RESUMEN Introducción: Gram-positive staphylococci are responsible for over 90% of cases of postoperative infectious endophthalmitis, with Staphylococcus epidermidis accounting for approximately 70% of isolated microorganisms. Objetivo: Evualuar la relación entre la virulencia de S. epidermidis y la gravedad de la endoftalmitis en un modelo animal. Metodología: Se dividieron conejos albinos de Nueva Zelanda en dos grupos y se les administraron 100 unidades formadoras de colonias de cepas de S. epidermidis. En el grupo virulento, cuatro conejos recibieron una cepa multirresistente de S. epidermidis portadora de gen mecA, ica y atlE, de la microbiota conjuntival de un paciente y tres conejos la cepa S. epidermidis ATCC 35984 formadora de biopelículas. En el grupo no-virulento, se inocularon cinco conejos con una cepa sensible a todos los antibióticos probados y que carecía de los genes mecA, ica y atlE, también de un paciente y tres conejos recibieron la cepa S. epidermidis ATCC 29122 no productora de biopelícula. Se realizaron exámenes clínicos y ecográficos cada tres horas hasta la aparición de síntomas de endoftalmitis, seguido de evaluaciones clínicas diarias. Las evaluaciones histológicas se realizaron 15 días después de la inoculación. Resultados: El grupo menos virulento mostró una inflamación más leve y un daño intraocular reducido en comparación con el grupo más virulento según observaciones clínicas y ecográficas. Sin embargo, el análisis histopatológico reveló una inflamación similar en todos los grupos, 15 días después de la inoculación. Discusión: Las cepas de S. epidermidis menos virulentas indujeron una inflamación menos grave, como se observó mediante evaluaciones clínicas y ecográficas. Sin embargo, las evaluaciones histopatológicas a largo plazo mostraron efectos comparables a los observados con la cepa más virulenta.

ABSTRACT Introduction: Gram-positive staphylococci are responsible for over 90% of cases of postoperative infectious endophthalmitis, with Staphylococcus epidermidis accounting for approximately 70% of isolated microorganisms. Objective: To evaluate the relationship between S. epidermidis virulence and severity of endophthalmitis in an animal model. Methodology: New Zealand albino rabbits were divided into two groups and administered 100 colony-forming units of S. epidermidis strains. In the virulent group, four rabbits received a multi-antibiotic resistant, mecA, ica, and atlE gene carrying S. epidermidis strain, from a patient´s conjuntival microbiota and three a biofilm-forming S. epidermidis ATCC 35984. In the non-virulent group, five rabbits were inoculated with a strain sensitive to all tested antibiotics and lacking mecA, ica, and atlE genes, also from a patient and three rabbits received the non-producer biofilm S. epidermidis ATCC 29122. Clinical and ultrasound examinations were conducted every three hours until endophthalmitis symptoms appeared, followed by daily clinical assessments. Histological evaluations were performed 15 days post-inoculation. Results: The less virulent group displayed milder inflammation and reduced intraocular damage in comparison to the more virulent group based on clinical and ultrasound observations. Nevertheless, histopathological analysis revealed similar inflammation in all groups, 15 days post-inoculation. Discussion: Less virulent S. epidermidis strains induced less severe inflammation as observed through clinical and ultrasound assessments. However, long-term histopathological assessments showed effects comparable to those seen with the more virulent strain.

Resumen Las vesículas extracelulares (EV) son estructuras esféricas delimitadas por membranas y producidas por varios tipos de células. En particular, las vesículas de membrana externa (OMV) son partículas nanométricas producidas constitutivamente por bacterias Gram negativas (GNB) en diferentes condiciones ambientales. Las OMV son biológicamente activas; están cargadas de lípidos, polisacáridos, proteínas e incluso diferentes tipos de ácidos nucleicos. Las OMV de bacterias orales patógenas desempeñan papeles clave en las interacciones patógeno-hospedero, constituyendo un posible vínculo entre la salud oral y las enfermedades sistémicas. Las OMV participan en la adhesión, la invasión y el daño celular, así como en la modulación de la respuesta inmunitaria del hospedero, la formación de biopelículas y la promoción de la virulencia. El objetivo de esta revisión sistemática era recopilar, analizar y sintetizar los conocimientos disponibles sobre las OMV de las GNB anaerobias orales patógenas más estudiadas. Esta información se clasificó en las siguientes categorías: inducción de la vesiculación y biogénesis, su liberación de la célula parental, contenido, internalización por otra célula hospedadora e interacción con la célula hospedadora. Se observó que las OMV más estudiadas son las de Porphyromonas gingivalis y Bacteroides spp. y, en menor medida, Aggregatibacter spp. y Treponema spp. Esta revisión sistemática ofrece una síntesis de los conocimientos actuales sobre las OMV, haciendo hincapié en la información disponible para los periodontopatógenos.

