ABSTRACT Calla lily (Zantedeschia spp.) is an herbaceous flowering plant that belongs to the Araceae family, with worldwide distribution. Native to the swampy or mountainous regions of South Africa, it is valued as an ornamental plant due to its extraordinary spathe and decorative leaves. However, its production has decreased due to the presence of diseases. In vitro culture of plant cells and tissues has been successfully applied to precisely diagnose and control diseases to produce disease-free plants. This study analyzes information from in vitro techniques applied to this crop, highlighting phytopathological aspects. It considers the different stages of in vitro culture and the process of obtaining and propagating healthy or pathogen-free plants. In vitro culture has proven to be an effective tool for rapid clonal propagation and multiplication of Zantedeschia spp. Sanitary management before the in vitro culture is recommended.

RESUMEN La cala lily (Zantedeschia spp.) es una planta herbácea con flores que pertenece a la familia Araceae, con distribución mundial. Originaria de las regiones pantanosas o montañosas de Sudáfrica, es valorada como planta ornamental por su extraordinaria espata y hojas decorativas. Sin embargo, su producción ha disminuido por la presencia de enfermedades. El cultivo in vitro de células y tejidos vegetales se ha aplicado con éxito para diagnósticar y controlar enfermedades con precisión y producir plantas libres de enfermedades. Este estudio analiza información de las técnicas in vitro aplicadas a este cultivo, destacando aspectos fitopatológicos. Considera las diferentes etapas del cultivo in vitro y el proceso de obtención y propagación de plantas sanas o libre de patógenos. El cultivo in vitro ha demostrado ser una herramienta eficaz para la rápida propagación clonal y multiplicación de Zantedeschia spp. Se recomienda manejo sanitario antes del cultivo in vitro.

Abstract Epidendrum falcatum Lindl. is an endemic orchid of Mexico, with a discontinuous distribution in wild populations growing on limestone rocks. Anthropogenic activities and the demand of collectors have caused a decrease in the wild populations of this species. The objective of this work was to know the effect of two organic compounds on the in vitro propagation of E. falcatum. Seeds from an indehiscent capsule were grown on Murashige and Skoog (MS) medium modified to 50% of macronutrients and added with 100, 200 and 300 mL L-1 and g L-1 of coconut water or banana pulp. The organic compounds promoted germination of E. falcatum; the highest germination percentage was obtained with 100% coconut water. The control presented a greater number of leaves. However, treatments containing plantain significantly (p ≤ 0.01) stimulated the differentiation of the root system and aerial structures. This study represents a successful biotechnological method of in vitro propagation to obtain specimens of E. falcatum and thus counteract the exploitation of wild populations.

Resumen Epidendrum falcatum Lindl. es una orquídea endémica de México, con una distribución discontinua en poblaciones silvestres que crecen sobre rocas calizas. Las actividades antropogénicas y la demanda de coleccionistas han provocado una disminución en las poblaciones silvestres de esta especie. El objetivo de este trabajo fue conocer el efecto de dos compuestos orgánicos sobre la propagación in vitro de E. falcatum. Semillas provenientes de una cápsula indehiscente se cultivaron en medio Murashige y Skoog (MS) modificado a 50% de los macronutrientes y adicionado con 100, 200 y 300 mL L-1 y g L-1 de agua de coco o pulpa de plátano. Los compuestos orgánicos promovieron la germinación de E. falcatum; el mayor porcentaje de germinación se obtuvo con agua de coco a 100%. El control presentó mayor número de hojas. Sin embargo, los tratamientos que contenían plátano estimularon significativamente (p ≤ 0.05) la diferenciación del sistema radicular y de estructuras aéreas. Este estudio representa un método biotecnológico exitoso de propagación in vitro para la obtención de ejemplares de E. falcatum y así contrarrestar la explotación de las poblaciones silvestres.

Resumen: El experimento se realizó en el Laboratorio de Biotecnología de la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional de Asunción, con el objetivo de evaluar dos tratamientos de desinfección de explantes para la micropropagación del banano (Musa spp.) variedad Nanicao. Se utilizaron 80 hijuelos de 30 - 40 cm de los cuales se extrajeron los ápices meristemáticos que fueron sembrados en medios MS (Murashige y Skoog 1962) con el agregado de 1 g.l-1 de carbón activado como antioxidante. Los tratamientos consistieron en dos concentraciones de NaClO (5 y 10 %) durante cinco minutos. El diseño experimental utilizado fue completamente al azar. Las variables evaluadas fueron: porcentaje de supervivencia, grado de oxidación y porcentaje de contaminación de plántulas. Los datos obtenidos fueron sometidos al análisis de varianza al 5 % de probabilidad de error. No se registraron diferencias significativas entre los tratamientos de desinfección aplicados relacionados a la sobrevivencia de explantes de banano cultivados in vitro, aunque existieron diferencias significativas con respecto al grado de oxidación y contaminación microbiana. Se logró una regeneración de 12,5% de los segmentos nodales de banano sembrados. En conclusión, al incrementar la concentración de hipoclorito de sodio, el porcentaje de explantes contaminados con hongos y bacterias fue menor, sin embargo, esto se tradujo en un incremento del grado de oxidación de explantes de Musa spp variedad Nanicao.

