Abstract Phytohormones, also known as plant hormones, are naturally occurring chemical compounds that regulate various physiological processes in plants. In this work, a capillary electrophoretic coupled to a diode array detector (CE-DAD) method was developed and validated for the simultaneous quantification of abscisic acid (ABA), 3-indolacetic acid (IAA), and gibberellic acid (GA3) in commercial plant biostimulants. Sample preparation was carried out by liquid-liquid extraction using ethyl acetate. CE separation was performed in a fused-silica capillary and background electrolyte (BGE) consisting of borate buffer (50 mM, pH 9.3) applying a high voltage of 20 kV, a pressure of 50 mbar, and injection time of 35 s. The ABA, IAA, and GA3 were detected at 254, 220 and 195 nm respectively. The CE-DAD method validation results showed acceptable specificity, linearity, accuracy, and precision in the concentration range of 10-100 µg/mL for all compounds according to the (International Conference Harmonisation) ICH guidelines. The proposed method was satisfactory applied to the analysis of cited plant hormones in biostimulants and suggest that sample preparation is a reliable step for extraction of phytohormones containing carboxyl groups. Therefore, the developed and validated method could be implemented as a low-cost and fast analytical tool for quality control purposes.

Abstract Phalaenopsis amabilis (L.) Blume commonly called Moth Orchid (Orchidaceae) is a natural orchid species designated as the National Flower of Indonesia for its beautiful flower shape and long-lasting flowering period. Basically, P. amabilis has a long vegetative phase that cause late flowering, about 2 to 3 years for flowering, hence a method to shorten vegetative period is desired. The latest technological approach that can be used to accelerate flowering of P. amabilis is the CRISPR/Cas9 genome editing method to inactivate the GAI (Gibberellic Acid Insensitive) gene as a mutant gene that can accelerate the regulation of FLOWERING TIME (FT) genes flowering biosynthesis pathway. The approach that needs to be taken is to silence the GAI gene with a knockout system which begins with identifying and characterizing the GAI target gene in the P. amabilis which will be used as a single guide RNA. CRISPR/Cas9 mediated knockout efficiency is highly dependent on the properties of the sgRNA used. SgRNA consists of a target sequence, determining its specificity performance. We executed phylogenetic clustering for the PaGAI protein with closely related orchid species such as Dendrobium capra, Dendrobium cultivars and Cymbidium sinensis. SWISS-Model as tool webserver for protein structure homology modeling. Results show that P. amabilis has a specific domain with the occurrence of point mutations in the two conservative domains. Therefore, a single guide RNA reconstruction needs to be implemented. L. L (L. Orchidaceae (Orchidaceae longlasting lasting Basically P desired CRISPRCas9 CRISPRCas CRISPR Cas9 Cas CRISPR/Cas Gibberellic Insensitive FT (FT pathway sequence performance capra sinensis SWISSModel SWISS Model modeling domains Therefore implemented (L

Resumo Phalaenopsis amabilis (L.) Blume, comumente chamada de orquídea mariposa (Orchidaceae), é uma espécie natural de orquídea designada como a flor nacional da Indonésia por seu belo formato de flor e período de floração duradouro. Basicamente, P. amabilis tem uma longa fase vegetativa que causa floração tardia, cerca de 2 a 3 anos para a floração, portanto, um método para encurtar o período vegetativo é desejado. A mais recente abordagem tecnológica que pode ser utilizada para acelerar a floração de P. amabilis é o método de edição do genoma CRISPR/Cas9 para inativar o GAI (Gibberellic Acid Insensitive) que pode ser usado como um gene mutante para acelerar a regulação da floração dos genes FLOWERING TIME (FT), via de biossíntese. Para isto, a melhor abordagem é silenciar o GAI gene com um sistema knockout que deve ser iniciado com a identificação e caracterização do gene alvo GAI no P. amabilis, e que, posteriormente, será utilizado como um único RNA guia. A eficiência de nocaute mediada por CRISPR/Cas9 é altamente dependente das propriedades do sgRNA usados. O SgRNA consiste em uma sequência alvo, determinando seu desempenho de especificidade. Executamos agrupamento filogenético para a proteína PaGAI com espécies de orquídeas intimamente relacionadas, como Dendrobium capra, Dendrobium cultivars e Cymbidium sinensis. SWISS-Model foi utilizado como ferramenta webserver para modelagem de homologia de estruturas de proteínas. Os resultados mostram que P. amabilis possui um domínio específico com ocorrência de mutações pontuais nos dois domínios conservativos. Portanto, uma única reconstrução de RNA guia precisa ser implementada. L. L (L. Blume Orchidaceae, Orchidaceae , (Orchidaceae) duradouro Basicamente P tardia portanto desejado CRISPRCas9 CRISPRCas CRISPR Cas9 Cas CRISPR/Cas Gibberellic Insensitive FT, FT (FT) biossíntese isto posteriormente usados especificidade relacionadas capra sinensis SWISSModel SWISS Model proteínas conservativos Portanto implementada (L (Orchidaceae (FT

ABSTRACT Physiological dormancy of Vitis vinifera seeds jeopardises breeding programs and biodiversity evolution. To increase the knowledge on dormancy breaking, seeds of white and black Sardinian grape cultivars (cvs) were exposed to different pre-germination treatments. To shed light on the physiological and structural factors involved in seed dormancy, the contents of oil, abscisic acid, gibberellic acid, 3-indolacetic acid, condensed tannins, and total polyphenols were determined. In addition, sectioned seeds were observed by SEM to determine the morphological and anatomical characteristics. Dormancy break in white, but not in black grape seeds, occurred under almost all imposed pre-germination treatments. Among red cvs, only seeds from ‘Cagnulari’ germinated when kept at 25 °C. Chilling seeds of the white cvs ‘Malvasia sarda’ and ‘Vernaccia di Oristano’ for 30 d resulted in the most effective treatment. Compared to white cvs, seeds of red ones owned 7 times higher levels of abscisic acid however, gibberellic acid content resulted 4 times less. Concerning the coat characteristics, red cv seeds had a thicker cuticle (6-10 µm) than white (4-6 µm) ones, however the most significant diversities were found for the inner integument, where in addition to size variances, palisade cell wall were structurally different. evolution breaking (cvs pregermination pre germination treatments oil 3indolacetic indolacetic 3 tannins determined characteristics ‘Cagnulari Cagnulari 2 C °C Malvasia sarda Vernaccia Oristano treatment less 610 6 10 (6-1 µm 46 (4- integument variances 61 1 (6- (4 (6 (

