Resumen Introducción. En Ecuador el cultivo de fresa tiene una relevancia tanto económica como social y ha presentado un crecimiento significativo en los últimos años. Sin embargo, es susceptible a diferentes tipos de plagas y patógenos. Objetivo. Evaluar el efecto de Bacillus megaterium en el cultivo de fresa en variables relacionadas con la sanidad y el rendimiento agronómico. Materiales y métodos. El ensayo de campo se llevó a cabo en una plantación de fresa de la variedad Albion, de cuatro meses de edad desde la primera cosecha, en la provincia de Pichincha, Ecuador. Se utilizaron las cepas IB6 y AB4 de Bacillus megaterium a concentraciones de 1 × 109 y 5 × 108 UFC/L, comparadas con un testigo químico de captan (3 g/L) y clorotalonil (2 mL/L) como fungicidas, y abamectina (0,75 mL/L) y lambdacialotrina (0,3 mL/L) como insecticidas en rotación. Se empleó un diseño de parcela dividida con evaluaciones en dos tiempos, entre abril y junio de 2023; se evaluó la incidencia y el índice de severidad de Botrytis cinerea, peso fresco, rendimiento, diámetros y grados Brix de frutos. Resultados. No hubo interacción entre los factores tratamientos y tiempo; los tiempos evaluados no mostraron diferencia estadística. El factor de tratamientos presentó diferencia estadística para variables de sanidad e interés agronómico. La incidencia de B. cinerea en tratamientos biológicos fue la menor, con 13 % en promedio. El control de ácaros fue superior a 72,71 % con la cepa IB6 a una concentración alta; este mismo tratamiento evidenció incrementos significativos en el peso fresco de frutos (13,2 %), los diámetros (14 %) y la concentración de sólidos solubles (23 %), superiores al testigo. Conclusión. El uso de Bacillus megaterium redujo la incidencia de Botrytis cinerea, fue efectivo contra ácaros y trips, y mejoró las variables de peso fresco, diámetros y grados Brix de frutos.

Abstract Introduction. In Ecuador, strawberry cultivation holds significant economic and social importance, having witnessed substantial growth in recent years. However, this sector faces challenges from various pests and diseases. Objective. To evaluate the effect of Bacillus megaterium on strawberry crop variables related to plant health and agronomic yield. Materials and methods. Field trial was conducted on an Albion strawberry plantation, four months after the first harvest, in Pichincha province, Ecuador. IB6 and AB4 strains of Bacillus megaterium were used at concentrations of 1 × 109 and 5 × 108 CFU/L. These were compared with a chemical control using captan (3 g/L) and chlorothalonil (2 mL/L) as fungicides, and abamectin (0.75 mL/L) and lambdacyhalothrin (0.3 mL/L) as insecticides in rotation. A split-plot design was applied with evaluations conducted at two intervals between April and June 2023. Variables measured included Botrytis cinerea incidence and severity index, fresh weight, yield, diameters, and Brix degrees of fruits. Results. There was no interaction between the treatment and time factors; the evaluated times showed no statistical differences. The treatment factor showed statistical differences for health and agronomic interest variables. The incidence of B. cinerea in the biological treatments was the lowest, with an average of 13 %. Mite control was greater than 72.71 % with the IB6 strain at a high concentration. This same treatment showed significant increases in the fresh weight of fruits (13.2 %), diameters (14 %), and soluble solids concentration (23 %), higher than the control. Conclusion. The use of Bacillus megaterium reduced the incidence of Botrytis cinerea, provided effective control against mites and thrips, and improved fresh weight, diameters and Brix degrees of fruits.

RESUMEN Colombia es el noveno productor de pitahaya amarilla en el mundo y el Departamento de Boyacá es el mayor productor con 440 hectáreas plantadas. Los fitopatógenos bacterianos pueden causar pérdidas de frutos de pitahaya y bajos rendimientos al producir la pudrición blanda de los tallos. El objetivo de esta investigación fue estudiar e identificar posibles agentes de enfermedades bacterianas de la pitahaya en Boyacá, Colombia. Trece (13) fincas de la región fueron seleccionadas para la toma de 20 muestras mediante un muestreo dirigido y al azar de tejidos de tallo y frutos con síntomas de pudrición blanda en estadios iniciales de la enfermedad. Se realizó un proceso de aislamiento microbiológico, identificación bioquímica y taxonómica molecular de las bacterias aisladas. Las secuencias del gen ARNr 16s de la región V2-V5 fueron editadas mediante la eliminación de los primers, ensamblaje y obtención de la secuencia consenso de los primers 1100R-337F y 800R -518F. El análisis filogenético fue hecho por BLAST en el NCBI, por las herramientas "Classifier" y "SeqMatch", del sitio Web del RDP y se realizaron árboles filogenéticos mediante alineamiento múltiple usando el algoritmo MUSCLE y el método de distancias de Tamura Nei. Se registraron signos como ampollas y fluidos mucilaginosos, síntomas como manchas cloróticas amarillas y marrones, pudrición blanda y licuefacción, y se reportaron posibles vectores como moscas y hormigas. Veinticinco (25) morfotipos de bacterias fueron clasificados en 4 filos, 8 familias y 13 géneros. El análisis de las secuencias del gen ARNr 16S de las cepas bacterianas mostró una identidad del 98 al 100% con Enterobacter cloacae, Pectobacterium carotovora y Paenibacillus glucanolyticus, reportados en otros estudios como causantes de la pudrición blanda del tallo y fruto de pitahaya. Se reportaron nuevas especies como posibles bacterias patógenas de pitahaya: Pantoea cypripedii, Kluyvera intermedia y Klebsiella oxytoca. Los ensayos de infectividad no arrojaron resultados positivos. La microbiota identificada en los estadios de la fase necrotrofa o final de la pudrición blanda del tallo podría estar conformada por los géneros Achromobacter, Sphingobacterium, Pseudomonas, Klebsiella, Paenibacillus, Bacillus, Stenotrophomonas y Microbacterium. En la mosca Leptoglossus zonatus asociada al cultivo se identificó Pseudomonas fulva y Lysinibacillus fusiformis. Este es el primer registro oficial de un complejo de posibles bacterias fitopatógenas del orden Enterobacterales (familia Enterobacteriaceae, Erwiniaceae y Pectobacteriaceae) en síntomas por enfermedad bacteriana en cultivos colombianos de pitahaya. La identificación de las bacterias de un pato-sistema puede orientar las prácticas de control químico y biológico con el fin de incrementar el potencial productivo y de exportación de los cultivos exóticos y huérfanos de las pequeñas fincas locales.