Abstract: The experiment was carried out in the Biotechnology Laboratory of the Facultad de Ciencias Agrarias of the Universidad Nacional de Asunción, with the objective of evaluating two explant disinfection treatments for the micropropagation of banana (Musa spp.) variety Nanicao. Eighty shoots of 30 - 40 cm were used, from which the meristematic apices were extracted and planted in MS media (Murashige and Skoog 1962) with the addition of 1 g.l-1 of activated carbon as an antioxidant. The treatments consisted of two concentrations of NaClO (5 and 10%) for five minutes. The experimental design used was completely randomized. The variables evaluated were: percentage of survival, degree of oxidation and percentage of contamination of seedlings. The data obtained were subjected to variance analysis at 5% probability of error. No significant differences were recorded between the applied disinfection treatments related to the survival of banana explants cultivated in vitro, although there were significant differences with respect to the degree of oxidation and microbial contamination. A regeneration of 12.5% of the planted banana nodal segments was achieved. In conclusion, by increasing the concentration of sodium hypochlorite, the percentage of explants contaminated with fungi and bacteria was lower, however, this translated into an increase in the degree of oxidation of Musa spp variety Nanicao.

Abstract Mint (Mentha arvensis), is one of the most commercially valuable and mostwidespread herbs in the world, it has numerous properties which is why it is highly required in the cosmetic, pharmaceutical and food industries. In Paraguay there is a high demand for this item, especially in the yerbatero sector. Currently there is a problem to obtainhealthy plants, free of pathogens, of the varieties required in the local market. The objective of this work was to evaluate different disinfection methods for in vitro multiplication and different types of substrates for the acclimatization of vitroplants, in order to optimize a sanitation protocol for the production of mother plants. The disinfection treatments consisted of: T1 NaClO 1 % for 10 minutos; T2 NaClO 1.5 % for 10 minutos; T3 NaClO 1 % for 15 minutos and T4 NaClO 1.5 % for 15 min. The substrates used were: perlite; Carolina® commercial substrate; perlite + commercial substrate (1:1). The disinfection results indicate that treatments 3 and 4 with a concentration of 1 % and 1.5 % NaClO for 15 minutes were the best, and the commercial substrate obtained the best performance in the vegetation house, which has a 100 % of acclimatized plants.

Resumen La menta (Mentha arvensis), es una de las hierbas comercialmente más valiosas y más difundidas en todo el mundo, tiene numerosas propiedades por lo que es muy requerido en las industrias cosméticas, farmacéuticas y de alimentos. En Paraguay existe una alta demanda de este rubro, especialmente en el sector yerbatero. Actualmente existe una problemática con la obtención de plantas sanas, libres de patógenos, para las mudas, de las variedades requeridas en el mercado local. Por consecuente, el objetivo del presente trabajo fue evaluar diferentes métodos de desinfección para la multiplicación in vitro y diferentes tipos de sustratos para la aclimatación de vitroplantas, con el fin de optimizar un protocolo de saneamiento de stock de plantas para producción de plantas madre. Los tratamientos de desinfección consistieron en: T1 NaClO 1 % por 10 minutos; T2 NaClO 1,5 % por 10 minutos; T3 NaClO 1 % por 15 minutos y T4 NaClO 1,5 % por 15 minutos, los sustratos utilizados fueron: perlita; sustrato comercial Carolina®; perlita + sustrato comercial (1:1). Los resultados de la desinfección indican que los tratamientos 3 y 4 con una concentración de NaClO al 1 % y 1,5 % por 15 minutos fueron los mejores, y el sustrato comercial obtuvo el mejor desempeño en casa de vegetación, pues se logró un 100 % de plantas aclimatadas.

Resumen Beaucarnea hookeri, es una especie endémica de México y está catalogada como amenazada en la NOM-059-SEMARNAT-2010. Con la finalidad de micropropagar esta especie, se estableció un experimento en el Campus Montecillo, Colegio de Posgraduados en 2022, donde se evaluó la respuesta de los brotes durante la multiplicación in vitro con diferentes concentraciones de bencilaminopurina (BAP) y su capacidad de enraizamiento ex vitro durante su aclimatización. Se estableció un experimento con tres subcultivos subsecuentes (SC3, SC4, SC4-1), en SC3 se utilizaron brotes generados con 0.5 mg L-1 de BAP (SC2), en SC4 brotes sanos generados del SC3 y SC4-1 con brotes del SC3, pero, con hiperhidratación inicial (HHI). En el SC3 se evaluaron 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5 mg L-1 de BAP. En el SC4 0 y 0.5 mg L-1 BAP y en SC4-1 concentraciones de 0, 0.5 y 1 mg L-1 de BAP. Durante la aclimatización se evaluaron cuatro tratamientos de Radix® 10 000 (0, 1 000, 2 000 y 4 000 mg kg-1) y se utilizaron brotes del SC2. Durante la multiplicación se registró el número de brotes (NB) y el SC3 generó 6.35 brotes con la concentración 1.5 mg L-1 BAP, con presencia de HHI. En el SC4 se obtuvo 9.7 brotes en promedio y en SC4.1, 5.3 brotes, ambos subcultivos con 0.5 mg L-1 de BAP. Además, en el SC4-1 hubo recuperación de HHI. En el enraizamiento no existieron diferencias significativas entre los tratamientos y el testigo a 80 días del trasplante generó 73.3% de brotes con raíz (SBR). Únicamente los brotes del tratamiento testigo en multiplicación presentaron raíces lo que permite obtener plantas completas en 30 días.

