Abstract Vitamin B12 is a cofactor involved in DNA synthesis, red blood cell production and essential for neurologic functions. Its deficiency can lead to varied manifestations. Thrombotic pseudomicroangiopathy is characterized by microangiopathic hemolytic anemia and thrombocytopenia associated with dysmorphic red blood cells secondary to severe vitamin B12 deficiency, with an approximate incidence of 2.5%. It is often confused with thrombotic thrombocytopenic purpura and treated as such. Replacement with cyanocobalamin leads to immediate improvement of symptoms without the need of other treatments. We describe three cases of patients hospitalized in a general hospital in Panama City, Republic of Panama. Two males and one female with no pathological history presenting with anemic syndrome, microangiopathic hemolytic anemia and severe vitamin B12 deficiency. Clinical improvement was observed following parenteral cyanocobalamin replacement.

Resumen La vitamina B12 es un cofactor que forma parte de la síntesis de ADN, formación de glóbulos rojos y determinante de funciones neurológicas. Su deficiencia genera manifestaciones variadas. La seudomicroangiopatía trombótica se caracteriza por anemia hemolítica microangiopática y trombocitopenia asociada a eritrocitos dismórficos secundario a deficiencia severa de vitamina B12. Con una incidencia aproximada de 2.5%. A menudo es confundida con púrpura trombocitopénica trombótica y tratada como tal. La reposición con cianocobalamina produce mejoría inmediata de los síntomas, sin la necesidad de otros tratamientos. Describimos tres casos de pacientes hospitalizados en un hospital general en la ciudad de Panamá, República de Panamá. Dos varones y una mujer sin antecedentes patológicos que debutan con síndrome anémico, datos de anemia hemolítica microangiopática y deficiencia severa de vitamina B12. Con mejoría clínica posterior a la reposición con cianocobalamina.

Abstract Introduction: Nephrotic syndrome (NS) is one of the reasons of end-stage kidney disease, and elucidating the pathogenesis and offer new treatment options is important. Oxidative stress might trigger pathogenesis systemically or isolated in the kidneys. Octreotide (OCT) has beneficial antioxidant effects. We aimed to investigate the source of oxidative stress and the effect of OCT on experimental NS model. Methods: Twenty-four non-uremic Wistar albino rats were divided into 3 groups. Control group, 2 mL saline intramuscular (im); NS group, adriamycin 5 mg/kg intravenous (iv); NS treatment group, adriamycin 5 mg/kg (iv) and OCT 200 mcg/kg (im) were administered at baseline (Day 0). At the end of 21 days, creatinine and protein levels were measured in 24-hour urine samples. Erythrocyte and renal catalase (CAT) and thiobarbituric acid reactive substance (TBARS) were measured. Renal histology was also evaluated. Results: There was no significant difference among the 3 groups in terms of CAT and TBARS in erythrocytes. Renal CAT level was lowest in NS group, and significantly lower than the control group. In treatment group, CAT level significantly increased compared with NS group. In terms of renal histology, tubular and interstitial evaluations were similar in all groups. Glomerular score was significantly higher in NS group compared with control group and it was significantly decreased in treatment group compared to NS group. Conclusions: Oxidative stress in NS might be due to the decrease in antioxidant protection mechanism in kidney. Octreotide improves antioxidant levels and histology in renal tissue and might be a treatment option. Introduction (NS endstage stage disease important kidneys (OCT effects model Methods Twentyfour Twenty four nonuremic non uremic im mgkg mg kg iv (iv 20 mcgkg mcg (im Day 0. 0 . 0) days 24hour hour 24 samples (CAT (TBARS evaluated Results erythrocytes Conclusions option

Resumo Introdução: Síndrome nefrótica (SN) é uma das causas de doença renal em estágio terminal. É importante elucidar a patogênese e oferecer novas opções de tratamento. Estresse oxidativo pode desencadear a patogênese sistemicamente ou isoladamente nos rins. O octreotide (OCT) tem efeitos antioxidantes benéficos. Nosso objetivo foi investigar a fonte de estresse oxidativo e efeito do OCT no modelo experimental de SN. Métodos: Dividimos 24 ratos albinos Wistar não urêmicos em 3 grupos. Grupo controle, 2 mL de solução salina intramuscular (im); grupo SN, adriamicina 5 mg/kg intravenosa (iv); grupo tratamento SN, adriamicina 5 mg/kg (iv) e OCT 200 mcg/kg (im) foram administrados no início do estudo (Dia 0). Aos 21 dias, mediram-se os níveis de creatinina e proteína em amostras de urina de 24 horas. Mediu-se a catalase (CAT) eritrocitária e renal e a substância reativa ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). Avaliou-se também histologia renal. Resultados: Não houve diferença significativa entre os três grupos em termos de CAT e TBARS em eritrócitos. O nível de CAT renal foi menor no grupo SN e significativamente menor que no grupo controle. No grupo tratamento, o nível de CAT aumentou significativamente em comparação com o grupo SN. Quanto à histologia renal, as avaliações tubular e intersticial foram semelhantes em todos os grupos. O escore glomerular foi significativamente maior no grupo SN em comparação com o grupo controle e diminuiu significativamente no grupo de tratamento em comparação com o grupo SN. Conclusões: Estresse oxidativo na SN pode ser devido à diminuição do mecanismo de proteção antioxidante nos rins. O octreotide melhora níveis de antioxidantes e histologia do tecido renal e pode ser uma opção de tratamento. Introdução (SN terminal rins (OCT benéficos Métodos im mgkg mg kg iv (iv 20 mcgkg mcg (im Dia 0. 0 . 0) dias mediramse mediram se horas Mediuse Mediu (CAT TBARS. (TBARS) Avaliouse Avaliou Resultados eritrócitos Conclusões (TBARS

