Resumen: El uso continuo e inadecuado de agentes antimicrobianos, tradicionalmente utilizados en odontología, ha provocado el surgimiento de cepas bacterianas multirresistentes (MDR, por sus siglas en inglés), así como la mutación de microrganismos. Esta problemática ha propiciado el desarrollo de varias nanopartículas para combatir patógenos resistentes; las nanopartículas de dióxido de titanio (TiO2) han sido agentes antimicrobianos atractivos debido a su estabilidad química, no toxicidad y precursores económicos. Por lo tanto, las nanodispersiones basadas en TiO2 se exploraron preparándolas con agentes antimicrobianos bien conocidos, como el ácido hipocloroso (HOCl), para mejorar el efecto antimicrobiano. En este estudio, se sintetizaron y caracterizaron nanodispersiones de TiO2 NPs-HOCl basadas en sol-gel. El efecto antimicrobiano se evaluó mediante un ensayo de microdilución utilizando cepas de S. mutans, S. aureus, E. faecalis y C. albicans mediante la incubación de diferentes concentraciones de las nanodispersiones. Para evaluar los efectos citotóxicos, se inocularon células madre de la papila apical (SCAP) y se evaluaron mediante el ensayo MTT. La nanodispersión exhibió un efecto antimicrobiano mejorado, casi sin citotoxicidad. La nanodispersión basada en HOCl exhibió un mayor efecto antimicrobiano y alta estabilidad, por lo cual se puede utilizar como un agente antimicrobiano prometedor para el tratamiento de diversos patógenos dentales.

Abstract: The continuous and inappropriate use of antimicrobial agents, traditionally used in dentistry, has caused the emergence of multidrug-resistant (MDR) bacterial strains, as well as the mutation of microorganisms. This problem has led to the development of several nanoparticles to combat resistant pathogens. Titanium dioxide (TiO2) nanoparticles have been attractive antimicrobial agents because of their chemical stability, non-toxicity, and inexpensive precursors. Therefore, TiO2-based nanodispersions were explored by preparing them with well-known antimicrobial agents, such as hypochlorous acid (HOCl), to enhance the antimicrobial effect. In this study, sol-gel-based TiO2 NPs-HOCl nanodispersions were synthesized and characterized. The antimicrobial effect was assessed by a microdilution assay using S. mutans, S. aureus, E. faecalis, and C. albicans strains by incubating different concentrations of the nanodispersions. To evaluate the cytotoxic effects, stem cells from the apical papilla (SCAPs) were inoculated and evaluated using the MTT assay. The nanodispersion exhibited an enhanced antimicrobial effect, with almost no cytotoxicity. The HOCl-based nanodispersion exhibited a greater antimicrobial effect and high stability. Thus, it can be used as a promising antimicrobial agent for the treatment of various dental pathogens.

Summary: The use of rhizobacteria has the ability to colonize the root system, promote plant growth and biocontrol or suppress phytopathogenic fungi. The objective of this research was to select and analyze fluorescent rhizobacteria solubilizing nitrogen, phosphorus and potassium, producing lytic enzymes with antagonistic activity towards P. palmivora and L. theobromae. The bacteria were isolated from root and leaf tissue of endemic CCN-51 cacao cultivars from the provinces of Los Ríos, Santa Elena and Esmeralda. Characterization of antagonistic activity was based on the selection of proteolytic activity, siderophore production and fluorescent pigmentation under ultra violet light. In addition, antagonistic activity was performed using cell extracts. Nine bacterial strains (BF 567, FZ 9-7, LH 5-10, MH 4-20, MN 5-20, MN 5-19, AC3, PV-25) with protease production, siderophore production and fluorescence emission were selected. The ability of the bacteria to solubilize complex minerals (nitrogen, phosphorus and potassium) was analyzed and their solubilization efficiency varied, ranging from 50 to 100 %. The antagonistic factor of cell supernatants from FZ 9-7, BF 567 and PV-25 inhibited mycelial growth toward P. palmivora and L. theobromae by 40, 60 and 85%, respectively. The use of rhizobacteria could be used as an alternative biofertilizer to chemical fertilizers and biological control of phytopathogenic soil fungi through their volatile emissions.

Resumen: El empleo de rizobacterias tiene la capacidad de colonizar el sistema radicular, promover el crecimiento en plantas y la capacidad biocontroladora o suprimir hongos fitopatógenos. El objetivo de esta investigación fue seleccionar y analizar las rizobacterias fluorescentes solubilizadoras de nitrógeno, fósforo y potasio, productoras de enzimas líticas de actividad antagonistas hacia P. palmivora y L. theobromae. Las bacterias se aislaron del tejido radicular y foliar de cultivares endémicos de cacao CCN-51 de las provincias de Los Ríos, Santa Elena y Esmeralda. La caracterización de la actividad antagonista se apoyó en la selección de actividad proteolítica, producción de sideróforos y pigmentación fluorescente bajo luz ultra violeta. Además, se realizó la actividad antagonista mediante los extractos celulares. Se seleccionaron nueve cepas bacterianas (BF 567, FZ 9-7, LH 5-10, MH 4-20, MN 5-20, MN 5-19, AC3, PV-25) con producción de proteasa, sideróforos y emisión de fluorescencia. Se analizó la capacidad de las bacterias para solubilizar minerales complejos (nitrógeno, fosforo y potasio) su eficiencia de solubilización vario, oscilando entre 50 y 100%. El factor antagónico de los sobrenadantes celulares de FZ 9-7, BF 567 y PV-25 inhiben el crecimiento del micelio hacia P. palmivora y L. theobromae en un 40, 60 y 85%, respectivamente. La utilización de las rizobacterias podría usarse como biofertilizante alternativo a los fertilizantes químicos y control biológico de hongos fitopatógenos del suelo a través de sus emisiones volátiles.

