Resumo O hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH) é um decapeptídeo, sintetizado pelos neurônios GnRH no hipotálamo, que estimula a síntese e secreção de gonadotrofinas (hormônio folículo-estimulante, FSH e hormônio luteinizante, LH) da hipófise anterior ou adeno-hipófise. Agonistas de GnRH com estrutura idêntica ou semelhante à natureza estão disponíveis comercialmente desde a década de 1970 e foram inicialmente utilizados para o tratamento de cistos foliculares e melhoria da fertilidade em bovinos (1). A ovulação de folículos ovarianos após a administração de GnRH foi relatada pela primeira vez por Schams et al. (2) e Britt et al. (3), mas foi somente na década de 1990 que o GnRH começou a ser usado para controlar a dinâmica folicular durante o ciclo estral bovino. Sabemos agora que uma nova onda folicular surge dentro de 2 dias após a ovulação do folículo dominante presente no momento do tratamento com GnRH. (4,5) Essa descoberta facilitou o desenvolvimento de protocolos de sincronização baseados em GnRH em combinação com prostaglandinas (PGF) que permitem a inseminação artificial em tempo fixo (IATF), sem a necessidade de detecção de cio. Esses protocolos baseados em GnRH e PGF fazem parte do manejo reprodutivo de bovinos, especialmente bovinos leiteiros, em muitos rebanhos comerciais ao redor do mundo. Existem inúmeros protocolos baseados em GnRH e PGF disponíveis para sincronização de estro e ovulação em bovinos, vários desses protocolos foram explicados e discutidos em detalhes em outros artigos (6,7). O objetivo desta revisão é descrever os fatores associados à liberação de LH e resposta ovulatória após a administração de GnRH, apresentar informações relevantes sobre o efeito dos hormônios esteroides na resposta ao GnRH e, por fim, postular brevemente estratégias que possam melhorar a eficácia de protocolos baseados na aplicação de GnRH e PGF.

Resumen La hormona liberadora de gonadotropina (GnRH) es un decapéptido, sintetizado por las neuronas GnRH en el hipotálamo, que estimula la síntesis y secreción de gonadotrofinas (hormonas folículo estimulante, FSH y luteinizante, LH) de la hipófisis anterior o adenohipofisis. Agonistas de GnRH con una estructura idéntica o similar a la natural han estado disponible comercialmente desde la década del 70 y han sido utilizadas en un principio para el tratamiento de quistes foliculares y el mejoramiento de la fertilidad en el ganado vacuno (1). La ovulación de folículos ováricos después de la administración de GnRH fue reportada por primera vez por Schams et al. (2) y Britt et al. (3), pero no fue hasta la década del 90 cuando la GnRH se comenzó a utilizar para controlar la dinámica folicular durante el ciclo estral del bovino. Ahora sabemos que una nueva onda folicular emerge dentro de los 2 días después de la ovulación del folículo dominante presente en el momento del tratamiento con GnRH (4,5). Este hallazgo facilitó el desarrollo de protocolos de sincronización a base de GnRH en combinación con prostaglandinas (PGF) que permiten la inseminación artificial a tiempo fijo (IATF), sin necesidad de realizar detección de celo. Estos protocolos a base de GnRH y PGF son parte del manejo reproductivo bovino, sobre todo del ganado lechero, en muchos rodeos comerciales del mundo. Existen numerosos protocolos a base de GnRH y PGF disponibles para la sincronización del estro y la ovulación en el ganado, varios de esos protocolos se han explicado y discutido en detalle en otros artículos (6,7). El objetivo de esta revisión es describir los factores asociados a la liberación de LH y respuesta ovulatoria posterior a la administración de GnRH, dar a conocer información relevante sobre el efecto de las hormonas esteroideas en la respuesta a la GnRH y, por último, brevemente postular estrategias que podrían mejorar la eficacia de los protocolos basados en la aplicación de GnRH y PGF.

Abstract The gonadotropin-releasing hormone (GnRH) is a decapeptide, synthesized by the GnRH neurons in the hypothalamus, which stimulates the synthesis and secretion of gonadotrophins (follicle-stimulating hormone, FSH and luteinizing hormone, LH) from the anterior pituitary or adenohypophysis. GnRH agonists with a structure identical or similar to nature have been commercially available since the 1970’s and were initially used for the treatment of follicular cysts and the improvement of fertility in cattle (1). The ovulation of ovarian follicles after GnRH administration was first reported by Schams et al. (2) and Britt et al. (3), but it was not until the 1990’s that GnRH began to be used to control follicular dynamics during the bovine estrous cycle. Studies have shown that a new follicular wave emerges within 2 days after ovulation of the dominant follicle present at the time of GnRH treatment (4,5). This finding facilitated the development of synchronization protocols based on GnRH in combination with prostaglandins (PGF) that allow fixed-time artificial insemination (FTAI), without the need for heat detection. These GnRH-based protocols are part of the reproductive management, especially in dairy cattle, in many commercial herds around the world. There are several GnRH and PGF-based protocols available for estrus and ovulation synchronization in cattle, most of these protocols have been explained and discussed in detail in other publications (6,7). The objective of this review is to describe the factors associated with the release of LH and ovulatory response after the administration of GnRH, to present relevant information on the effect of steroid hormones on the response to GnRH and, finally, to briefly postulate strategies that could improve the efficacy of GnRH and PGF-based protocols.