Abstract The production of seedlings of the passion fruit tree, usually, is sexual, and the seeds are not uniform in the seedling emergence, and soaking treatments of seeds can provide faster and more uniform germination. It was aimed to study the action of plant growth regulators and the mobilization of reserves in the stages of soaking of yellow passion fruit seeds. The seeds were soaked for five hours in solutions containing plant growth regulators, in a completely randomized design, in a factorial 8 x 4, with four replications. The first factor corresponds to eight plant growth regulators: T1 - distilled water (control); T2 - 6-benzylaminepurine 500 mg L-1; T3 - 4-(3-indolyl) butyric acid 500 mg L-1; T4 - gibberellic acid 500 mg L-1; T5 - spermine 250 mg L-1; T6 - spermine 750 mg L-1; T7 - spermidine 750 mg L-1; T8 - spermidine 1250 mg L-1; and the second factor, to the four soaking times: zero, four, 72 and 120 hours, corresponding, respectively, to the dry seed, and to phases I, II, and III of the imbibition curve. It was evaluated the biochemical composition of seeds (lipids, soluble sugars and starch). The seeds showed accumulation of lipids in phase III; the content of soluble sugars increased in phase I and decreased in phase II. The starch content increased until the phase II and decreased in phase III. Starch is the main reserve in the seeds and the main source of energy used in phase III; soaking the seeds in polyamines generates an accumulation of lipids in the seeds and soaking in plant growth regulators increases the burning of starch. tree usually sexual emergence germination design 4 replications T control (control) 6benzylaminepurine benzylaminepurine 6 50 L1 L 1 L-1 43indolyl indolyl 3 4-(3-indolyl 25 75 125 times zero 7 12 corresponding respectively seed curve lipids, (lipids . starch) (control 5 L- 2

Resumo A produção de mudas de maracujazeiro, geralmente, é sexuada, e as sementes não são uniformes na emergência das plântulas, e tratamentos de embebição das sementes podem proporcionar uma germinação mais rápida e uniforme. Objetivou-se estudar a ação de reguladores vegetais e a mobilização de reservas nas etapas de embebição de sementes de maracujá amarelo. As sementes foram embebidas por cinco horas em soluções contendo reguladores vegetais, em delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 8 X 4, com quatro repetições. O primeiro fator correspondeu a oito reguladores vegetais: T1 - água destilada (testemunha); T2 - 6-benzilaminapurina 500 mg L-1; T3 - ácido 4-(3-indolil)butírico 500 mg L-1; T4 - ácido giberélico 500 mg L-1; T5 - espermina 250 mg L-1; T6 - espermina 750 mg L-1; T7 - espermidina 750 mg L-1; T8 - espermidina 1250 mg L-1; e o segundo fator, aos quatro tempos de embebição: zero, quatro, 72 e 120 horas, correspondendo, respectivamente, à semente seca, e às fases I, II e III da curva de embebição. Foi avaliada a composição bioquímica das sementes (lipídeos, açúcares solúveis e amido). As sementes apresentaram acúmulo de lipídeos na fase III; o teor de açúcares solúveis aumentou na fase I e diminuiu na fase II. O teor de amido aumentou até a fase II e diminuiu na fase III. O amido é a principal reserva nas sementes e a principal fonte de energia utilizada na fase III; a embebição das sementes em poliaminas gera um acúmulo de lipídios nas sementes e a embebição em reguladores de crescimento vegetal aumenta a queima do amido. maracujazeiro geralmente sexuada plântulas uniforme Objetivouse Objetivou se amarelo casualizado 4 repetições T testemunha (testemunha) 6benzilaminapurina benzilaminapurina 6 50 L1 L 1 L-1 43indolilbutírico indolilbutírico 3 indolil butírico 25 75 125 zero 7 12 correspondendo respectivamente seca lipídeos, (lipídeos . amido) (testemunha 5 L- 2

ABSTRACT Salinity stress severely restricts plant nutrition and hinders biochemical and physiological processes crucial for growth. In several crop systems bioactive products which confer growth promotion, are applied as a sustainable alternative for contributing to food security. The aim of this work was to evaluate the biochemical contribution of QuitoMax® to hormonal and enzymatic metabolism in tomato under saline stress. Three treatments were applied: saline without QuitoMax®, nonsaline + QuitoMax® and saline + QuitoMax®. A tolerant (Amalia) and a susceptible (Claudia) tomato variety were used as experimental models. The normalized difference vegetation index (NDVI) was measured as a morphological variable, and peroxidase (POD), glutamine synthetase (GS) and nitrate reductase (NR) enzyme activities were determined. Gibberellic (GA) and abscisic acid (ABA) concentrations were also determined. Due to the effects of QuitoMax®, the plants maintained high NDVI values even under saline conditions. A decrease in POD and GS activity and an increase in NR activity were also found. The GA concentration in the leaves was higher in the tolerant variety when QuitoMax® was applied than in the saline treatment but lower in the susceptible variety. The opposite behavior was found when the ABA concentration was quantified. This study demonstrates the protective action of QuitoMax® under salinity stress on tomato crops in both tolerant and susceptible varieties. In crux, QuitoMax® can be opted as a shotgun approach to tackle salinity in tomato. promotion security QuitoMax Amalia (Amalia Claudia (Claudia models (NDVI variable POD, , (POD) (GS (NR determined (GA (ABA conditions quantified varieties crux (POD