Resumen Los concentrados de glóbulos rojos son el componente que se utiliza con mayor frecuencia en las transfusiones sanguíneas. La irradiación gamma de la unidad transfusional está indicada cuando un paciente corre el riesgo de desarrollar la enfermedad de injerto contra huésped asociada a una transfusión. Sin embargo, esta irradiación exacerba la lesión de almacenamiento aumentando los niveles plasmáticos de potasio y disminuyendo los de sodio. Estos efectos sobre los glóbulos rojos reducen el tiempo de viabilidad de las unidades transfusionales irradiadas almacenadas. En este trabajo, estudiamos el efecto de diferentes dosis de radiación gamma sobre la concentración de los iones plasmáticos en las bolsas irradiadas, los cuales son indicativos de posibles alteraciones de las membranas de los glóbulos rojos y de los leucocitos. El análisis de los resultados obtenidos muestra que la radiación, a las dosis estudiadas, no afecta el consumo de glucosa. Sin embargo, la permeabilidad de la membrana de los eritrocitos aumenta con la dosis de radiación, indicando que este tipo de alteraciones podrían ser dosis dependiente. Estos resultados podrían ayudar a diseñar nuevos medios de conservación para reducir el daño a la membrana inducido por la radiación.

Abstrac Red blood cell concentrates are the most widely used component in blood transfusions. Gamma irradiation of the transfusion unit is indicated when a patient is at risk of developing transfusion-associated graft-versus-host disease. However, this irradiation exacerbates storage damage by increasing potassium and decreasing sodium plasmatic levels. These effects on red blood cells reduce the viability time of stored irradiated units. In this work, we study the different radiation dose effects on the concentration of plasmatic ions in the gamma-irradiated bags, which are attributed to possible membrane alterations of red blood cells and leukocytes. The result analysis shows that radiation, at the doses studied, does not affect glucose consumption. However, the permeability of the erythrocyte membrane increases with the radiation dose, indicating that these types of alterations could be dose-dependent. These results could help to design a new preservation medium to reduce radiation-induced membrane damage.

RESUMEN Introducción: La medicina ancestral ha utilizado plantas con cualidades medicinales para prevenir y tratar enfermedades; aun cuando este tipo de investigaciones se han incrementado, son escasos los estudios con tubérculos andinos. Objetivo: Determinar la actividad biológica de extractos acuosos y etanólicos de los tubérculos andinos Tropaeolum tuberosum (mashua) y Ullucus tuberosus (melloco). Métodos: La investigación fue experimental y se desarrolló in vitro. La muestra estuvo constituida por 2 tubérculos andinos utilizados en la medicina ancestral. Se aplicaron técnicas de extracción en medio acuoso y etanólico. Los extractos fueron evaluados para determinar la actividad hemoaglutinante, anticoagulante y antimicrobiana con cepas ATCC. Resultados: Se demostró actividad hemoaglutinante en el extracto acuoso de T. tuberosum sobre eritrocitos A. Todos los extractos acuosos mostraron actividad anticoagulante, Tropaeolum tuberosum inhibió la actividad de la coagulación sanguínea (vía intrínseca) con un TTPa> 300 seg. Tanto los extractos acuosos y etanólicos exhibieron actividad antimicrobiana contra cepas ATCC, Tropaeolum tuberosum inhibió el crecimiento de Staphylococcus aureus 25923 con halos de 17 y 22 mm y Ullucus tuberosus (blanco) con halos de 10 y 30 mm, respectivamente. Los extractos acuosos de Tropaeolum tuberosum y Ullucus tuberosus (rojo) inhibieron el crecimiento de Candida tropicalis 66029 con halos de 27 y 12 mm y respectivamente. Conclusiones: Determinada la actividad biológica, se evidencia que los tubérculos andinos estudiados aglutinan eritrocitos humanos, específicamente eritrocitos del grupo A, así mismo, capacidad de inhibir las proteínas plasmáticas de la coagulación y de inhibir el crecimiento bacteriano y micótico de cepas ATTC.

ABSTRACT Introduction: Ancestral medicine has used plants with medicinal qualities to prevent and treat diseases, even though this type of research has increased, studies with Andean tubers are scarce. Objective: To determine the biological activity of aqueous and ethanolic extracts of the Andean tubers Tropaeolum tuberosum (mashua) and Ullucus tuberosus (melloco). Methods: The research was experimental and was developed in vitro. The sample consisted of 2 Andean tubers used in ancestral medicine. Extraction techniques were applied in aqueous and ethanolic medium. The extracts were evaluated for hemagglutinating, anticoagulant and antimicrobial activity with ATCC strains. Results: Hemagglutinating activity was demonstrated in the aqueous extract of T. tuberosum on A erythrocyte. All aqueous extracts showed anticoagulant activity, Tropaeolum tuberosum inhibited blood coagulation activity (intrinsic pathway) with an aPTT>300 sec. Both aqueous and ethanolic extracts exhibited antimicrobial activity against ATCC strains, Tropaeolum tuberosum inhibited the growth of Staphylococcus aureus 25923 with halos of 17 and 22 mm and Ullucus tuberosus (white) with halos of 10 and 30 mm, respectively. The aqueous extracts of Tropaeolum tuberosum and Ullucus tuberosus (red) inhibited the growth of Candida tropicalis 66029 with halos of 27 and 12 mm, respectively. Conclusions: Once the biological activity was determined, it was evident that the Andean tubers studied agglutinated human erythrocytes, specifically group A erythrocytes, as well as the ability to inhibit plasma coagulation proteins and inhibit the bacterial and fungal growth of ATTC strains.