Resumen Diversos estudios han comprobado que la progesterona tiene un efecto directo en la calidad ovocitaria y el desarrollo inicial embrionario. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la concentración de la progesterona (P4) plasmática en el desarrollo de embriones in vitro en vacas de raza Bos taurus taurus (Holstein) y Bos taurus indicus (Gyr). Se utilizaron vacas Holstein y Gyr multíparas, presincronizadas con la aplicación de dos dosis de D-cloprostenol con intervalo de once días. Posteriormente, se distribuyeron en uno de tres grupos experimentales inducidos a diferentes niveles plasmáticos de progesterona. El grupo control fue sincronizado utilizando únicamente D-cloprostenol sin progesterona exógena, el grupo progesterona baja recibió un implante auricular de norgestomet de segundo uso y al grupo progesterona alta se le aplicaron dos implantes auriculares de norgestomet nuevos. Los resultados evidencian que la concentración plasmática de progesterona fue significativamente diferente (P < 0,05) tanto para las vacas Holstein (0,22 ± 0,15, 2,23 ± 0,17 y 5,32 ± 0,22 ng/mL) como para las vacas Gyr (0,24 ± 0,19, 2,05 ± 0,17, 4,85 ± 0,20 ng/mL) entre los grupos control, progesterona baja y progesterona alta, respectivamente. Las vacas Gyr presentaron diferencia (P < 0,05) en la tasa de clivaje del grupo progesterona baja en relación con los grupos control y progesterona alta (87,9 % ± 0,11 vs 77,5 % ± 0,13 y 76,4 % ± 0,10, respectivamente) y en la variable tasa de blastocistos del grupo progesterona baja (48,3 % ± 0,16) en relación con el grupo control (35,8 % ± 0,10) y el grupo progesterona alta (30,4 % ± 0,20). Se concluye que la progesterona tuvo efecto sobre el desarrollo embrionario en vagas de raza Gyr, el cual no se evidenció en las vacas de raza Holstein.

Abstract Studies have shown that progesterone has a direct effect on oocyte quality and early embryonic development. The objective of this study was to evaluate the effect of plasma progesterone (P4) concentration on in vitro embryo development in Bos taurus taurus (Holstein) and Bos taurus indicus (Gyr) cows. Multiparous Holstein and Gyr cows were used, and they were presynchronized with the application of two doses of D-cloprostenol with an interval of 11 days. They were latter distributed in one of three experimental groups induced to different plasma levels of progesterone: control group was synchronized using only D-cloprostenol without exogenous progesterone, low progesterone group received an auricular implant of norgestomet of second use, and high progesterone group received two new auricular implants of norgestomet. The plasma progesterone concentration was significantly different (P < 0.05) for both Holstein cows (0.22 ± 0.15, 2.23 ± 0.17 and 5.32 ± 0.22 ng/mL) and Gyr cows (0.24 ± 0.19, 2.05 ± 0.17, 4.85 ± 0.20 ng/mL) between control, low progesterone, and high progesterone groups respectively. Gyr cows presented differences (P < 0.05) in the cleavage rate of the low progesterone group in relation to the control and high progesterone groups (87.9 % ± 0.11 vs. 77.5 % ± 0.13 and 76.4 % ± 0.10, respectively) and in the variable blastocyst rate of the low progesterone group (48.3 % ± 0.16) in relation to the control group (35.8 % ± 0.10) and the high progesterone group (30.4 % ± 0.20). It is concluded that there is an effect of progesterone on embryonic development of Gyr cows. However, this effect is not evidenced in Holstein cows.

ABSTRACT Aim. To compare the efficiency of the ultrasound and direct visual techniques for antral follicle counts, and the morphological characteristics of the ovaries of slaughtered heifers. Methods: A number of 102 ovary pairs from crossbred Holstein heifers collected postmortem were included. The study used the ultrasound and direct visual techniques to determine the size and weight of the ovaries, luteal body, and the number of <4 mm >4 mm antral follicles. A simple analysis of variance and the Tukey test at 5% were performed to compare the means of the variables pooled by phase of the estrus cycle and follicular wave. A two-way analysis of variance was performed to compare the two techniques and location of the ovarian structures (RO and LO). Additionally, the Pearson test was conducted to establish the correlation between the techniques. Results: The study found that the right ovary (RO) weighed 3.21 g more than the left ovary (LO). Besides, 86.27% of animals presented luteal body (LB) with a mean weight of 3.38 g. The size of ovaries, (LB), and > 4 mm antral follicle counts (AFC) performed through direct visual (Vis) and ultrasound (US) techniques were similar (P>0.05), with a high and significant correlation (r=0.75; P<0.001). However, the <4 mm AFC showed statistically significant differences (P<0.05) between the techniques, whereas the correlation was low and non-significant. Conclusion: Ultrasound is a highly efficient tool to assess > 4 mm ovarian structures. However, the correct determination of smaller structures will depend on other additional factors.