ABSTRACT Colombia is the ninth largest producer of dragon fruit in the world and the department of Boyacá is the largest with 440 hectares planted. Bacterial phytopathogens can cause pitahaya fruit losses and low yields by producing stem soft rot. This research aimed to study and identified possible agents of bacterial diseases of pitahaya in Boyacá, Colombia. Thirteen farms in the region were selected to take 20 samples by means of a targeted and random sampling of stem and fruit tissues with soft rot symptoms in the early stages of the disease. A process of microbiological isolation, biochemical and molecular taxonomic identification of the isolated bacteria. The 16s rRNA gene sequences of the V2-V5 region were edited by removing the primers, assembling and obtaining the consensus sequence of the primers 1100R-337F and 800R -518F. The phylogenetic analysis was performed by BLAST at NCBI, using the "Classifier" and "SeqMatch" tools from the RDP website, and phylogenetic trees were created by multiple alignment using the MUSCLE algorithm and the Tamura Nei distance method was performed. Signs like blisters and mucilaginous fluids, symptoms like yellow and brown chlorotic spots, soft rot, and liquefaction were identified, and possible vectors like flies and ants were report. Twenty-five bacterial morphotypes were identified classifieds in 4 phyla, 9 families and 13 genera. The analysis of the 16S rRNA gene sequences of the bacterial strains showed a 98 to 100% identity with Enterobacter cloacae, Pectobacterium carotovora and Paenibacillus glucanolyticus, reported in other studies as causing the soft rot of the pitahaya stem and fruit. New species were reported as possible pathogenic bacteria of pitahaya: Pantoea cypripedii, Kluyvera intermedia and Klebsiella oxytoca. Infectivity assays did not have positive results. The microbiota identified in the stages of the necrotrophic phase or final stage of soft rot of the stem belong to the genera Achromobacter, Sphingobacterium, Pseudomonas, Klebsiella, Paenibacillus, Bacillus, Stenotrophomonas and Microbacterium. In the fly Leptoglossus zonatus associated with the crop were identified Pseudomonas fulva and Lysinibacillus fusiformis were identified. This is also the first official report of a complex of possible phytopathogen bacteria of the order Enterobacterales (Enterobacteriacea, Erwiniaceae and Pectobacteriaceae family) in symptoms by bacterial disease on pitahaya Colombian crops. Identification of the bacteria in a pathogenic system can guide chemical and biological control practices in order to increase the productive and export potential of exotic and orphan crops from small local farmings.

Resumen Introducción. La producción de banano es una de las actividades económicas más significativas para el país. Sin embargo, enfrenta serios desafíos debido a la presencia de diversos patógenos, entre los más significativos se encuentran los nematodos fitoparásitos que afectan el rendimiento y la calidad del cultivo. El uso de hongos nematófagos (HN) para el control biológico de nematodos es una alternativa para reducir la aplicación de productos químicos en cultivos agrícolas. En Costa Rica existe gran variedad de hongos debido a la diversidad de los suelos, por lo que el aislamiento y la correcta identificación de estos hongos es crucial para determinar su potencial antagonista. Objetivo. Aislar e identificar potenciales hongos nematófagos (PHN) presentes en muestras de suelo de plantaciones de banano de la región Huetar Atlántica. Materiales y métodos. Se analizaron seis muestras de suelo provenientes de cinco cantones de la región Huetar Atlántica de Costa Rica mediante el método de espolvoreado en placas con agar-agua en búsqueda de PHN. Para la selección y purificación de los PHN se utilizaron placas Petri con papa dextrosa agar (PDA), identificando las estructuras morfológicas para el diagnóstico a nivel de género. Los hongos identificados morfológicamente se replicaron y se conservaron en viales con PDA y en aceite mineral a 4°C. Se extrajo ADN de los PHN y mediante amplificación por PCR (Reacción de Cadena de la Polimerasa) y secuenciación de diferentes regiones del genoma (ITS, tef 1-alfa, rpb2 y β-tubulina), se identificaron molecularmente. Resultados. Se aislaron e identificaron doce hongos, entre ellos Trichoderma asperellum, Penicillium steckii, Purpureocillium lilacinum, Fusarium oxysporum, Fusarium sp., Fusarium pseudocircinatum, y Talaromyces sp. Conclusión. El descubrimiento e identificación correcta de PHN subraya la importancia de investigar su aplicación en programas de manejo integrado de plagas, así como la necesidad de evaluar su eficacia y seguridad en diferentes condiciones agroecológicas para maximizar su impacto positivo en la agricultura.

