER 1 9 7 3 330 33,0 103 10,3 8 893 89,3 892 2 89,2 (AChE (CaE 00 0,0 33, 10, 89, 0,

RESUMO Amostras de sangue e fezes de perdiz chukar (Alectoris chukar), faisão-albino (Phasianus colchicus), faisão-prateado (Lophura nycthemera), periquito-de-rosa (Psittacula krameri) e perus (Meleagris gallopavo) foram analisadas para verificar a prevalência de parasitas. Para registrar os parasitas, essas cinco espécies de aves foram colocadas em gaiolas separadas no Centro de Conservação e Pesquisa de Aves, Departamento de Vida Selvagem e Ecologia, Universidade de Veterinária e Ciências Animais, Lahore, Paquistão. Cem amostras fecais e 100 amostras de sangue para cada espécie de ave foram inspecionadas para analisar os parasitas internos. Durante o presente estudo, foram examinadas 17 espécies de endoparasitas, 14 de amostras fecais e 3 de sangue. Foram estudadas duas espécies de ectoparasitas, ou seja, o ácaro Dermanyssus gallinae 42% e o carrapato aviário Args persicus 41%. Os parasitas sanguíneos incluíram Plasmodium juxtanucleare 50%, Leucoctoyzoon simond com prevalência parasitária de 40% e Aegyptinella pullorum com prevalência parasitária de 40%. As espécies parasitas registradas em amostras fecais incluíram 6 espécies de nematoides viz. Allodpa suctoria 2%, Syngamus traqueia com prevalência parasitária de 60%, Capillaria annulata 37,5%, Ascardia galli 24%, Capillaria anatis 40% e Heterakis gallinarum 28,3%. Da mesma forma, duas espécies de trematódeos viz. Prosthogonimus ovatus com prevalência parasitária de 50% e Prosthogonimus macrorchis 21% também foram documentados em amostras fecais de aves. Espécies de cestoide único Raillietina echinobothrida com prevalência parasitária de 72% e 3 espécies de protozoários, isto é, Eimeria maxima com prevalência parasitária de 21%, Giardia lamblia 41% e Histomonas meleagridis 18% foram documentadas durante a análise corpológica. Em nossa recomendação, o saneamento adequado, medicação e vacinação de invólucros de pássaros são sugeridos para evitar parasitas.

Abstract Blood and fecal samples of chukar partridge (Alectoris chukar), albino pheasant (Phasianus colchicus), silver pheasant (Lophura nycthemera), rose-ringed parakeet (Psittacula krameri) and turkeys (Meleagris gallopavo) were analyzed to check parasitic prevalence. To record parasites these five avian species were placed kept in separate cages at Avian Conservation and Research Center, Department of Wildlife an Ecology, University of Veterinary and Animal Sciences, Lahore, Pakistan. 100 fecal and 100 blood samples for each bird species were inspected to analyze internal parasites. During present study, 17 species of endoparasites 14 from fecal samples and three from blood were examined. Two species of ectoparasites i.e. mite Dermanyssus gallinae 42% and fowl ticks Args persicus 41%were studied. Blood parasites included Plasmodium juxtanucleare 50%, Leucoctoyzoon simond having parasitic prevalence 40%, and Aegyptinella pullorum having parasitic prevalence of 40%. Parasitic species recorded from fecal samples included 6 species of nematodes viz. Allodpa suctoria 2%. Syngamus trachea with parasitic prevalence of 60%, Capillaria annulata 37.5%, Ascardia galli 24%, Capillaria anatis 40% and Heterakis gallinarum 28.3%. Similarly, two species of trematodes viz. Prosthogonimus ovatus having parasitic prevalence of 50% and Prosthogonimus macrorchis 21% were also documented from fecal avian samples . Single cestode species Raillietina echinobothrida having parasitic prevalence of 72% and 3 protozoan species i.e. Eimeria maxima having parasitic prevalence of 21%, Giardia lamblia 41% and Histomonas meleagridis 18% were documented during corpological analysis. In our recommendation, proper sanitation, medication and vaccination of bird’s enclousres are suggested to avoid parasites.