Abstract Beaucarnea hookeri is a species endemic to Mexico and is listed as threatened in NOM-059-SEMARNAT-2010. In order to micropropagate this species, an experiment was established at the Montecillo Campus, College of Postgraduates in 2022, where the response of the shoots during in vitro multiplication with different concentrations of benzylaminopurine (BAP) and their capacity for ex-vitro rooting during acclimatization were evaluated. An experiment was established with three subsequent subcultures (SC3, SC4, SC4-1); in SC3, shoots generated with 0.5 mg L-1 BAP (SC2) were used; in SC4, healthy shoots generated from SC3; and SC4-1 with shoots from SC3 but with initial hyperhydration (IHH). In SC3, 0.5, 1, 1.5, 2, and 2.5 mg L-1 BAP were evaluated. In SC4, 0 and 0.5 mg L-1 BAP and in SC4-1, concentrations of 0, 0.5, and 1 mg L-1 BAP. During acclimatization, four treatments of Radix® 10 000 (0, 1 000, 2 000, and 4 000 mg kg-1) were evaluated, and shoots from SC2 were used. During multiplication, the number of shoots (NS) was recorded, and SC3 generated 6.35 shoots with the concentration of 1.5 mg L-1 BAP, with the presence of IHH. On average, 9.7 shoots were obtained in SC4, and 5.3 shoots in SC4-1, both subcultures with 0.5 mg L-1 BAP. In addition, there was a recovery of IHH in SC4-1. In rooting, there were no significant differences between treatments, and the control generated 73.3% of shoots with roots (SSR) 80 days after transplantation. Only the shoots of the control treatment in multiplication presented roots, which allowed complete plants to be obtained in 30 days.

Resumen La producción de piña (Ananas comosus L.) por métodos convencionales está limitada principalmente por la falta de disponibilidad de retoños de alto rendimiento. Sin embargo, se ha demostrado que por medio de metodologías de propagación in vitro como la embriogénesis somática y organogénesis, es posible obtener plantas de alto rendimiento de una manera más eficiente y controlable. El objetivo de este estudio consistió en generar un protocolo eficiente de micropropagación de piña criolla (Ananas comosus L.) para la multiplicación y conservación in vitro de esta especie, el estudio se llevó a cabo en 2021. Se evaluó la respuesta morfogénica de la piña criolla a partir de diferentes explantes (meristemo apical y hoja), cultivados en medio de cultivo Murashige y Skoog (MS) suplementado con diversos reguladores de crecimiento: ácido naftalenacético (ANA) (0.5, 1 y 1.5 mg L-1), 6-bencilaminopurina (BAP) (1, 2 y 3 mg L-1) y ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) (1, 2 y 4.5 mg L-1), así como un tratamiento control libre de reguladores. Los resultados mostraron que de los explantes evaluados la mejor respuesta se observó en el meristemo apical, en el cuales se obtuvo la formación de brotes adventicios a los 60 días del tratamiento de inducción, cuando el medio de cultivo fue suplementado con BAP a una concentración de 2 mg L-1 obteniéndose ocho brotes/explante. El protocolo desarrollado es un estudio clave para la propagación masiva de piña criolla.

Abstract The production of pineapple (Ananas comosus L.) by conventional methods is limited mainly by the lack of availability of high-yielding suckers. Nevertheless, it has been shown that, through in vitro propagation methodologies such as somatic embryogenesis and organogenesis, it is possible to obtain high-yielding plants in a more efficient and controllable way. The objective of this study was to generate an efficient protocol of micropropagation of landrace pineapple (Ananas comosus L.) for the in vitro multiplication and conservation of this species, the study was carried out in 2021. The morphogenic response of the landrace pineapple was evaluated based on different explants (apical meristem and leaf), grown in Murashige and Skoog (MS) culture medium supplemented with various growth regulators: naphthaleneacetic acid (NAA) (0.5, 1 and 1.5 mg L-1), 6-benzylaminopurine (BAP) (1, 2 and 3 mg L-1) and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) (1, 2 and 4.5 mg L-1), as well as a regulator-free control treatment. The results showed that, of the explants evaluated, the best response was observed in the apical meristem, in which the formation of adventitious shoots was obtained 60 days after induction treatment, when the culture medium was supplemented with BAP at a concentration of 2 mg L-1, obtaining eight shoots/explant. The protocol developed is a key study for the mass propagation of landrace pineapple.

