ABSTRACT: Canine leishmaniasis (CanL) is a multifaceted disease triggered by the protozoan Leishmania infantum, characterized by diverse clinical presentations, including osteoarticular complications. Immune-mediated joint diseases invariably initiate at the synovial membrane, implicating its pivotal role in arthritis pathogenesis. This study aimed to investigate the influence of natural L. infantum infection on synovial fluid characteristics and the expression of immune markers, including TLR-2, FOXP3, and COX-2, in the synovial membrane. Twenty naturally infected dogs (NID) with L. infantum were sourced from the Zoonosis Surveillance Unit (ZSU). Clinical-orthopedic assessments were conducted, encompassing lameness, joint edema, crepitus, patellar luxation, and the drawer test. Synovial fluid (SF) parameters, including volume, appearance, viscosity, total nucleated cell count (TNC), neutrophil count, and total protein (TP) content, were determined. After anesthesia and euthanasia, synovial membrane specimens were obtained. SF protein concentrations categorized dogs into three groups: GI (2 to 2.5g/dL), GII (2.5 to 6.0g/dL), and GIII (>6g/dL). Inflammatory infiltrates and synovial membrane changes were assessed, and immunohistochemistry evaluated TLR-2, FOXP3, and COX-2 marker expressions. Clinical evaluations revealed various osteoarticular abnormalities in NID dogs, including lameness (55%), joint edema (25%), crepitus (30%), patellar luxation (20%), and positive drawer test (25%). Post mortem examinations revealed bilateral subchondral bone, meniscus, and trochlea erosion in 30% of cases. Amastigotes of L. infantum were identified extracellularly and within macrophages (60%). An inflammatory infiltrate was predominant in 70% of dogs, with varying intensity among the groups. Mononuclear cells, chiefly macrophages and lymphocytes, and neutrophils comprised the infiltrate. TLR-2 and COX-2 expression levels were elevated in GIII compared to GII and GI. Conversely, FOXP3 showed moderate expression in GI and minimal expression in GII and GIII. This study underscores the contributory role of L. infantum infection in the development of joint lesions in CanL. Additionally, alterations in the expression of immune markers TLR2, FOXP3, and COX2 within the synovial membrane imply the perpetuation and exacerbation of the inflammatory processes, shedding light on the intricate pathogenesis of CanL-induced arthritis. ABSTRACT CanL (CanL presentations complications Immunemediated Immune mediated L TLR2 TLR 2, 2 FOXP COX2, COX (NID ZSU. ZSU . (ZSU) Clinicalorthopedic orthopedic conducted (SF parameters volume appearance viscosity TNC, TNC , (TNC) TP (TP content determined euthanasia obtained groups ( 2.5g/dL, 25gdL gdL 2.5g/dL 5g dL g 2.5g/dL) 2.5 25 5 (2. 6.0g/dL, 60gdL 6.0g/dL 6 0g 6.0g/dL) >6g/dL. 6gdL >6g/dL 6g (>6g/dL) assessed COX- expressions 55%, 55 55% (55%) 25%, 25% (25%) 30%, 30 (30%) 20%, 20 20% (20%) 25%. bone meniscus cases 60%. 60 60% (60%) 70 cells lymphocytes TLR- Conversely Additionally processes CanLinduced induced (ZSU (TNC 2. (>6g/dL (55% (25% 3 (30% (20% (60% 7 (55 (25 (30 (20 (60 (5 (3 (6
RESUMO: A leishmaniose canina (LC) é uma doença causada pelo protozoário Leishmania infantum com diversas manifestações clínicas, incluindo alterações osteoarticulares. A membrana sinovial é o local inicial de eventos patogênicos em todos os tipos de doenças articulares mediadas pelo sistema imunológico. Devido a essa relação, o objetivo foi avaliar a influência da infecção natural por L. infantum nas características do líquido sinovial e na expressão de TLR-2, FOXP3 e COX-2 na membrana sinovial. Cães naturalmente infectados por L. infantum (NID, N=20) foram obtidos na Unidade de Vigilância de Zoonoses (UVZ). Critérios clínicos ortopédicos foram avaliados, assim como foram obtidas amostras de líquido sinovial por artrocentese. O volume, aspecto, viscosidade, contagem total de células nucleadas (TNC) e contagem de neutrófilos e proteína total (PT) no líquido sinovial (LS) foram determinados. Os cães foram anestesiados e posteriormente eutanasiados para obtenção da membrana sinovial. Os animais do estudo apresentaram claudicação (55%), edema (25%), crepitação na articulação do joelho (30%) e luxação patelar medial (20%) e foram positivos no teste da gaveta (25%). Trinta por cento (30%) dos cães apresentaram erosão bilateral do osso subcondral, menisco e tróclea. Amastigotas de L. infantum foram visualizadas extracelularmente e dentro de macrófagos (60% dos animais). Os cães foram ainda divididos em três grupos de acordo com a concentração de proteína no líquido sinovial: GI: 2 a 2,5g/dL (valor de referência normal), GII: 2,5 a 6,0g/dL, GIII: >6g/dL. Infiltrado celular inflamatório, bem como aumento da camada da membrana sinovial, foram identificados em 70% (14/20) dos cães. O infiltrado inflamatório estava ausente em membranas sinoviais originadas de GI, presente em GII com intensidade moderada e presente em GIII com intensidade alta. O infiltrado inflamatório era predominantemente composto por macrófagos, linfócitos e neutrófilos. Houve um aumento na expressão dos marcadores TLR2 e COX2 em GIII em comparação com os grupos GII e GI. Contudo, em relação à expressão de FOXP3, houve uma marcação moderada em GI e apenas uma marcação leve em GII e GIII. Este trabalho reforça o papel da infecção por L. infantum no desenvolvimento de lesões articulares em cães. Além disso, nosso estudo indica que a LC modifica a expressão de TLR2, FOXP3 e COX2 na membrana sinovial, o que implica a manutenção e progressão do processo inflamatório. RESUMO (LC clínicas osteoarticulares imunológico L TLR 2, TLR-2 FOXP COX COX- NID, NID (NID N=20 N20 N 20 UVZ. UVZ . (UVZ) avaliados artrocentese volume aspecto viscosidade TNC (TNC PT (PT LS (LS determinados 55%, 55 55% , (55%) 25%, 25 25% (25%) 30% 30 (30% 20% (20% 25%. subcondral tróclea 60% 60 (60 animais. animais) 25gdL gdL 5g dL g valor normal, normal normal) 5 60gdL 6 0g 6,0g/dL 6gdL 6g >6g/dL 70 14/20 1420 14 (14/20 alta Contudo disso TLR- N=2 N2 (UVZ (55% (25% 3 (30 (20 (6 7 14/2 142 1 (14/2 N= (55 (25 (3 (2 ( 14/ (14/ (5 (14 (1