ABSTRACT Colombia is the ninth largest producer of dragon fruit in the world and the department of Boyacá is the largest with 440 hectares planted. Bacterial phytopathogens can cause pitahaya fruit losses and low yields by producing stem soft rot. This research aimed to study and identified possible agents of bacterial diseases of pitahaya in Boyacá, Colombia. Thirteen farms in the region were selected to take 20 samples by means of a targeted and random sampling of stem and fruit tissues with soft rot symptoms in the early stages of the disease. A process of microbiological isolation, biochemical and molecular taxonomic identification of the isolated bacteria. The 16s rRNA gene sequences of the V2-V5 region were edited by removing the primers, assembling and obtaining the consensus sequence of the primers 1100R-337F and 800R -518F. The phylogenetic analysis was performed by BLAST at NCBI, using the "Classifier" and "SeqMatch" tools from the RDP website, and phylogenetic trees were created by multiple alignment using the MUSCLE algorithm and the Tamura Nei distance method was performed. Signs like blisters and mucilaginous fluids, symptoms like yellow and brown chlorotic spots, soft rot, and liquefaction were identified, and possible vectors like flies and ants were report. Twenty-five bacterial morphotypes were identified classifieds in 4 phyla, 9 families and 13 genera. The analysis of the 16S rRNA gene sequences of the bacterial strains showed a 98 to 100% identity with Enterobacter cloacae, Pectobacterium carotovora and Paenibacillus glucanolyticus, reported in other studies as causing the soft rot of the pitahaya stem and fruit. New species were reported as possible pathogenic bacteria of pitahaya: Pantoea cypripedii, Kluyvera intermedia and Klebsiella oxytoca. Infectivity assays did not have positive results. The microbiota identified in the stages of the necrotrophic phase or final stage of soft rot of the stem belong to the genera Achromobacter, Sphingobacterium, Pseudomonas, Klebsiella, Paenibacillus, Bacillus, Stenotrophomonas and Microbacterium. In the fly Leptoglossus zonatus associated with the crop were identified Pseudomonas fulva and Lysinibacillus fusiformis were identified. This is also the first official report of a complex of possible phytopathogen bacteria of the order Enterobacterales (Enterobacteriacea, Erwiniaceae and Pectobacteriaceae family) in symptoms by bacterial disease on pitahaya Colombian crops. Identification of the bacteria in a pathogenic system can guide chemical and biological control practices in order to increase the productive and export potential of exotic and orphan crops from small local farmings.

RESUMEN Colombia es el noveno productor de pitahaya amarilla en el mundo y el Departamento de Boyacá es el mayor productor con 440 hectáreas plantadas. Los fitopatógenos bacterianos pueden causar pérdidas de frutos de pitahaya y bajos rendimientos al producir la pudrición blanda de los tallos. El objetivo de esta investigación fue estudiar e identificar posibles agentes de enfermedades bacterianas de la pitahaya en Boyacá, Colombia. Trece (13) fincas de la región fueron seleccionadas para la toma de 20 muestras mediante un muestreo dirigido y al azar de tejidos de tallo y frutos con síntomas de pudrición blanda en estadios iniciales de la enfermedad. Se realizó un proceso de aislamiento microbiológico, identificación bioquímica y taxonómica molecular de las bacterias aisladas. Las secuencias del gen ARNr 16s de la región V2-V5 fueron editadas mediante la eliminación de los primers, ensamblaje y obtención de la secuencia consenso de los primers 1100R-337F y 800R -518F. El análisis filogenético fue hecho por BLAST en el NCBI, por las herramientas "Classifier" y "SeqMatch", del sitio Web del RDP y se realizaron árboles filogenéticos mediante alineamiento múltiple usando el algoritmo MUSCLE y el método de distancias de Tamura Nei. Se registraron signos como ampollas y fluidos mucilaginosos, síntomas como manchas cloróticas amarillas y marrones, pudrición blanda y licuefacción, y se reportaron posibles vectores como moscas y hormigas. Veinticinco (25) morfotipos de bacterias fueron clasificados en 4 filos, 8 familias y 13 géneros. El análisis de las secuencias del gen ARNr 16S de las cepas bacterianas mostró una identidad del 98 al 100% con Enterobacter cloacae, Pectobacterium carotovora y Paenibacillus glucanolyticus, reportados en otros estudios como causantes de la pudrición blanda del tallo y fruto de pitahaya. Se reportaron nuevas especies como posibles bacterias patógenas de pitahaya: Pantoea cypripedii, Kluyvera intermedia y Klebsiella oxytoca. Los ensayos de infectividad no arrojaron resultados positivos. La microbiota identificada en los estadios de la fase necrotrofa o final de la pudrición blanda del tallo podría estar conformada por los géneros Achromobacter, Sphingobacterium, Pseudomonas, Klebsiella, Paenibacillus, Bacillus, Stenotrophomonas y Microbacterium. En la mosca Leptoglossus zonatus asociada al cultivo se identificó Pseudomonas fulva y Lysinibacillus fusiformis. Este es el primer registro oficial de un complejo de posibles bacterias fitopatógenas del orden Enterobacterales (familia Enterobacteriaceae, Erwiniaceae y Pectobacteriaceae) en síntomas por enfermedad bacteriana en cultivos colombianos de pitahaya. La identificación de las bacterias de un pato-sistema puede orientar las prácticas de control químico y biológico con el fin de incrementar el potencial productivo y de exportación de los cultivos exóticos y huérfanos de las pequeñas fincas locales.