Abstract. Light is an essential environmental factor that regulates important plant processes, including photosynthesis, photoprotection, and the accumulation of pigments such as chlorophylls and carotenoids. Conversely, the absence of light initiates the etiolation phenomenon, characterized by a decrease in photosynthetic and photoprotective pigments. In contrast, albinism is a rare variant characterized by the absence of chloroplasts, chlorophyll, and other pigments, even in the presence of light. Albinism may occur spontaneously in plant tissue culture (PTC) and is considered an unexplored phenotypic variant. During micropropagation of Agave angustifolia Haw., two somaclonal variants emerged from green plantlets: albino and variegated. We demonstrate that low-intensity light exposure triggers greener pigmentation in albino plantlets accompanied by an increase in global DNA methylation levels. Our findings suggest the possibility of chloroplast biogenesis under low-intensity light and provide insight into the potential role of DNA methylation in regulating plant responses to light intensity and highlight the importance of studying the effects of different light conditions on plant development and physiology.

Resumen. La luz es un factor ambiental esencial que regula importantes procesos de las plantas, incluyendo la fotosíntesis, la fotoprotección y la acumulación de pigmentos como las clorofilas y los carotenoides. Por el contrario, la ausencia de luz inicia el fenómeno de etiolación, caracterizado por una disminución de los pigmentos fotosintéticos y fotoprotectores. En contraste, el albinismo es una rara variante caracterizada por la ausencia de cloroplastos, clorofila y otros pigmentos, incluso en presencia de luz. El albinismo puede ocurrir espontáneamente en el cultivo de tejidos vegetales (PTC) y se considera una variante fenotípica inexplorada. Durante la micropropagación de Agave angustifolia Haw. surgieron dos variantes somaclonales a partir de las plántulas verdes: albino y variegado. Demostramos que la exposición a la luz de baja intensidad desencadena una pigmentación verde en las plántulas albinas acompañada de un aumento en los niveles globales de metilación del ADN. Nuestros hallazgos sugieren la posibilidad de la biogénesis de cloroplastos bajo luz de baja intensidad y proporcionan información sobre el posible papel de la metilación del ADN en la regulación de las respuestas de las plantas a la intensidad de la luz, destacando la importancia de estudiar los efectos de diferentes condiciones de luz en el desarrollo y la fisiología de las plantas.

Summary: The irupé or water corn (Victoria cruziana A. D. Orb.) belongs to the Nymphaeaceae family and arouses interest mainly due to the beauty of its leaves and flowers. Obtaining seeds of this aquatic species in its natural environment is challenging, and it is also considered a recalcitrant species for in vitro culture. For this reason, the aim of this work was to establish a methodology for the conversion into plants of irupé embryos extracted from seeds of immature fruits and to obtain material to be used in micropropagation or in environmental restoration programs. Embryo culture of fruits in six growth stages was carried out up to a maximum of four weeks. Using Murashige & Skoog’s basal medium, twelve culture media with and without the addition of growth regulators (gibberellic acid, AG3 and thidiazuron, TDZ) were tested. Embryos converted into plants in all media diluted to 50% (½ MS) with 3% sucrose, while plants with developed roots were obtained in the medium with the addition of 10 mg/L of GA3 . Although the culture of embryos derived from seeds in early fruit stages did not allow plant regeneration, this was possible when explants derived from fruits in late developmental stages.

Resumen: El irupé o maíz de agua (Victoria cruziana A. D. Orb.) pertenece a la familia Nymphaeaceae y despierta interés, principalmente, por la belleza de sus hojas y flores. La obtención de semillas de esta especie acuática es dificultosa en su ambiente natural y además es considerada recalcitrante para el cultivo in vitro. Por este motivo, el objetivo de este trabajo fue el establecimiento de una metodología para la conversión a plantas de embriones de irupé extraídos de semillas de frutos inmaduros y la obtención de material para ser empleado en la micropropagación o en programas de restauración ambiental. Se realizó el cultivo de embriones de frutos con seis estadios de crecimiento, hasta un máximo de cuatro semanas. Empleando el medio basal de Murashige & Skoog, se probaron doce medios de cultivo con y sin el agregado de reguladores de crecimiento (ácido giberélico, AG3 y thidiazuron, TDZ). Los embriones se convirtieron en plantas en todos los medios diluidos al 50% (½ MS), manteniendo el 3% de sacarosa, mientras que en el medio adicionado con 10 mg/L de AG3 se obtuvieron plantas con raíces desarrolladas. Si bien el cultivo de embriones derivados de las semillas en los estadios tempranos del fruto no permitió la regeneración de plantas, esta fue posible cuando los explantes derivaron de frutos en estadios tardíos.