RESUMEN Objetivo. Comparar la eficiencia de la técnica ultrasonográfica con la visual directa en el recuento de folículos antrales y las características morfológicas ováricas de vaquillas sacrificadas. Métodos: Se utilizaron 102 pares de ovarios de vaquillas Holstein mestizas, recuperados post-mortem. Mediante las técnicas ultrasonográfica y visual directa se determinó tamaño y peso del ovario, cuerpo lúteo y número de folículos antrales <4 mm y >4 mm. Se aplicó un análisis de varianza simple (ANOVA) y la prueba de Tukey al 5% para comparar medias de las variables agrupadas por fase del ciclo estral y fase de onda folicular y para comparar las técnicas y ubicación de las estructuras ováricas (OD y OI) se utilizó un análisis de varianza de dos vías. Además, se aplicó la prueba de Pearson para establecer correlación entre las dos técnicas. Resultados: Se determinó que el ovario derecho (OD) pesó 3,21 g más que el ovario izquierdo (OI). Además, el 86,27% de los animales presentaron cuerpo lúteo (CL), con peso medio de 3,38 g. El tamaño de los ovarios, CL y el recuento de folículos antrales (RFA) >4 mm establecidos mediante las técnicas visual directa (Vis) y ultrasonográfica (US) fueron similares (P>0,05) y guardaban correlación alta y significativa (r=0,75; P<0,001). Sin embargo, el RFA <4 mm presentaron diferencia estadística (P<0,05) entre las dos técnicas y la correlación fue baja y no significativa. Conclusión: La ultrasonografía es una herramienta con una alta eficiencia en la valoración de estructuras ováricas mayores a 4 mm. Sin embargo; la determinación correcta de estructuras menores, va a depender de otros factores adicionales.

ABSTRACT The aim of this study was to evaluate the superovulatory and embryonic response in alpacas with equine chorionic gonadotropin (eCG) according to the number of follicles recruited >3 mm in the follicular wave (FW). Twenty-six alpacas from the CIP «Chuquibambilla», Universidad Nacional del Altiplano, Puno, Peru, were selected and distributed into two experimental groups: GE01 (n=15 alpacas) with less than three follicles >3 mm and GE02 (n=11 alpacas) with more from four follicles >3 mm in diameter to follicular recruitment post-induction of ovulation by a follicle >7 mm with 0.0042 mg of buserelin acetate (BA). Both groups were evaluated by ultrasound every other day until the beginning of the third follicular wave. Subsequently, females with follicles >7 mm were induced to ovulate with BA (day 0), ovulation was verified at 36 h and 700 IU of eCG was administered. On day 6.5 animals were mated and 7.5 days later the embryos were collected. The superovulatory response was similar in GE01 and GE02 with 4.4 ± 4.0 and 4.7 ± 3.7 follicles between >3 and <7 mm; 7.5 ± 3.7 and 10.1 ± 6.3 follicles >7 mm; and 7.2 ± 3.3 and 8.6 ± 5.0 corpora lutea, respectively. Furthermore, GE01 and GE02 presented 1.6 ± 0.5 and 2.8 ± 1.3 luteinized anovulatory follicles and 2.0 ± 1.0 and 2.0 ± 2.2 anovulatory follicles, respectively. In 80% of alpacas in GE01 2.5 ± 1.4 embryos were collected and in 70% of alpacas in GE02 2.3 ± 1.1 embryos were collected. Likewise, 25 transferable and 5 nontransferable embryos were recovered in GE01 (n=15) and 12 transferable and 4 nontransferable embryos in GE02 (n=10). The results suggest that there is no difference in the ovarian response and embryonic collection in alpacas overstimulated with eCG despite a marked difference in emerging follicles >3 mm in the first FW and that it was not sustainable in the second and third FW.

RESUMEN El propósito del estudio fue evaluar la respuesta superovulatoria y embrionaria en alpacas con gonadotropina coriónica equina (eCG) según el número de folículos reclutados >3 mm en la onda folicular (OF). Se seleccionaron 26 alpacas del CIP «Chuquibambilla», Universidad Nacional del Altiplano, Puno, Perú, para conformar dos grupos experimentales: GE01 (n=15 alpacas) con menos de tres folículos >3 mm y GE02 (n=11 alpacas) con más de cuatro folículos >3 mm de diámetro al reclutamiento folicular pos-inducción de la ovulación de un folículo >7 mm con 0.0042 mg de acetato de buserelina (AB). Ambos grupos fueron evaluados por ecografía cada dos días hasta inicios de la tercera onda folicular. Posteriormente, hembras con folículos >7 mm fueron inducidas a la ovulación con AB (día 0), se verificó la ovulación a las 36 h y se administró 700 UI de eCG. Al día 6.5 se hizo el empadre y 7.5 días después se colectaron los embriones. La respuesta superovulatoria fue similar en GE01 y GE02 con 4.4 ± 4.0 y 4.7 ± 3.7 folículos entre >3 y <7 mm; 7.5 ± 3.7 y 10.1 ± 6.3 folículos >7 mm; y 7.2 ± 3.3 y 8.6 ± 5.0 cuerpos lúteos, respectivamente. Además, GE01 y GE02 presentaron 1.6 ± 0.5 y 2.8 ± 1.3 folículos anovulatorios luteinizados y 2.0 ± 1.0 y 2.0 ± 2.2 folículos anovulatorios, respectivamente. En 80% de alpacas en GE01 se colectaron 2.5 ± 1.4 embriones y en 70% de alpacas de GE02 se colectaron 2.3 ± 1.1 embriones. Así mismo, se colectaron 25 embriones transferibles y 5 no transferibles en GE01 (n=15) y 12 embriones transferibles y 4 no transferibles en GE02 (n=10). Los resultados sugieren que no hay diferencia en la respuesta ovárica y colección embrionaria en alpacas superestimuladas con eCG a pesar de una marcada diferencia de folículos emergentes >3 mm en la primera OF y que no se hizo sostenible en la segunda y tercera OF.