RESUMO O estresse salino é um dos fatores abióticos que mais limita a nutrição das plantas. Também limita o desempenho bioquímico e fisiológico que regula o crescimento em diversos sistemas de cultivo de produtos bioativos que conferem promoção de crescimento, são aplicados como alternativa sustentável para contribuir para a segurança alimentar. O objetivo do trabalho foi avaliar a contribuição bioquímica do QuitoMax® no metabolismo hormonal e enzimático do tomate sob estresse salino. Foram aplicados três tratamentos: solução salina sem QuitoMax®, QuitoMax® sem solução salina e solução salina com QuitoMax®. Uma variedade de tomate tolerante (Amalia) e uma suscetível (Claudia) foram utilizadas como modelos experimentais. O índice de vegetação por diferença normalizada (NDVI) foi medido como variável morfológica, e as atividades das enzimas peroxidase (POD), glutamina sintetase (GS) e nitrato redutase (NR) foram determinadas. As concentrações de ácido giberélico (GA) e abscísico (AB) também foram determinadas. Devido aos efeitos do QuitoMax®, as plantas mantiveram valores elevados de NDVI mesmo em condições salinas (T3). Também foram encontradas diminuição na atividade de POD e GS e aumento na atividade de NR. A concentração de GA nas folhas foi maior na variedade tolerante quando aplicado QuitoMax® do que no tratamento salino, mas menor na variedade suscetível. O comportamento oposto foi encontrado quando a concentração de ABA foi quantificada. Este estudo demonstrou a ação protetora do QuitoMax® sob estresse salino em culturas de tomate em variedades tolerantes e suscetíveis. Em suma, QuitoMax® pode ser escolhido como uma abordagem agressiva para combater a salinidade no tomate. alimentar QuitoMax tratamentos Amalia (Amalia Claudia (Claudia experimentais (NDVI morfológica POD, , (POD) (GS NR (NR determinadas (GA AB (AB T3. T3 T . (T3) quantificada suscetíveis suma (POD (T3 (T

ABSTRACT Hail netting increases natural fruitlet drop. Mixing lower concentrations of Plant Growth Regulators (PGRs) and spraying on more advanced fruitlets could promote adequate crop load management and improve fruit quality. The objective of this study was to evaluate thinning programs with low concentrations of PGRs sprayed at advanced fruitlet size looking for reducing crop load, enhancing fruit quality, and preserving yield. On 2020/21 and 2021/22, in an orchard covered with hail netting in Bom Jesus-RS, eight programs were tested on vigorous ‘Maxi Gala’: Benzyladenine (BA)+Gibberellic acid4+7 (BA-GA) at full bloom (FB) and BA+Ethephon (ETH) at 15mm; BA-GA at FB and Naphthalene acetic acid+Carbaryl (CB) at 7 mm; BA-GA at FB and BA+CB at 15 mm; ETH+CB at 15 mm and Metamitron (MM)+ETH at 20 mm; BA-GA at FB and BA at 7 mm and MM at 20 mm; MM at 7 mm and MM at 20 mm; Manual Thinning Only; Untreated Control. The treatments containing CB reduced fruit set, although diminished yield unsustainably. All PGR programs improved fruit quality. In conclusion, BA-GA at FB and BA+ETH at 15 mm, and MM at 7 mm and MM at 20 mm reduce crop load, preserve yield and improve fruit quality. drop (PGRs quality 202021 2020 21 2020/2 202122 2021 22 2021/22 JesusRS, JesusRS Jesus RS, RS Jesus-RS Maxi Gala Gala’ BA+Gibberellic BAGibberellic +Gibberellic Gibberellic acid47 acid acid4 acid4+ BAGA GA (BA-GA (FB BAEthephon Ethephon ETH (ETH 15mm acidCarbaryl Carbaryl (CB BACB 1 ETHCB MM+ETH MMETH +ETH 2 Only Control set unsustainably conclusion BAETH 20202 202 2020/ 20212 2021/2 2021/

Abstract The proper establishment of plants is essential for the efficient use of resources such as water and light. Besides, even after seed storage and sowing the uniform establishment of plants is essential for their success. Crotalaria ochroleuca and Crotalaria spectabilis are important medicinal plants with poor seed germination rate, occasionally. The effects of seed priming in both C. ochroleuca and C. spectabilis were evaluated in seed performance even after seeds storage for up 90-days. Experimental assays were performed in a randomized design with gibberellic acid (GA3, 100 ppm), polyethylene glycol (PEG 6000, -0.2 MPa) and PEG (-0.2 MPa) + GA3 (100 ppm) solutions during seed priming in four replicates. Seeds not submitted to priming treatments constituted control. Seeds physiological performance were evaluated immediately and even after 30, 60 and 90-days seed dry-storage. The data obtained in each experiment were submitted to variance analysis (ANOVA) adopting a confidence level of 95%. The effects of seed priming with PEG and GA3 during seed ageing were significant for germination variables of C. ochroleuca and C. spectabilis. During dry storage, seed viability of both species gradually decreased and the first symptoms were delayed seed germination, especially more evident for C. ochroleuca, even in primed or non-primed seeds. Afterwards, C. ochroleuca seeds previously GA3 primed had higher results of root protrusion (86%), hypocotyls elongation (76%) and complete seedlings (75%) than non-primed seeds (control). These findings shown a good potential of hormopriming to attenuate damage during the seed aging of C. ochroleuca. light Besides success rate occasionally C 90days. 90days days 90 days. GA3, GA (GA3 10 ppm, ppm , 6000 0.2 02 0 2 -0. MPa (-0. (10 replicates control 30 6 drystorage. drystorage storage. dry-storage ANOVA (ANOVA 95 95% nonprimed non Afterwards 86%, 86 86% (86%) 76% 76 (76% 75% 75 (75% . (control) 9 (GA 1 600 0. -0 (-0 (1 3 8 (86% 7 (76 (75 (control - (- ( (86 (7 (8