ABSTRACT The aim of this study was to evaluate the haematological parameters of adult Pelibuey sheep under conditions of the humid tropics of Mexico. Erythrocytes (RBC, x106/µL), haemoglobin (HB, g/dL), haematocrit (HTO, %), mean corpuscular volume (MCV, fL), mean corpuscular haemoglobin (MCH, pg), and mean corpuscular haemoglobin concentration were analysed. (MCHC, g/dL), leukocyte count (WBC, x103/µL) and platelets (PLT, x103/µL) through descriptive statistics of 86 adult, non-pregnant, non-lactating sheep. The values were: RCB 10.35±1.08 x106 /µL; HB 10.83 ± 1.53 g/dL, HTO 33.97 ± 3.79%, MCV 32.78 ±2.49 fL, MCH 10.63 ±1.16 pg, MCHC 32.55 ±3.35 g/dL, WBC 10.75 ±5.78 x103/ µL, PLT 340±658 x103/µL. The haematological parameters obtained are within the average values of the species.

RESUMEN El objetivo del estudio fue evaluar los parámetros hematológicos de ovejas Pelibuey adultas bajo condiciones del trópico húmedo de México. Se analizaron eritrocitos (RBC, x106 /µL), hemoglobina (HB, g/dL), hematocrito (HTO, %), volumen corpuscular medio (VCM, fL), hemoglobina corpuscular media (HCM, pg), concentración de hemoglobina corpuscular media (CHCM, g/dL), conteo de leucocitos (WBC, x103 /µL) y plaquetas (PLT, x103 /µL) a través de estadística descriptiva de 86 ovejas adultas, no gestantes no lactantes. Los valores fueron: RCB 10.35±1.08 x106 /µL; HB 10.83 ±1.53 g/dL, HTO 33.97±3.79%, VCM 32.78 ±2.49 fL, HCM 10.63±1.16 pg, CHCM 32.55 ±3.35 g/dL, WBC 10.75 ±5.78 x103 /µL, PLT 340±658 x103 /µL. Los parámetros hematológicos obtenidos se encuentran dentro de los valores medios de la especie.

Abstract Candida albicans is the main fungal species involved in oral candidiasis, and its increasing resistance to pharmacological treatment encourages the search for improved antifungal agents. Lavandula dentata L. essential oil (LD-EO) has been recognized for its antimicrobial activity, but little is known about its role against oral C. albicans. This study evaluated the antifungal and antibiofilm activities, mechanisms of action, and toxicity of LD-EO from Brazil against oral strains of C. albicans. Antifungal activity was assessed based on Minimum Inhibitory Concentration (MIC), Minimum Fungicidal Concentration (MFC), association study with miconazole (Checkerboard method), and sorbitol and ergosterol assays. Inhibition of biofilm formation and disruption of preformed biofilm were considered when studying the effects of the product. Additionally, the toxicity of LD-EO was evaluated by a hemolysis assay on human erythrocytes. Phytochemical analysis by gas chromatography-mass spectrometry identified eucalyptol (33.1%), camphor (18.3%), and fenchone (15.6%) as major constituents. The test substance showed mainly fungicidal activity (MIC100 = 8 μg/mL; MFC = 16 μg/mL), including against two miconazole-resistant isolates of C. albicans. The effects of LD-EO were synergistic with those of miconazole and appeared not to involve damage to the fungal cell wall or plasma membrane. Its effectiveness in inhibiting biofilm formation was higher than the effect of disrupting preformed biofilm. Finally, the product exhibited low hemolytic activity at MIC. Based on the favorable and novel results described here, LD-EO could constitute a promising therapeutic alternative for oral candidiasis, including miconazole-resistant cases. candidiasis agents L LDEO LD EO (LD-EO C activities action MIC, MIC , (MIC) MFC, (MFC) Checkerboard method, method method) assays Additionally erythrocytes chromatographymass chromatography mass 33.1%, 331 33.1% 33 1 (33.1%) 18.3%, 183 18.3% 18 3 (18.3%) 15.6% 156 15 6 (15.6% constituents MIC100 (MIC10 μg/mL μgmL μg mL μg/mL, μg/mL) miconazoleresistant resistant membrane Finally here cases (MIC (MFC 33.1 (33.1% 18.3 (18.3% 15.6 (15.6 MIC10 (MIC1 33. (33.1 18. (18.3 15. (15. MIC1 (33. (18. (15 (33 (18 (1 (3 (