ABSTRACT The ovarian follicular dynamics monitored by transrectal (TR) and transvaginal (TV) routes in successive waves was studied in 10 llamas older than 4 years, multiparous, without calves at foot, body condition of 3.0, during a period of 90 days in the reproductive season. The Sonostar SS8® ultrasound equipment was used with a linear transducer for transrectal examination and endocavitary microconvex transducer for transvaginal examination, both with a frequency of 6.5 MHz. The inter-wave interval was 20 ± 4.4 and 22.5 ± 5.3 via TR and VT, respectively; the number of follicles per cohort was 5.21 ± 0.92 and 6.38 ± 1.26 for TR and TV, respectively (p=0.0011); the maximum diameter of follicles was 12.49 ± 3.57 mm for TR and 13.56 ± 3.91 mm for TV; the growth rate was 0.70 ± 0.35 and 0.67 ± 0.32 mm/day for TR and TV, respectively. The regression equation for the ratio of the maximum follicular diameter and duration of follicular wave for the TR route was y=0.89766x+6.5554 (R²=0.423) and for the TV route y=0.8466x+10.184 (R²=0.479). The duration of the follicular phases was similar between both techniques except for the dominance phase (10.2±3.19 days for TR and 8.67±2.46 for TV, p=0.0418). The relationship between the follicular diameter and the number of follicles detected showed a low negative correlation (R²=-0.0827 for TV and R²=-0.0876 for TR). In conclusion, the transvaginal endocavitary transducer makes it possible to determine with greater precision the characteristics of llama follicular dynamics in their recruitment, dominance and regression phases with overlapping of follicular waves as an important characteristic.

RESUMEN La dinámica folicular ovárica monitoreada por vía transrectal (TR) y transvaginal (TV) en ondas sucesivas en llamas fue estudiada en 10 llamas con más de 4 años, multíparas, sin cría, estado corporal de 3.0, durante un periodo de 90 días en la época reproductiva. Se utilizó el ecógrafo Sonostar SS8® con un transductor lineal para el examen transrectal y transductor microconvexo endocavitario para el examen transvaginal, ambos con frecuencia de 6.5 MHz. El intervalo inter-onda fue de 20±4.4 y 22.5±5.3 por vía TR y TV, respectivamente; el número de folículos por cohorte fue 5.21±0.92 y 6.38±1.26 para TR y TV, respectivamente (p=0.0011); el diámetro máximo de folículos fue 12.49±3.57 mm para TR y 13.56±3.91 mm para TV; la tasa de crecimiento fue de 0.70±0.35 y 0.67±0.32 mm/día para TR y TV, respectivamente. La ecuación de regresión para relación del diámetro máximo folicular y duración de onda folicular para la vía TR fue de y=0.89766x+6.5554 (R²=0.423) y para la vía TV de y=0.8466x+10.184 (R²=0.479). La duración de las fases foliculares fue similar entre ambas técnicas con excepción de la fase de dominancia (10.2±3.19 días para TR y 8.67±2.46 para TV, p=0.0418). La relación entre el diámetro folicular y número de folículos detectados presentó una correlación negativa baja (R²=-0.0827 para TV y R²=-0.0876 para TR). En conclusión, el transductor endocavitario transvaginal permite determinar con mayor precisión las características de dinámica folicular en llamas en sus fases de reclutamiento, dominancia y regresión con sobreposición de ondas foliculares como característica importante.

Resumen El objetivo del actual estudio fue evaluar el efecto del grupo genético de donadoras de ovocitos de las razas Gyr y Holstein sobre el desempeño en la técnica de producción in vitro de embriones. Se utilizaron 12 vacas multíparas, no lactantes, seis de la raza Gyr (Bos indicus) y seis de la raza Holstein (Bos taurus). Previo a la aplicación de la técnica de aspiración folicular, los animales fueron sometidos a sincronización del estro, mediante la administración de 3 mg de benzoato de estradiol (RIC-BE®, Tecnopec Ltda, Brasil), más la inserción de un implante auricular de norgestomet (Crestar®, Intervet, Brasil). La aspiración fue realizada siete días después del inicio del protocolo de sincronización. Los resultados determinaron que las vacas de la raza Gyr presentaron mayor número de folículos visualizados y de ovocitos recuperados, así como mayor tasa de clivaje y de blastocistos en el día siete. Estos resultados permiten considerar que la aplicación de la técnica de producción in vitro de embriones en la raza Gyr puede presentar mejor desempeño en ciertos parámetros en relación con la Holstein.

Abstract The aim of this study was to evaluate the genetic group effect of oocyte donors of the Gyr and Holstein breeds on the performance of the in vitro embryo production technique. Twelve multiparous cows were used, non-lactating, six of the Gyr breed (Bos indicus), and six of the Holstein (Bos taurus) breed. Prior to the implementation of the follicular aspiration technique, the animals were subjected to estrus synchronization through the administration of 3 mg estradiol benzoate (RIC-BE®, Tecnopec Ltda., Brazil) plus the insertion of an ear implant with norgestomet (Crestar®, Intervet, Brazil). Aspiration was performed seven days after the start of the synchronization protocol. The results showed that the cows of the Gyr breed had a higher number of visualized follicles and recovered oocytes, as well as a higher cleavage and blastocyst rate on day 7. These results allow considering that, the application of the in vitro embryo production technique in the Gyr breed offers a better performance in specific parameters in comparison to the Holstein breed.