Resumo Boophilus microplus é uma das principais espécies de carrapatos bovinos, causando grandes perdas econômicas para a indústria de laticínios em todo o mundo, incluindo o Paquistão. Triclorfon e deltametrina são usados no controle de carrapatos bovinos, e seus sprays também são usados em outros programas de controle de pragas que exercem pressão sobre os carrapatos para ganhar resistência. Este estudo tem como objetivo examinar o nível de resistência de Rhipicephalus microplus contra triclorfon e deltametrina. Os carrapatos ingurgitados foram coletados de duas regiões ecológicas de Khyber Pakhtunkhwa, KPK Paquistão, ou seja, Swat & Dir (Zona 1) e Charsadda & Nowshera (Zona 2). Quatro concentrações de acaricidas em duas e dez vezes ppm com três repetições para cada foram usadas em ambos os bioensaios. O ensaio de eclosão de ovos e testes de imersão em adultos foram usados para avaliar o status de resistência. A análise probit do ensaio de eclosão de ovos mostrou a maior porcentagem de eclosão na zona 1 em ambas as diluições (67% na diluição de duas vezes e 68,33% na diluição de dez vezes), enquanto a concentração letal (CL95) foi de 2,187 ppm e dose discriminante (DD) como 4,374 ppm para triclorfon. Na zona 2, a porcentagem de eclosão foi de 73 em duas vezes e 72% em dez vezes, enquanto LC95 foi registrado como 0,599 ppm e DD como 1,198 ppm. Os mesmos parâmetros foram estudados para a deltametrina, e na zona 1 a porcentagem de eclosão foi de 38% na diluição de duas vezes e 37% na diluição de dez vezes, enquanto CL95 foi registrado como 0,001 ppm e DD como 0,002 ppm. Na zona 2, a eclodibilidade foi registrada como 42% na diluição de duas vezes e 43% na diluição de dez vezes. Os valores para LC95 foram registrados como 0,001 ppm e DD como 0,002 ppm. Além disso, a análise do teste de imersão de adulto contra triclorfon revelou os valores de LC50 como 2,85 ppm e LC95 como 4,71 ppm na zona 1 e na zona 2 como 3,14 ppm e 5,28 ppm, respectivamente. Da mesma forma, LC50 e LC95 contra deltametrina foram registrados como 0,79 ppm e 1,71 ppm na zona 1 e 0,45 ppm e 4,325 ppm na zona 2, respectivamente. Com base nos achados deste estudo, o isolado Rhipicephalus microplus mostrou-se mais resistente ao acaricida amplamente utilizado, ou seja, triclorfon do que deltametrina. Para manter a eficácia dos acaricidas em nível nacional, o estudo recomenda o monitoramento contínuo da resistência.

Abstract Boophilus microplus is a major cattle tick specie causing great economic loss to the dairy industry throughout the globe including Pakistan. Trichlorfon and Deltamethrin are used to control bovine ticks, and their sprays are also used in other pest control programs that exert pressure on ticks to gain resistance. This study is aimed to examine the resistance level of Rhipiciphalus microplus against trichlorfon and deltamethrin. The engorged ticks were collected from two ecological regions of Khyber Pakhtunkhwa, KPK Pakistan i.e., Swat & Dir (zone-1), and Charsadda & Nowshera (zone-2). Four concentrations of acaricides in two-fold and ten-fold ppm with three replicates for each were used in both bioassays. Egg hatch assay and adult immersion tests were used to assess the resistance status. The probit analysis of egg hatch assay showed the highest hatching percentage in zone 1 on both dilutions (67-76% on two-fold and 68-88% on ten-fold dilution) while lethal concentration (LC95) was found to be 2.187 ppm and discriminating dose (DD) as 4.374 ppm for trichlorfon. In zone 2, hatching percentage was 73-84 on two-fold and 72-91% on ten-fold dilution while LC95 was recorded as 0.599 ppm and DD as 1.198 ppm. The same parameters were studied for deltamethrin and in zone 1 the hatching percentage was found as 38-56% on two-fold dilution and 37-80% on ten-fold dilution while LC95 was recorded as 0.001 ppm and DD as 0.002 ppm. In zone 2, the hatchability was recorded as 42-58% on two-fold and 43-85% on ten-fold dilution. The values for LC95 was recorded as 0.001 ppm and DD as 0.002 ppm. Further, analysis of adult immersion test against trichlorfon revealed the values of LC50 as 2.85 ppm and LC95 as 4.71 ppm in zone 1 and in zone 2 as 3.14 ppm and 5.28 ppm, respectively. Similarly, LC50 and LC95 against deltamethrin was recorded as 0.79 ppm & 1.71 ppm in zone 1 and 0.45 ppm & 4.325 ppm in zone 2, respectively. Based on the findings of this study, the isolated Rhipicephalus microplus was found to be more resistant to the widely used acaricides i.e., trichlorfon than deltamethrin. In order to maintain the efficacy of acaricides at country level, the study recommends continuous monitoring of resistance.