Resumo Candida albicans é a principal espécie fúngica envolvida na candidíase bucal, e sua crescente resistência ao tratamento farmacológico encoraja a busca por melhores agentes antifúngicos. O óleo essencial da Lavandula dentata L. (LD-EO) tem sido reconhecido por sua atividade antimicrobiana, porém pouco se conhece o seu papel contra C. albicans bucal. Este trabalho avaliou as atividades antifúngica e antibiofilme, mecanismos de ação e toxicidade do LD-EO do Brasil contra cepas de C. albicans bucal. A atividade antifúngica foi avaliada baseando-se em: Concentração Inibitória Mínima (CIM), Concentração Fungicida Mínima (CFM), estudo de associação com o miconazol (método Checkerboard) e ensaios com sorbitol e ergosterol. A inibição da formação do biofilme e a ruptura do biofilme pré-formado foram considerados no estudo dos efeitos do produto. Adicionalmente, a toxicidade do LD-EO foi avaliada pelo ensaio de hemólise em eritrócitos humanos. A análise fitoquímica por cromatografia gasosa-espectrometria de massa identificou eucaliptol (33.1%), cânfora (18.3%) e fenchona (15.6%) como constituintes majoritários. A substância teste revelou atividade principalmente fungicida (CIM100 = 8 μg/mL; CFM = 16 μg/mL), inclusive contra dois isolados de C. albicans resistentes ao miconazol. Os efeitos do LD-EO foram sinérgicos aos do miconazol e parecem não envolver danos à parede celular ou à membrana plasmática fúngica. Sua efetividade em inibir a formação do biofilme foi maior que o efeito de eliminação do biofilme pré-formado. Finalmente, o produto exerceu baixa atividade hemolítica na CIM. Considerando os resultados favoráveis e inéditos aqui descritos, o LD-EO poderia constituir uma alternativa terapêutica promissora para a candidíase bucal, incluindo casos resistentes ao miconazol. bucal antifúngicos L LDEO LD EO (LD-EO antimicrobiana C antibiofilme baseandose baseando CIM, CIM , (CIM) CFM, (CFM) método Checkerboard ergosterol préformado pré formado Adicionalmente humanos gasosaespectrometria gasosa espectrometria 33.1%, 331 33.1% 33 1 (33.1%) 18.3% 183 18 3 (18.3% 15.6% 156 15 6 (15.6% majoritários CIM100 (CIM10 μg/mL μgmL μg mL μg/mL, μg/mL) préformado. formado. Finalmente descritos (CIM (CFM 33.1 (33.1% 18.3 (18.3 15.6 (15.6 CIM10 (CIM1 33. (33.1 18. (18. 15. (15. CIM1 (33. (18 (15 (33 (1 (3 (

Abstract Products derived from medicinal plants with antimicrobial activity are considered a promising alternative in the treatment of fungal infections. In this perspective, this study proposed to evaluate the antifungal activity of the dichloromethane fraction of Annona crassiflora Mart. against C. albicans strains. Tests were carried out to determine Minimum Inhibitory Concentration (MIC), Minimum Fungicide Concentration (MFC), microbial growth kinetics, fungal cell wall and membrane mechanisms of action, antifungal biofilm activity, and cytotoxic effects on human erythrocytes. The extract presented MIC and MFC values that ranged from 256 µg/mL to 1,024 µg/mL, with fungicidal activity in the microbial growth kinetics assay. The mechanism of action did not occur through damage to the cell wall or via binding to ergosterol in the membrane, though the fraction presents activity against biofilm and is not cytotoxic in human erythrocytes. The dichloromethane fraction of Annona crassiflora Mart. presented antifungal activity and reduced biofilm growth, without toxicity against human erythrocytes; however, further studies are needed to define its mechanism of action. infections perspective Mart C strains MIC, , (MIC) MFC, (MFC) erythrocytes 25 µgmL µg mL 1024 1 024 1,02 assay however (MIC (MFC 2 102 02 1,0 10 0 1,

Resumo Produtos derivados de plantas medicinais com atividade antimicrobiana são considerados uma alternativa promissora no tratamento de infecções fúngicas. Nesta perspectiva, o estudo propôs avaliar a atividade antifúngica da fração diclorometano da Annona crassiflora Mart. frente às cepas de C. albicans. Realizou-se ensaios para determinação de Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Fungicida Mínima (CFM), interferência sobre a cinética de crescimento microbiano, mecanismos de ação sobre a parede e a membrana celular fúngica, atividade antifúngica sobre o biofilme e os efeitos citotóxicos sobre eritrócitos humanos. Esse extrato apresentou valores da CIM e CFM que variaram de 256 µg/mL a 1,024µg/mL e no ensaio de cinética de crescimento microbiana, demonstrou atividade fungicida. O mecanismo de ação não ocorreu por danos na parece celular, tampouco por via ligação ao ergosterol da membrana. Demonstrou-se, ainda, que a fração tem ação frente ao biofilme e não é citotóxico em eritrócitos humanos. Assim, a fração diclorometano de Annona crassiflora Mart possui atividade antifúngica com capacidade de promover redução do crescimento do biofilme, não demosntrou toxicidade frente eritrócitos humanos, no entanto, necessita-se de mais estudos para definição do seu provável mecanismo de ação. fúngicas perspectiva C albicans Realizouse Realizou se (CIM CFM, , (CFM) microbiano fúngica humanos 25 µgmL µg mL 1024µgmL 1 024µg microbiana fungicida Demonstrouse, Demonstrouse Demonstrou se, Demonstrou-se ainda Assim entanto necessitase necessita (CFM 2