RESUMEN Introducción: La contaminación microbiológica de las aguas de los Hospitales puede estar asociada a la aparición de brotes de infecciones y los microorganismos resistentes a antimicrobianos pueden proliferar en aguas que no se tratan debidamente. Objetivo: Evaluar los perfiles de resistencia de cepas bacterianas aisladas en muestras de agua de Establecimientos Sanitarios. Material y métodos: estudio descriptivo, transversal. Se efectuaron pruebas de sensibilidad a 55 cepas bacterianas aisladas de muestras de agua potable de tanques y de agua tratada de pozos artesianos de Establecimientos Sanitarios de 22 distritos del Departamento Caaguazú. Las técnicas utilizadas fueron antibiogramas (Kirby-Bauer), técnicas fenotípicas y pruebas enzimáticas (Rapidec carba NP). Los resultados se interpretaron acorde al Clinical & Laboratory Standards Institute (CLSI). Resultados: Se observaron mayormente perfiles de resistencia intrínsecos; en los aislados de Enterobacterales se hallaron Betalactamasas tipo AmpC, Betalactamasas de Espectro Extendido (BLEE) y Carbapenemasas, en los aislados de Pseudomonas aeruginosa se observaron Betalactamasas tipo AmpC. No obstante, se detectaron 13,3% aislados multidrogoresitentes de la especie complejo Enterobacter cloacae. Conclusión: Debido al hallazgo de cepas con alta resistencia antibiótica, se recomienda optimizar las técnicas de tratamiento del agua y de mantenimiento de las fuentes de suministro de agua, en los Establecimientos Sanitarios, con el fin de erradicar las bacterias resistentes y prevenir brotes infecciosos.

ABSTRACT Introduction: Microbiological contamination of Hospital water can be associated with the appearance of outbreaks of infections and microorganism resistant to antimicrobials can proliferate in water that is not properly treated. Objetive: To evaluate the resistance profiles of bacterial strains isolated in water samples from Health Centers. Methodology: descriptive, cross-sectional study. Sensitivity tests will be carried out on 55 bacterial strains isolated in samples of drinking water from tanks and treated water from artesian wells of health centers in the 22 districts of the Department of Caaguazú. The techniques used were antibiograms (Kirby-Bauer), phenotypic techniques and enzyme tests (Rapidec carba NP). The results were interpreted according to the Clinical & Laboratory Standards Institute (CLSI). Results: Intrinsic resistance profiles were mostly observed; AmpC-type Beta-lactamases, Extended Spectrum Beta-lactamases and Carbapenemases were found in the Enterobacterales strains. AmpC-type beta-lactamases were observed in Pseudomonas aeruginosa strains. Nevertheless, 13.3% multidrug-resistant strains of the Enterobacter cloacae Complex species were detected. Conclusion: Due to the finding of strains with high resistance to the antibiotics tested, it is recommended to optimize water treatment techniques and maintenance of water supply sources, of Health Centers, in order to eradicate resistant bacteria and prevent infectious outbreaks.

Abstract Introduction: From a microbiological point of view, Staphylococcus aureus is one of the main contaminants causing foodborne illnesses, with symptoms such as nausea, vomiting, diarrhea, abdominal cramps, joint or back pain and fatigue. Bacterial resistance of pathogenic bacteria has recently been found to be a public health problem. An alternative is the use of microencapsulated probiotics for the inhibition of pathogenic microorganisms such as Lactobacillus casei. Objective: Evaluate microencapsulated Lactobacillus casei ATCC 393® under in-vitro conditions simulating the gastrointestinal environment and the inhibitory potential on Staphylococcus aureus ATCC BAA 1708®. Materials and methods: Reconstitution, seeding and adjustment of the inoculum; antibiogram of the two bacterial strains; fermentation kinetics of Lactobacillus casei; identification of peptides, amino acids and lactic acid of the supernatant; resistance of Lactobacillus casei to different temperatures (37 °C and 45 °C); microencapsulation of Lactobacillus casei; study, characterization and exposure to simulated gastrointestinal conditions of the microencapsulate after 90 days of storage and production of Exopolysaccharides. Results: The results indicate inhibitory action of the Lactobacillus casei strain against pathogenic bacteria; exponential phase at 15 hours (MRS culture medium) and 18 hours (PRO culture medium); results of the microencapsulation study and analysis: viability 100 %; efficiency 84,64 %; humidity 4,0 %; solubility 99,8 %; wettability 2 min with 22 seconds; water activity 0,617 and particle size between 2,10 μm and 5,28 μm. Conclusion: It was concluded that the microencapsulated Lactobacillus casei showed inhibitory properties against the pathogenic strain.