Abstract Improving the efficiency in vitro culture conditions in established yellow pitahaya micropropagation protocols, allows evaluating the dependence of sucrose in the culture medium under photoautotrophic conditions to obtain high quality seedlings in less time, which favors their acclimatization in the mass production of this species. The objective of this research was to evaluate the levels of light intensity and the use or not of sucrose in the culture medium on the in vitro morphological and physiological response of yellow pitahaya (S. megalanthus) seedlings. Vegetative sections of yellow pitahaya were placed in growth and development culture media to obtain cuttings approximately six centimeters long to obtain the explants. The containers were placed at different light intensities: 50, 100 and 150 μmol/m-2s-1, using compact fluorescent lamps, whose intensities were adjusted using a luxometer. A completely randomized design with factorial arrangement (Factor A: three light intensities and Factor B: presence and absence of sucrose in the growth and development culture medium) and seven repetitions per treatment was used. The evaluations of the morphological and physiological response were made after 45 days of in vitro culture. The traits related to water content, dry weight and shoot length allow us to explain the photoautotrophic response of yellow pitahaya seedlings grown in vitro using light intensities of 50 and 100 μmol/m-2s-1 and in the absence of sucrose.

Resumen Mejorar la eficiencia en las condiciones de cultivo in vitro en protocolos de la micropropagación de pitahaya amarilla establecidos, permite evaluar la dependencia de la sacarosa en el medio de cultivo bajo condiciones fotoautotróficas con la finalidad de obtener plántulas de alta calidad en menor tiempo, que favorezca su aclimatación en la producción masiva de esta especie. La presente investigación tuvo como objetivo evaluar los niveles de intensidad de la luz y el empleo o no de la sacarosa en el medio de cultivo sobre la respuesta morfológica y fisiológica in vitro de plántulas de pitahaya amarilla (S. megalanthus). Secciones vegetativas de pitahaya amarilla fueron colocadas en medios de cultivo de crecimiento y desarrollo para la obtención de esquejes de aproximadamente seis centímetros de largo para la obtención de los explantes. Los recipientes fueron colocados a diferentes intensidades de la luz: 50, 100 y 150 μmol/m-2s-1, utilizando lámparas fluorescentes compactas, cuyas intensidades fueron ajustadas empleando un luxómetro. Se empleó un diseño completamente al azar con arreglo factorial (Factor A: tres intensidades de luz y Factor B: presencia y ausencia de sacarosa en el medio de cultivo de crecimiento y desarrollo) y siete repeticiones por tratamiento. Las evaluaciones de la respuesta morfológica y fisiológica fueron realizadas a los 45 días de cultivo in vitro. Los rasgos relacionados con el contenido hídrico, peso seco y longitud de brote permiten explicar la respuesta fotoautotrófica de las plántulas de pitahaya amarilla cultivada in vitro empleando intensidades de luz de 50 y 100 μmol/m-2s-1 y en ausencia de sacarosa.

Resumen Ficus americana y F. obtusifolia, se encuentran entre las especies arbóreas más importantes de los Bosques Tropicales Estacionalmente Secos (BTES) por su condición de siempre verdes y sus altos niveles de biomasa. Sin embargo, el BTES de Lambayeque y el norte de Perú está disminuyendo enormemente debido al avance de la agricultura migratoria, la minería ilegal y la deforestación. El objetivo de este trabajo fue estudiar los aspectos taxonómicos de ambas especies, así como la germinación de semillas, la micropropagación y la conservación de germoplasma in vitro. La germinación de semillas fue de 100 % en ambas especies hasta tres meses después de la recolección. Respecto a la micropropagación, el enraizamiento y la conservación de germoplasma, el medio de cultivo de Piper resultó efectivo, el cual está conformado por sales minerales MS con IAA 0.02 mg.L-1 y GA3 0.02 mg.L-1. La conservación in vitro de germoplasma duró más de 24 meses en ambas especies. La aclimatación en condiciones de invernadero alcanzó 50 % de supervivencia en ambas especies.

Abstract Ficus americana and F. obtusifolia are among the most important tree species in Seasonally Dry Tropical Forests (SDTF) due to their evergreen condition and high levels of biomass. However, the SDTF of Lambayeque and northern Peru is greatly diminishing due to the advance of migratory agriculture, illegal mining, and deforestation. The objective of this work was to study the taxonomic aspects of both species, as well as seed germination, micropropagation, and in vitro germplasm conservation. Seed germination was 100% for both species up to three months after collection. As for micropropagation, rooting, and germplasm conservation, the Piper culture medium was effective, as it was constituted by MS mineral salts with 0.02 mg.L-1 IAA and 0.02 mg.L-1 GA3. In vitro germplasm conservation lasted more than 24 months for both species. Acclimatization under greenhouse conditions reached 50% survival for both species.

Resumen La micropropagación o propagación in vitro es la propagación asexual de plantas utilizando técnicas de cultivo de tejidos vegetales (CTV). A pesar de las ventajas de estas técnicas, la contaminación de explantes, la asepsia del medio de cultivo y la acumulación de etileno en algunas especies han sido un problema que afecta la micropropagación. La reciente aplicación de las nanopartículas de plata (NPsAg) en la micropropagación se ha convertido en una alternativa eficiente para la solución a estos inconvenientes. Además, en estudios de laboratorio se ha demostrado que las NPsAg, a bajas concentraciones, tiene un efecto dosis-respuesta sobre el desarrollo vegetal, conocido como hormesis. En este artículo revisamos los efectos de las NPsAg sobre la reducción de la contaminación, inhibir los efectos de etileno y promover el desarrollo durante la micropropagación. Además, son una alternativa para otras aplicaciones en el CTV y en la agricultura moderna.