ABSTRACT: Rhipicephalus (Boophilus) microplus is a hard tick endemic in livestock-growing regions and causes economic losses in the largest beef-producing countries, including Brazil, Mexico, Argentina, Australia and Uruguay. The use of chemical acaricides is still the main strategy to control R. microplusinfestations. Nevertheless, immunological control of R. microplus with an anti-tick vaccine is a suitable alternative and has manifold advantages because it can avoid drug-resistance and the presence of acaricide residues in milk, beef and in the environment. Indeed, vaccines based on the Bm86 antigen have had relative commercial and technical success to control R. microplus in some regions. Although, the efficacy of such vaccines varies among tick populations and is insufficient to provide an acceptable level of protection. Therefore, the need to search for better antigens is impelling. This review focused on the restrictions imposed on the use of acaricides in Brazil and in the European Union, as well as on the impacts of Bm86-based vaccines on R. microplus control. The efficacy of experimental anti-tick vaccines (based on subolesin, glutathione S-transferase, ferritin 2; voltage-dependent anion channel; aquaporin, 60 S acidic ribosomal protein, metalloprotease and trypsin) that can elicit an immune response against the physiological functions of various ticks is discussed. ABSTRACT Boophilus (Boophilus livestockgrowing livestock growing beefproducing producing countries Mexico Argentina Uruguay R microplusinfestations Nevertheless antitick anti drugresistance drug resistance milk environment Indeed Bm Bm8 Although protection Therefore impelling Union Bm86based Bmbased subolesin Stransferase, Stransferase transferase, transferase S-transferase 2 voltagedependent voltage dependent channel aquaporin 6 protein trypsin discussed

RESUMO: O Rhipicephalus (Boophilus) microplus é um carrapato duro que é endêmico de regiões de pecuária e causa perdas econômicas nos maiores países produtores de carne bovina, incluindo Brasil, México, Argentina, Austrália e Uruguai. O uso de acaricidas ainda é a principal estratégia para controlar infestações por R. microplus. No entanto, o controle imunológico do R. microplus com uma vacina contra carrapatos é uma alternativa adequada e possui diversas vantagens, por evitar a seleção de populações de carrapato resistentes a drogas, evitar a presença de resíduos de acaricidas no leite, na carne e no ambiente. As vacinas baseadas no antígeno Bm86 tiveram relativo sucesso comercial e técnico no controle do R. microplus em diversas regiões. No entanto, a eficácia dessas vacinas varia entre as populações de carrapatos e é insuficiente para fornecer um nível aceitável de proteção. Portanto, há uma necessidade de procurar novos antígenos. Esta revisão foca nas restrições impostas ao uso de acaricidas no Brasil e na União Europeia, bem como nos impactos das vacinas baseadas em Bm86 no controle do R. microplus. Também é discutida a eficácia de vacinas anti-carrapatos experimentais (baseadas em subolesina, glutationa S-transferase, ferritina 2; canal aniônico dependente de voltagem; aquaporina, proteína ribossômica ácida 60S, metaloprotease, tripsina) que podem elicitar uma resposta imune contra as funções fisiológicas de vários carrapatos. RESUMO Boophilus (Boophilus bovina México Argentina Uruguai R entanto vantagens drogas leite ambiente Bm Bm8 proteção Portanto antígenos Europeia anticarrapatos anti subolesina Stransferase, Stransferase S transferase, transferase S-transferase 2 voltagem aquaporina 60S metaloprotease tripsina