Resumen Introducción: Desde un punto de vista microbiológico, Staphylococcus aureus es uno de los principales contaminantes causante de enfermedades de trasmisión alimentaria, con síntomas como náuseas, vómitos, diarrea, calambres abdominales, dolor articular o de espalda y fatiga. Recientemente, se ha encontrado resistencia bacteriana de bacterias patógenas siendo un problema de salud pública. Una alternativa es la utilización de probióticos microencapsulados para la inhibición de microorganismos patógenos como Lactobacillus casei. Objetivo: Evaluar Lactobacillus casei ATCC 393® microencapsulada bajo condiciones in vitro que simulan el ambiente gastrointestinal y potencial inhibitorio sobre Staphylococcus aureus ATCC BAA 1708®. Materiales y métodos: Reconstitución, siembra y ajuste de inóculo; antibiograma de las dos cepas bacterianas; cinética de fermentación de Lactobacillus casei; identificación de péptidos, aminoácidos y ácido láctico de sobrenadante; resistencia de Lactobacillus casei a diferentes temperaturas (37 °C y 45 °C); microencapsulación de Lactobacillus casei; estudio, caracterización y exposición a condiciones gastrointestinales simuladas del microencapsulado después de 90 días de almacenamiento y producción de Exopolisacáridos. Resultados: Los resultados indican acción inhibitoria de la cepa Lactobacillus casei frente a la bacteria patógena; fase exponencial a las 15 horas (medio de cultivo MRS) y a las 18 horas (medio de cultivo PRO); resultados del estudio y análisis del microencapsulado: viabilidad 100 %; eficiencia 84,64 %; humedad 4,0 %; solubilidad 99,8 %; humectabilidad 2 min con 22 segundos; actividad de agua 0,617 y tamaño de partícula entre 2,10 μm y 5,28 μm. Conclusión: Se concluyó que Lactobacillus casei microencapsulado presentó propiedades inhibitorias frente a la cepa patógena.

RESUMEN: El objetivo principal de este estudio es aislar, seleccionar y determinar la capacidad promotora del crecimiento vegetal de rizobacterias en el tocón y el árbol de algarrobo a nivel de laboratorio y de semillas, con el fin de poder tener un banco de cepas que pueda usarse para la reforestación del bosque seco en Piura. Se obtuvieron dos muestras compuestas de suelo rizosférico: una de tocones (árboles talados) y otra de árboles de algarrobo, de las cuales se aislaron 16 y 18 cepas bacterianas, respectivamente. A nivel de laboratorio, se evaluó la capacidad de fijar nitrógeno libre y producir ácido indolacético, actividad celulolítica y solubilizadora de fosfatos. Por cada muestra de suelo se escogieron cinco cepas con propiedades no antagonistas sino más bien complementarias entre sí, para hacer un inoculante líquido y evaluar su efecto en la germinación de semillas. Se encontró porcentajes de germinación de 53 % para tocones, 37 % para árboles y 34 % para el control (agua). Las cepas de los inoculantes fueron identificadas molecularmente como un Actinomicetos y otras cepas de Bacillus sp., B. paramycoides, B. wiedmannii, B. thuringiensis y B. subtilis. Por lo tanto, se demostró que la rizosfera de algarrobo de bosque seco, ya sea como árbol o tocón, es una fuente importante de rizobacterias con capacidad promotora vegetal, que puede ser usada para reforestar el bosque seco.

SUMMARY: The main objective of this study is to isolate, select, and determine the vegetal growth-promoting capacity of rhizobacteria of Algarrobo trees and stumps at the seed and laboratory levels, with the purpose of selecting strains that could be used for reforestation of dry forest in Piura. Two composite samples of rhizosphere soil were obtained: one from stumps (felled trees) and the other from algarrobo trees, of which 16 and 18 bacterial strains were isolated, respectively. Measurements at a laboratory level included free nitrogen fixation, indolacetic acid, cellulolytic, and phosphate solubilizing production capacity. For each soil sample, five strains were selected with complementary (not antagonistic) properties to make an inoculating liquid and evaluate its effect on seed growth: 53 % for stumps, 37 % for trees, and 34 % for control (water). Inoculant strains were molecularly identified as Actinomycetes and other strains as Bacillus sp., B. paramycoides, B. wiedmannii, B. thuringiensis, and B. subtilis. Therefore, it was demonstrated that the rhizosphere of a dry forest carob, whether as a tree or stump, is an important source of rhizobacteria with plant-promoting capacity, which can be used to reforest the dry forest.

ABSTRACT Climate change has caused droughts in regions that previously did not have water issues, affecting the production of medicinal plants grown in small-scale agricultural units. Plants such as lemon balm, Melissa officinalis L., are sensitive to water stress, which reduces their yield. One alternative to mitigate water stress is the use of plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR). However, in the high tropics of Colombia, the use of these microorganisms is not common due to a lack of knowledge about how they can improve water absorption and increase the yield of medicinal plants. This study aimed to determine the effect of native PGPR on lemon balm plants subjected to water stress conditions using a completely randomized design with six treatments and four replications. Applications of Bacillus cereus and Bacillus amyloliquefaciens were made, and the plants were subjected to two water levels (field capacity and 50% field capacity). Physiological variables of stomatal conductance, chlorophyll content, and fluorescence were measured at the end of the experiment. Bacillus cereus significantly improved growth parameters such as number of leaves (115.00±34.71), fresh weight of root (5.51±3.07 g) and shoot (8.32±4.27), Bacillus amyloliquefaciens increased stomatal conductance (401.3 μmol H2O m2 s1) in water-stressed plants. These results suggest that the use of native PGPR considerably improves the growth and development parameters of lemon balm plants and provides a viable alternative for farmers to enhance yield and resistance to water stress conditions.