Abstract Micropropagation or in vitro propagation is the asexual propagation of plants using plant tissue culture (PTC) techniques. Despite the advantages of these techniques, the explants contamination, the asepsis in culture medium and the in vitro accumulation of ethylene in some species, have been a problem that affects the micropropagation. The recent application of silver nanoparticles (NPsAg) in micropropagation has become an effective tool for solving these issues. In addition, in laboratory studies it has been showed that NPsAg, at low concentrations, have a dose-respond effect on plant development, define as hormesis. In this article we reviewed the NPsAg effects on contamination reduction, inhibition of ethylene effects and development stimulation during micropropagation. Besides, they are an alternative to others applications in PTC and modern agriculture.

SUMMARY Indiscriminate deforestation is one of the anthropic activities that most impacts global biodiversity. Its immediate effects mainly reach vulnerable species with high commercial value, such as Cedrela odorata, so the development of biotechnological studies is a crucial element for the genetic conservation of its populations. In this context, this work aimed to analyze the seed germination, micropropagation, and germplasm conservation of C. odorata in one of the most arid regions in northern Peru. Seed germination reached 76.6 % development, with germination time between 9 and 12 days. Likewise, micropropagation produced seedlings with stem tips up to 5.4 cm in height, 12 nodes, and 83 % rooting. Finally, the conservation of germplasm resulted in individuals that reached up to 12 cm in height, 19 nodes, and presented an optimal root system. The positive results regarding seed germination, micropropagation, and germplasm conservation of C. odorata in northern Peru could offer new approaches to the development and genetic conservation of its populations, and provide a more efficient alternative for the management and local conservation of the species.

RESUMEN La deforestación indiscriminada es una de las actividades antrópicas que más impactan la biodiversidad global. Sus efectos inmediatos alcanzan principalmente especies vulnerables y con alto valor comercial, como Cedrela odorata, por lo que el desarrollo de estudios biotecnológicos es un elemento crucial para la conservación genética de sus poblaciones. En ese contexto, el objetivo de este trabajo fue analizar la germinación de semillas, micropropagación y conservación de germoplasma de C. odorata, en una de las regiones más áridas del norte del Perú. La germinación de semillas alcanzó una eficiencia de 76,6 %, con velocidades de germinación de entre 9 y 12 días. Asimismo, en ensayos de micropropagación se obtuvieron plántulas con ápices caulinares de hasta 5,4 cm de altura, 12 nudos y 83 % de eficiencia de enraizamiento. Por último, la conservación de germoplasma resultó en individuos que, a los 30 meses de cultivo, alcanzaron hasta 12 cm de altura, 19 nudos y presentaron un óptimo sistema radicular. Este estudio sugiere que los efectos positivos sobre la germinación de semillas, micropropagación y conservación de germoplasma de C. odorata en el norte del Perú, podrían ofrecer nuevos enfoques sobre el desarrollo y conservación genética de sus poblaciones, funcionando incluso como una alternativa más eficiente para el manejo y conservación local de la especie.

Abstract Until now, there is no protocol for the micropropagation of pecan trees (Carya illinoinensis) from explants of adult trees. Persistent microbial contamination and browning of tissues have impeded the success of previously proposed methods. Specifically, the adult tree leaf explant constitutes an unexplored starting point for the regeneration of C. illinoinensis. Therefore, the objective of this study was to determine a disinfection method and in vitro culture conditions that induce greater callus production in adult pecan tree leaf explants. Five disinfection methods were tested: (1) 70% ethanol for 50 s, 1.8-2.7% sodium hypochlorite with 2 drops/L of Tween 80 for 50 s, (2) 70% ethanol for 2 min, 1.8-2.7% sodium hypochlorite with 2 drops/L of Tween 80 for 2 min, (3) 70% ethanol for 2 min, 1.8-2.7% sodium hypochlorite with 2 drops/L of Tween 80 for 2 min, 1 g/L of carbendazim with 2 drops/L of Tween 80 for 20 min, (4) 70% ethanol for 2 min, 1.8-2.7% sodium hypochlorite with 2 drops/L of Tween 80 for 2 min, 8.8 g/L of carbendazim with 2 drops /L of Tween 80 for 20 min, and (5) 70% ethanol for 2 min, 1.8-2.7% sodium hypochlorite with 2 drops/L of Tween 80 for 2 min, 1 g/L of prochloraz with 2 drops/L of Tween 80 for 20 min. In addition, 6 different culture media were tested where the carbon source (sucrose, glucose and maltose), the inclusion of an antioxidant (AgNO3 and activated carbon), and the concentration of MS salts (maximum or one third of the maximum concentration) were varied. The explants were incubated for 50 days; a portion of the explants was incubated in the dark and the other under a photoperiod of 16 h. Likewise, some explants were inoculated in abaxial orientation, and others in abaxial orientation. The level of browning, the percentage of explants with callus, the fresh and dry weight of the calluses, and the percentage of explants contaminated by microorganisms were evaluated. The lowest percentage of contaminated explants was observed in the disinfection treatment that included immersion in prochloraz, and prochloraz was the only fungicide that allowed callogenesis in 100% of the treated explants. The darkening in the explants did not increase when the concentration of MS salts tripled. Glucose significantly reduced browning, but also significantly decreased the percentage of explants with callus, compared to that observed when using sucrose or maltose. The adaxial orientation promoted a higher percentage of explants with callus, with a fresh and dry weight, as well as a higher moisture percentage. The photoperiod prevented callus production, while incubation in the dark allowed more than 80% of the explants to produce callus in each treatment. The medium without antioxidant and the medium with 5 mg/L of silver nitrate gave similar browning results, while 1 g/L of activated carbon left the explants unviable. The present work proposes a method for the aseptic establishment and in vitro culture conditions for callus initiation in leaflets of adult pecan tree, with reproducible results.