Resumo A presente pesquisa foi feita para determinar a capacidade micronuclei e citotóxica do antidepressivo venlafaxina em ensaios agudos e subcrônicos in vivo em camundongos. No primeiro estudo, administramos uma vez 5, 50 e 250 mg/kg do medicamento e incluímos um grupo negativo e um grupo tratado com daunorubicina. As observações foram feitas diariamente durante quatro dias. O ensaio subcrônico durou cinco semanas com administração diária de venlafaxina (1, 5, e 10 mg/kg) mais um grupo negativo e um grupo administrado de imipramina. As observações foram feitas a cada semana. No primeiro ensaio, os resultados não mostraram aumento de eritrócitos policromáticos micronucleados (MNPE), exceto com a dose elevada a 72 h. O efeito citotóxico mais forte foi encontrado com 250 mg/kg a 72 h (um efeito citotóxico de 51% em comparação com o nível médio de controle). No ensaio subcrônico não foi encontrado aumento de MNPE; entretanto, com a dose mais alta, um aumento significativo de eritrócitos normocromáticos micronucleados foi observado nas últimas três semanas (média de 51% em relação ao valor médio de controle). Foi observado um efeito citotóxico com as duas altas doses nas últimas duas semanas (uma diminuição média de 52% em relação ao valor médio de controle dos eritrócitos policromáticos). Os resultados sugerem cautela com a venlafaxina.

Abstract The present research was made to determine the micronuclei and cytotoxic capacity of the antidepressant venlafaxine in an in vivo acute and subchronic assays in mouse. In the first study, we administered once 5, 50, and 250 mg/kg of the drug, and included a negative and a daunorubicin treated group. Observations were daily made during four days. The subchronic assay lasted 5 weeks with daily administration of venlafaxine (1, 5, and 10 mg/kg) plus a negative and an imipramine administered groups. Observations were made each week. In the first assay results showed no micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPE) increase, except with the high dose at 72 h. The strongest cytotoxic effect was found with 250 mg/kg at 72 h (a 51% cytotoxic effect in comparison with the mean control level). In the subchronic assay no MNPE increase was found; however, with the highest dose a significant increase of micronucleated normochromatic erythrocytes was observed in the last three weeks (a mean of 51% respect to the mean control value). A cytotoxic effect with the two high doses in the last two weeks was observed (a polychromatic erythrocyte mean decrease of 52% respect to the mean control value). Results suggest caution with venlafaxine.

Resumo Durante o presente estudo, o estresse oxidativo mediado pelo cobre (Cu) foi medido que induziu danos ao DNA por concentração nos tecidos de peixes, Catla catla (14,45 ± 1,24g; 84,68 ± 1,45mm) (Hamilton, 1822). Os alevinos foram retidos em 5 grupos por 14, 28, 42, 56, 70 e 84 dias do período de exposição. Eles foram tratados com 2/3, 1/3, 1/4 e 1/5 (T1-T4) de 96h de concentração letal de cobre. Os controles foram executados junto com todos os tratamentos para as mesmas durações. Uma significativa (p <0,05) concentração dependente do tempo e da dose de Cu foi observada nas brânquias, fígado, rim, músculos e cérebro de C. catla. Entre os órgãos, o fígado apresentou uma concentração significativamente maior de cobre, seguido por guelras, rins, cérebro e músculos. O acúmulo de cobre nesses órgãos causou uma variação significativa nas atividades das enzimas viz. superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e peroxidase (POD). A atividade de SOD variou significativamente em resposta ao tempo de exposição de Cu como 56> 70> 42> 84> 28> 14 dias, enquanto a atividade de CAT exibiu uma relação inversa com o aumento na concentração de Cu. A atividade POD mostrou um aumento significativo com um aumento na duração da exposição ao Cu. O ensaio do cometa exibiu dano significativo ao DNA induzido por Cu nos eritrócitos periféricos de C. catla. Entre as quatro concentrações de exposição, 2/3 do LC50 (T1) causou danos significativamente maiores aos núcleos em comparação com o controle. O aumento da atividade de POD e SOD, bem como uma diminuição na atividade de CAT em resposta ao Cu, demonstra o envolvimento de um mecanismo protetor contra espécies reativas de oxigênio (ROS), enquanto o aumento de ROS resultou em maior dano ao DNA. Esses marcadores moleculares mencionados acima podem ser usados de forma eficiente para o biomonitoramento de ambientes aquáticos e conservação da ictiofauna comestível.

Abstract During present study, the copper (Cu) mediated oxidative stress was measured that induced DNA damage by concentrating in the tissues of fish, Catla catla (14.45±1.24g; 84.68±1.45mm) (Hamilton,1822). Fish fingerlings were retained in 5 groups for 14, 28, 42, 56, 70 and 84 days of the exposure period. They were treated with 2/3, 1/3, 1/4 and 1/5 (T1-T4) of 96h lethal concentration of copper. Controls were run along with all the treatments for the same durations. A significant (p < 0.05) dose and time dependent concentration of Cu was observed in the gills, liver, kidney, muscles, and brain of C. catla. Among organs, the liver showed a significantly higher concentration of Cu followed by gills, kidney, brain, and muscles. Copper accumulation in these organs caused a significant variation in the activities of enzymes viz. superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and peroxidase (POD). The SOD activity varied significantly in response to the exposure time of Cu as 56 > 70 > 42 > 84 > 28 > 14 days while CAT activity exhibited an inverse relationship with the increase in Cu concentration. POD activity showed a significant rise with an increase in Cu exposure duration. Comet assay exhibited significant DNA damage in the peripheral erythrocytes of Cu exposed C. catla. Among four exposure concentrations, 2/3rd of LC50 (T1) caused significantly higher damage to the nuclei compared to control. Increased POD and SOD activity, as well as a decrease in CAT activity in response to Cu, demonstrates the involvement of a protective mechanism against reactive oxygen species (ROS), whereas increased ROS resulted in higher DNA damage. These above-mentioned molecular markers can be efficiently used for the biomonitoring of aquatic environments and conservation of edible fish fauna.