RESUMEN El cambio climático ha causado sequías en regiones que anteriormente no tenían problemas hídricos, afectando la producción de plantas medicinales cultivadas en unidades agrícolas pequeñas. Plantas como Melissa officinalis L. (toronjil) son sensibles al estrés hídrico, lo que reduce su rendimiento. Una alternativa para reducir el impacto hídrico es el uso bacterias promotoras del crecimiento vegetal (PGPR). Sin embargo, en los trópicos altos de Colombia, el uso de estos microorganismos no es común debido a la falta de conocimiento sobre cómo pueden mejorar la absorción de agua y aumentar el rendimiento de las plantas medicinales. Este estudio tuvo como objetivo determinar el efecto de PGPR nativas en plantas de toronjil sometidas a condiciones de estrés hídrico, se utilizó un diseño completamente aleatorizado DCA con seis tratamientos y cuatro repeticiones, se realizaron aplicaciones de Bacillus cereus y Bacillus amyloliquefaciens y las plantas se sometieron a dos niveles de hídricos (capacidad de campo y 50% de capacidad de campo), se midieron las variables fisiológicas de conductancia estomática, contenido de clorofila y fluorescencia al finalizar el experimento. Bacillus cereus mejoró número de hojas (115,00±34,71), peso fresco de raíces (5,51±3,07 g) y brotes (8,32±4,27), Bacillus amyloliquefaciens aumentó la conductancia estomática (401,3μmol H2O m2 s1) en plantas sometidas a estrés hídrico. Estos resultados sugieren que el uso de PGPR nativas mejora considerablemente los parámetros de crecimiento y desarrollo de las plantas de toronjil, proporcionando una alternativa viable para los agricultores con el fin de mejorar el rendimiento y la resistencia a condiciones de estrés hídrico.

RESUMEN El programa de mejoramiento de alfalfa requiere alternativas más amigables con el ambiente para incrementar la sanidad del cultivo. Las rlzobacterlas promotoras del crecimiento vegetal (RPCV) y endófltos de semillas constituyen una opción para inhibir hongos patógenos por la producción de compuestos antifúngicos o enzimas hidrolíticas. En Argentina, la alfalfa es afectada principalmente por Colletotr¡chum trifolii (Ct) y Phytophthora megasperma (Pm). Los objetivos fueron seleccionar bacterias con capacidad antifúngica contra Ct y Pm, e identificar una compatible con el rizobio INTA5 con baja emisión de N2O para constituir un consorcio bacteriano sustentable. Diez cepas mostraron capacidad antifúngica con medias de porcentaje de inhibición (PI) entre 41,74-91,28 para Ct y 56,23-77,59 relativos al control para Pm. B2, B4, SC6 y MN1 fueron seleccionadas por su mayor capacidad de biocontrol y se estudió la compatibilidad con INTA5. Sólo B4 resultó compatible, por ello fue evaluada contra Ct sobre plántulas de alfalfa en experimentos bajo condiciones controladas. Esta cepa incrementó el número de plántulas sobrevivientes cuando las mismas fueron inoculadas con Ct. La disponibilidad de un consorcio bacteriano que estimule tanto el biocontrol como la fijación biológica de nitrógeno representa la estrategia preferida por el programa de mejoramiento de alfalfa.

ABSTRACT Alfalfa breeding programs require environmentally friendly alternatives to improve plant growth and health. Plant Growth Promoting Rhizobacteria (PGPR) and endophytic bacteria offer a biological solution as they can inhibit phytopathogenic fungi by producing antifungal compounds or enzymes. In Argentina, alfalfa is primarily affected by Colletotrchum trifolii (Ct) and Phytophthora megasperma (Pm). The objectives of this study were to select bacterial isolates with antifungal inhibition against Ct and Pm and identify a biocontroller isolate compatible with the rhizobia INTA5 has and with low-N2O emissions, to constitute an eco-friendly bacterial consortium. Ten isolates demonstrated antifungal inhibition, with mean Inhibition Percentage (IP) values between 41.74-91.28 for Ct and 56.23-77.59 for Pm compared to the control. Among these isolates, B2, B4, SC6, and MN1 showed the highest inhibition performance and were selected to evaluate their compatibility with INTA5. Only B4 exhibited compatibility, which was further evaluated against Ct in an experiment with alfalfa seedlings under controlled conditions. The alfalfa seedlings treated with B4 increased the plant survival number against Ct. The availability of a bacterial consortium that promotes biocontrol and biological nitrogen fixation represents the preferred strategy for alfalfa breeding programs.

Abstract The development of living beings depends on the health and chemical quality of the available water. In recent years, the importance of the environment in the spread of resistant and multi-resistant bacteria to antibiotics has been observed, a situation that has placed the problem of antibiotic resistance on a broader level and which is being studied from the perspective “One Health”. The objective of this work was to determine the presence of multi-resistant bacteria to antibiotics in irrigation water samples from the Chibunga river. Fourteen water samples of 100 mL each were collected in sterile containers and aseptically, were kept under refrigeration until analysis in the laboratory. Each sample was seeded by the surface seeding method on blood, cystine electrolyte deficient, MacConkey, Salmonella-Shigella and thiosulfate citrate bile sucrose agars, incubating in all cases at a temperature of 37 °C for a maximum time of 48 hours. The identification of bacterial colonies was carried out through physiological and biochemical tests according to the identification schemes indicated by MacFaddin. The resistance/sensitivity to antibiotics of the identified colonies was carried out by the disk diffusion method of Kirby Bauer. Two species of multi-resistant bacteria were identified, including strains of Morganella morgani and Plesiomonas shigelloides resistant to antibiotics of clinical use such as ceftazidime, aztreonam, ciprofloxacin, nalidixic acid and trimethoprim-sulfamethoxazole. The results show that the waters of Chibunga river harbor bacteria with multi-resistance to antimicrobials, representing a contamination risk of agricultural products harvested in its vicinity, as well as for the people who use these waters.

