ABSTRACT Chile has about 72 species of terrestrial orchids, most of them endemic. Some are threatened due to habitat loss, fires and herbivores damage and many have potential as ornamental plants or cut flowers. In vitro plant germination could be a key strategy for the long-term conservation and propagation of these species. In vitro asymbiotic and symbiotic, germination and subsequent embryo development in the orchid Chloraea longipetala were evaluated using five different culture media, aiming to provide efficient protocols for its propagation. For asymbiotic germination, we used water agar (AW), banana culture medium (CMB), tomato culture medium (CMT), oatmeal agar (OMA) and Malmgren terrestrial orchid medium (MM). For symbiotic germination, just AW and OMA were used. In addition, seed viability was estimated and reached 86.6 %. After four weeks, in all media except AW, the germination stage (embryo emerges from seed coat) was reached, for asymbiotic germination. However, there were no significant differences in the germination percentage among all five media, not exceeding 10 % in any treatment. After eight weeks, only seeds in MM reached the protocorm stage. On the other hand, symbiotic germination resulted in a significantly higher germination percentage (40 %), and embryos reached the rhizoid stage. For C. longipetala, unlike other Chilean species, the presence of orchidiod fungi seems to be necessary for successful and efficient germination and embryo development. This information is key for future propagation initiatives, for conservation, restoration or commercial applications as ornamental plants.
RESUMEN Chile posee alrededor de 72 especies de orquídeas terrestres, la mayoría de ellas endémicas. Algunas están amenazadas debido a la pérdida de hábitat, incendios y daños por herbívoros y muchas tienen potencial como plantas ornamentales o flores cortadas. La germinación in vitro de plantas podría ser una estrategia clave para la conservación y propagación a largo plazo de estas especies. Se evaluó la germinación in vitro, asimbiótica y simbiótica, y el posterior desarrollo embrionario de la orquídea Chloraea longipetala utilizando cinco medios de cultivo diferentes, con el objetivo de proporcionar protocolos eficientes para su propagación. Para la germinación asimbiótica, se utilizó agar agua (AW), medio de cultivo de plátano (CMB), medio de cultivo de tomate (CMT), agar avena (OMA) y medio Malmgren para orquídeas terrestres (MM). Para la germinación simbiótica, sólo se utilizaron AW y OMA. Además, se estimó la viabilidad de las semillas, que alcanzó el 86,6 %. Después de cuatro semanas, en todos los medios excepto AW, se alcanzó la fase de germinación (el embrión emerge de la cubierta de la semilla), para la germinación asimbiótica. Sin embargo, no hubo diferencias significativas en el porcentaje de germinación entre los cinco medios, no superando el 10 % en ningún tratamiento. Al cabo de ocho semanas, sólo las semillas en MM alcanzaron la fase de protocor. Por otro lado, la germinación simbiótica dio lugar a un porcentaje de germinación significativamente mayor (40 %), y los embriones alcanzaron el estadio de rizoide. Para C. longipetala, a diferencia de otras especies chilenas, la presencia de hongos orquidioides parece ser necesaria para una germinación y desarrollo embrionario exitosos y eficientes. Esta información es clave para futuras iniciativas de propagación, para conservación, restauración o aplicaciones comerciales como plantas ornamentales.