Abstract Extracellular vesicles (EV) are spherical structures limited by membranes and shed by several cell types. Specifically, outer membrane vesicles (OMVs) are nanometric particles constitutively produced by Gram-negative bacteria (GNB) under different environmental conditions. OMVs are biologically active; they are loaded with selected lipids, polysaccharides, proteins, and even different types of nucleic acids. OMVs from pathogenic oral bacteria play key roles in pathogen-host interactions, constituting a possible link between oral health and systemic disease. OMVs participate in adhesion, invasion, and damage to cells, as well as in modulating the host's immune response, biofilm formation, and promotion of virulence. The objective of this systematic review was to collect, analyze and synthesize the knowledge available on literature reviews on OMVs of the most studied pathogenic oral anaerobic GNB. This information was classified into the following categories: induction of vesiculation and biogenesis, its liberation from the parental cell, content, internalization by another host cell, and the interaction with the host cell. It was found that the most studied OMVs are those of Porphyromonas gingivalis and Bacteroides spp. and, to a lesser extent, Aggregatibacter spp., and Treponema spp. This systematic review provides a synthesis of the current knowledge regarding OMVs, with emphasis on the information available for periodontopathogens.

Resumo Objetivo. Explorar o efeito das características da superfície no volume total e viabilidade do biofilme formado em PEEK e pilares de cicatrização de titânio. Métodos. Parâmetros de rugosidade (S a e S k) e energia de superfície de PEEK e pilares de titânio (n = 3) foram determinados por microscopia confocal de varredura a laser (CLSM) e ângulo de contato, respectivamente. O volume total e a viabilidade de um biofilme bacteriano multiespécie cultivado por 30 dias foram então determinados usando CLSM e o reagente LIVE/DEAD Kit BacLight. O tamanho do efeito foi determinado usando o d de Cohen. Resultados. Os pilares de PEEK mostraram maior rugosidade do que os de titânio (S a 0,41 µm vs 0,17 µm), mas não foram observadas diferenças na energia de superfície. Embora o volume total de biofilme tenha sido maior no titânio do que no PEEK (696 µm3 vs 419 µm3), não houve diferenças na proporção de bactérias vivas entre os dois materiais. Conclusões. A viabilidade do biofilme bacteriano formado não está diretamente relacionada às características da superfície dos pilares de cicatrização de PEEK e titânio.

Abstract Objectives . To explore the effect of surface characteristics on the total volume and viability of a bacterial biofilm developed on the surface of PEEK and titanium healing abutments. Methods. Surface parameters S a and S k, as well as the surface energy of PEEK and titanium healing abutments (n=3) were determined using confocal laser scanning microscopy (CLSM) and contact angle, respectively. The total volume and viability of a multispecies bacterial biofilm cultivated for 30 days were determined using CLSM and the LIVE/DEAD BacLight reactive kit. Effect size was determined using Cohen’s d. Results. PEEK healing abutments displayed a higher surface roughness than titanium (S a 0.41 µm vs 0.17 µm), although no differences in surface energy were observed. Despite the higher total volume of the biofilm measured on titanium abutments compared to PEEK (696 µm3 vs 419 µm3), no differences in the live/dead bacterial ratio were observed. Conclusions. Bacterial viability of the biofilm did not show a direct relation to the surface characteristics of PEEK and titanium healing abutments.

Resumen Objetivos. Explorar el efecto de las características de superficie sobre el volumen total y la viabilidad de la biopelícula formada sobre pilares de cicatrización de PEEK y titanio. Métodos. Los parámetros de rugosidad (S a y S k) y la energía superficial de pilares de cicatrización de PEEK y titanio (n=3) fueron determinados mediante microscopía confocal láser de barrido (CLSM) y ángulo de contacto, respectivamente. Se determinó luego el volumen total y la viabilidad de una biopelícula bacteriana multiespecie cultivada por 30 días, mediante CLSM y el reactivo LIVE/DEAD Kit BacLight. El tamaño del efecto se determinó mediante d de Cohen. Resultados. Los pilares de PEEK mostraron una mayor rugosidad que los de titanio (S a 0,41 µm vs 0,17 µm), pero no se observaron diferencias en la energía superficial. Si bien el volumen total de biopelícula fue mayor en titanio que en PEEK (696 µm3 vs 419 µm3), no hubo diferencias en la proporción de bacterias vivas entre ambos materiales. Conclusiones. La viabilidad de la biopelícula bacteriana formada no guarda relación directa con las características superficiales de pilares de cicatrización de PEEK y titanio.

Abstract The application of Electrochemical Impedance Spectroscopy (EIS) in biofilms studies has been long reported due to the great variety and diversity of applications that are involved in many fields, for instance, in Bioelectrochemical Systems (BES), drinking water distribution systems, electrochemical sensors, food industry, medical devices; among others. Microbial attachment and biofilm growth have been extensively investigated using EIS due to their non-destructive nature; however, several studies (using a three-electrode system) have described changes in the electrochemical parameters that model biofilm development. Therefore, this overview focused on the EIS data analysis by an electrical equivalent circuit (eec). The most representative studies on attachment, biofilm formation, Extracellular Polymeric Substances (EPS), and charge transfer phenomena were discussed. Consequently, the goals of this overview are: Distinguish between the ways of studying biofilm growth (in-situ/ex-situ). EIS data validation by Kramers Kronig relations. The discussion of the electrical elements of eec. Due to the heterogeneity of the reviewed information, the biofilms are divided into two groups: strong electroactive and another group: weak electroactive and non-electroactive biofilms. The importance of this manuscript is to present the biofilm-electrode interface by the electrical elements of various biofilms studied under different conditions, establish an overview of the working methods followed by different authors, and discuss the results obtained on diverse biofilms. Lastly, this overview might help as a general outlook for planning further research.