Abstract Introduction. Banana production is one of the most significant economic activities for the country. However, it faces serious challenges due to the presence of various pathogens, among the most significant are plant-parasitic nematodes that affect crop yield and quality. The use of nematophagous fungi (NF) for biological control of nematodes is an alternative to reduce the application of synthetic chemicals in agricultural crops. In Costa Rica there is a great variety of fungi due to the diversity of soils. Therefore, the isolation and correct identification of these fungi is crucial to determine their antagonistic potential. Objective. To isolate and identify the potential nematophagous fungi (PNF) present in soil samples from banana plantations at the Huetar Atlantic region. Materials and methods. Six soil samples from the Huetar Atlantic region of Costa Rica were analyzed by the agar-water sprinkling plates method in search of PNF. For PNF selection and purification, Petri dishes with potato dextrose agar (PDA) were used, identifying morphological structures for diagnosis at genus level. Morphologically identified fungi were replicated and preserved in vials with PDA and in mineral oil at 4°C. DNA was extracted from the isolated PNF and through PCR amplification (Polymerase Chain Reaction) and sequencing of different regions of the genome (ITS, tef 1-alpha, rpb2 and β-tubulin), they were molecularly identified. Results. Twelve fungi were isolated and identified, including Trichoderma asperellum, Penicillium steckii, Purpureocillium lilacinum, Fusarium oxysporum, Fusarium sp., Fusarium pseudocircinatum, and Talaromyces sp. Conclusion. The correct discovery and identification of PNF underscores the importance of investigating its application in integrated pest management programs, as well as the need to evaluate its efficacy and safety under different agroecological conditions to maximize its positive impact on agriculture.

Resumen Introducción. Los hongos endófitos (HE) de la vid (Vitis vinifera) tienen un gran potencial de aplicación en la agricultura y pueden representar posibles agentes de control biológico de los viñedos. Objetivo. Aislar e identificar los hongos endófitos (HE) de plantas de vid con capacidad de antibiosis hacia Botrytis cinerea. Materiales y métodos. Se colectaron ramas jóvenes y maduras de cuarenta plantas sanas de vid de siete lotes de producción en la provincia de Cañete, Lima, Perú, durante los meses de marzo a mayo 2022. El aislamiento de HE se realizó de 702 secciones de tejidos desinfectados en medio de cultivo papa dextrosa agar (PDA) y la identificación fue a nivel de género. Se extrajeron metabolitos secundarios de veintiocho cepas de HE para determinar la inhibición micelial del patógeno. Se llevó a cabo un análisis de varianza (ANDEVA) de los parámetros evaluados con el programa estadístico Minitab. Resultados. Se aislaron un total de 129 cepas de HE de hojas y tallos de ramas jóvenes y maduras de vid, que correspondieron a siete géneros (Trichoderma, Aspergillus, Alternaria, Cladosporium, Fusarium, Nigrospora y Stemphylium). La mayor frecuencia se presentó en las hojas y rama madura. Trichoderma y Alternaria fueron los géneros más frecuentes en las plantas de vid con 22,48 % y 21,71 %, respectivamente. Los metabolitos obtenidos de las cepas HEVH-01 del género Cladosporium, HEV-99 y HEV-70 del género Alternaria, tuvieron mayor efecto en la inhibición micelial del patógeno. Conclusiones. Cepas de hongos endofitos del género Cladosporium y Alternaria mostraron capacidad de antibiosis hacia Botrytis cinerea a escala de laboratorio, los cuales podrían ser potenciales biocontroladores de patógenos en el cultivo de vid.

Abstract Introduction. Endophytic fungi (EF) in grapevines (Vitis vinifera) have great potential for agricultural applications and may represent possible biological control agents for vineyards. Objective. To isolate and identify endophytic fungi (EF) from grapevine plants with antibiosis capacity against Botrytis cinerea. Materials and methods. Young and mature branches from forty healthy grapevine plants were collected from seven production lots in the Cañete province, Lima, Peru, during March to May 2022. EF isolation was performed on 702 sections of disinfected tissues using potato dextrose agar (PDA) culture medium, and identification was carried out at the genus level. Secondary metabolites were extracted from twenty-eight EF strains to determine the mycelial inhibition of the pathogen. An analysis of variance (ANOVA) was conducted on the evaluated parameters using the Minitab statistical program. Results. A total of 129 EF strains were isolated from leaves and stems of young and mature grapevine branches, encompassing seven genera (Trichoderma, Aspergillus, Alternaria, Cladosporium, Fusarium, Nigrospora, and Stemphylium). The highest frequency was found in leaves and mature branches. Trichoderma and Alternaria were the most frecuent genera in grapevine plants, with 22.48 % and 21.71%, respectively. Metabolites obtained from the EFVH-01 strain of the genus Cladosporium, and EF-99 and EF-70 strains of the genus Alternaria, had the greatest effect on mycelial inhibition of the pathogen. Conclusions. Strains of endophytic fungi from the genera Cladosporium and Alternaria showed antibiosis capacity against Botrytis cinerea at the laboratory scale, which could potential biocontrol agents of pathogens in grapevine cultivation.

Resumen Introducción. El “moho verde” causado por Penicillium digitatum es uno de los problemas fitosanitarios que limita la producción en los cítricos. Para su control se utilizan fungicidas sintéticos, que han perdido eficacia, debido a la resistencia generada por el hongo. Una alternativa, es el uso de hongos endófitos con acción biocontroladora. Objetivo. Evaluar el efecto de metabolitos secundarios (MS) de hongos endófitos (HE) en la inhibición micelial de Penicillium digitatum y la eficacia de control de la enfermedad, en frutos de mandarina (Citrus reticulata) después de la cosecha. Materiales y métodos. El estudio se realizó en 2022, bajo un diseño experimental completo al azar, en el laboratorio de Sanidad Vegetal, Universidad Nacional de Cañete (UNDC), Lima, Perú. Para la prueba de antibiosis se extrajeron los metabolitos secundarios de diez cepas de HE de los géneros Trichoderma sp., Fusarium sp. y Aspergillus sp., en donde se evaluó la inhibición micelial del patógeno (%). Se asperjaron MS a una concentración del 15 % (v/v) sobre frutos de mandarina que fueron desinfectados e inoculados con el patógeno por aspersión (1x105 UFC/cc). Adicionalmente, se utilizaron un biocontrol comercial, un aceite vegetal y un fungicida. Después de 6 y 9 días, se evaluaron la incidencia (%) y el índice de severidad (0,1,2,3) de la enfermedad. Resultados. Los metabolitos secundarios de las cepas HEA-111 (Aspergillus), HEA-109 (Fusarium) y HSA-1 (Trichoderma) presentaron la mayor inhibición micelial con 95,05 %, 87,51 % y 47,47 %, respectivamente. En los frutos de mandarina tratados con los MS de las cepas HEA-109 y HSA-1, hubo un control del 80 % y 55 %, respectivamente. Conclusiones. Los MS de HE tuvieron efecto en la inhibición micelial de P. digitatum y redujeron el avance de la enfermedad en frutos de mandarina después de la cosecha.