Resumen Hasta ahora, no existe un protocolo para la micropropagación de nogal pecanero (Carya illinoinensis) a partir de explantes de árbol adulto. La contaminación microbiana persistente y el oscurecimiento oxidativo de los tejidos han impedido el éxito de métodos previamente propuestos. Específicamente, el explante de hoja de árbol adulto constituye un punto de partida inexplorado para la regeneración de C. illinoinensis. Por ello, el objetivo de este estudio fue determinar un método de desinfección y las condiciones de cultivo in vitro que inducen una mayor producción de callo en explantes de hoja de árbol adulto de nogal pecanero. Se probaron 5 métodos de desinfección: (1) etanol 70% por 50 s, 1.8-2.7% hipoclorito de sodio con 2 gotas/L de Tween 80 por 50 s, (2) etanol 70% por 2 min, 1.8-2.7% hipoclorito de sodio con 2 gotas/L de Tween 80 por 2 min, (3) etanol 70% por 2 min, 1.8-2.7% hipoclorito de sodio con 2 gotas/L de Tween 80 por 2 min, 1 g/L de carbendazim con 2 gotas/L de Tween 80 por 20 min, (4) etanol 70% por 2 min, 1.8-2.7% hipoclorito de sodio con 2 gotas/L de Tween 80 por 2 min, 8.8 g/L de carbendazim con 2 gotas/L de Tween 80 por 20 min, y (5) etanol 70% por 2 min, 1.8-2.7% hipoclorito de sodio con 2 gotas/L de Tween 80 por 2 min, 1 g/L de procloraz con 2 gotas/L de Tween 80 por 20 min. Además, se probaron 6 diferentes medios de cultivo donde se varió la fuente de carbono (sacarosa, glucosa y maltosa), la inclusión de un antioxidante (AgNO3 y carbón activado), y la concentración de sales MS (máxima o un tercio de la concentración máxima). Los explantes fueron incubados durante 50 días; una porción de los explantes fue incubada en la oscuridad y la otra ante un fotoperiodo de 16 h. Asimismo, unos explantes fueron inoculados en orientación abaxial, y otros en orientación abaxial. Se evaluó el oscurecimiento oxidativo de los explantes, el porcentaje de explantes con callo, el peso fresco y seco de los callos, y el porcentaje de explantes contaminados por microorganismos. El menor porcentaje de explantes contaminados se observó en el tratamiento de desinfección que incluyó inmersión en procloraz, además procloraz fue el único fungicida que permitió la callogénesis en el 100% de los explantes tratados. El oscurecimiento en los explantes no aumentó al triplicar la concentración de sales MS. La glucosa redujo significativamente el oscurecimiento de los explantes, pero también disminuyó de manera significativa el porcentaje de explantes con callo, en comparación con lo observado al utilizar sacarosa o maltosa. La orientación adaxial, promovió un mayor porcentaje de explantes con callo, con un peso fresco y seco, así como un porcentaje de humedad superiores. El fotoperiodo impidió la producción de callo, mientras que la incubación en la oscuridad permitió que más del 80% de los explantes produjeran callo. El medio sin antioxidante y el medio con 5 mg/L de nitrato de plata dieron resultados semejantes de oscurecimiento, mientras que 1 g/L de carbón activado dejó los explantes inviables. El presente trabajo propone un método para el establecimiento aséptico y condiciones de cultivo in vitro para la iniciación de callos en hojas de nogal pecanero adulto, con resultados reproducibles.