Resumen La aplicación de la Espectroscopía de Impedancia Electroquímica (EIS) en estudios de biopelículas, ha sido ampliamente reportada debido a la gran variedad y diversidad de aplicaciones que están involucradas en diversos campos, por ejemplo, en sistemas bioelectroquímicos (BES), sistemas de distribución de agua potable, sensores electroquímicos, industria alimentaria, dispositivos médicos; entre otros. La adherencia microbiana y el crecimiento de biopelículas se han investigado ampliamente mediante EIS debido a su naturaleza no destructiva; sin embargo, diversos estudios han descrito cambios en los parámetros electroquímicos que modelan el desarrollo de las biopelículas. Por lo tanto, esta revisión general se centró en el análisis de datos de EIS mediante un circuito eléctrico equivalente (eec). Se discutieron los estudios más representativos sobre attachment, formación de biopelículas, Sustancias Poliméricas Extracelulares (EPS) y fenómenos de transferencia de carga. Por consiguiente, los objetivos de esta revisión son Distinguir entre las formas de estudiar el crecimiento de biopelículas (in-situ/ex-situ). La validación de los datos de EIS por relaciones de Kramers Kronig. La discusión de los elementos de eec. Debido a que la información revisada sobre biopelículas es muy heterogénea, las biopelículas se dividen en dos grupos: electroactivas fuertes, y el otro grupo: electroactivas débiles y biopelículas no electroactivas. La importancia de este manuscrito es presentar la interfase biopelícula-electrodo mediante los elementos eléctricos de varias biopelículas estudiadas bajo diferentes condiciones, establecer una visión general de los métodos de trabajo seguidos por diferentes autores y discutir los resultados obtenidos en diversos tipos de biopelículas. Por último, esta revisión contribuye como una perspectiva general para planificar futuras investigaciones.

ABSTRACT Background. Nitrification and denitrification processes are part of the biogeochemical nitrogen cycle. The microorganisms that carry them out are used in wastewater treatment systems to remove a very common pollutant; ammonium (NH4+) and release molecular nitrogen (N2). Objective. Show the diversity and metabolic flexibility of nitrifying and denitrifying consortia used in the elimination of nitrogen from wastewater. Results. Among these taxonomically diverse microorganisms, bacteria are the best studied. They are divided and named according to the main process they carry out. Although thanks to the genes they share, their diversity and metabolic flexibility can enable them to survive under changing conditions and through functions different from the process that is canonically attributed to them. The characteristic genes of these processes are used as molecular markers in community studies. However, taxa known canonically as nitrifying may have functional genes of the denitrifying process. Microorganisms classified as typically denitrifying may have functional genes of the nitrifying process. The consortia (flocules, granules and biofilms) used in the elimination of NH4+ are an example of communities that can have superior or different capacities than those of their individual members. Conclusions. This review compiles physiological, genetical, and ecological information that contributes to a better understanding of the great diversity and metabolic flexibility of nitrifying and denitrifying consortia. It stands out that in artificial systems, a better knowledge of the participating taxa and their trophic, metabolic and communication relationships, would allow a better control of the nitrifying and denitrifying processes for making them more efficient and stable.

RESUMEN Antecedentes. Los procesos de la nitrificación y desnitrificación forman parte del ciclo biogeoquímico del nitrógeno. Los microorganismos que los llevan a cabo son empleados en los sistemas dedicados al tratamiento de aguas residuales para eliminar un contaminante muy común; el amonio (NH4+), y liberar nitrógeno molecular (N2). Objetivo. Mostrar la diversidad y flexibilidad metabólica de consorcios nitrificantes y desnitrificantes usados en la eliminación de nitrógeno de aguas residuales. Resultados. En estos microorganismos taxonómicamente diversos, las bacterias son las mejor estudiadas. Se las divide y nombra según el proceso principal que realizan. Aunque en realidad gracias a los genes que comparten, pueden presentar una diversidad y flexibilidad metabólica, que las capacita para sobrevivir en condiciones cambiantes y con funciones distintas del proceso que canónicamente se les atribuye. Los genes característicos de estos procesos son empleados como marcadores moleculares en estudios de comunidades. Sin embargo, taxones conocidos canónicamente como nitrificantes pueden tener genes funcionales propios del proceso desnitrificante. Microorganismos catalogados como típicamente desnitrificantes pueden tener genes funcionales del proceso nitrificante. Los consorcios (flóculos, gránulos y biopelículas) empleados en la eliminación de NH4+ son un ejemplo de comunidades que pueden tener capacidades superiores o distintas de las que tienen sus integrantes individualmente. Conclusiones. La presente revisión conjunta información fisiológica, genética y ecológica que contribuye a entender mejor la gran diversidad y flexibilidad metabólica de los consorcios nitrificantes y desnitrificantes. Se destaca que, en los sistemas artificiales, un mayor conocimiento de los taxones participantes, así como de sus relaciones tróficas, metabólicas y de comunicación posibilitaría un mejor control de los procesos nitrificante y desnitrificante para que estos sean más eficientes y estables.

Summary: Plants play a key role in ecosystems. Like other living organisms, plants have microbiomes that allow them to maintain good health and cope with the different types of stress to which they are subjected. At this point, one of the most complex and rich environments is the microbiome that inhabits plants roots in the rhizosphere. In the rhizosphere, there is a complex network of interactions that have only recently begun to be understood. Within these interactions, the biofilm formation on the root surface is a crucial step in the establishment of microbial communities in plants. However, until recent years, its importance in the complex network of interactions that occur between the plant-microorganism, microorganism-microorganism, and its function for soils has begun to be studied. The latest advances in the knowledge of biofilms formation on the rhizosphere, and their role in the production of different antimicrobial compounds in the soil, like different antibiotics, that could be used to improve food production systems or for the benefit of human health, are discussed in this review.