Resumo O estabelecimento adequado das plantas é essencial para o uso eficiente de recursos como água e luz. Além disso, mesmo após o armazenamento e semeadura das sementes, o estabelecimento uniforme das plantas é essencial para o seu sucesso. Crotalaria ochroleuca e Crotalaria spectabilis são plantas medicinais importantes com baixa taxa de germinação de sementes, ocasionalmente. Os efeitos do condicionamento fisiológico de sementes em C. ochroleuca e C. spectabilis foram avaliados no desempenho das sementes mesmo após o armazenamento por até 90 dias. Os ensaios experimentais foram realizados em delineamento casualizado com soluções de ácido giberélico (GA3, 100 ppm), polietilenoglicol (PEG 6000, -0,2 MPa) e PEG (-0,2 MPa) + GA3 (100 ppm) durante o condicionamento físiológico das sementes, em quatro repetições. As sementes que não foram submetidas aos tratamentos de condicionamento constituíram o controle. O desempenho fisiológico das sementes foi avaliado imediatamente e após 30, 60 e 90 dias de armazenamento. Os dados obtidos em cada experimento foram submetidos à análise de variância (ANOVA) adotando-se nível de confiança de 95%. Os efeitos do condicionamento de sementes com PEG e GA3 durante o envelhecimento das sementes foram significativos para as medidas de germinação de C. ochroleuca e C. spectabilis. Durante o armazenamento, a viabilidade das sementes de ambas as espécies diminuiu gradualmente e os primeiros sintomas foram o atraso na germinação das sementes, especialmente para C. ochroleuca. Posteriormente, sementes de C. ochroleuca previamente condicionadas com GA3 apresentaram maiores resultados de protrusão radicular (86%), alongamento de hipocótilos (76%) e plântulas normais (75%) do que sementes não condicionadas (controle). Esses achados mostraram um bom potencial do condicionamento fisiológico com fitohormônio para atenuar os danos durante o envelhecimento das sementes de C. ochroleuca. luz disso sucesso ocasionalmente C 9 GA3, GA (GA3 10 ppm, ppm , 6000 0,2 02 0 2 -0, MPa (-0, (10 repetições controle 30 6 ANOVA (ANOVA adotandose adotando se 95 95% Posteriormente 86%, 86 86% (86%) 76% 76 (76% 75% 75 (75% . (controle) (GA 1 600 0, -0 (-0 (1 3 8 (86% 7 (76 (75 (controle - (- ( (86 (7 (8

Abstract: Germination is influenced by several factors, among them pH. Two experiments were conducted to determine the effect of imbibition-water pH on the water absorption curve of chincuya seeds and germination. The results were contrasted to the known effect of gibberellic acid imbibition. In the first year of fruit collection and evaluation, imbibition curves were constructed per treatment. The seeds of this evaluation were divided into two lots: the first at the initial moisture content (39.9 %) and the second at the moisture content of 34.1 % after three days of drying in the laboratory. The seeds were imbibed for 84 h in distilled water at three pH levels (5, 7, and 9) and kept in a water bath at 30 °C. In the second year of collection and evaluation, the pH treatments were repeated, and an imbibition treatment with gibberellic acid at 350 mg L-1 (pH 3.9) was added. A control treatment contained distilled water at pH 6.1. For both years, treated seeds were incubated on paper towels and placed under controlled conditions at a 12-hour photoperiod and alternating day and night temperatures (30 °C:25 °C). The three imbibition curves showed similar behavior and no statistical significance. Seeds with a higher moisture content did not gain weight after imbibition. The imbibition curves increased constantly in the seeds at 34.1 % moisture, and weight gain reached almost 46 % with the pH 9 treatment. However, there were no statistical differences among treatments. The highest rate of water absorption occurred in the first six hours in the open-air, dehydrated seeds, and after 72 hours, the weight of the seeds did not increase. Average daily germination kinetics indicated a slow and poor germination process. Gibberellic acid significantly promoted germination, causing 43 % germination. The absolute control reached 5.7 %, while the rest of the treatments did not promote germination. Abstract factors imbibitionwater lots 39.9 399 39 (39. 341 34 1 34. laboratory 8 5, 5 (5 7 3 C °C repeated 35 L1 L L- 3.9 added 61 6 6.1 years 12hour hour 12 (3 °C25 C25 25 °C:2 . °C) significance 4 However openair, openair open air, air open-air increase process 57 5. 39. (39 ( 3. 6. °C2 C2 2 °C:

Resumo: A germinação é influenciada por diversos fatores, entre eles o pH. Para conhecer o efeito do pH da água de embebição na curva de aquisição de água das sementes de chincuya, assim como na germinação e compará-lo com o efeito conhecido daembebição em ácido giberélico, foram realizados dois experimentos. Em um primeiro ano decoleta de frutos, construíram-se as curvas de embebição com os tratamentos. As sementesdesta avaliação foram divididas em dois lotes: o primeiro com o conteúdo de umidade inicial(39.9%),e o segundo com sementes secas por três dias em laboratório (34.1% deumidade). As sementes foram embebidas por 84 horas em água destilada com três diferentes níveis de pH (5, 7 e 9) e foram mantidas em banho-maria a 30°C. No segundo ano de coleta foram repetidos os tratamentos de pH e acrescentado o tratamento de embebição com ácidogiberélico a 350mg L-1 (com pH 3.9) e a testemunha com água destilada (pH6.1). Nos dois anos de avaliação, as sementes receberam os tratamentos, foram incubadas em toalhas depapel e mantidas em condições controladas de temperaturas alternadas de 30°C dia e25°C noite,com 12h de fotoperíodo. Observou-se que as três curvas de aquisição de águamostraram comportamento semelhante e sem significância estatística; as sementes não aumentaram de peso depois da imersão, pois o conteúdo inicial de umidade era elevado. Nassementes com 34.1% de umidade, as curvas de aquisição de água tiveram aumento constantee o peso das sementes aumentou até cerca de 46% com o pH 9. Não houve diferençaestatística entre os tratamentos. A maior velocidade de aquisição de água ocorreu nasprimeras seis horas nas sementes secas ao ambiente e depois de 72 horas o peso dassementes não aumentou. A cinética da germinação média diária apresentou um lento e escassoprocesso germinativo. O ácido giberélico aumentou significativamente a germinação, promovendo 43% de germinação, enquanto com a testemunha absoluta se alcançou 5.7%. Com osdemais tratamentos não se observou germinação. Resumo fatores chincuya comparálo compará lo experimentos frutos construíramse construíram lotes inicial39.9%,e inicial399e iniciale 39.9% ,e 39 9 341 34 1 (34.1 deumidade. deumidade . deumidade) 8 5, 5 (5 banhomaria banho maria 30C C 30 mg L1 L L- 3.9 3 pH6.1. pH61 pH6.1 pH6 (pH6.1) e25C eC e25 noitecom noite h fotoperíodo Observouse Observou estatística imersão elevado 34.1 46 germinativo 43 57 5.7% inicial39 399 39.9 (34. ( 3. pH6. (pH6.1 e2 34. 4 5.7 inicial3 39. (34 (pH6. 5. (3 (pH6 (pH