Abstract Introduction. “Green mold,” caused by Penicillium digitatum is one of the phytosanitary issues that limits citrus production. For its control, synthetic fungicides are used, which have lost effectiveness due to resistance developed by the fungus. An alternative is the use of endophytic fungi with biocontrol action. Objective. To evaluate the effect of secondary metabolites (SM) from endophytic fungi (EF) on the mycelial inhibition of Penicillium digitatum and the effectiveness of disease control in mandarin fruits (Citrus reticulata) post-harvest. Materials and methods. The study was conducted in 2022, using a completely randomized experimental design in the Plant Health Laboratory at the Universidad Nacional de Cañete (UNDC), Lima, Peru. For the antibiosis test, secondary metabolites were extracted from ten strains of EF from the genera Trichoderma sp., Fusarium sp., and Aspergillus sp., where mycelial inhibition of the pathogen (%) was evaluated. SMs were sprayed at 15 % (v/v) concentration on mandarin fruits that were disinfected and inoculated with the pathogen by spraying (1x 105 CFU/cc). Additionally, a commercial biocontrol, a vegetable oil, and a fungicide were used. After 6 and 9 days, disease incidence (%) and severity index (0, 1, 2, 3) were evaluated. Results. Secondary metabolites from strains the HEA-111 (Aspergillus), HEA-109 (Fusarium), and HSA-1 (Trichoderma) showed the highest mycelial inhibition with 95.05 %, 87.51 %, and 47.47 %, respectively. In mandarin fruits treated with SMs from strains HEA-109 and HSA-1, there was a control of 80 % and 55 %, respectively. Conclusions. SMs from EF were effective in inhibiting the mycelial growth of P. digitatum and reduces disease progression in mandarin fruits post-harvest.

Resumen Introducción. Los problemas en la cadena de suministro aumentaron los costos de las materias primas y redujeron la disponibilidad de materiales para la producción de agentes de control biológico. Esto puede ejercer mayor presión de enfermedades y menores rendimientos en las granjas. Objetivo. Determinar el efecto de diferentes cantidades de almidón y el uso de ingredientes locales en procesos de fermentación a pequeña y gran escala para Trichoderma harzianum. Materiales y métodos. El estudio se ralizó en San José, Costa Rica, entre 2016 y 2018. Se realizaron ensayos en matraces para investigar la reducción o eliminación de almidón en medios de fermentación comerciales. Se llevaron a cabo ensayos en recipientes de fermentación para evaluar la efectividad de un medio local alternativo, que incluyó tres tratamientos: 1) medio comercial como control, 2) melaza al 10 % y 3) melaza al 10 % con 0,5 % de extracto de levadura. Se realizaron recuentos de esporas viables para determinar las unidades formadoras de colonias (UFC/mL). Resultados. La reducción de almidón al 10 % del medio original no tuvo impacto en las UFC/mL. Sin embargo, la ausencia de almidón resultó en un crecimiento desigual durante la fermentación. La melaza produjo aproximadamente la mitad de las UFC/mL en comparación con el medio comercial, pero superó el umbral de 107 UFC/mL utilizado en estudios para el control biológico de patógenos de plantas. Los resultados obtenidos en un fermentador a escala comercial fueron similares a los de la fermentación a escala piloto. Conclusión. La reducción del contenido de almidón en el medio comercial no afectó al crecimiento, pero la ausencia de almidón provocó acumulaciones sólidas de micelio. El uso de un medio de melaza de origen local a escala comercial parece factible mientras se mantenga un recuento de esporas viables requeridas para su uso en el campo.

Abstract Introduction. Supply chain issues have increased the costs of raw material and reduced the availability of materials for the production of biological control agents. This can result in greater disease pressure and lower yields on farms. Objective. To determine the effect of different amounts of starch and the use of local ingredients in small- and large-scale fermentation processes for Trichoderma harzianum. Materials and methods. The study was conducted in San José, Costa Rica, between 2016 and 2018. Flask experiments were performed to investigate the reduction or elimination of starch in commercial fermentation media. Fermentation vessel trials were conducted to evaluate the effectiveness of an alternative local medium, which included three treatments: 1) commercial medium as a control, 2) 10 % molasses medium, and 3) 10 % molasses with 0.5% yeast extract. Viable spore counts were performed to determine colony-forming units (CFU/mL). Results. Reducing starch to 10 % of the original medium had no impact on CFU/mL. However, the absence of starch resulted in uneven growth during fermentation. Molasses produced approximately half the CFU/mL compared to the commercial medium but exceeded the threshold of 107 CFU/mL used in studies for the biological control of plant pathogens. Results obtained in a commercial-scale fermenter were similar to those of pilot-scale fermentation. Conclusion. Reducing starch content in the commercial medium did not affect growth, but the absence of starch led to solid mycelium clumps. The use of a local molasses-based medium on a commercial scale feasible as long as the required viable spore count for field use is maintained.