Resumo A hibernação é uma condição natural dos animais que vivem na zona temperada, embora alguns lagartos tropicais também experenciem hibernação anualmente, como é o caso do lagarto nativo da América do Sul, Salvator merianae ou “teiú”. Embora as características fisiológicas e metabólicas associadas à hibernação tenham sido amplamente estudadas, possíveis alterações na integridade das hemácias durante esse período ainda permanecem obscuras. A desidratação e o jejum são consequências naturais da hibernação por vários meses e podem estar relacionadas a algumas modificações celulares. Neste estudo, investigamos se a tolerância osmótica de hemácias do lagarto teiú sob hibernação são diferentes das células obtidas de animais em atividade normal. Além disso, investigamos indiretamente por meio da quantificação de biomoléculas oxidadas e da atividade de enzimas antioxidantes se a membrana das hemácias dos teiús em hibernação poderia estar associada à oxidação. Nossos resultados sugerem que as hemácias possuem maior fragilidade durante o período de hibernação, embora não tenhamos encontrado evidências de um cenário de estresse oxidativo associado à essa fragilidade acentuada. Embora não tenhamos excluído a possibilidade de dano oxidativo durante a hibernação, sugerimos que um aumento no volume das hemácias como consequência de sangue hipoosmótico durante a hibernação também poderia afetar a integridade de hemácias, tal como foi observado.

Abstract Hibernation is a natural condition of animals that lives in the temperate zone, although some tropical lizards also experience hibernation annually, such as the lizard native from South America, Salvator merianae, or “tegu” lizard. Even though physiological and metabolic characteristic associated with hibernation have been extensively studied, possible alterations in the red blood cells (RBC) integrity during this period remains unclear. Dehydration and fasting are natural consequences of hibernating for several months and it could be related to some cellular modifications. In this study, we investigated if the osmotic tolerance of RBCs of tegu lizard under hibernation is different from the cells obtained from animals while normal activity. Additionally, we indirectly investigated if the RBCs membrane of hibernating tegus could be associated with oxidation by quantifying oxidized biomolecules and the activity of antioxidant enzymes. Our findings suggest that RBCs are more fragile during the hibernation period, although we did not find evidence of an oxidative stress scenario associated with the accentuated fragility. Even though we did not exclude the possibility of oxidative damage during hibernation, we suggested that an increased RBCs volume as a consequence of hypoosmotic blood during hibernation could also affect RBCs integrity as noted.

ABSTRACT: A 20-year-old, sexually intact male Dutch Warmblood horse was presented with a 5-day history of difficulty moving and non-flexion of the right pelvic limb, followed by subcutaneous swelling and permanent lateral decubitus. Despite attempts at palliative care, the horse was euthanized after clinical worsening and lack of treatment response. The main gross finding was a soft, red-to-black, lobulated mass involving the right semitendinosus, semimembranosus, and biceps femoris muscles. Soft, red nodules were also seen in all pulmonary lobes and adrenal glands. Histology revealed neoplastic proliferation of malignant polygonal cells, occasionally arranged in irregular anastomosing vascular channels filled with erythrocytes. Neoplastic cells were immunoreactive for factor VIII-related antigen, confirming the blood vascular origin. A final diagnosis of epithelioid hemangiosarcoma was made. These findings reinforced the inclusion of hemangiosarcoma as a differential diagnosis of equine muscular lesions and highlighted the histological features of the epithelioid hemangiosarcoma subtype. ABSTRACT 20yearold, 20yearold yearold 20 year old, old 20-year-old 5day day 5 nonflexion non flexion limb decubitus care response soft redtoblack, redtoblack to black, black red-to-black semitendinosus semimembranosus muscles Soft glands erythrocytes VIIIrelated VIII related antigen origin made subtype 2

RESUMO: Um cavalo macho não castrado, Sela Holandesa, de 20 anos de idade apresentou histórico de dificuldade de movimentação e não flexão do membro pélvico direito, seguido por inchaço subcutâneo e decúbito lateral permanente. Apesar das tentativas de cuidados paliativos, o cavalo foi eutanasiado após piora clínica e falta de resposta ao tratamento. O principal achado macroscópico foi uma massa macia, vermelha a preta e lobulada envolvendo os músculos semitendinoso, semimembranoso e bíceps femoral direito. Nódulos macios e vermelhos também foram observados nos lobos pulmonares e adrenais. A histologia revelou proliferação neoplásica de células poligonais malignas, ocasionalmente arranjadas em estruturas vasculares irregulares preenchidas por eritrócitos. As células neoplásicas foram imunorreativas para antígeno relacionado ao fator VIII, confirmando a origem vascular sanguínea. Portanto, foi realizado o diagnóstico final de hemangiossarcoma epitelioide intramuscular. Esses achados reforçaram a inclusão do hemangiossarcoma como diagnóstico diferencial das lesões musculares equinas e destacaram as características histológicas do subtipo hemangiossarcoma epitelioide. RESUMO castrado Holandesa 2 direito permanente paliativos tratamento macia semitendinoso adrenais malignas eritrócitos VIII sanguínea Portanto intramuscular