Resumo Com o crescente interesse no seu cultivo, estudos na produção de pitaya ((Selenicereus undatus (Haw.) D.R. Hunt, família Cactaceae) é de fundamental importância quando se busca novas técnicas para o incremento do cultivo e garantia de um pomar homogêneo e produtivo. Objetivou-se avaliar a influência do uso de diferentes concentrações de ácido giberélico e do estágio de maturação de frutos na germinação de sementes e vigor de plântulas de pitaya vermelha da polpa branca, tendo em vista a qualidade fisiológica de mudas produzidas a fim de subsidiar trabalhos de melhoramento genético e conservação da espécie. Foram utilizadas sementes de frutos de pitaya vermelha da polpa branca em dois estágios de maturação (fisiologicamente maduros e conservados à 10°C em BOD por 3 meses), tratadas com diferentes concentrações de ácido giberélico: 0, 50, 100 e 500 mg/L. Foi possível observar que houve influência do armazenamento de frutos na germinação, emergência e crescimento das plântulas em função das concentrações de ácido giberélico. Assim, verifica-se que, no caso de sementes extraídas de frutos maduros de pitaya vermelha da polpa branca, quando semeadas nas condições do presente estudo, é necessário a utilização de GA3 para incrementar a emergência e o vigor das plântulas, com doses ótimas variando entre 150 e 300 mg/L. No caso da necessidade em armazenar os frutos de pitaya para a posterior retirada de sementes, também nas mesmas condições de semeadura do presente estudo, observa-se que, em síntese, é necessária a utilização de GA3, porém em doses maiores do que o observado no primeiro, sendo de, no mínimo, 500 mg/L. O presente estudo mostra que há influência do estágio de maturação dos frutos de pitaya vermelha de polpa branca para retirada de sementes sobre a qualidade das mudas, concluindo que o uso de sementes extraídas de frutos maduros, sem fermentação, é mais adequado para esta finalidade.

Abstract With increased interest in cultivation, the study of white-fleshed pitahaya (Selenicereus undatus (Haw.) D.R. Hunt, Cactaceae family) seedling production is of fundamental importance in the search for novel techniques to increase cultivation and guarantee homogeneous and productive orchards. The present study investigated the influence of various gibberellic acid (GA3) concentrations and fruit maturation stages on seed germination and vigor of white-fleshed pitahaya seedlings, considering the physiological quality of seedlings produced to support genetic breeding and conservation programs of the species. White-fleshed pitahaya seeds at two maturation stages (physiologically ripe and maintained at 10 °C in Biochemical Oxygen Demand incubators for three months) were treated with varying GA3 concentrations of 0, 50, 100, and 500 mg/L. We observed the influence of fruit storage on seedling germination, emergence, and growth as a function of GA3 concentration. According to the results, seeds extracted from ripe white-fleshed pitahaya fruits grown under the conditions tested here required GA3 application to increase seedling emergence and vigor, with optimal doses in the 150–300-mg/L range. In the case of pitahaya fruits intended for storage for future seed removal and maintained under the same sowing conditions, the application of higher doses of GA3 was necessary when compared to the previous condition, with a minimum dose of 500 mg/L GA3. The present study shows that the maturation stage of white-fleshed pitahaya fruits intended for seed removal influences the quality of seedlings; therefore, the use of seeds extracted from ripe pitahaya fruits without fermentation is more appropriate for the purpose.

Resumo A produção de meloeiro no semiárido brasileiro está sujeita a utilização de águas marginais com salinidade elevada. Entretanto, a utilização de reguladores e bioativadores no tratamento de sementes podem mitigar os efeitos nocivos dos sais na água de irrigação. Nesse sentido, objetivou-se avaliar o efeito de tratamentos pré-germinativos com fitorreguladores e bioativador em sementes de melão para a produção de mudas irrigadas com água biossalina de efluente de piscicultura. Para isso, dois ensaios com os híbridos Goldex e Grand Prix foram realizados separadamente. Utilizou-se delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 4 × 3 (tratamentos pré-germinativos × diluições de água). Além do controle, as sementes foram tratadas com os ácidos salicílico e giberélico, e tiametoxam. As águas utilizadas para irrigação foram a de abastecimento local, efluente de piscicultura (água biossalina) e estas diluídas a 50%. Durante quatorze dias foram realizadas as análises fisiológicas e bioquímicas. A água biossalina (5,0 dS m-1) não afetou a emergência de plântulas de meloeiro Goldex, mas prejudicou o estabelecimento da cultivar Grand Prix. Os pré-tratamentos de sementes com os ácidos salicílico e giberélico atenuam os efeitos da salinidade da água e promovem modulações no crescimento, proporcionando mudas de meloeiro mais vigorosas.