ABSTRACT The response of the dominant follicle (DF), the profile of the FSH and estradiol and the onset of the follicular wave after the application of estradiol benzoate, GnRH, or follicular ablation in late metestrus were characterized in crossbred Holstein heifers, reared at 2500 meters above sea level and fed to grazing. Nine animals weighing 427.7±23.0 kg, body condition 2.7±0.1, age 26.7±1.4 months were used. Before the experiment, the heifers were synchronized and day 6 of the oestrous cycle was considered day zero (start of the experiment). There were three treatments: T1 = Oestradiol benzoate -BE (n=9), T2 = GnRH (n=9), T3 = Ablation (n=9). The evaluation of the DF was carried out by ultrasound every 24 hours, for 5 consecutive days. FSH and oestradiol levels were analysed every 5 days from day 0 by radioimmunoassay. The onset of the follicular wave and number of follicles recruited were determined retrospectively when assessing the daily ultrasound. The application of BE (T1) caused an initial growth of the DF, then it was maintained and finally went to atresia, the peak of FSH appeared at 48h (0.87±0.21 ng/ml) and the onset of the follicular wave was at 3.2±0.15 d post-treatment. In T2, 55.5% of the heifers ovulated in 24h and 44.5% between 24-48h, the peak of FSH was at 24h post-treatment and the onset of the wave in 2.4±0.18 d. The T3 heifers showed the FSH peak at 24h and wave restarted at 1.8±0.15 days. It is concluded that the application of BE in the heifers of the study favoured then an earlier restart of the follicular wave. Besides, the presence of corpus luteum and DF prior to the application of GnRH and ablation allows a more solid and homogeneous restart of the follicular wave.

RESUMEN Se caracterizó el comportamiento del folículo dominante (FD), el perfil de la FSH y estradiol, el momento del reinicio de la onda folicular pos-aplicación de benzoato de estradiol, GnRH, o ablación folicular en el metaestro tardío en vaquillas Holstein mestizas, sobre los 2500 msnm y alimentadas al pastoreo. Se utilizaron nueve animales de peso 427.7±23.0 kg, condición corporal 2.7±0.1, edad 26.7±1.4 meses. Previo al experimento las vaquillas fueron sincronizadas y se consideró día cero (inicio del experimento) al día 6 del ciclo estral. Se tuvo tres tratamientos: T1=Benzoato de estradiol - BE (n=9), T2=GnRH (n=9), T3=Ablación (n=9). La evaluación del FD se realizó mediante ecografía cada 24h, durante 5 días consecutivos. Los niveles de FSH y estradiol fueron analizados cada 5 días a partir del día 0 mediante radioinmunoensayo. El reinicio de la onda y número de folículos reclutados fueron determinados en forma retrospectiva al valorar los resultados de las ecografías diarias. La aplicación de BE (T1) provocó un crecimiento inicial del FD, luego se mantuvo y finalmente fue a la atresia, el pico de FSH apareció a las 48h (0.87±0.21 ng/ml), el reinicio de la onda folicular fue a los 3.2±0.15 d pos-tratamiento. En T2, el 55.5% de las vaquillas ovularon en 24h y el 44.5% entre las 24-48h, el pico de FSH fue a las 24h pos-tratamiento y el reinicio de la onda en 2.4±0.18 d. Las vaquillas de T3 presentaron el pico de FSH a las 24h y reinicio de onda 1.8±0.15 días. Se concluye que la aplicación de BE en las vaquillas del estudio causa que reinicien tempranamente la onda folicular. Además, la presencia de cuerpo lúteo y FD previo a la aplicación de GnRH y ablación permite un reinicio de la onda folicular más sólido y homogéneo.

Abstract The study aimed to evaluate the effect of applying seminal plasma, a GnRH analogue and follicular ablation on the follicular dynamic in llamas. The study was carried out in Puno, Peru, using 24 llamas selected under the criterion of presenting a preovulatory follicle >7 mm, determined by transrectal ultrasound. The animals were randomly distributed into four groups: T1, 1 ml PBS IM; T2, 2 ml seminal plasma IM; T3, 1 ml GnRH IM; T4, follicular ablation. The animals were evaluated, by transrectal ultrasound, every 2 h between 20 and 36 h post-treatment to determine ovulation; subsequently daily until day 9 and then every 2 days until day 15 post-stimulation to determine the interval to the emergence of a new follicular wave, the appearance of the new dominant follicle and the diameter of the corpus luteum on day 8 of treatment. No significant difference was found between treatments in the variables under study. It is possible that there are other factors that could affect the interval to the emergence of a new follicular wave.

RESUMEN El presente estudio tuvo como objetivo evaluar el efecto de la aplicación de plasma seminal, un análogo de GnRH y la ablación folicular sobre la dinámica folicular en llamas. El estudio se realizó en Puno, Perú, utilizando 24 llamas seleccionadas bajo el criterio de presentar un folículo preovulatorio >7 mm, determinado mediante ecografía transrectal. Las llamas fueron distribuidas aleatoriamente en cuatro grupos: T1, 1 ml PBS IM; T2, 2 ml plasma seminal IM; T3, 1 ml GnRH IM; T4, ablación folicular. Los animales fueron evaluados, mediante ecografía transrectal, cada 2 h entre las 20 hasta las 36 h post-tratamiento para determinar la ovulación; posteriormente en forma diaria hasta el día 9 y luego cada 2 días hasta el día 15 pos-estímulo para determinar el intervalo a la emergencia de una nueva onda folicular, la aparición del nuevo folículo dominante y el diámetro del cuerpo lúteo al día 8 del tratamiento. No se encontró diferencia significativa entre tratamientos en las variables en estudio. Es posible que existan otros factores que podrían afectar el intervalo a la emergencia de una nueva onda folicular.