Resumen El bienestar y desarrollo de los seres vivos depende de la calidad sanitaria y química del agua disponible. En los últimos años se ha venido observando la importancia del ambiente en la diseminación de bacterias resistentes y multirresistentes a los antibióticos, situación que ha colocado la problemática de la resistencia en un plano más amplio y que se está estudiando desde la perspectiva “One Health”. En este sentido, el objetivo del presente trabajo fue determinar la presencia de bacterias multirresistentes a los antibióticos en muestras de agua de riego provenientes del río Chibunga. Se recolectaron 14 muestras de agua de un volumen de 100 mL cada una, en envases estériles y de manera aséptica, las cuales fueron conservadas bajo refrigeración hasta su análisis en el laboratorio. Cada muestra fue sembrada por el método de siembra en superficie en los agares cistina electrolito deficiente, MacConkey, Salmonella-Shigella, tiosulfato citrato bilis sacarosa y agar sangre, incubándose en todos los casos a una temperatura de 37 °C durante un tiempo máximo de 48 horas. La identificación de las colonias bacterianas se realizó mediante pruebas fisiológicas y bioquímicas de acuerdo con los esquemas de identificación indicados por MacFaddin. El perfil de susceptibilidad a los antibióticos de las colonias identificadas se realizó por el método de difusión en disco de Kirby Bauer. Se lograron identificar 2 especies de bacterias multirresistentes, entre ellas, cepas de Morganella morganii y Plesiomonas shigelloides resistentes a antibióticos de uso clínico como ceftazidima, aztreonam, ciprofloxacino, ácido nalidíxico y trimetroprim-sulfametoxazol. Los resultados muestran que las aguas del río Chibunga albergan bacterias con multirresistencia a los antimicrobianos, representando un riesgo de contaminación de los productos agrícolas cosechados en sus inmediaciones, así como para las personas que utilizan estas aguas.

ABSTRACT Introduction: The discharge of hospital wastewater leads to the establishment of microorganisms from human biota in aquatic ecosystems. This is risky, as there is the possibility of horizontal gene transfer of antibiotic resistance genes from bacteria to other bacterial strains in the aquatic ecosystem and the environment in general, contributing to the expansion of bacterial resistance to antibiotics and the therapeutic ineffectiveness of these medicines. Objective: To demonstrate the environmental risk due to discharge of wastewater from a hospital into an urban river in Santa Clara, Cuba. Materials and Methods: Bacteria were isolated from sediment and soil from the banks of the Bélico river and their resistance to parenteral antibiotics for intra-hospital use employed between 2015 and 2019 was determined. If positive, the environmental risk of these medicines in terrestrial surface waters was estimated, and the resistance of in-hospital strains was assessed. Results and Discussion: All isolated bacterial strains were resistant to at least one of the parenteral antibiotics for intra-hospital use employed in the period under study. All antibiotics were environmentally risky in terrestrial surface waters. There was a high antibiotic resistance of the strains isolated from hospitalized patients. Conclusions: The discharge of untreated wastewater into the Bélico river led to the establishment of bacterial strains which can have a negative impact on the environment, including human health.

RESUMEN Introducción: El vertimiento de aguas residuales hospitalarias conduce al establecimiento de microorganismos de la biota humana en ecosistemas acuáticos. Lo anterior es riesgoso, al existir la posibilidad de transferencia génica horizontal de genes de resistencia de antibióticos de las bacterias a otras cepas bacterianas del ecosistema acuático y del ambiente en general; contribuyendo a la expansión de la resistencia bacteriana a antibióticos y la inefectividad terapéutica de estos medicamentos. Objetivo: Demostrar el riesgo ambiental por vertimiento de aguas residuales de un hospital a un río urbano en Santa Clara, Cuba. Materiales y Métodos: Se aislaron bacterias del sedimento y suelo de la ribera del río Bélico y se determinó su resistencia a los antibióticos parenterales de uso intrahospitalario empleados entre 2015 y 2019. De ser esta positiva, se estimó el riesgo ambiental de estos medicamentos en aguas superficiales terrestres y se valoró la resistencia de cepas intrahospitalarias. Resultados y Discusión: Todas las cepas bacterianas aisladas fueron resistentes al menos a uno de los antibióticos parenterales de uso intrahospitalario empleados en el período objeto de estudio. Todos los antibióticos resultaron ambientalmente riesgosos en aguas superficiales terrestres. Existió una elevada resistencia microbiana a antibióticos en las cepas aisladas de pacientes hospitalizados. Conclusiones: El vertimiento de las aguas residuales sin tratar al río Bélico, condujo al establecimiento de cepas bacterianas que pueden tener un impacto negativo en el ambiente, incluyendo la salud humana.

Abstract: Since 1941, outbreaks of Neisseria meningitidis have been recorded in Chile which, to date, have varied according to clinical form, incidence, lethality, and the responsible serogroup. Objective: To summarize the available evidence on the epidemiological profile of acute bacterial meningitis due to Neisseria meningitidis in Chile, analyzing the incidence between 1990 and 2019. Method: A systematized review of primary articles was carried out following the Cochrane Collaboration standards. The information sources were PubMed, Scielo, and LILACS. Publications on acute bacterial meningitis due to Neisseria meningitidis were included, with a descriptive design, and in English and Spanish. Studies on the effectiveness of vaccines and diagnostic techniques were excluded. Results: Between 1990 and 2019, the evidence collected focuses exclusively on the year 2012. Of the 133 cases of invasive meningococcal disease (IMD) reported that year, 42 cases presented with meningitis. Of the IMD cases caused by serogroup W135 strains, 21.7% of the cases presented with meningitis (13 cases), compared with the “Non-W135” strains, in which it was 67.4% (29 cases). Lethality due to IMD was higher in patients affected by serogroup W135 (26.7%), compared with patients affected by serogroup “Non-W135” (13.9%). Discussion: The year 2012 shows a change in the prevalent serogroup from serogroup B to W, with a decrease in cases of meningitis and an increase in cases of meningo- coccemia and the lethality of IMD.