Resumen La antracnosis causada por Colletotrichum gloeosporioides provoca defoliación, aborto de flores, lesiones en frutos y reduce la producción y calidad de maracuyá. Aunque es controlada con fungicidas químicos, éstos contaminan el medio ambiente y son peligrosos para la salud, por lo que se ha incrementado la investigación en el control biológico con Trichoderma spp. Los objetivos de la investigación fueron aislar, identificar, determinar la patogenicidad del agente causal de la antracnosis y evaluar el antagonismo frente a cepas nativas mexicanas: T. asperellum (TaCh y TaST), Trichoderma sp. (TsRV, TsCo, TsCh y TsLF); además, frente a especies foráneas: Trichoderma virens G-41® , T. harzianum T-22® , Trichoderma sp. (Bactiva®) y Trichoderma sp. (Fithan®), mediante la técnica de cultivo dual. Se evaluaron: el día del primer contacto entre hifas, el antagonismo y el porcentaje de esporulación e inhibición de Trichoderma spp., contra el hongo patógeno. De frutos de maracuyá infectados se aisló e identificó C. gloeosporioides, el cual provocó infección en los frutos sanos a los 10 días después de la inoculación del aislado fungoso. Trichoderma y el patógeno hicieron contacto entre 1,6 (TsLF) y 3,8 (TaST) días. Todas las cepas evaluadas excepto TsLF y Bactiva®, presentaron entre 97,56 y 100 % de esporulación. TsRV, TsCh, Fithan®, TaCh, G-41® y T-22® sobrecrecieron al patógeno y cubrieron toda la superficie del PDA (antagonismo 1). Asimismo, TsRV, Bactiva®, Fithan® y TaChinhibieron 88,1; 76,0; 73,5 y 72,8 % el crecimiento miceliar de C. gloeosporioidesy se consideran candidatas para el manejo integrado de la antracnosis en maracuyá.

Abstract Anthracnose caused by Colletotrichum gloeosporioides can cause defoliation, flower abortion, fruit lesions and reduce the production and quality of passion fruit. Although it is controlled with chemical fungicides, they contaminate the environment and are dangerous to health, which is why research into biological control with Trichoderma spp has increased. This research had the objectives of isolating, identifying and testing the pathogenicity of the causal agent of fruit anthracnose and comparing it with native Mexican strains: T. asperellum (TaCh and TaST), Trichoderma sp. (TsRV, TsCo, TsCh and TsLF); and, against foreign and commercial species: Trichoderma virens G-41®, T. harzianum T-22®, Trichoderma sp. (Bactiva®) and Trichoderma sp. (Fithan®), using the dual culture technique. The following was evaluated: the day of the first contact among hyphae, the type of antagonism and percentages of sporulation and inhibition of Trichodermaspp. against the pathogenic fungus. From infected diseased passion fruit fruits, C. gloeosporioides was isolated and identified, which caused infection in healthy fruits 10 days after inoculation of the fungal isolate. Trichoderma and the pathogen made contact between 1,6 (TsLF) and 3,8 (TaST) days. All the Trichoderma spp., strains evaluated, except TsLF and Bactiva®, presented abundant sporulation between 97.56 and 100 % of sporulation. The TsRV, TsCh, Fithan®, TaCh, G-41® and T-22® strains also had level 1 antagonism, overgrown the pathogen and covered the entire surface of the PDA (antagonism 1). Likewise, the strains TsRV, Bactiva®, Fithan® and TaCh caused the greatest inhibition with 88,1 inhibitions; 76,0; 73,5 and 72,8 % of the mycelial growth of C. gloeosporioides, respectively, and are considered the most promising candidates for the integrated management of anthracnose in passion fruit.

Abstract This work aimed to evaluate the combined effect of two pest biocontrol strategies: biofumigation with Brassica juncea and inoculation of Trichoderma harzianum, on the in vitro growth of the pathogen Phomopsis spp., an etiological agent of canker disease in pecan crops (Carya illinoinensis). B. juncea plants were crushed and placed in polystyrene recipients in doses of 10 and 30 g. Then, a Petri dish was introduced to each recipient, with a disk with a grown mycelium of Phomopsis spp. or T. harzianum, or both fungi (dual culture). Treatments were incubated in a culture chamber. The parameters evaluated were colonies’ surface area and percentage of mycelial inhibition of Phomopsis spp. Data were analyzed with non-parametric statistics using the Kruskal-Wallis test. The results indicated that: i) B. juncea did not affect the growth of T. harzianum; ii) the 30 g dose of B. juncea completely suppressed the growth of Phomopsis spp.; iii) T. harzianum significantly inhibited the growth of Phomopsis spp. colonies; iv) the combination of T. harzianum and biofumigation with 10 g of B. juncea showed synergy on the growth control of Phomopsis spp. Biofumigation with B. juncea, the application of T. harzianum, and the combination of both techniques could be promising alternatives for the biological control of Phomopsis spp.

Resumen El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto combinado de dos tácticas de biocontrol de plagas: la biofumigación con Brassicajuncea y la inoculación de Trichoderma harzianum, sobre el crecimiento in vitro del patógeno Phomopsis spp., agente etiológico de la cancrosis en el cultivo de pecán (Carya illinoinensis). Se trituraron plantas de B. juncea y se colocaron en envases de poliestireno en dosis de 10 y 30 g. Luego, en cada uno de estos recipientes se introdujo una caja de Petri con un disco con micelio dePhomopsis spp. o T. harzianum o ambos hongos (cultivo dual). Se incubó en cámara de cultivo. Los parámetros evaluados fueron la superficie de las colonias y el porcentaje de inhibición miceliar de Phomopsis spp. Los datos se analizaron con estadística no paramétrica mediante la prueba de Kruskal-Wallis. Se obtuvieron los siguientes resultados: i) B. juncea no afectó el crecimiento de T. harzianum; ii) la dosis de 30 g de B. juncea suprimió completamente el crecimiento de Phomopsis spp.; iii) T. harzianum inhibió significativamente el crecimiento de las colonias de Phomopsis spp.; iv) la combinación de T. harzianum y la biofumigación con 10 g de B. juncea mostró sinergia sobre el control del crecimiento de Phomopsis spp. La biofumigación con B. juncea, la aplicación de T. harzianum y la combinación de ambas técnicas podrían ser alternativas promisorias para el control biológico de Phomopsis spp.