ABSTRACT The aim of this study was to determine the concentration of glucose, total proteins, albumin, cholesterol and triglycerides in the follicular fluid during the three stages of follicular development in alpacas. Twenty-seven animals from CIP Chuquibambilla, National University of the Altiplano, Puno, Peru were used. The alpaca ovaries were checked by an Aloka SSD 500 ultrasound and a 7.5 MHz linear transducer. The animals were subjected to a follicular wave synchronization procedure in the presence of a follicle >7 mm. On day 9 of the synchronization the animals were distributed according to the stage of the follicular wave in three groups: G1, follicle >7 mm in the growing stage; G2, follicle >7 mm in the static stage; G3, follicle >7 mm in the regression stage. The follicular fluid was aspirated from the dominant follicle with the indicated ultrasound and a 5.0 MHz transvaginal transducer. The fluid was centrifuged, and the supernatant placed in vials and stored in liquid nitrogen. Biochemical determinations were made with specific commercial kits in a semi-automatic biochemical analyser. The results were: glucose 37.04, 41.19 and 30.07 mg/dl; total proteins 1.65, 1.93 and 1.79 g/dl; albumin 1.14, 1.42 and 1.31 g/dl; cholesterol 15.82, 18.3 and 11.08 mg/dl; triglycerides 11.3, 12.35 and 10.78 mg/dl for the stages of growth, static and regression, respectively, without significant differences between stages, with the exception of glucose. The glucose concentration was lower in the regression stage compared to the static stage (p<0.05).

RESUMEN El estudio tuvo como objetivo determinar la concentración de glucosa, proteínas totales, albúmina, colesterol y triglicéridos en el fluido folicular durante los tres estadios del desarrollo folicular en alpacas. Se utilizaron 27 animales del CIP Chuquibambilla, Universidad Nacional del Altiplano, Puno, Perú. Los ovarios de las alpacas fueron revisados mediante un ecógrafo Aloka SSD 500 y un transductor lineal de 7.5 MHz. Los animales fueron sometidos a un procedimiento de sincronización de la onda folicular a la presencia de un folículo >7 mm. En el día 9 de la sincronización fueron distribuidos según el estadio de la onda folicular en tres grupos: G1, folículo >7 mm en estadio de crecimiento; G2, folículo >7 mm en estadio de estática; G3, folículo >7 mm en estadio de regresión. Seguidamente, se procedió a la aspiración del fluido folicular del folículo dominante con el ecógrafo indicado y un transductor transvaginal de 5.0 MHz. El fluido fue centrifugado y el sobrenadante colocado en viales y almacenado en nitrógeno líquido. Las determinaciones bioquímicas se hicieron con kits comerciales específicos en un analizador bioquímico semiautomático. Los resultados fueron: glucosa 37.04, 41.19 y 30.07 mg/dl; proteínas totales 1.65, 1.93 y 1.79 g/dl; albúmina 1.14, 1.42 y 1.31 g/dl; colesterol 15.82, 18.3 y 11.08 mg/dl; triglicéridos 11.3, 12.35 y 10.78 mg/dl para los estadios de crecimiento, estático y regresión, respectivamente, sin diferencias significativas entre estadios, con excepción de la glucosa. La concentración de glucosa fue menor en el estadio de regresión en comparación con el estadio de estática (p<0.05).

ABSTRACT The study aimed to characterize the follicular emergence and determine the repeatability of the follicular wave in alpacas. For this, 34 female alpacas were selected and induced to ovulation by parenteral application of buserelin acetate (day 0). Two days after the hormonal stimulation, individual follicular development was recorded by counting the total number of antral follicles >3 mm in both ovaries. For this, an inter-daily transrectal ultrasound follow-up was done for 60 days. It was determined that the emergence of the follicular wave occurred on day 4.5 ± 1.4 (range 2-8). The number of antral follicles (NAF) >3 mm during three consecutive follicular emergencies was 2.8 ± 1.3 (range 1-8). Despite having a great similarity (p>0.05) in the NAF >3 mm during three successive follicular emergencies there is a significant difference in the average number of emerging follicles between alpacas (p<0.05). The repeatability of the NFA >3 mm in the three follicular waves was 0.72. The interval between waves was 16.9 ± 3.9 days (range 8-24) and was identified as variable among animals, which showed a repeatability of 0.23. It is concluded that the number of emerging follicles >3 mm represents a highly repeatable characteristic in alpacas, but variable among animals; the interval between waves was also variable and a non-repeatable character.

RESUMEN El presente trabajo tuvo como objetivo caracterizar la emergencia folicular y determi- nar la repetibilidad de la onda folicular en alpacas. Para ello, 34 hembras alpacas fueron seleccionadas e inducidas a ovulación mediante la aplicación parenteral de acetato de buserelina (día 0). Dos días después del estímulo hormonal, se registró el desarrollo folicular individual a partir del conteo del número total de folículos antrales >3 mm en ambos ovarios. Para esto, se hizo un seguimiento ecográfico transrectal inter diario por 60 días. Se determinó que la emergencia de la onda folicular se produjo el día 4.5 ± 1.4 (rango 2-8). El número de folículos antrales (NFA) >3 mm durante tres emergencias foliculares consecutivas fue de 2.8 ± 1.3 (rango 1-8). A pesar de haber una gran similitud (p>0.05) en el NFA >3 mm durante tres emergencias foliculares sucesivas existe una diferencia significativa en el número promedio de folículos emergentes entre alpacas (p<0.05). La repetibilidad del NFA >3 mm en las tres ondas foliculares fue de 0.72. El intervalo entre ondas fue de 16.9 ± 3.9 días (rango 8-24) y se identificó como un carácter variable entre animales, el cual presentó una repetibilidad de 0.23. Se concluye que el número de folículos emergentes >3 mm representa una característica altamente repetible en alpacas, pero variable entre animales; siendo además el intervalo entre ondas un carácter variable y no repetible.