ABSTRACT Chemical acaricides are used as the primary method for controlling Rhipicephalus (Boophilus) microplus. However, the incorrect use of these compounds over the years has led to the emergence of resistant tick populations. This study aimed to evaluate the effectiveness of different combinations of synthetic acaricides and the essential oil of Plectranthus amboinicus on engorged females of R. (B.) microplus. Engorged females were obtained from infested bovines in dairy farms in the Agreste mesoregion of Pernambuco, Brazil. Five different combinations of commercial synthetic acaricides: I) Chlorpyrifos 30.0g + Cypermethrin 15.0g + Fenthion 15.0g; II) Chlorpyrifos 8.5g + Cypermethrin 15.0g + Ethion 16.0g; III) Deltamethrin 50.0g; IV) Amitraz 12.5g; V) Chlorpyrifos 15.0g + Cypermethrin 25.0g + Piperonyl butoxide 50.0g, and the 1% essential oil of P. amboinicus were used for the Adult Immersion Test. Only the combinations I and V of synthetic acaricides and essential oil showed efficacy over 95%. The findings of this study demonstrate that ticks’ resistant populations are present in the study area, and the essential oil of P. amboinicus is a promising compound for developing products used for tick control. Finally, it is paramount to implement educational activities to improve farmers' awareness of the rational use of acaricides. Boophilus (Boophilus microplus However R B. B (B. Pernambuco Brazil 300g g 30 0g 150g 15 II 85g 8 5g 16.0g 160g 16 III 50.0g 500g 50 IV 12.5g 125g 12 250g 25 1 P Test 95 95% ticks area control Finally farmers (B 3 5 2 9

RESUMO Os acaricidas químicos são utilizados como o principal método para controlar Rhipicephalus (Boophilus) microplus. No entanto, o uso incorreto desses compostos ao longo dos anos levou ao surgimento de populações de carrapatos resistentes. Este estudo teve como objetivo avaliar in vitro a eficácia de diferentes combinações de acaricidas sintéticos e do óleo essencial de Plectranthus amboinicus em fêmeas ingurgitadas de R. (B.) microplus. Fêmeas ingurgitadas foram obtidas de bovinos infestados, criados em fazendas leiteiras localizadas na mesorregião do Agreste do estado de Pernambuco, Brasil. Foram utilizadas cinco combinações diferentes de acaricidas sintéticos comerciais: I) Clorpirifós 30,0g + Cipermetrina 15,0g + Fention 15,0g; II) Clorpirifós 8,5g + Cipermetrina 15,0g + Etion 16,0g; III) Deltametrina 50,0g; IV) Amitraz 12,5g; V) Clorpirifós 15,0g + Cipermetrina 25,0g + Butóxido de piperonila 50,0g, e o óleo essencial de P. amboinicus a 1% para o teste de imersão de adultos. Apenas as combinações I e V de acaricidas sintéticos, juntamente com o óleo essencial, mostraram eficácia superior a 95%. Os resultados deste estudo demonstram que populações de carrapatos resistentes estão presentes na área de estudo, e o óleo essencial de P. amboinicus é uma substância promissora para o desenvolvimento de produtos utilizados no controle de carrapatos. Por fim, é fundamental a implementação de atividades educacionais para melhorar a conscientização dos produtores quanto ao uso racional de acaricidas. Boophilus (Boophilus microplus entanto R B. B (B. infestados Pernambuco Brasil comerciais 300g g 30 0g 150g 15 II 85g 8 5g 16,0g 160g 16 III 50,0g 500g 50 IV 12,5g 125g 12 250g 25 P 1 adultos 95 95% fim (B 3 5 2 9

Abstract Rhipicephalus (Boophilus) microplus is a leading cause of significant economic losses in the livestock industry, and tick populations have developed multiple forms of resistance to acaricides; therefore, the potential of novel natural bioactive compounds that are effective for targeting ticks must be addressed. The aim of this study was to evaluate the acaricidal and anticholinesterase activities of R. aculeata seeds and to identify naturally occurring compounds that potentially inhibit anticholinesterase through in silico docking. The acaricidal activity of the extract of R. aculeata seeds against larval and adult R. microplus ticks was assessed through immersion tests. Inhibition of anticholinesterase activity was measured spectrophotometrically. Extracts of R. aculeata seeds showed activity against larvae and engorged females of R. microplus, and a reduction in the reproductive index were also observed. Rutin, chlorogenic acid, quercetin, and epicatechin exhibited noteworthy interactions with the active site residues of RmAChE. These findings could significantly contribute to the exploration of novel natural products that can potentially inhibit RmAChE and could be used in the development of new acaricides for tick control. Boophilus (Boophilus industry therefore addressed R docking tests spectrophotometrically observed Rutin acid quercetin control