Resumen: Desde el año 1941 que en Chile han sido registrados brotes de Neisseria meningitidis, los cuales a la fecha han ido variando según forma clínica, incidencia, letalidad y serogrupo responsable. Objetivo: Resumir la evidencia disponible sobre el perfil epidemiológico de la meningitis bacteriana aguda por Neisseria meningitidis en Chile, analizando la incidencia entre los años 1990 y 2019. Método: Revisión sistematizada de artículos primarios siguiendo los estándares de la Cochrane Colaboration. Las fuentes de información fueron PubMed, Scielo y LILACS. Fueron incluidas publicaciones acerca de meningitis bacteriana aguda por Neisseria meningitidis, de diseño descriptivo y en idioma inglés y español; fueron excluídos estudios sobre efectividad de vacunas y técnicas de diagnóstico. Resultados: Durante el período comprendido entre 1990 y 2019, la evidencia recopilada se centra exclusivamente en el año 2012. De los 133 casos de Enfermedad meningocócica invasora (EMI) reportados aquel año, 42 casos cursaron con meningitis. De los casos de EMI causados por cepas del serogrupo W135, el 21,7% de los casos cursó con meningitis (13 casos), en comparación a las cepas “No W135”, en el cual fue el 67,4% (29 casos). La letalidad por EMI fue más alta en los pacientes afectados por el serogrupo W135 (26,7%), en comparación a los pacientes afectados por serogrupo “No W135” (13,9%). Discusión: El año 2012 evidencia un cambio de serogrupo prevalente desde el serogrupo B al W, existiendo una disminución en los casos de meningitis y aumentando los de meningococcemia y la letalidad de la EMI.

RESUMEN El objetivo del estudio fue aislar, caracterizar e identificar la bacteria Shewanella algae a partir de muestras de órganos internos de tilapias (Oreochromis niloticus) enfermas, las cuales estuvieron cultivadas con tecnología biofloc en Lima, Perú; además, se describieron los cambios histopatológicos provocados por el patógeno. Se muestrearon 85 tilapias que presentaron signos clínicos de enfermedad como exoftalmia, melanosis y nado errático. Se aislaron siete cepas bacterianas las cuales fueron caracterizadas a través de pruebas bioquímicas y confirmadas como S. algae mediante la técnica de PCR y secuenciamiento del gen RNAr 16S. Las cepas mostraron susceptibilidad antibiótica a florfenicol, ácido nalidíxico, gentamicina, flumequina, kanamicina y sulfatrimetoprim. Los hallazgos histopatológicos fueron hiperplasia interlamelar, epicarditis, miocarditis, enteritis, necrosis en estómago y congestión en diversos tejidos.

ABSTRACT The aim of this study was to isolate, characterize and identify the Shewanella algae bacteria from internal organ samples of diseased tilapia (Oreochromis niloticus), which were cultivated using biofloc technology in Lima, Peru; In addition, the histopathological changes caused by the pathogen were described. In total, 85 tilapias were sampled that presented clinical signs of disease such as exophthalmia, melanosis and erratic swimming. Seven bacterial strains were isolated, which were characterized through biochemical tests and confirmed as S. algae using the PCR technique and sequencing of the 16S rRNA gene. The strains showed antibiotic susceptibility to florfenicol, nalidixic acid, gentamicin, flumequine, kanamycin and sulfamethoxazole trimethoprim. The histopathological findings were interlamellar hyperplasia, epicarditis, myocarditis, enteritis, necrosis in the stomach and congestion in various tissues.

Abstract The objective of this research was to identify bacteria present in the microbiota of dentinal carious lesions in primary molars of some Costa Rican pediatric patients. Data were collected from 15 children aged between 4 and 8 years old who attended the Pediatric Dentistry Clinic at the Faculty of Dentistry from the University of Costa Rica (UCR). The inclusion criteria were: infants between 4 and 8 years old who presented cavitated carious lesions in primary teeth, who were actively attended by students at the Faculty of Dentistry from the UCR, and whose parents or legal guardians signed the informed consent to participate in this research. Samples were taken using a sterile spoon, placed in storage vials, and subjected to various conventional and molecular microbial identification techniques, such as Gram stain identification, catalase tests, oxidase, TSI, API 20E, API STAPH, and VITEK 2. Of the 60 bacterial strains subjected to Gram staining, the following was obtained: 28 Gram-positive bacteria and 32 Gram-negative bacteria. The main isolated organisms were species of Staphylococcus epidermidis, Pasteurella pneumotropica/Mannheimia haemolytica, Pantoea spp, and Streptococcus mutans.

Resumen El objetivo de esta investigación fue identificar las bacterias presentes en la microbiota de lesiones cariosas dentinales en molares primarias de pacientes pediátricos costarricenses. Las muestras fueron recolectadas de 15 niños entre los 4 y 8 años que fueron atendidos en la Clínica de Odontopediatría en la Facultad de Odontología de la Universidad de Costa Rica (UCR). Los criterios de inclusión fueron: pacientes entre los 4 y los 8 años de edad que presentaran lesiones cariosas cavitadas en dientes primarios, que se encuentraran activos para su atención por estudiantes de la Facultad de Odontología de la UCR, y que los padres o encargados legales firmaran el consentimiento informado para participar en esta investigación. Las muestras se tomaron utilizando una cuchareta estéril, colocándolas en viales de almacenamiento y fueron sometidas a diversas técnicas de identificación microbiana convencionales y moleculares tales como: identificación por Tinción de Gram, pruebas catalasa, oxidasa, TSI, API 20E, API STAPH y VITEK. De las 60 cepas bacterianas sometidas a tinción de Gram se obtuvo: 28 bacterias Gram Positivas y 32 bacterias Gram Negativas. Los principales organismos aislados fueron: especies de Staphylococcus epidermidis, Pasteurella pneumotropica/ Mannheimia haemolytica, Pantoea spp y Streptococcus mutans.