RESUMEN Objetivo. Determinar el efecto de la ablación folicular en el inicio de un protocolo de superovulación (SPO) sobre la respuesta superovulatoria en vacas donantes de raza Brahman. Materiales y métodos. Se utilizaron 20 vacas de raza Brahman, las cuales fueron distribuídas aleatoriamente en dos grupos: Grupo control (G1; n = 10), la sincronización de la onda de crecimiento folicular fue realizada mediante la combinación de estrógenos (2.5 mg, Benzoato de Estradiol) y progestágenos (1 gr, implante intravaginal); cuatro días después se inició el protocolo de SPO con la hormona folículoestimulante porcina (FSHp); y grupo ablación (G2; n = 10), se realizó la ablación folicular y un día después se inició el tratamiento de SPO con FSHp . En los dos grupos la colecta de los embriones se realizó siete días después de la primera inseminación artificial. Resultados. El G2 presentó una mayor proporción de embriones de calidad 1 (p<0.01) en comparación con el G1 (68.60%, 31.22%), mientras que los animales del grupo G1 presentaron una mayor proporción de embriones de calidad 2 (43.04%, 18.60%, p<0.01). Para las variables total de estructuras colectadas, y total de embriones transferibles, no se observaron diferencias significativas (p>0.05). Conclusiones. La ablación folicular aumentó el porcentaje de embriones de calidad 1, sugiriendo que la implementación de esta técnica, como estrategia para sincronizar el inicio de una nueva onda de crecimiento folicular en tratamientos de SPO, mejora la calidad de los embriones producidos en vacas donadoras Brahman.

ABSTRACT Objective. The objective of this study was to determine the effect of follicular ablation at the beginning of a superovulation protocol (SOP) on the superovulatory response of Brahman donor cows. Materials and methods. Twenty Brahman cows were used, randomly distributed in two groups: control group (G1, n = 10), synchronization of the follicular growth wave was performed by the combination of estrogens (2.5 mg, estradiol benzoate) and progestagens (1 gr intravaginal implant); four days after starting the SOP with porcine follicle stimulating hormone (FSHp); and the ablation group (G2, n = 10), follicular ablation was performed and one day after, the SOP treatment with FSHp was initiated. In both groups, embryo collection was performed seven days after the first artificial insemination. Results. The G2 had a higher proportion of quality 1 embryos (p<0.01) compared to G1 (68.60% vs. 31.22%), while animals of G1 group had a higher proportion of quality 2 embryos (43.04% vs. 18.60%, p<0.01). For the total of structures collected and the total of transferable embryos, no significant differences were observed (p>0.05). Conclusions. Follicular ablation increased the percentage of quality 1 embryos, suggesting that the implementation of this technique, as a strategy to synchronize the beginning of a new wave of follicular growth when using SOP, improve embryo quality in Brahman donor cows.

The effect of the stage of development of the follicular wave (growth phase, static and regression of the dominant follicle) prior to the natural mounting on the ovulation rate, and the recovery rate and embryo quality in alpacas was evaluated. It was used 51 female alpacas with presence of dominant follicle greater than or equal to 7 mm, which were synchronized with a GnRH analogue. The groups were T1 (n=16): growth phase; T2 (n=19): Static phase and T3 (n=18): Regression phase. The day of the copula was considered as day 0. Ultrasonographic evaluations were conducted on day 2 (occurrence of ovulation) and on day 7 (to measure the size of the corpus luteum). The embryo recovering was done 7 days after the service. Two animals of T1 did not ovulate. There were no significant differences between groups by size of the dominant follicle at the time of service, ovulation rate or size of the corpus luteum on the day of embryo recover. In 52.9% (n=27) of the alpacas, 27 embryos were recovered without significant differences between treatments; however, the embryos of T1 and T2 were of better quality than those of T3 (p<0.05).

Se evaluó el efecto del estadio de desarrollo de la onda folicular (fase de crecimiento, estático y regresión del folículo dominante) previo a la monta natural sobre la tasa de ovulación, y tasa de recuperación y calidad embrionaria en alpacas. Se trabajó con 51 alpacas hembra con presencia de folículo dominante mayor o igual a 7 mm, las que fueron sincronizadas con un análogo de GnRH. Los grupos fueron T1 (n=16): Fase crecimiento; T2 (n=19): Fase estática y T3 (n=18): Fase regresión. El día de la monta fue considerado como día 0. Se hicieron evaluaciones ecográficas en el día 2 (ocurrencia de la ovulación) y en el día 7 (para medir el tamaño del cuerpo lúteo). El lavado uterino se realizó a los 7 días del servicio. Dos animales de T1 no llegaron a ovular. No hubo diferencias significativas entre grupos por tamaño del folículo dominante en el momento del servicio, tasa de ovulación ni por tamaño del cuerpo lúteo en el día del lavado uterino. En el 52.9% (n=27) de las alpacas servidas se recuperaron 27 embriones sin diferencias significativas entre tratamientos; no obstante, los embriones de T1 y T2 fueron de mejor calidad que los de T3 (p<0.05).