Resumo Rhipicephalus microplus é uma das principais causas de significativas perdas econômicas na indústria pecuária, e as populações de carrapatos desenvolveram diversas formas de resistência a acaricidas. Portanto, é necessário abordar o potencial de novos compostos bioativos naturais eficazes no combate aos carrapatos. O objetivo deste estudo foi avaliar as atividades acaricida e anticolinesterase das sementes de R. aculeata e identificar compostos naturalmente ocorrentes que possam inibir a anticolinesterase por meio de docking in silico. A atividade acaricida do extrato de sementes de R. aculeata contra larvas e fêmeas adultas de R. microplus foi avaliada por meio de testes de imersão. A inibição da atividade anticolinesterase foi medida espectrofotometricamente. Extratos de sementes de R. aculeata apresentaram atividade contra larvas e fêmeas ingurgitadas de R. microplus, sendo observada também uma redução no índice reprodutivo. Rutina, ácido clorogênico, quercetina e epicatequina mostraram interações notáveis com os resíduos do sítio ativo de RmAChE. Esses resultados podem contribuir significativamente para a exploração de novos produtos naturais que potencialmente inibem RmAChE e poderiam ser utilizados no desenvolvimento de novos acaricidas para o controle de carrapatos. pecuária Portanto R silico imersão espectrofotometricamente reprodutivo Rutina clorogênico

ABSTRACT. Ticks are obligate ectoparasite arthropods of the class Arachnida distributed worldwide and can parasitize many animals. They constitute one of the most important groups of vectors of infectious diseases, including zoonoses. The objective of this study was to report the parasitism by Amblyomma ovale Koch, 1844 in a domestic dog (Canis lupus familiaris Linnaeus, 1758) in Santa Maria, in the central region of the state of Rio Grande do Sul, Brazil. Two specimens of ectoparasites found on a domestic dog, living in a rural property, were sent to the Laboratory of Veterinary Parasitology at the Federal University of Santa Maria for taxonomic identification. The two specimens found were classified as adult male and female of A. ovale. Through this study, the parasitism of this species is reported for the first time in the central region of the state of Rio Grande do Sul, Brazil, in a domestic dog, allowing the infestation and transmission of diseases to humans. ABSTRACT animals zoonoses Koch 184 Canis Linnaeus 1758 Sul Brazil property identification A humans 18 175 1 17

Abstract The domestic cat is not considered a primary host for any specific tick species; however, it can be affected by some Ixodidae species, such as Rhipicephalus sanguineus sensu lato and Amblyomma spp. The study reports parasitism by Amblyomma auricularium and the detection of anti-Rickettsia spp. antibodies in domestic cats from a rural property in the Afrânio municipality, Pernambuco, Brazil. Amblyomma auricularium (24 nymphs, six females, and four males) and Amblyomma sp. (42 larvae) parasitized three cats, and 73 free-living ticks were captured in armadillo burrows: A. auricularium (36 nymphs, six females, five males) and Amblyomma sp. (26 larvae). Blood samples from cats were collected and the obtained plasma were subjected to indirect immunofluorescence assay (IFA) to detect antibodies against Rickettsia antigens. Thus, anti-Rickettsia spp. antibodies were determined (titers ranging from 128 to 512) and showed a predominant antibody response to Rickettsia amblyommatis or a very closely related genotype. This study reports the first infestation of nymphs and adults of A. auricularium on cats in a new area of occurrence in the semi-arid region of Northeastern Brazil and reports for the first time the presence of anti-Ricketsia antibodies in cats in the region, with R. amblyommatis as the probable infectious agent. species however spp antiRickettsia anti municipality Pernambuco 24 (2 females males sp 42 (4 larvae 7 freeliving free living burrows A 36 (3 26 larvae. . IFA (IFA antigens Thus titers 12 512 genotype semiarid semi arid antiRicketsia Ricketsia R agent 2 ( 4 3 1 51 5