Resumen: Las plantas juegan un papel fundamental en los ecosistemas. Al igual que otros organismos vivos, las plantas cuentan con microbiomas que les permiten mantener una buena salud y hacer frente a los diferentes tipos de estrés a los que están sometidas. En este punto, uno de los entornos más complejos y ricos es el microbioma que habita en las raíces de las plantas, la rizósfera. En la rizósfera, hay una compleja red de interacciones que solo recientemente han comenzado a entenderse. Dentro de estas interacciones, la formación de biopelículas en la superficie de la raíz es un paso crucial en el establecimiento de comunidades microbianas en las plantas. Sin embargo, hasta hace pocos años, se ha comenzado a estudiar su importancia en la compleja red de interacciones que se dan entre las plantas y los microorganismos, entre microorganismo-microorganismo y su función para los suelos. En esta revisión, se discuten los últimos avances en el conocimiento de la formación de biopelículas en la rizósfera y su papel en la producción de diferentes compuestos antimicrobianos en los suelos, como diferentes antibióticos, que podrían utilizarse para mejorar los sistemas de producción de alimentos o en beneficio de la salud humana.

Resumen Los alimentos contaminados por patógenos forman biopelículas con una alta resistencia a biocidas, desinfectantes y antibióticos. Los extractos vegetales pueden ser una alternativa potencial para combatirlos. Este estudio evaluó la actividad antimicrobiana y antibiopelícula de un extracto vegetal (Sambucus canadensis) utilizado ampliamente en comunidades indígenas de México. El trabajo se realizó con bacterias aisladas de alimentos orgánicos. Las pruebas antimicrobianas mostraron actividad en todas las cepas evaluadas principalmente en S. aureus 976, S. entérica 915, E. coli 47553 (CMI 65.1 y 50 µg/mL) respectivamente. Respecto a la obstrucción en la formación de biopelícula se encontraron resultados significativos menores a 35 % a la concentración más baja 0.01 µg/mL frente a las cepas S. aureus CECT 976 y E. coli 47553. Respecto a los resultados en la disgregación del biopelicula las bacterias E. coli CECT 4757, S. aureus CECT 976 y S. aureus CECT 4465 lograron hasta un 36 % de disgregación en la concentración más baja de 0.01 µg/mL siendo estadísticamente significativo respecto al control (p < 0.001). Los resultados indican que el extracto vegetal tiene un alto potencial de actividad antibiopelícula frente a bacterias que afectan la inocuidad de los alimentos y plantean riegos para la salud de las personas.

Abstract Foodborne pathogens form biofilms with high resistance to biocides, disinfectants, and antibiotics. Plant extracts can be a potential alternative to combat them. This study evaluated the antimicrobial and antibiofilm activity of a plant extract (Sambucus canadensis) widely used in indigenous communities in Mexico. The work was carried out with bacteria isolated from organic food. The antimicrobial tests showed activity in all the strains evaluated, mainly in S. aureus 976, S. enterica 915, and E. coli 4753 (MIC 65.1 and 50 µg/mL) respectively. Regarding the obstruction in the formation of biofilm, significant results of less than 35 % were found at the lowest concentration (0.01 µg/mL) against the S. aureus CECT 976 and E. coli 4753 strains. Regarding the results in biofilm disintegration, E. coli CECT 4757, S. aureus CECT 976, and S. aureus CECT 4465 achieved up to 36 % disintegration under the lowest concentration of 0.01 µg/mL, being statistically significant with respect to the control p < 0.0001. The results indicated that the plant extract has a high potential for antibiofilm activity against bacteria that affect food safety and pose risks to people’s health.

ABSTRACT Candida endocarditis is a very serious manifestation of candida infections, and it has increased in incidence over the past years. Of these, C. parapsilosis has been described as a cause of endocarditis in native valves of intravenous drug users and prosthetic valves. We report the case of a female that developed a cerebrovascular accident secondary to emboli from aortic prosthetic valve C. parapsilosis endocarditis, despite apparently normal echocardiography. She received antifungal therapy without surgical intervention.

RESUMEN La endocarditis por Candida spp. es una manifestación muy grave de las infecciones por este patógeno y su incidencia ha ido aumentando en los últimos años. La Candida parapsilosis se ha descrito como causa de endocarditis en válvulas nativas de usuarios de drogas intravenosas y prótesis valvulares. Presentamos el caso de una mujer que desarrolló un accidente cerebrovascular secundario a émbolos fúngicos procedentes de una prótesis valvular aórtica infectada por C. parapsilosis, a pesar de un ecocardiograma sin vegetaciones. La paciente recibió tratamiento antifúngico sin necesidad de intervención quirúrgica.