Resumen El uso de insectos depredadores ha ganado interés para el manejo confiable y ambientalmente seguro de la polilla del tomate, Phthorimaea absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae), una plaga de este cultivo en todo el mundo. Por medio de un estudio con el programa EthoVision® y de ensayos de opción múltiple, repor tamos el comportamiento de búsqueda de presas y la preferencia alimentaria del mírido neotropical Tupiocoris cucurbitaceus Spinola (Hemiptera: Miridae), un agente de control biológico de P. absoluta, cuando se le presentan huevos de la plaga y simultáneamente otras dos especies de presas. T. cucurbitaceus exhibe un comportamiento alimentario generalista. Las ninfas del depredador mostraron inicialmente preferencia por las ninfas de Trialeurodes vaporariorum (Westwood) (Hemiptera: Aleyrodidae) pero consumieron más huevos de P. absoluta y Ephestia kuehniella Zeller (Lepidoptera: Pyralidae) al cabo de 24 h. Los machos de T. cucurbitaceus prefirieron a T. vaporariorum mientras que las hembras no mostraron preferencia por ningún tipo de presa. Además, los individuos no causaron daños directos a las hojas. Los hallazgos enfatizan la importancia de evaluar la oferta de diferentes presas para conocer la efectividad de los agentes de control biológico en el campo. La investigación aporta valiosos conocimientos sobre los hábitos alimentarios de T. cucurbitaceus, respaldando su potencial como agente de control biológico para P. absoluta.

Abstract The use of predatory insects has gained interest for reliable and environmentally safe pest management to control the South American tomato leafminer, Phthorimaea absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae), a pest of tomato crops worldwide. Based on video tracking using EthoVision® software and static feeding multiple-choice tests, we report the prey-searching behavior and feeding preference of the Neotropical mirid bug Tupiocoris cucurbitaceus Spinola (Hemiptera: Miridae), a biological control agent of P. absoluta when presented with its eggs and other two prey species. T. cucurbitaceus exhibits generalist feeding behavior; the nymphs initially showed a preference for Trialeurodes vaporariorum Westwood (Hemiptera: Aleyrodidae) nymphs but consumed more P. absoluta and Ephestia kuehniella Zeller (Lepidoptera: Pyralidae) eggs after 24 h. T. cucurbitaceus males preferred T. vaporariorum throughout the experiment while females showed no preference for any prey. Furthermore, they did not cause significant damage to the leaves. The findings emphasize the importance of evaluating the simultaneous offer of multiple prey types to understand the effectiveness of biocontrol agents in the field. Overall, the research contributes valuable insights into the feeding habits of T. cucurbitaceus, supporting its potential as a biological control agent for P. absoluta in tomato crops.

Resumen El objetivo de este trabajo fue seleccionar microorganismos promisorios como agentes de control biológico (ACB). Se visitaron predios florihortícolas ubicados en Buenos Aires, Argentina, de los cuales se obtuvo un total de 41 muestras de suelo. Se utilizaron las técnicas de insecto trampa y diluciones seriadas de suelo para la obtención de aislados de hongos entomopatógenos y hongos del género Trichoderma respectivamente. Se obtu vieron un total de 20 aislados, cinco pertenecientes al género Metarhizium y 15 aislados correspondientes al género Trichoderma. Los aislados fueron liofilizados y depositados como cultivos de referencia en la Colección Micológica del Centro de Estudios Parasi tológicos y de Vectores (CEPAVE). Se realizaron estudios de cultivos duales de los aislados recolectados frente a los patógenos Botrytis cinerea Pers. (1797) y Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary (1884). Se seleccionaron 11 aislados para la realización de estudios de promoción de crecimiento en plantas de tomate (Solanum lycopersicum L.). Los aislados de Metarhizium taii Liang y Liu (1991) CEP-722, CEP-723 y de Trichoderma afroharzianum Chaverri, Rocha, Degenkolb y Druzhinina (2015) CEP-753 y CEP-754, identificados molecularmente por medio de la amplificación de las zonas ITS y TEF1α, presentaron los mejores resultados en las pruebas de cultivo dual y promoción de crecimiento. Se espera avanzar en estudios posteriores que evalúen la virulencia de cepas de hongos en insectos.

Abstract This work aimed to select promising microorganisms as biological control agents (BCA). Forty-one soil samples were obtained from florihorticultural farms located in Buenos Aires, Argentina. Insect trap techniques and soil serial dilutions were used to obtain isolates of entomopathogenic fungi and fungi of genera Trichoderma, respectively. A total of 20 isolates included five Metarhizium and 15 Trichoderma. The isolates were lyophilized and deposited as reference cultures in the Mycological Collection of the Centro de Estudios Parasitológicos y de Vectores (CEPAVE). We performed dual culture studies of the isolates collected against the pathogens Botrytis cinerea Pers. (1797) and Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary (1884). Eleven isolates were selected for growth promotion studies in tomato plants (Solanum lycopersicum L.). The isolates of Metarhizium taii Liang & Liu (1991) CEP-722, CEP-723 Trichoderma afroharzianum Chaverri, Rocha, Degenkolb & Druzhinina (2015) CEP-753 and CEP-754, molecularly identified by amplification of the ITS and TEF1α zones, presented the best results in the dual culture and growth promotion tests. Subsequent studies will evaluate virulence of fungal strains in insects.