Abstract Melon production in the Brazilian semi-arid region is subject to the use of marginal waters with high salinity. However, the use of regulators and bioactivators in seed treatment can mitigate the harmful effects of salts in irrigation water. In this context, the objective was to evaluate the effect of pre-germination treatments with plant regulators and bioactivator in melon seeds for the production of seedlings irrigated with biosaline water from fish farming effluent. For this, two trials with the Goldex and Grand Prix hybrids were carried out separately. A completely randomized design was used in a 4 × 3 factorial scheme (pre-germination treatments × water dilutions). In addition to the control, the seeds were treated with salicylic and gibberellic acids and thiamethoxam. The waters used for irrigation were local-supply water, fish farming effluent (biosaline water) and these diluted to 50%. Physiological and biochemical analyses were performed for fourteen days. Biosaline water (5.0 dS m-1) did not affect the emergence of Goldex melon seedlings, but compromised the establishment of the Grand Prix cultivar. Seed pre-treatments with salicylic and gibberellic acids attenuate the effects of water salinity and promote growth modulations, resulting in more vigorous melon seedlings.

RESUMO: Operculina macrocarpa L. Urb é uma espécie conhecida popularmente como batata de purga, uma trepadeira da família Convolvulaceae que possui propriedades medicinais. O cultivo in vitro poderá contribuir para a produção de mudas em larga escala, favorecendo seu processo de comercialização. Assim, este trabalho teve como objetivo ajustar protocolos existentes para o estabelecimento in vitro e avaliar o efeito da interação de reguladores de crescimento sobre a morfogênese in vitro de O. macrocarpa. No processo de estabelecimento in vitro, foram testados: meio de cultura 1x MS sem carvão ativado, meio 1x MS com 1g.L-1 de carvão, meio 1/2x MS (com 50% da concentração de nutrientes) sem carvão e meio 1/2x MS com 1g.L-1 de carvão. Além do carvão ativado, foi testado o efeito do Ácido giberélico (GA3) nas seguintes condições: meio de cultura 1x MS sem GA3, meio 1x MS com 20μM de GA3 e meio 1x MS com 40 μM de GA3. Após o estabelecimentoin vitro, foram realizados ensaios com diferentes reguladores de crescimento. Inicialmente foram avaliadas diferentes concentrações de BAP com três diferentes segmentos da planta (basal, mediana e apical). Em seguida, foram testadas diferentes combinações com ANA x BAP e ANA x KIN. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado. Os resultados obtidos permitem afirmar que é possível o estabelecimento e a multiplicação in vitro de O. macrocarpa utilizando a semente e a base do caule, respectivamente, como fonte de explante, em meio MS na presença e ausência de BAP. RESUMO L purga medicinais escala comercialização Assim testados ativado 1g.L1 1gL1 gL 1g.L 1 1g g 1g.L- 12x 2x 50 nutrientes GA (GA3 condições 4 basal, basal (basal apical. apical . apical) seguida KIN casualizado caule respectivamente explante L1 1gL 5 (GA

ABSTRACT: Operculina macrocarpa L. Urb is a species popularly known as purge potato, a climbing plant from the Convolvulaceae family that has medicinal properties. In vitro cultivation could contribute to the production of seedlings on a large scale, favoring its commercialization process. This this study adjusted existing protocols for in vitro establishment and evaluated the effect of the interaction of growth regulators on the in vitro morphogenesis of O. macrocarpa. In the in vitro establishment process, the following were tested: 1x MS medium without activated charcoal, 1x MS medium with 1g.L-1 of charcoal, 1/2x MS medium (with 50% of the nutrient concentration) without charcoal and 1/2x MS medium with 1g.L-1 of charcoal. In addition to activated charcoal, the effect of gibberellic acid (GA3) was tested under the following conditions: 1x MS medium without GA3, 1x MS medium with 20μM of GA3 and 1x MS medium with 40 μM of GA3. After establishment in vitro, trials were carried out with different growth regulators. Initially, different concentrations of BAP were evaluated with 3 different segments of the plant (basal, median and apical). Different combinations of ANA x BAP and ANA x KIN were then tested. The experimental design was entirely randomized. The results obtained showed that it is possible to establish and multiply O. macrocarpa in vitro using the seed and the base of the stem, respectively, as a source of explant, in MS medium in the presence and absence of BAP. ABSTRACT L potato properties scale process O 1g.L1 1gL1 gL 1g.L 1 1g g 1g.L- 12x 2x 50 concentration GA (GA3 conditions 4 Initially basal, basal (basal apical. apical . apical) randomized stem respectively explant L1 1gL 5 (GA

Abstract Tillandsia takizawae Ehlers & H. Luther is an epiphytic bromeliad microendemic from Mexico with showy inflorescences with pink bracts that contrast with the green flowers. These attributes give it potential as an ornamental plant. The conservation of the species and commercial use requires efficient propagation systems that avoid the extraction of plants from their natural habitat. The objectives of this contribution were to establish the optimal conditions for in vitro seed germination and plant regeneration by organogenesis. Seeds were stablished in Murashige and Skoog medium (MS) with half the concentration of salts added with benciladenine (BA) and naftalen acetic acid (NAA). In the elongation and rooting of shoots, the gibberellic acid (GA3) and the indol butiric acid (IBA) were evaluated, respectively. In all treatments an average germination of 97% was obtained. The combination of BA and NAA promoted the induction of shoots in recently germinated seedlings. The highest number of shoots per explant was 41.4 with 1 mg L-1 of BA and 0.25 mg L-1 of NAA after 12 weeks of culture. Shoots elongation was achieved in the complete MS medium with 1 mg L-1 of GA3 after eight weeks. The best rooting response was with 1 mg L-1 of IBA, which induced the average formation of 7.7 roots in all shoots at four weeks. In the acclimatization of plants the survival was 95 % after four weeks.

