ABSTRACT Introduction: C. albicans together with C. dubliniensis and C. Africana, form the Candida albicans Complex. These species are closely related to each other, making differentiation by conventional methods difficult. Objectives: To differentiate Candida albicans and Candida dubliniensis by molecular method in isolates from outpatients and hospitalized patients from Central, Paraguay and to know their susceptibility profile. Methods: Yeasts isolated from respiratory materials, oral cavity, purulent secretions, blood, urine and others were included. An end-point duplex PCR was performed on the isolates that developed greenish coloration in chromogenic medium (CONDA®, Spain). DNA was extracted using the Wizard® Genomic DNA Kit (Promega, USA) with some modifications. Antifungal susceptibility was determined by VITEK® 2 to a subgroup of isolates. Results: Of 1065 isolates, 838 (78,7 %) were C. albicans and 3 (0,3 %) C. dubliniensis, the latter coming from the oral cavity; the remaining 224 were negative for both species. 94,4 % of 503 C. albicans isolates were susceptible to fluconazole, 97,6 % to voriconazole, 99,4 % to amphotericin B, 100 % to caspofungin and micafungin. The three isolates of C. dubliniensis presented MICs of ≤ 0,5 µg/mL against fluconazole, ≤ 0,12 µg/mL against voriconazole and ≤ 0,25 µg/mL against amphotericin B. Discussion: The frequency of C. dubliniensis is low compared to other studies that report values of 1,5 to 32 %. These isolates did not exhibit signs of resistance. C. albicans exhibited good susceptibility to antifungals tested.
RESUMEN Introducción: C. albicans junto con C. dubliniensis y C. africana, forman el Complejo Candida albicans. Estas especies están estrechamente relacionadas entre sí, lo que dificulta la diferenciación por métodos convencionales. Objetivos: Diferenciar por método molecular Candida albicans y Candida dubliniensis en aislamientos de pacientes ambulatorios y hospitalizados de Central, Paraguay y conocer el perfil de sensibilidad de los mismos. Metodología: Se incluyeron levaduras aisladas de materiales respiratorios, cavidad bucal, secreciones purulentas, sangre, orina y otros. Se realizó una PCR dúplex de punto final a los aislamientos que desarrollaron coloración verdosa en medio cromogénico (CONDA®, España). El ADN se extrajo utilizando el kit Wizard® Genomic DNA (Promega, EE. UU.) con algunas modificaciones. La sensibilidad a antifúngicos se determinó por VITEK® 2 a un subgrupo de aislamientos. Resultados: De 1065 aislamientos, 838 (78,7 %) fueron C. albicans y 3 (0,3 %) C. dubliniensis, estos últimos provenientes de cavidad bucal; los 224 restantes fueron negativos para ambas especies. El 94,4 % de 503 aislamientos de C. albicans fueron sensibles a fluconazol, 97,6 % a voriconazol, 99,4 % a anfotericina B, 100 % a caspofungina y micafungina. Los tres aislamientos de C. dubliniensis presentaron CIM de ≤ 0,5 µg/mL frente a fluconazol, ≤ 0,12 µg/mL a voriconazol y ≤ 0,25 µg/mL a anfotericina B. Discusión: La frecuencia de C. dubliniensis es baja con relación a otros estudios que informan valores de 1,5 a 32 %. Estos aislamientos no presentaron indicios de resistencia. C. albicans mostró buena sensibilidad a los antifúngicos ensayados.