Resumen: El cultivo del cacao es muy susceptible a deficiencias nutrimentales y a la moniliasis ocasionada por el fitopatógeno Moniliophthora roreri. Una de las alternativas a los productos químicos sintéticos son los compuestos a base de silicio (Si). En la presente investigación se evaluó el efecto del silicio como bioestimulante en el cultivo de cacao y agente de control biológico de M. roreri. En el experimento se utilizaron cincos tratamientos de Si: T1 (4.00 kg ha-1), T2 (3.00 kg ha-1), T3 (2.00 kg ha-1) y T4 (1.5 kg ha-1) y un tratamiento control (sin aplicación). Se determinaron los indicadores de producción, número de mazorca, peso fresco y seco de almendras, peso seco de 100 almendras y el rendimiento del cultivo. Además, de la incidencia y severidad de la enfermedad a los 60, 120 y 180 días después de la aplicación del Si y la eficiencia de los tratamientos. Los resultados significativamente superiores para las variables: Producción, número mazorca, peso fresco y seco de almendra y peso seco de 100 almendra, se obtuvieron mediante la aplicación de 4 kg ha-1 de Si, todas las dosis de Si superaron al control (P ≤ 0.05) en las variables relacionas a la producción. En el control del fitopatógeno (M. roreri), la dosis de 4 kg ha-1 Si disminuyó la incidencia y la severidad de la enfermedad en más del 50%. La aplicación de Si puede ser una opción en el cultivo de cacao como bioestimulante y agente de control biológico de M. roreri.

Summary: The cocoa crop is very susceptible to nutritional deficiencies and moniliasis caused by the phytopathogen Moniliophthora roreri. One of the alternatives to synthetic chemicals are compounds based on silicon (Si). In the present investigation, the ef fect of silicon as a biostimulant in cocoa cultivation and as a biological control agent for M. roreri was evaluated. In the experiment, five Si treatments were used: T1 (4.00 kg ha-1), T2 (3.00 kg ha-1), T3 (2.00 kg ha-1) and T4 (1.5 kg ha-1) and a control treatment (without application). Production indicators, ear number, fresh and dry weight of almonds, dry weight of 100 almonds and crop yield were determined. In addition, the incidence and severity of the disease at 60, 120 and 180 days af ter the application of Si and the ef ficiency of the treatments. The significantly higher results for the variables: Production, ear number, fresh and dry weight of almond and dry weight of 100 almonds, were obtained by applying 4 kg ha-1 of Si, all doses of Si exceeded the control (P ≤ 0.05) in the variables related to production. In the control of the phytopathogen (M. roreri), the dose of 4 kg ha-1 Si decreased the incidence and severity of the disease by more than 50%. The application of Si can be an option in cocoa cultivation as a biostimulant and biological control agent for M. roreri.

Resumen: El empleo de rizobacterias tiene la capacidad de colonizar el sistema radicular, promover el crecimiento en plantas y la capacidad biocontroladora o suprimir hongos fitopatógenos. El objetivo de esta investigación fue seleccionar y analizar las rizobacterias fluorescentes solubilizadoras de nitrógeno, fósforo y potasio, productoras de enzimas líticas de actividad antagonistas hacia P. palmivora y L. theobromae. Las bacterias se aislaron del tejido radicular y foliar de cultivares endémicos de cacao CCN-51 de las provincias de Los Ríos, Santa Elena y Esmeralda. La caracterización de la actividad antagonista se apoyó en la selección de actividad proteolítica, producción de sideróforos y pigmentación fluorescente bajo luz ultra violeta. Además, se realizó la actividad antagonista mediante los extractos celulares. Se seleccionaron nueve cepas bacterianas (BF 567, FZ 9-7, LH 5-10, MH 4-20, MN 5-20, MN 5-19, AC3, PV-25) con producción de proteasa, sideróforos y emisión de fluorescencia. Se analizó la capacidad de las bacterias para solubilizar minerales complejos (nitrógeno, fosforo y potasio) su eficiencia de solubilización vario, oscilando entre 50 y 100%. El factor antagónico de los sobrenadantes celulares de FZ 9-7, BF 567 y PV-25 inhiben el crecimiento del micelio hacia P. palmivora y L. theobromae en un 40, 60 y 85%, respectivamente. La utilización de las rizobacterias podría usarse como biofertilizante alternativo a los fertilizantes químicos y control biológico de hongos fitopatógenos del suelo a través de sus emisiones volátiles.

Summary: The use of rhizobacteria has the ability to colonize the root system, promote plant growth and biocontrol or suppress phytopathogenic fungi. The objective of this research was to select and analyze fluorescent rhizobacteria solubilizing nitrogen, phosphorus and potassium, producing lytic enzymes with antagonistic activity towards P. palmivora and L. theobromae. The bacteria were isolated from root and leaf tissue of endemic CCN-51 cacao cultivars from the provinces of Los Ríos, Santa Elena and Esmeralda. Characterization of antagonistic activity was based on the selection of proteolytic activity, siderophore production and fluorescent pigmentation under ultra violet light. In addition, antagonistic activity was performed using cell extracts. Nine bacterial strains (BF 567, FZ 9-7, LH 5-10, MH 4-20, MN 5-20, MN 5-19, AC3, PV-25) with protease production, siderophore production and fluorescence emission were selected. The ability of the bacteria to solubilize complex minerals (nitrogen, phosphorus and potassium) was analyzed and their solubilization efficiency varied, ranging from 50 to 100 %. The antagonistic factor of cell supernatants from FZ 9-7, BF 567 and PV-25 inhibited mycelial growth toward P. palmivora and L. theobromae by 40, 60 and 85%, respectively. The use of rhizobacteria could be used as an alternative biofertilizer to chemical fertilizers and biological control of phytopathogenic soil fungi through their volatile emissions.