Resumen Tillandsia takizawae Ehlers & H. Luther es una bromelia epífita microendémica de México de inflorescencias vistosas con brácteas de color rosa que contrastan con las flores de color verde. Estos atributos le otorgan potencial como planta ornamental. La conservación de la especie y aprovechamiento comercial requiere de sistemas de propagación eficientes que eviten la extracción de plantas de su hábitat natural. Los objetivos de esta contribución fueron establecer las condiciones óptimas para la germinación in vitro de semillas y la regeneración de plantas por organogénesis. Semillas se sembraron en medio de Murashige y Skoog (MS) con la mitad de concentración de sales adicionado con bencil adenina (BA) y ácido naftalenacético (ANA). Para el alargamiento y enraizamiento de brotes se avaluó el ácido giberélico (AG3) y el ácido indolbutírico (AIB), respectivamente. En todos los tratamientos se obtuvo una germinación promedio de 97%. La combinación de BA y ANA favorecieron la inducción de brotes en las plántulas recién germinadas. La mayor cantidad de brotes por explante fue de 41.4 con 1 mg L-1 de BA y 0.25 mg L-1 de ANA a las 12 semanas de cultivo. El alargamiento de los brotes se logró en el medio MS completo con 1 mg L-1 de AG3 después de ocho semanas. La mejor respuesta de enraizamiento fue con 1 mg L-1 de AIB que indujo la formación promedio de 7.7 raíces en todos los brotes a las cuatro semanas. En la aclimatación de plantas la supervivencia fue de 95 % después de cuatro semanas.

ABSTRACT Violet, with its pleasant scent and attractive flower color, is also important for its medicinal and edible uses, in addition to ornamental uses. Proper nutrition of the plant (violet) with essential nutrients and growth hormones improves the quantitative and qualitative characteristics and can increase the economic value and popularity of these flowers. In this regard, the current research aims to investigate the combined effect of nitrogen (N) and gibberellic acid (GA) on the morphophysiological traits of two native Iranian violet species (Viola tricolor and Viola odorata), as a factorial experiment with three factors including two species of violets, three levels of GA (0, 150 and 300 mg/L) and three levels of N (0, 100 and 200 mg/L) in a completely randomized design with 18 treatments, 3 replications and a total of 216 plants. Some characteristics of planting medium, morphophysiological traits and activity of antioxidant enzymes were evaluated. The results of ANOVA showed that the three-way effect of experimental treatments on all evaluated traits is significant. According to the results of comparing the averages the N application reduced the soil electrical conductivity (EC) versus its non-application in both violet species and at all GA levels. The highest soil N in both species was obtained from the application of 0 mg/L GA × 100 or 200 mg/L N. In two species of violets, the highest number of leaves, flowers, and stolons was obtained from the treatment of 300 mg/L GA × 200 mg/L N. The highest chlorophyll a and total chlorophyll among the treatments were related to V. odorata × 150 mg/L GA × 200 mg/L N. The application of GA and N in both species increased peroxidase activity versus the control. The highest level of this enzyme activity was related to 300 mg/L GA × 200 mg/L N. V. odorata had higher peroxidase activity than V. tricolor. The lowest and highest levels of catalase activity were recorded by control × V. tricolor (0.13 nM/g FW/min) and V. odorata × 300 mg/L GA × 200 mg/L N (0.676 nM/g FW/min), respectively. According to the results, with the application of 300 or 150 mg/L GA × 200 mg/L N, the ornamental and edible properties of these two types of violets are improved, and their economic value and marketability are increased, and there will be a change in the sales market of these flowers. Violet color uses (violet flowers regard (N (GA odorata, , odorata) 0, (0 15 30 mgL mg L 10 20 1 21 plants medium threeway way significant EC (EC nonapplication non leaves V 0.13 013 13 (0.1 nMg nM g FW/min FWmin FW min 0.676 0676 676 (0.67 FW/min, respectively improved ( 2 0.1 01 (0. 0.67 067 67 (0.6 0. 0.6 06 6

RESUMO A violeta, com seu aroma agradável e cor atraente das flores, também é importante para usos medicinais, comestíveis e ornamentais. A nutrição adequada dessa planta com nutrientes essenciais e hormônios de crescimento melhora as características quantitativas e qualitativas e pode aumentar o valor econômico e a popularidade dessas flores. Assim, a presente pesquisa visa investigar o efeito combinado do nitrogênio (N) e do ácido giberélico (GA) nas características morfofisiológicas de duas espécies nativas de violeta iraniana (Viola tricolor e Viola odorata), em experimento fatorial com três fatores (2 espécies de violetas), três níveis de GA (0, 150 e 300 mg/L) e três níveis de N (0, 100 e 200 mg/L), em delineamento inteiramente casualizado com 18 tratamentos, 3 repetições e um total de 216 plantas. Neste estudo foram avaliadas algumas características do meio de plantio, características morfofisiológicas e atividade de enzimas antioxidantes. Os resultados da ANOVA mostraram que o efeito triplo dos tratamentos experimentais em todas as características avaliadas é significativo. De acordo com os resultados da comparação das médias, a aplicação de N reduziu a condutividade elétrica (CE) do solo versus sua não aplicação em ambas as espécies de violeta e em todos os níveis de GA. O maior N no solo em ambas as espécies foi obtido a partir da aplicação de 0 mg/L GA × 100 ou 200 mg/L N. Em duas espécies de violetas, o maior número de folhas, flores e estolões foi obtido no tratamento 300 mg/L GA × 200 mg/L N. Os maiores valores de clorofila a e clorofila total entre os tratamentos foram relacionados a V. odorata × 150 mg/L GA × 200 mg/L N. A aplicação de GA e N em ambas as espécies aumentou a atividade da peroxidase em relação ao controle. O maior nível de atividade desta enzima foi relacionado a 300 mg/L GA × 200 mg/L N. V. odorata apresentou maior atividade de peroxidase que V. tricolor. Os níveis mais baixos e mais altos de atividade de catalase foram registrados por controle × V. tricolor (0,13 nM/g FW/min) e V. odorata × 300 mg/L GA × 200 mg/L N (0,676 nM/g FW/min), respectivamente. De acordo com os resultados, com a aplicação de 300 ou 150 mg/L GA × 200 mg/L N, as propriedades ornamentais e comestíveis destes dois tipos de violetas são melhoradas, e o seu valor econômico e comercialização são aumentados, e é possível haver uma mudança no mercado de vendas dessas flores. medicinais Assim (N (GA odorata, , odorata) 2 ( violetas) 0, (0 15 30 mgL mg L 10 20 mg/L, 1 21 plantas plantio antioxidantes significativo médias CE (CE folhas V 0,13 013 13 (0,1 nMg nM g FW/min FWmin FW min 0,676 0676 676 (0,67 FW/min, respectivamente melhoradas aumentados 0,1 01 0,67 067 67 (0,6 0,6 06 6