ABSTRACT This study aimed to evaluate the effect of different levels of omega-3 polyunsaturated fatty acids (n-3 PUFA) in the diet of Sardinella brasiliensis on their hematological parameters. A total of 375 fish were distributed in 15 experimental units to evaluate the effects of the diet on their blood for 45 days. The levels of n-3 PUFA added in the diet were 0, 0.3, 0.6, 0.9, and 1.2% of the lipid fraction. These values represent the total percentage of n-3 PUFA in the lipid fraction of the diet, and 0% n-3 PUFA was used as the negative control. Five fish from each experimental unit were sampled at the end of the experiment for hematological analysis, and the parameters measured include the total number of erythrocytes, hematocrit percentage, hemoglobin and glucose concentration and differential leukocyte count. Higher numbers of circulating eosinophils were observed in fish fed 0.3% and 1.2% n-3 PUFA. Although no significant differences were observed in several of the parameters, the results demonstrate that the health of the sardines was not affected by the addition of n-3 PUFA in their diet. It should be emphasized that this is the first study with emphasis on the blood analysis of S. brasiliensis. omega3 omega 3 omega- n3 n (n- 37 1 4 days n- 0 03 0.3 06 6 0.6 09 9 0.9 12 2 1.2 control erythrocytes count S (n 0. 1.

RESUMO O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de diferentes níveis de ácidos graxos poli-insaturados ômega-3 (PUFA n-3) na dieta de Sardinella brasiliensis sobre seus parâmetros hematológicos. Um total de 375 peixes foi distribuído em 15 unidades experimentais para avaliar os efeitos da dieta em seu sangue durante 45 dias. Os níveis de PUFA n-3 adicionados à dieta foram 0, 0,3, 0,6, 0,9 e 1,2% da fração lipídica. Esses valores representam a porcentagem total de PUFA n-3 na fração lipídica da dieta, e 0% de PUFA n-3 foi usado como controle negativo. Cinco peixes de cada unidade experimental foram amostrados no final do experimento para análise hematológica, e os parâmetros medidos incluem o número total de eritrócitos, a porcentagem de hematócrito, a concentração de hemoglobina e glicose e a contagem diferencial de leucócitos. Foram observados números mais altos de eosinófilos circulantes em peixes alimentados com 0,3% e 1,2% de PUFA n-3. Embora não tenham sido observadas diferenças significativas em vários dos parâmetros, os resultados demonstram que a saúde das sardinhas não foi afetada pela adição de PUFA n-3 em sua dieta. Deve ser enfatizado que este é o primeiro estudo realizado com ênfase na análise sanguínea de S. brasiliensis. poliinsaturados poli insaturados ômega3 ômega 3 ômega- n3 n hematológicos 37 1 4 dias n- 0 03 0,3 06 6 0,6 09 9 12 2 1,2 negativo hematológica eritrócitos hematócrito leucócitos n3. 3. S 1,

Abstract This work explored whether anthropized environments have the potential to promote cellular alterations in eukaryotic organisms. Wild fish that are in constant contact with anthropized water were evaluated using the following variables: presence of nuclear alterations and micronuclei in erythrocytes using the Feulgen method; and tissue analysis of the gills and liver through histological sections using Hematoxylin and Eosin staining. Therefore, 200 individuals were analyzed over 24 months. The results show that these environments are promoters of significant changes in liver and gill tissue and induce nuclear changes in erythrocytes. The analyses were subjected to statistical tests at a significance level of 0.5%. organisms variables method staining Therefore 20 2 months 05 0 5 0.5% 0.5 0.

Resumo Os ambientes antropizados têm o potencial de promover alterações celulares em organismos eucarióticos? Esta questão impulsionou o objetivo deste trabalho. Os peixes selvagens que estão em constante contato com água antropizada foram avaliados nas seguintes variáveis: presença de alterações nucleares e micronúcleos em eritrócitos usando o método Feulgen; e análise de tecidos das brânquias e fígado através de secções histológicas usando Hematoxilina e coloração de Eosina. Por conseguinte, 200 indivíduos foram analisados durante 24 meses. Os resultados mostram que estes ambientes são promotores de alterações significativas no fígado e no tecido das brânquias e induzem alterações nucleares nos eritrócitos. As análises foram submetidas a testes estatísticos a um nível de significância de 0,5%. eucarióticos trabalho variáveis Feulgen Eosina conseguinte 20 2 meses 05 0 5 0,5% 0,5 0,

Resumen: La leishmaniosis visceral ocasionada por Leishmania infantum se ha extendido hacia el sur de la región y el perro infectado con o sin manifestaciones clínicas constituye el principal reservorio. Los signos clínicos mayormente encontrados en perros de la ciudad de Salto, Uruguay fueron lesiones cutáneas, adelgazamiento, mucosas pálidas y linfadenomegalia. En la paraclínica se mencionan alteraciones hematológicas y bioquímicas relacionadas con la infección y en consecuencia resulta importante analizarlas en la situación epidemiológica actual de la enfermedad. El objetivo del trabajo fue describir los perfiles hematológicos, hepáticos y renales en perros naturalmente infectados con L. infantum en la ciudad de Salto, Uruguay y comparar con valores de referencia. En una subpoblación de perros con anticuerpos anti-L. infantum se determinaron valores del hemograma y de la bioquímica hepática y renal. Se detectó significativa disminución de eritrocitos, hemoglobina, hematocrito, índices hematimétricos, plaquetas, eosinófilos, albúmina e índice albúmina/globulinas, así como aumento de proteínas totales, globulinas, la mayoría de las enzimas hepáticas y de urea. Los perros con leishmaniosis visceral presentan una afección multisistémica al constatar alteraciones hematológicas, hepáticas y renales. Las modificaciones en los indicadores, principalmente del perfil proteico en plasma, en un contexto epidemiológico compatible orientan a la sospecha de infección por L. infantum.