ABSTRACT Introduction: Bioproduct’s development to beneficiate economic importance crops such rice, contributes directly to our food sovereignty. The objective of the work was: To obtain and characterize bacterial strains associated with two rice cultivars widely distributed in Cuba, in terms of their potential as Plant Growth Promoting Bacteria. Methods: Bacteria associated to the rhizosphere and seeds of INCA LP-5 and INCA LP-7 rice cultivars were isolated and identified by partial 16S rRNA sequencing. The strains were characterized in terms of potentialities as biofertilizers, phytostimulants, biocontrol, and attributes of infection and colonization. The endophytic capacity of a Rhizobium strain was studied in rice seedlings, from inoculation tests and confocal fluorescence microscopy. Inoculation experiments were carried out under controlled, semi-controlled and field conditions. Results: We isolated 43 strains; 24 from the rhizosphere and 19 from rice seeds and eight associated bacterial genera were identified: Rhizobium, Pantoea, Pseudomonas, Acinetobacter, Mitsuaria, Enterobacter, Bacillus and Paenibacillus. Some strains solubilized calcium and potassium phosphate, grew in nitrogen-free media, and produced siderophores, indole compounds, hydrolytic enzymes, and formed biofilms. The endophytic capacity of a Rhizobium strain was verified by systemic colonization of rice seedlings. The inoculation of some strains increased the content of nutrients, some biomolecules and rice plant growth. Furthermore, the crop yield enhanced between 30% - 80% with reduction of 40% - 60% of nitrogen fertilization. Conclusions, the research constitutes a contribution to the knowledge of Rhizobium-rice interaction and in the identification, characterization and selection of bacterial strains with potential for the development of bioproducts that positively impact the environment, the economy and the society.

RESUMEN Introducción: El desarrollo de bioproductos para beneficiar cultivos de importancia económica como el arroz tributa directamente a nuestra soberanía alimentaria. El objetivo del trabajo fue obtener y caracterizar cepas bacterianas asociadas a 2 cultivares de arroz de amplia distribución en Cuba, en cuanto a sus potencialidades como bacterias promotoras del crecimiento vegetal. Métodos: Se realizó el aislamiento de bacterias asociadas a la rizosfera y semillas de los cultivares de arroz INCA LP-5 e INCA LP-7 y se identificaron por secuenciación parcial del ARNr 16S. Las cepas se caracterizaron en cuanto a potencialidades como biofertilizantes, fitoestimulantes, de biocontrol y atributos de infección y colonización. Se estudió la capacidad endofítica de una cepa de Rhizobium en plántulas de arroz, a partir de ensayos de inoculación y microscopía confocal de fluorescencia. Se desarrollaron experimentos de inoculación en condiciones controladas, semicontroladas y de campo. Resultados: Se aislaron 43 cepas; 24 de la rizosfera y 19 del interior de semillas de arroz y se identificaron 8 géneros bacterianos asociados: Rhizobium, Pantoea, Pseudomonas, Acinetobacter, Mitsuaria, Enterobacter, Bacillus y Paenibacillus. Algunas cepas solubilizaron fosfato de calcio y potasio, crecieron en medios libres de nitrógeno y produjeron sideróforos, compuestos indólicos, enzimas hidrolíticas y formaron biopelículas. Se comprobó la capacidad endofítica de una cepa de Rhizobium y su colonización sistémica en plántulas de arroz. La inoculación de algunas cepas incrementó el contenido de nutrientes, algunas biomoléculas y el crecimiento de plantas de arroz. Además, el rendimiento del cultivo se favoreció entre 30 % y 80 %, con la reducción del 40 % a 60 % de la fertilización nitrogenada. Conclusiones, la investigación constituye un aporte al conocimiento de la interacción Rhizobium-arroz y a la identificación, caracterización y selección de cepas bacterianas con potencialidades para el desarrollo de bioproductos que impacten positivamente en el medio ambiente, la economía y la sociedad.

Resumen Objetivo Evaluar la integridad de la superficie y las condiciones microbiológicas de tornillos listos para uso en bandejas ortopédicas después de múltiples procesamientos. Métodos Después del procesamiento completo, fueron seleccionadas aleatoriamente durante cuatro meses las bandejas utilizadas en cirugías de pequeños fragmentos, proporcionadas mediante el sistema de consignación/comodato en un hospital brasileño. Los tornillos más utilizados (números 14, 16 y 18 – Grupo 1) y menos utilizados (números 10 y 38 – Grupo 2), por lo tanto, los más y menos expuestos a agentes biológicos, químicos y físicos, fueron quitados aleatoriamente y sometidos a inspección visual (n=126), seguido de cultivo bacteriano (n=6 tornillos/bandeja, 9 bandejas), prueba de proteínas (n=6 tornillos/bandeja, 9 bandejas) y microscopía electrónica de barrido (MEB) (n=2 tornillos/bandeja, 9 bandejas). Los cultivos positivos fueron sometidos a métodos automatizados de identificación bacteriana y susceptibilidad antimicrobiana. Resultados Se detectaron ranuras en el 8,7 % de los tornillos, predominantemente en el Grupo 2 (8/11). Se detectó proteína residual en el 96,3 % y no se encontró diferencia estadísticamente significativa en la cantidad de proteína entre los grupos (P=0,07). En 3/54 tornillos se identificó crecimiento bacteriano. Se visualizaron daños en la superficie y presencia de suciedad en todos los tornillos sometidos a MEB. En ocho tornillos se detectó la formación de biopelículas, tres del Grupo 1 y cinco del Grupo 2. Conclusión Se detectó recuperación de bacterias viables, acumulación de biopelícula y daños en la superficie en los tornillos listos para uso. Los tornillos suelen permanecer en las bandejas quirúrgicas y son sometidos a múltiples procesamientos, donde están expuestos a contaminación y daños repetidas veces. Estos descubrimientos señalan la necesidad de discutir y repensar la forma como estos implantes de uso único se ponen a disposición para cirugía actualmente. procesamientos completo fragmentos consignacióncomodato consignación comodato brasileño números 14 3 2, , 2) tanto biológicos físicos n=126, n126 n n=126 126 (n=126) n=6 n6 6 (n= tornillosbandeja bandeja tornillos/bandeja bandejas, MEB (MEB n=2 n2 bandejas. . antimicrobiana 87 8 7 8, 8/11. 811 8/11 11 (8/11) 963 96 96, P=0,07. P007 P P=0,07 0 07 (P=0,07) 354 54 3/5 biopelículas viables veces actualmente n12 n=12 12 (n=126 n= (n 81 8/1 (8/11 P00 P=0,0 (P=0,07 35 5 3/ n1 n=1 (n=12 8/ (8/1 P0 P=0, (P=0,0 (n=1 (8/ P=0 (P=0, (8 P= (P=0 ( (P= (P