ABSTRACT Stenospermocarpy in mango trees is associated with hormonal regulation and boron fertilization. However, the mode of action of plant growth regulators and boron in mango trees of the Palmer cultivar affected by this physiological disorder needs to be elucidated. In this scenario, this study aimed to evaluate the association of plant growth regulators (auxin, cytokinin, and gibberellin) and boron with the incidence of stenospermocarpic fruits in ‘Palmer’ mango. Two experiments were conducted in two consecutive crop years (2018 and 2019) in a commercial orchard. The experiment was set up in a randomized block design, with six treatments and four replicates. The treatments consisted of: T1 = water application (control); T2 = gibberellin (25 ppm, GA3); T3 = auxin (25 ppm, naphthaleneacetic acid); T4 = cytokinin (25 ppm, 6-BA); T5 = boron (2 ppm); and T6 = boron (2 ppm) + gibberellin (25 ppm). The application of gibberellic acid during the flowering phase resulted in higher mean values for the number of stenospermocarpic fruits. The cytokinin treatment reduced the incidence of stenospermocarpic fruits and led to higher mean values for the number of productive branches. Boron, auxin, and the combination of gibberellin and boron did not reduce the stenospermocarpy indices. Hormonal balance plays a crucial role in the manifestation of stenospermocarpic fruits, with gibberellin being associated with the expression of this disorder, while cytokinin exerts an antagonistic effect. The application of boron and auxin did not have a predominant effect on the increase or reduction of stenospermy. fertilization However elucidated scenario (auxin ‘Palmer 2018 (201 2019 orchard design replicates T control (control) 25 ppm GA3 GA GA3) acid) 6BA BA 6 6-BA) 2 ( ppm. . branches Boron indices stenospermy 201 (20 (control 6-BA 20

RESUMO A estenospermocarpia em mangueiras está associada à regulação hormonal e à fertilização com boro. No entanto, o modo de ação de reguladores de crescimento de plantas e boro em mangueiras da cultivar Palmer afetadas por esse distúrbio fisiológico precisa ser elucidado. Nesse contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar a associação de reguladores de crescimento de plantas (auxina, citocinina e giberelina) e boro com a incidência de frutos estenospermocárpicos em mangas ‘Palmer’. Dois experimentos foram conduzidos em anos consecutivos (2018 e 2019) em um pomar comercial. O experimento foi organizado em delineamento de blocos ao acaso, com seis tratamentos e quatro repetições. Os tratamentos consistiram em: T1 = aplicação de água (controle absoluto); T2 = giberelina (25 ppm, GA3); T3 = auxina (25 ppm, ácido naftalenoacético); T4 = citocininas (25 ppm, 6-BA); T5 = boro (2 ppm); e T6 = boro (2 ppm) + giberelina (25 ppm). A aplicação de ácido giberélico durante a fase de floração resultou em médias mais altas para o número de frutos estenospermocárpicos. As citocininas reduziram a incidência de frutos estenospermocárpicos e levaram às médias mais altas para o número de ramos produtivos. Boro, auxina e a combinação de giberelina e boro não reduziram os índices de estenospermocarpia. O equilíbrio hormonal desempenha papel crucial na manifestação dos frutos estenospermocárpicos, estando a giberelina associada à expressão deste distúrbio, enquanto a citocinina exerce efeito antagônico. A aplicação de boro e auxina não teve efeito preponderante no aumento ou redução da estenocarpia. entanto elucidado contexto auxina, (auxina ‘Palmer. ‘Palmer . ‘Palmer’ 2018 (201 2019 comercial acaso repetições T controle absoluto absoluto) 25 ppm GA3 GA GA3) naftalenoacético naftalenoacético) 6BA BA 6 6-BA) 2 ( ppm. produtivos Boro antagônico estenocarpia 201 (20 6-BA 20

Abstract Vismia japurensis Reichardt is a plant of ecological and chemical importance from which a variety of bioactive substances have been isolated. The current study aimed to establish in vitro cultures of this species as a source of secondary metabolites. Appropriate decontamination treatments and germination tests were performed and, after in vitro culture establishment, the propagated plants were multiplied in a sterile environment to increase the biomass of available experimental material. Seeds showed low contamination and a high germination percentage on Woody Plant Medium (WPM) supplemented with gibberellic acid (both at concentrations of 5 and 10 mg/L). V. japurensis nodal segments rapidly regenerated when first grown in WPM and then transplanted to Murashige and Skoog medium (MS). After 60 days in MS medium, the propagated plants were removed, lyophilized, and extracted with hexane and methanol. The hexane extract was fractionated via open column chromatography, and the substance isolated was purified by high performance liquid chromatography. Structural determination of the isolated substance was carried out using one and two-dimensional nuclear magnetic resonance and mass spectrometry. The isolated substance was identified as 1,8,10-trihydroxy-3,10-dimethyl-9(10H)-anthracenone, which, based on the conducted literature search, is reported for the first time. metabolites establishment material (WPM both 1 mg/L. mgL mg/L . mg L mg/L) V MS. (MS) 6 removed lyophilized methanol chromatography twodimensional two dimensional spectrometry 1,8,10trihydroxy3,10dimethyl910Hanthracenone, 1810trihydroxy310dimethyl910Hanthracenone trihydroxydimethylHanthracenone 1,8,10 trihydroxy 3,10 dimethyl 9 10H anthracenone, 8 3 anthracenone H 1,8,10-trihydroxy-3,10-dimethyl-9(10H)-anthracenone search time (MS 10trihydroxy3 10dimethyl910Hanthracenone Hanthracenone 1,8,10trihydroxy3,10dimethyl910Hanthracenone 1810 1,8,1 310 3,1 10trihydroxy dimethylHanthracenone 181 1,8, 31 3, 18 1,8 1,