RESUMO Os objetivos deste estudo foram relatar a dinâmica folicular ovariana e a concentração plasmática de progesterona durante ciclos estrais de duração irregular em cabras da raça Alpina. Vinte e nove cabras tiveram sua atividade ovariana monitorada diariamente por ultrassonografia transretal durante um, dois ou três períodos interovulatórios consecutivos. Amostras de sangue foram coletadas para análise da concentração plasmática de progesterona. Dos 47 ciclos avaliados, 28 (59,57%) foram de duração normal (17 a 25 dias), sete (14,89%) de curta duração (<17 dias) e 12 (25,53%) de longa duração (>25 dias). Os ciclos estrais de curta duração tiveram 6,14±0,69 dias e uma onda folicular que emergiu no dia 0,43±1,13. Os ciclos estrais de longa duração tiveram entre 26 e 79 dias, com duas a nove ondas foliculares. Os ciclos estrais de curta duração ocorreram durante a estação reprodutiva e foram associados à regressão prematura do corpo lúteo (CL). Os ciclos estrais de longa duração ocorreram na transição entre o anestro e a estação reprodutiva e foram associados principalmente à persistência do CL ou à fase folicular prolongada.

The aim of this paper was to compare the effects of two superovulation protocols: synchronization of the follicular wave (SFW), and natural estrus (NE) induction of embryos produced for transference in Holstein cows. Twenty cows were chosen as donors, with body condition (BC) of 2.75-3.5; 40-60 months old; 1-2 previous services per gestation, and without reproductive problems. Two superovulation protocols were applied: SFW and NE. SFW was not observed to produce more embryos than the NE in the blastocyst and morula stages.

El objetivo del trabajo fue comparar la respuesta a la superovulación con sincronización de la onda folicular (SOF) y con celo natural (CN) en la producción de embriones para transferencia en vacas Holstein. Se seleccionaron 20 vacas como donadoras con una condición corporal (CC) de 2,75-3,5; edades entre 40 y 60 meses; ciclos sexuales regulares; uno-dos servicios por gestación anterior y sin problemas reproductivos. Se aplicaron dos protocolos de superovulación: con SOF y CN. No se obtuvo evidencia que el número de embriones producidos con SOF fuera mayor al número de embriones producidos con CN en los estadios de blastocito y mórula.

Reproducing genetic merit animals led the development of different biothecnologies such as "embryo transfer". Superovulation treatments produce variable responses especially in synthetic cow breeds. The aim of the present work was to evaluate superovulatory response in Braford donors from the Argentinean northeast region trough monitoring ovaries by ultrasound. The study used 60 donors randomly assigned for two protocol treatments (T1: n=30 and T2: n=30), being examined only 6 animals per treatment on day 0 to determine cyclicity, then before injecting FSH (T1=day 3 and T2=day 4), for estrus control and to determine superovulatory response (T1=day 7 and T2= day 8), and finally at embryo collection (T1=day 14 and T2=day 15). Qualitative variables (with binomial distribution), were analyzed using contingency tables to calculate absolute and relative frequencies and chi2 test (p<0.05). The number of transferable embryos achieved was 6.85±0.75, degenerate embryos were 1±0.12, and unfertilized oocytes were 5.32±1.01. Ultrasonography in embryo collection did not show differences in total corpora lutea (12.6 vs 12.06), however, they were higher in right ovary (7 and 6.66) than in the left (5.6 and 5.4) in T1 and T2, respectively. The independence test did not established statistic significant evidence. We conclude that the great advances on superstimulation do not generate significant improvements on treatment responses, but it can be used as an alternative in embryo production, without affecting quantity and quality of ovarian structures at ultrasonography; even shortening the traditional treatments

La reproducción de animales de mayor valor genético ha llevado a desarrollar distintas biotecnologías, como la transferencia de embriones. Los tratamientos de superovulación producen respuestas muy variables sobre todo en las razas sintéticas. El objetivo fue evaluar la respuesta superovulatoria, en vacas donantes Braford del nordeste argentino, mediante el seguimiento ecográfico de los ovarios. Se trabajó con 60 donantes, asignadas aleatoriamente a dos tratamientos o protocolos (T1: n=30 y T2: n=30); examinándose ecográficamente 6 por tratamiento, el día 0 para determinar ciclicidad, al comienzo de las aplicaciones de FSH (T1=día 3 y T2=día 4), en el control de celos (T1=día 7 y T2=día 8) para determinar respuesta superovulatoria y en la colecta (T1=día 14 y T2=día 15). Las variables cualitativas, de distribución binomial, se analizaron mediante tablas de contingencia para el cálculo de frecuencias absolutas y relativas y prueba de chi2 (p<0,05). El número de embriones transferibles logrado fue de 6,85±0,77; embriones degenerados de 1±0,12 y ovocitos sin fertilizar de 5,32±1,01. La ultrasonografía en la colecta no mostró diferencias en los cuerpos lúteos totales (12,6 vs 12,06), sin embargo fueron superiores en el ovario derecho (7 y 6,66) respecto al izquierdo (5,6 y 5,4) en T1 y T2, respectivamente. La prueba de independencia no estableció evidencia estadísticamente significativa. Concluimos que el adelanto en la superestimulación no genera mejoras en la respuesta, pudiendo utilizarse como una alternativa en la producción de embriones, sin afectar la cantidad y calidad de estructuras ováricas a la ultrasonografía, acortando los tratamientos tradicionales