Abstract Sequoia sempervirens is the tallest tree in the world, it has a low germination percentage, due to it the in vitro tissue culture has been used for its propagation. Even so, the multiplication technique development is still not efficient. This work aimed to the development of an efficient protocol for in vitro multiplication of S. sempervirens, using apical and basal stem explants, and four concentrations of kinetin and a culture medium with a low concentration of mineral salts to replace the use of the MS medium. Twenty axillary buds from an 18-years-old tree were established in vitro, after three subcultures, three experiments were established every six weeks. Kinetin (6- furfuryl- aminopurin) concentrations (0, 0.92, 1.85 y 3.71 µM) and two types of explants: apical and basal, were evaluated. The parameters evaluated were: height increase, over time growth, and number of axillary shoots emitted by explant type. The height increase for the three experiments was in apical explants (2.35, 4.26, and 4.78 cm) with 0 µM kinetin. The greatest increases in height of apical explants (2.35, 4.26 and 4.78 cm) were obtained with 0 μM of kinetin, in the three experiments. The greatest increases in height were in all evaluated treatments in the second and the fourth week. The greatest number of axillary shoots (2.11) were obtained in basal explants. The in vitro propagation protocol for S. sempervirens using apical and basal explants is efficient, the growth of the explants was successful with 12.38 mm of total nitrogen in culture medium.

Resumen Sequoia sempervirens (D. Don). Endl. es considerado el árbol de mayor altura en el mundo, con bajo porcentaje de germinación, por lo cual, se ha recurrido al cultivo in vitro para su propagación, pero los protocolos desarrollados para obtener brotes son poco eficaces. El objetivo del presente trabajo fue desarrollar un esquema eficiente de multiplicación in vitro de S. sempervirens utilizando explantes de tallo apicales y basales, cuatro concentraciones de kinetina, además de un medio de cultivo con baja concentración de sales para sustituir el uso del medio MS. Se establecieron in vitro 20 yemas axilares de una planta de 18 años, después de tres subcultivos fueron colocados tres experimentos consecutivos cada seis semanas. Se evaluaron cuatro concentraciones de kinetina (6-furfuril-aminopurina) (0, 0.92, 1.85 y 3.71 μM) y dos tipos de explantes: apicales y basales. Las variables evaluadas fueron: incremento de altura, crecimiento a través del tiempo, número de brotes axilares emitidos por tipo de explante. Los mayores incrementos en altura de explantes apicales (2.35, 4.26 y 4.78 cm) se obtuvieron con 0 μM de kinetina, en los tres experimentos. En las semanas dos y cuatro, se presentaron los mayores incrementos en altura en todos los tratamientos evaluados. La mayor cantidad de brotes se obtuvieron en explantes basales (2.11). El esquema de propagación in vitro de S. sempervirens fue eficiente con explantes apicales y basales, y el crecimiento de los explantes fue satisfactorio con 12.38 mM de nitrógeno total en el medio de cultivo.

Resumen La multiplicación de orquídeas suele ser un impedimento para el éxito comercial de especies importantes. Con el fin de evaluar el crecimiento inicial de Epidendrum schomburgkii Lindl., bajo diferentes concentraciones de nutrientes, se inocularon in vitro plántulas provenientes de semilla sexual, de 20 mm de altura, en dos medios basales: Murashige & Skoog (ms) y Knudson (kn) a concentraciones de 25%, 50%, 75% y 100%. Se aplicó un diseño estadístico completamente al azar en arreglo factorial 2 × 3, y para el análisis se utilizaron los paquetes estadísticos spss, Infostat y Biostat. Después de 118 días de cultivo se obtuvo un promedio de 5,88 brotes vivos con una altura promedio de 92,80 mm y una longitud promedio de raíces de 80,74 mm. Se encontraron diferencias significativas para el número de brotes vivos entre concentraciones, mayor altura del tallo y mayor longitud de raíz, así como en la interacción media por concentración. En general, los valores promedios para el medio ms fueron más altos en comparación con el medio kn. En cuanto a la longitud del tallo de mayor extensión, no encontramos una diferencia estadísticamente significativa entre concentraciones, pero sí una clara diferencia en las tendencias (negativas para ms y positivas para kn). El crecimiento de raíces y tallos fue visiblemente mayor con el medio MS, con una concentración óptima del 25%; por lo tanto, al evaluar las fórmulas y dosis aplicadas, se concluye que el medio ms a una concentración del 25% presenta una mejor respuesta para el desarrollo de los propágulos de Epidendrum schomburgkii Lindl.

Abstract Orchid multiplication is often an impediment to the commercial success of important species. In order to have a sowing technique to evaluate the initial growth of Epidendrum schomburgkii Lindl., seedlings from sexual seed 20 mm high were inoculated in vitro in two basal media: Murashige & Skoog (ms) and Knudson (kn) at concentrations of 25 %, 50 %, 75 % and 100 %. After 118 days of cultivation, an average of 5.88 live shoots with an average height of 92.80 mm and an average root length of 80.74 mm were obtained. Significant differences were found for the number of live shoots between concentrations, greater stem height and greater root length, as well as in the mean x concentration interaction. A completely randomized statistical design was applied in a 2 x 3 factorial arrangement, and the spss, infostat and biostat tests were used for the analysis. In general, the values for ms medium were higher compared to kn medium. Regarding the length of the longest stem, we did not find a statistically significant difference between concentrations, but a clear difference in trends (negative for ms and positive for kn). The growth of roots and stems was visibly higher with the ms medium, with an optimal concentration of 25 %. Therefore, when evaluating the formulas and applied doses, it is concluded that the ms medium at a concentration of 25 % offers the best response in the development of propagules.