Abstract Objective Assess the surface integrity and microbiological conditions of patient-ready screws in orthopaedic trays that had been multiply reprocessed. Methods After full reprocessing, clinical trays used for small fragment surgery provided through a loaner system to a Brazilian hospital were randomly selected during four months. The most (numbers 14, 16 and 18 – Group 1) and least (numbers 10 and 38 – Group 2) frequently implanted screws, therefore, the ones estimated to be the most and least exposed to biological, chemical and physical agents, were randomly removed and subjected to visual inspection (n=126), followed by bacterial culture (n=6 screws/tray, 9 trays), protein test (n=6 screws/tray, 9 trays) and Scanning Electron Microscopy (SEM) (n=2 screws/tray, 9 trays). Positive cultures were subjected to automated bacterial identification and antimicrobial susceptibility tests. Results Grooves were detected on 8.7% screws, predominantly in Group 2 (8/11). Residual protein was detected on 96,3%, and there was no statistically significant difference in the amount of protein between the groups (P=0.07). Bacterial growth was identified in 3/54 screws. Surface damage and soil were visualized on all screws subjected to SEM. Extensive biofilms were detected on eight screws, three from Group 1 and five from Group 2. Conclusion Recovery of bacteria, biofilm accumulation and surface damage were detected on patient-ready screws. Screws frequently remain in surgical trays for multiple reprocessing; thus they are repeatedly exposed to contamination and damage. These findings point to the need to discuss and review the way these single-use implants are currently made available for surgeries. patientready patient ready reprocessed reprocessing months numbers 14 3 therefore biological agents n=126, n126 n n=126 , 126 (n=126) n=6 n6 6 (n= screwstray tray screws/tray trays, SEM (SEM n=2 n2 trays. . tests 87 8 7 8.7 8/11. 811 8/11 11 (8/11) 963 96 96,3% P=0.07. P007 P P=0.07 0 07 (P=0.07) 354 54 3/5 bacteria singleuse single use surgeries n12 n=12 12 (n=126 n= (n 8. 81 8/1 (8/11 96,3 P00 P=0.0 (P=0.07 35 5 3/ n1 n=1 (n=12 8/ (8/1 96, P0 P=0. (P=0.0 (n=1 (8/ P=0 (P=0. (8 P= (P=0 ( (P= (P

Resumo Objetivo Avaliar a integridade da superfície e as condições microbiológicas de parafusos prontos para uso em bandejas ortopédicas após múltiplos processamentos. Métodos Após o processamento completo, as bandejas utilizadas em cirurgias de pequenos fragmentos, fornecidas por meio de sistema de consignação/comodato em um hospital brasileiro, foram selecionadas aleatoriamente durante quatro meses. Os parafusos mais utilizados (números 14, 16 e 18 – Grupo 1) e menos utilizados (números 10 e 38 – Grupo 2), portanto, os mais e menos expostos a agentes biológicos, químicos e físicos, foram aleatoriamente removidos e submetidos a inspeção visual (n=126), seguido de cultura bacteriana (n=6 parafusos/bandeja, 9 bandejas), teste de proteínas (n=6 parafusos/bandeja, 9 bandejas) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) (n=2 parafusos/bandeja, 9 bandejas). As culturas positivas foram submetidas a métodos automatizados de identificação bacteriana e suscetibilidade antimicrobiana. Resultados Foram detectadas ranhuras em 8,7% dos parafusos, predominantemente no Grupo 2 (8/11). Proteína residual foi detectada em 96,3%, e não houve diferença estatisticamente significativa na quantidade de proteína entre os grupos (P=0,07). Crescimento bacteriano foi identificado em 3/54 parafusos. Danos na superfície e presença de sujidade foram visualizados em todos os parafusos submetidos a MEV. Formação de biofilmes extensos foi detectada em oito parafusos, três do Grupo 1 e cinco do Grupo 2. Conclusão Recuperação de bactérias viáveis, acúmulo de biofilme e danos na superfície foram detectados nos parafusos prontos para uso. Os parafusos costumam permanecer nas bandejas cirúrgicas e serem submetidos a múltiplos processamento, sendo expostos a contaminação e danos repetidas vezes. Esses achados apontam para a necessidade de discutir e repensar a forma como esses implantes de uso único são atualmente disponibilizados para cirurgias. processamentos completo fragmentos consignaçãocomodato consignação comodato brasileiro meses números 14 3 2, , 2) portanto biológicos físicos n=126, n126 n n=126 126 (n=126) n=6 n6 6 (n= parafusosbandeja bandeja parafusos/bandeja bandejas, MEV (MEV n=2 n2 bandejas. . antimicrobiana 87 8 7 8,7 8/11. 811 8/11 11 (8/11) 963 96 96,3% P=0,07. P007 P P=0,07 0 07 (P=0,07) 354 54 3/5 viáveis vezes n12 n=12 12 (n=126 n= (n 8, 81 8/1 (8/11 96,3 P00 P=0,0 (P=0,07 35 5 3/ n1 n=1 (n=12 8/ (8/1 96, P0 P=0, (P=0,0 (n=1 (8/ P=0 (P=0, (8 P= (P=0 ( (P= (P