Resumen La principal enfermedad del café a nivel mundial es la roya causada por Hemileia vastatrix, que ocasiona pérdidas hasta del 40 % en la producción. El control biológico con hongos antagonistas representa una opción de manejo compatible con el ambiente. Se aislaron y evaluaron en condiciones de campo cepas de Trichoderma y Lecanicillium nativas de la zona cafetalera de Nayarit. En general las cepas de Lecanicillium presentaron mejor desempeño que las de Trichoderma con excepción de la cepa 39 en la protección de las hojas de café contra la roya con efectividades del 80 % y reducciones en la escala de daño a 1 y 2. Por lo anterior, estas cepas representan una buena opción en el control biológico de Hemileia vastatrix, en el área de estudio. Por otra parte, si no se aplican medidas de combate los porcentajes de infestación llegan al 85 % y los niveles de daño son del 3 y 4, provocando graves pérdidas en la producción del cultivo del café.

Abstract The main coffee disease worldwide is rust by Hemileia vastatrix, which causes losses of up to 40% in production. Biological control with antagonistic fungi represents a management option compatible with the environment. Trichoderma and Lecanicillium strains native to the coffee producing areas of Nayarit were isolated and evaluated under field conditions. In general, Lecanicillium strains showed better performance than Trichoderma strains, with the exception of strain 39, in protecting coffee leaves against Hemileia vastatrix rust, with 80 % effectiveness and reductions in the damage scale at 1 and 2. Therefore, these strains represent a good option for the biological control of Hemileia vastatrix in the study area. Besides, if combat measures are not applied, the infestation percentages reach 85 % and the damage levels are 3 and 4, causing severe coffee cultivation production losses.

Resumen Se analizaron muestras de suelo y raíces del cultivo del pepino. Se extrajeron e identificaron los nematodos fitopatógenos presentes. Juveniles de Meloidogyne incognita fueron los más abundantes en suelo, otros como Aphelenchoides sp., Pratylenchus sp., Tylenchorynchus sp., y Aphelenchus sp. se encontraron con menor presencia. De las raíces se obtuvieron hembras y huevos de M. incognita. Con el fin de encontrar alternativas a los productos químicos fumigantes utilizados en exceso, se evaluaron las rizobacterias Bacillus vallismortis, Bacillus velezensis y Pseudomonas fluorescens, que fueron fermentadas y filtradas para ponerse en contacto con estos nematodos bajo condiciones in vitro, observando su efecto cada 24 h. Los tratamientos se analizaron en concentraciones de 100 % y 50 %. El filtrado de P. fluorescens presentó la mejor actividad nematicida, ocasionando una mortalidad de 95 % en la concentración más alta y de 93 % en la concentración de 50 % a las 24 h, seguido por los tratamientos de B. vallismortis y B. velezensis con 83 y 77 % de respectivamente, en las concentraciones más altas. Los tres tratamientos ocasionaron un 100 % de mortalidad de los nematodos a 48 h de exposición, indicando, que contienen acción nematicida y pueden ser una alternativa viable para el control de estos fitopatógenos.

Abstract Soil and root samples of the cucumber crop were analyzed. Plant pathogenic nematodes present were extracted and identified. The juveniles of the root-knot nematode Meloidogyne incognita were the most abundant in soil, other such as Aphelenchoides sp., Pratylenchus sp., Tylenchorynchus sp., and Aphelenchus sp. were found in less presence. Females and eggs of M. incognita were obtained from the roots. Finding alternatives to chemicals fumigants, the rhizobacterias Bacillus vallismortis, Bacillus velezensis and Pseudomonas fluorescens were fermented and filtered to be evaluated on these filiform nematodes under laboratory conditions, observing their effect every 24 h. The treatments were evaluated at concentrations of 100 % and 50 %. The P. fluorescens filtrate was the treatment with the best nematicidal activity, causing a mortality of 95 % at the highest concentration and 93 % at the 50 % at 24 h, followed by the treatments of B. vallismortis and B. velezensis with 83 and 77 % respectively at concentrations of 100 % product. The three treatments showed 100 % mortality of the nematodes after 48 hours of exposure, indicating that these rhizobacteria contain metabolites with nematicidal action that could be a healthy alternative for the control of these phytopathogens.

Abstract Introduction: Biological monitoring in activated sludge wastewater treatment systems provides comprehensive results and serves as a complementary tool in operational control decisions. One such tool is the Sludge Biological Index (SBI), which is based on protozoa. However, there is limited data on this topic in Costa Rica. Objective: To evaluate the SBI as a bioindication tool in hospital wastewater. Methods: From February to April 2022, we collected a total of 36 samples from a Conventional Activated Sludge Treatment system and a Membrane Bioreactor (MBR) at a Costa Rican hospital. Results: The removal efficiency of BOD and COD was higher in the MBR; however, in both cases, the efficiency was high (greater than 85%), and this is related to the high SBI values. Nitrogen removal efficiency did not exceed 50% (MBR). No environmental parameter correlated with SBI values, but sludge age affected the SBI value. Conclusion: In both the conventional treatment system and the MBR, the average SBI values indicate good performance and high-quality activated sludge

Resumen Introducción: El monitoreo biológico en los sistemas de tratamiento de aguas residuales por lodos activados ofrece resultados integrales y es una herramienta complementaria en las decisiones de control operacional. Una herramienta para ello es el Índice Biológico de Lodos (IBL), basado en protozoos, pero en Costa Rica hay pocos datos sobre este tema. Objetivo: Evaluar el IBL como herramienta de bioindicación en agua residual hospitalaria. Métodos: De febrero a abril de 2022 tomamos, en un hospital costarricense, un total 36 muestras de un sistema de tratamiento por lodos activados Convencional y de un Biorreactor de Membrana (MBR). Resultados: La eficiencia de remoción del DBO y DQO fue mayor en el MBR, sin embargo, en ambos casos la eficiencia fue alta (mayor al 85%), y esto se relaciona con los altos valores de IBL. La eficiencia de remoción nitrógeno no superó el 50% (MBR). Ningún parámetro ambiental tuvo correlación con los valores de IBL, pero la edad del lodo afectó el valor de IBL. Conclusión: Tanto en el sistema de tratamiento convencional como en el MBR, los valores promedio de IBL demuestran un buen desempeño y una alta calidad de los lodos activados