ABSTRACT The objective was to determine the presence of carbapenem resistance genes and plasmid resistance to colistin (mcr-1) in bacteria isolated from Musca domestica in a garbage dump near a hospital in Lima, Peru. Bacteria with phenotypic resistance to carbapenemics were isolated on CHROMagar mSuperCARBATM medium and colistin resistance profiling was performed using the colistin disk elution method. Detection of blaKPC, blaNDM, blaIMP, blaOXA-48, blaVIM and mcr-1 genes was performed by conventional PCR. The antimicrobial susceptibility profile was determined using the automated MicroScan system. We found that 31/38 strains had phenotypic resistance to carbapenemics and 26/38 strains had phenotypic resistance to colistin with a minimum inhibitory concentration ≥ 4 µg/ml. Finally, we identified seven bacterial strains with carbapenem resistance genes (OXA-48 and KPC) and one bacterial strain with plasmid resistance to colistin (mcr-1). One Escherichia coli strain had three resistance genes: KPC, OXA-48 and mcr-1.

RESUMEN El objetivo fue determinar la presencia de genes de resistencia a carbapenémicos y resistencia plasmídica a colistina (mcr-1) en bacterias aisladas de Musca domestica en un basural cercano a un hospital de Lima, Perú. Las bacterias con resistencia fenotípica a los carbapénemicos se aislaron en medio CHROMagar mSuperCARBATM y el perfil de resistencia a colistina se realizó mediante el método de elución de discos de colistina. La detección de genes blaKPC, blaNDM, blaIMP, blaOXA-48, blaVIM y mcr-1 se realizó mediante PCR convencional. El perfil de susceptibilidad antimicrobiana se determinó mediante el sistema automatizado MicroScan. Las bacterias con resistencia fenotípica a carbapenémicos fueron 31/38 cepas y a colistina fueron 26/38 cepas con una concentración inhibitoria mínima ≥ 4 µg/ml. Finalmente, se identificaron siete cepas bacterianas con genes de resistencia a carbapenémicos (OXA-48 Y KPC) y una cepa bacteriana con resistencia plasmídica a colistina (mcr-1). Una cepa de Escherichia coli presentó tres genes de resistencia: KPC, OXA-48 y mcr-1.

Abstract Introduction: Sea urchin aquaculture is a rising industry, and in consequence, there is a need to establish optimal culture parameters to ensure the health of the cultured animals. Objective: To evaluate the bacterial counts in the seawater of sea urchin (Arbacia dufresnii) aquaculture recirculating systems (RAS). Methods: The bacteriological water quality of two RAS containing sea urchins was determined. For approximately two months, weekly water samples were taken. The bacteriological quality was determined by counting total aerobic heterotrophic populations, lactic acid bacteria, enterobacterias and genus Vibrio. Physicochemical parameters were also measured. Results: There was no presence of disease or mortality. Enterobacteria and lactic acid bacteria were not detected from both RAS systems. The number of animals had an important effect on the observed difference in the count of total bacteria and Vibrio spp. In RAS 1 the maximum counts of total bacteria and Vibrio spp. were 2.8 x 105 ± 1.7 x 105 and 1.45 x 105 ± 3.6 x 104 UFC ml-1, respectively. In RAS 2 total bacteria and Vibrio spp. exhibited repetitive behavior over time influenced in part by water exchange and mainly by feeding. The results indicate that periodic water changes ensure a limited growth of bacterial strains as Vibrio and other bacteria. Conclusions: Our results suggests that the bacterial count levels recorded in this study can be used as a threshold or safety limit for Arbacia dufresnii aquaculture.

Resumen Introducción: La acuicultura de erizos de mar es una industria en auge, y en consecuencia, existe la necesidad de establecer los parámetros de cultivo óptimos para garantizar la salud de los animales en cultivo. Objetivo: Evaluar los recuentos bacterianos en el agua de cultivo de los sistemas de recirculación acuícola (RAS) de erizo de mar Arbacia dufresnii. Métodos: Se determinó la calidad bacteriológica del agua de cultivo de dos RAS que contenían erizos de mar. Durante aproximadamente dos meses, se tomaron muestras de agua semanalmente. La calidad bacteriológica se determinó realizando recuento de las poblaciones heterótrofas aerobias totales, bacterias ácido lácticas, enterobacterias y bacterias del género Vibrio. También se midieron parámetros fisicoquímicos. Resultados: No se observaron patologías ni mortalidad. No se detectaron enterobacterias ni bacterias del ácido láctico en ninguno de los sistemas RAS. El número de animales cultivados tuvo un efecto importante en la diferencia observada en el recuento de bacterias totales y Vibrio spp. En el RAS 1 los recuentos máximos de bacterias totales y Vibrio spp. fueron 2.8 x 105 ± 1.7 x 105 y 1.45 x 105 ± 3.6 x 104 UFC ml-1, respectivamente. En RAS 2 los recuentos de bacterias totales y Vibrio spp. exhibieron un comportamiento repetitivo en el tiempo influenciado en parte por el recambio de agua y principalmente por la alimentación. Los resultados indican que los cambios periódicos de agua aseguran un crecimiento limitado de cepas bacterianas como Vibrio y otras bacterias. Conclusiones: Nuestros resultados sugieren que los niveles de recuento bacteriano registrados en este estudio pueden usarse como umbral o límite de seguridad para la acuicultura de Arbacia dufresnii.