ABSTRACT Background: Methicillin resistance and biofilm-producing Staphylococci are emerging as multidrug-resistant strains narrowing the efficacy of antimicrobial therapy. Although vancomycin is used as the drug of choice to treat such isolates, different studies worldwide have documented the emergence of strains that are intermediately susceptible or resistant to this antibiotic. Objective: The study aimed to determine the minimum inhibitory concentration of vancomycin to methicillin-resistant and biofilm-producing staphylococci isolated from different clinical specimens. Methods: 375 staphylococci isolated from different clinical specimens over one year were included in the study. Biofilm formation was determined by the Tissue culture plate method (TCP), and ica genes were identified by Polymerase Chain Reaction (PCR). Antibiotic susceptibility and methicillin resistance were done following Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) guidelines. The minimum inhibitory concentration (MIC) of vancomycin in all isolates was determined by the agar dilution method. Results: Among 375 Staphylococci studied, 43% and 57% represented S. aureus and Coagulase- Negative Staphylococci (CNS), respectively. The rate of Methicillin-Resistant S. aureus (MRSA) and Methicillin-Resistant Coagulase Negative Staphylococci (MRCNS) were 81.4% and 66.8% respectively and determined by the disc diffusion method. The most potential antibiotics were tetracycline and chloramphenicol showing sensitivity to more than 90% isolates. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) value of oxacillin for staphylococci ranged from 0.125-32 μg/ml. Oxacillin agar diffusion method showed 51.6% and 79.9% isolates as MRSA and MRCNS, respectively, revealing a very high percentage of S. aureus and CNS isolates as methicillin-resistant. All isolates had susceptible vancomycin MICs that ranged from 0.125-2 μg/ml. Two S. aureus isolated from Central Venous Catheter (CVC) and catheter specimens were detected with intermediate susceptibility to vancomycin. Similarly, three CNS isolated from blood, CVC, and wound/pus (w/p) were intermediately susceptible to vancomycin. Strong biofilm formation was observed in 22.1% of clinical isolates, and the ica gene was detected among 22.9% of isolates. Only one S. aureus detected as a biofilm producer by the TCP method was found to have intermediate susceptibility to vancomycin. Conclusions: The increment in vancomycin MIC among methicillin-resistant and biofilm-producing staphylococci is alarming. Strict control measures to prevent methicillin-resistant isolates spread and routine surveillance for vancomycin-resistant isolates must be incorporated in hospitals to prevent antimicrobial treatment failure.

RESUMEN Antecedentes: Los estafilococos resistentes a la meticilina y productores de biopelículas están surgiendo como cepas multirresistentes que reducen la eficacia del tratamiento antimicrobiano. Aunque la vancomicina se utiliza como fármaco de elección para tratar dichos aislados, diferentes estudios realizados en todo el mundo han documentado la aparición de cepas intermedias susceptibles o resistentes a este antibiótico. Objetivo: El estudio tenía como objetivo determinar la concentración mínima inhibitoria de la vancomicina para los estafilococos resistentes a la meticilina y productores de biofilm aislados de diferentes muestras clínicas. Métodos: Se incluyeron en el estudio 375 estafilococos aislados de diferentes muestras clínicas durante un año. La formación de biopelículas se determinó mediante el método de la placa de cultivo de tejidos (TCP), y los genes ica se identificaron mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). La susceptibilidad a los antibióticos y la resistencia a la meticilina se realizaron siguiendo las directrices del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). La concentración inhibitoria mínima (MIC) de vancomicina en todos los aislados se determinó por el método de dilución en agar. Resultados: Entre los 375 estafilococos estudiados, el 43% y el 57% representaban S. aureus y estafilococos coagulasa-negativos (ECN), respectivamente. La tasa de S. aureus resistente a la meticilina (SARM) y de estafilococos coagulasa negativos resistentes a la meticilina (ECNM) fue del 81,4% y el 66,8%, respectivamente, y se determinó por el método de difusión de discos. Los antibióticos más potenciales fueron la tetraciclina y el cloranfenicol, que mostraron una sensibilidad superior al 90% de los aislados. El valor de la concentración inhibitoria mínima (CIM) de la oxacilina para los estafilococos osciló entre 0,125-32 μg/ml. El método de difusión en agar de la oxacilina mostró que el 51,6% y el 79,9% de los aislados eran SARM y MRCNS, respectivamente, lo que revela que un porcentaje muy elevado de los aislados de S. aureus y CNS son resistentes a la meticilina. Todos los aislados tenían MIC de vancomicina susceptibles que oscilaban entre 0,125-2 μg/ml. Se detectaron dos S. aureus aislados de muestras de catéteres venosos centrales (CVC) y catéteres con una susceptibilidad intermedia a la vancomicina. Del mismo modo, tres S. aureus aislados de sangre, CVC y herida/pus (w/p) fueron intermedianamente susceptibles a la vancomicina. Se observó una fuerte formación de biopelículas en el 22,1% de los aislados clínicos, y se detectó el gen ica en el 22,9% de los aislados. Sólo un S. aureus detectado como productor de biopelículas por el método TCP resultó tener una susceptibilidad intermedia a la vancomicina. Conclusiones: El incremento de la MIC de vancomicina entre los estafilococos resistentes a la meticilina y productores de biofilm es alarmante. Para evitar el fracaso del tratamiento antimicrobiano, deben incorporarse en los hospitales medidas de control estrictas para prevenir la propagación de los aislados resistentes a la meticilina y una vigilancia rutinaria de los aislados resistentes a la vancomicina.