Abstract: Visceral leishmaniasis caused by Leishmania infantum has spread to the south of the region and the infected dog with or without clinical manifestations constitutes the main reservoir. The most common clinical signs in dogs from Salto city, Uruguay were skin lesions, weight loss, pale mucous membranes and lymphadenomegaly. In the paraclinical, haematological and biochemical alterations related to the infection are mentioned and, consequently, it is important to analyze them in the current epidemiological situation of the disease. The objective of the work was to describe the haematological, hepatic and renal profiles in dogs naturally infected with L. infantum in the city of Salto, Uruguay, and to compare them with reference values. In a subpopulation of dogs with anti-L. infantum antibodies, haemogram values and liver and kidney biochemistry were determined. A significant decrease in erythrocytes, haemoglobin, haematocrit, haematometric indices, platelets, eosinophils, albumin and albumin/globulin ratio was detected as well as increased in total proteins, globulins, most liver enzymes and urea. Dogs with visceral leishmaniasis present a multisystem condition when verifying haematoloical, hepatic and renal alterations. Changes in the indicators, mainly the plasma protein profile, in a compatible epidemiological context, lead to the suspicion of L. infantum infection.

Resumo: A leishmaniose visceral causada por Leishmania infantum se espalhou para o sul da região e o cão infectado com ou sem manifestações clínicas é o principal reservatório. Os sinais clínicos mais comuns encontrados em cães da cidade de Salto, Uruguai foram lesões cutâneas, perda de peso, mucosas pálidas e linfadenomegalia. Na paraclínica, são mencionadas alterações hematológicas e bioquímicas relacionadas à infecção e, consequentemente, é importante analisá-las na atual situação epidemiológica da doença. O objetivo do trabalho foi descrever os perfis hematológico, hepático e renal em cães naturalmente infectados com L. infantum na cidade de Salto, Uruguai, e compará-los com valores de referência. Em uma subpopulacão de cães com anticorpos anti-L. infantum, foram determinados valores de hemograma e bioquímica hepática e renal. Foi detectada diminuicão significativa de eritrócitos, hemoglobina, hematócrito, índices hematométricos, plaquetas, eosinófilos, albumina e relação albumina/globulina, além de aumento das proteínas totais, globulinas, maioria das enzimas hepáticas e uréia. Cães com leishmaniose visceral apresentam um cuadro multissistêmico ao verificar alterações hematológicas, hepáticas e renais. Alterações dos indicadores, principalmente do perfil protéico plasmático, em contexto epidemiológico compatível levam à suspeita de infecção por L. infantum.

RESUMO Acidentes ofídicos causados por serpentes do gênero Bothrops são responsáveis por 70% das notificações no país. O soro antiofídico é o antídoto específico contra o envenenamento causado por essas serpentes. O objetivo do presente estudo foi avaliar o estado de saúde de equinos produtores de soro antibotrópico, pelo monitoramento dos parâmetros hematológicos e do ferro sérico, durante a realização do protocolo de três imunizações. Os animais foram avaliados em 17 momentos experimentais: controle (antes da aplicação do imunógeno), quatro horas, 24h, 48h, 72h e sete dias após as inoculações, para cada imunização. Houve diminuição significativa nos valores dos eritrócitos, da hemoglobina e do hematócrito após a segunda imunização. Verificaram-se diminuições significativas nos valores do ferro durante as três imunizações. Foram verificadas diminuições significativas nos valores dos linfócitos, nas duas primeiras imunizações, e aumento significativo dos valores dos neutrófilos nas três imunizações. Os eosinófilos, monócitos e basófilos não apresentaram diferença significativa ao longo das três imunizações. O protocolo de imunização descrito neste trabalho causou reação inflamatória no local da aplicação do imunógeno e reações transitórias dos parâmetros hematológicos e do ferro, pois, no final do protocolo de imunização, os valores das variáveis retornaram aos intervalos de referência. 70 país antibotrópico sérico imunizações 1 experimentais antes imunógeno, , imunógeno) horas 24h h 48h inoculações eritrócitos Verificaramse Verificaram se linfócitos eosinófilos pois referência 7

ABSTRACT Ophidic accidents caused by snakes of the genus Bothrops are responsible for 70% of notifications in the country. The antiophidic serum is the specific antidote against envenomation caused by these snakes. Aiming to evaluate the health status of horses producing antibotropic serum, the hematological variables and serum iron were delineated along the protocol of three immunizations. The animals were evaluated at 17 experimental moments, being: control (before the immunogen application), four hours, 24h, 48h, 72h and seven days after inoculations, for each immunization. There was a significant decrease in erythrocyte, hemoglobin, and hematocrit values after the second immunization. Serum iron values showed significant decreases during the three immunizations. Significant decreases in lymphocyte values were noted in the first two immunizations, while there was a significant increase in neutrophil values during all three immunizations. Eosinophils, monocytes, and basophils did not show significant difference throughout the three immunizations. The immunization protocol described in this study caused an inflammatory reaction at the site of immunogen application and transient changes in hematological parameters and iron levels, as by the end of the immunization protocol, the variable values returned the reference levels. 70 country immunizations 1 moments being before application, , application) hours 24h h 48h inoculations erythrocyte hemoglobin Eosinophils monocytes levels 7