Resumo O gato doméstico não é considerado hospedeiro para nenhuma espécie de carrapato. Pode, entretanto, ser afetado por algumas espécies de Ixodídeos, como Rhipicephalus sanguineus e Amblyomma spp. Este estudo relata o parasitismo por Amblyomma auricularium e detecção de anticorpos anti-Rickettsia spp. em gatos domésticos, em uma propriedade rural no município de Afrânio, Pernambuco, Brasil. Amblyomma auricularium (24 ninfas, seis fêmeas e quatro machos) e Amblyomma sp. (42 larvas) parasitavam os gatos, e 73 carrapatos de vida-livre foram capturados em tocas de tatus: A. auricularium (36 ninfas, seis fêmeas, cindo machos) e Amblyomma sp. (26 larvas). Amostras de sangue dos três gatos foram coletadas, e os plasmas obtidos foram submetidos à reação de imunofluorescência indireta (RIFI) para a detecção de anticorpos contra antígenos de Rickettsia. Dessa forma, anticorpos anti-Rickettsia spp. foram determinados (títulos variando de 256 a 512) e demonstraram uma resposta predominante para Rickettsia amblyommatis ou genótipo próximo. Este estudo relata, pela primeira vez, infestação de ninfas e adultos A. auricularium em gatos em uma nova área de ocorrência na região semiárida do nordeste do Brasil. E, também relata, pela primeira vez, a presença de anticorpos anti-Ricketsia em gatos na região, com R. amblyommatis como agente provável pela infecção. carrapato Pode entretanto Ixodídeos spp antiRickettsia anti domésticos Afrânio Pernambuco Brasil 24 (2 machos sp 42 (4 larvas 7 vidalivre vida livre tatus A 36 (3 26 larvas. . coletadas RIFI (RIFI forma títulos 25 512 próximo vez E antiRicketsia Ricketsia R infecção 2 ( 4 3 51 5

Abstract A male of Pteronura brasiliensis (Carnivora: Mustelidae) was found dead on the banks of the Rio Negro, in the Pantanal wetlands of Mato Grosso do Sul state, Aquidauana municipality. Two ticks found attached to its skin were morphologically identified as a second-instar nymph of Ornithodoros rostratus (Argasidae) and a male of Amblyomma sculptum (Ixodidae). In order to complement the morphological identification, these tick specimens were subjected to DNA extraction, and tested using PCR assays to confirm the molecular identity the specimens. Also, the tick DNA samples were tested and were negative in the PCR assays for all the pathogens tested. We also examined 30 batches, consisting of 174 individuals of O. rostratus deposited in the Acari Collection of the Butantan Institute, and we found material from four Brazilian states, including one batch containing 2 males and 2 females from Aquidauana, of Mato Grosso do Sul state, collected from the soil. This was therefore the first record of O. rostratus parasitizing P. brasiliensis and the first locality record (Aquidauana). Likewise, A. sculptum is commonly found in the Pantanal and is reported here for the second time parasitizing the giant otter, which is a host little studied regarding the ectoparasites. Carnivora (Carnivora Mustelidae Negro state municipality secondinstar instar Argasidae (Argasidae Ixodidae. Ixodidae . (Ixodidae) identification extraction Also 3 batches 17 O Institute states soil P Aquidauana. (Aquidauana) Likewise otter ectoparasites (Ixodidae 1 (Aquidauana

Resumo Um macho de Pteronura brasiliensis (Carnivora: Mustelidae) foi encontrado morto às margens do Rio Negro, no Pantanal do estado de Mato Grosso do Sul, município de Aquidauana. Dois carrapatos encontrados aderidos à sua pele foram identificados, morfologicamente, como uma ninfa de segundo ínstar de Ornithodoros rostratus (Argasidae) e um macho de Amblyomma sculptum (Ixodidae). Para complementar a identificação morfológica, esses espécimes de carrapatos foram submetidos à extração de DNA e testados por meio de ensaios de PCR, para confirmar a identidade molecular dos espécimes. Além disso, os extraídos dos carrapatos foram testados e revelaram-se negativos nos ensaios de PCR para todos os patógenos testados. Também foram examinados 30 lotes, compostos por 174 indivíduos de O. rostratus, depositados na Coleção Acari do Instituto Butantan, e encontramos material de quatro estados brasileiros, incluindo-se um lote contendo 2 machos e 2 fêmeas de Aquidauana, estado de Mato Grosso do Sul (MS), coletado do solo. Este foi, portanto, o primeiro registro de O. rostratus parasitando P. brasiliensis e o primeiro registro de localidade (Aquidauana). Da mesma forma, A. sculptum é comumente encontrado no Pantanal e relatado aqui, pela segunda vez, parasitando a ariranha, hospedeiro pouco estudado em relação a ectoparasitas. Carnivora (Carnivora Mustelidae Negro Aquidauana identificados morfologicamente Argasidae (Argasidae Ixodidae. Ixodidae . (Ixodidae) morfológica disso revelaramse revelaram se 3 lotes 17 O Butantan brasileiros incluindose incluindo MS, MS , (MS) solo portanto P (Aquidauana) forma A aqui vez ariranha ectoparasitas (Ixodidae 1 (MS (Aquidauana