Resumen Salmonella entérica serovar Enteritidis (S. Enteritidis) es la serovariedad más frecuentemente aislada en la salmonelosis humana. Se ha demostrado que alrededor del 80% de las infecciones están relacionadas con la formación de biopelículas. Sin embargo, la información disponible acerca de la patogenicidad de S. Enteritidis y su relación con la producción de biopelículas es escasa. Este trabajo tuvo como objetivo investigar la respuesta diferencial del huésped frente a S. Enteritidis en sus 2 estilos de vida: biopelícula y planctónico. Para ello, se inocularon bacterias en estado de biopelícula o planctónico en ratones BALB/c y cultivo de células epiteliales. Los estudios de supervivencia revelaron que Salmonella en biopelícula fue menos virulenta que su contraparte planctónica. Los animales inoculados con biopelículas presentaron una mayor conservación estructural del intestino y una menor translocación bacteriana que el grupo planctónico. Asimismo, Salmonella en biopelícula mostró una capacidad deficiente para invadir células no fagocíticas e indujo una menor respuesta inflamatoria in vivo e in vitro que las bacterias planctónicas. Se concluye que el resultado de la interacción Salmonella-huésped depende del estilo de vida bacteriano.

Abstract Salmonella enterica serovar Enteritidis (S. Enteritidis) is the most frequent serovar involved in human salmonellosis. It has been demonstrated that about 80% of infections are related to biofilm formation. There is scant information about the pathogenicity of S. Enteritidis and its relationship to biofilm production. In this regard, this study aimed to investigate the differential host response induced by S. Enteritidis biofilm and planktonic lifestyle. To this purpose, biofilm and planktonic bacteria were inoculated to BALB/c mice and epithelial cell culture. Survival studies revealed that biofilm is less virulent than planktonic cells. Reduced signs of intestinal inflammation and lower bacterial translocation were observed in animals inoculated with Salmonella biofilm compared to the planktonic group. Results showed that Salmonella biofilm was impaired for invasion of non-phagocytic cells and induces a lower inflammatory response in vivo and in vitro compared to that of planktonic bacteria. Taken together, the outcome of Salmonella-host interaction varies depending on the bacterial lifestyle.

RESUMEN Antecedentes Los sistemas hidrotermales son una fuente novedosa para el descubrimiento de nuevos compuestos antimicrobianos y/o metabolitos con potencial biotecnológico. Objetivos En este sentido, en el presente trabajo se realizó una prospección de bioactividad de microorganismos aislados de sistemas hidrotermales someros con capacidad para inhibir el crecimiento de microorganismos de interés en salud humana, acuícola e industrial. Métodos Se aislaron bacterias de dos sistemas hidrotermales ubicados en Bahía Concepción y uno en El Sargento, B.C.S. en época de lluvias y temporada de estiaje. Se evaluó la actividad antimicrobiana contra bacterias patógenas de humano, patógenas acuícolas y formadoras de biopelículas marinas, utilizándose la técnica de difusión en pozo. Resultados El 73 % de las bacterias aisladas produjeron sustancias capaces de inhibir el crecimiento de al menos uno de los microrganismos evaluados. Solo se observó antagonismo para 15 de las 36 bacterias diana, donde Photobacterium damselae subsp. damselae fue la más sensible, observándose una inhibición de su crecimiento en presencia de más de la mitad de las bacterias marinas aisladas de sistemas hidrotermales (51 %). En cuanto a la actividad por sitio y temporada de obtención se observó un mayor número de aislados activos frente a los patógenos acuícolas, predominando los aislados de temporada de estiaje para Mapachitos y Santispac, mientras que en El Sargento el mayor número de aislados activos frente a este grupo de bacterias diana se obtuvo durante la temporada de lluvias. Conclusión Las bacterias marinas aisladas de ambientes extremos sintetizan compuestos antimicrobianos que podrían ser utilizados en el campo de la salud y la industria.

ABSTRACT Background Hydrothermal systems are a novel source for the discovery of new antimicrobial compounds and/or metabolites with biotechnological potential. Objectives In the present research, a bioactivity screening of microorganisms isolated from shallow hydrothermal systems with the capacity to inhibit the growth of microorganisms of interest in human, aquaculture, and industrial health was carried out. Methods Bacteria were isolated from two hydrothermal systems located in Bahía Concepción and other in El Sargento, B.C.S. in rainy and dry season. The antimicrobial activity against human pathogens, aquaculture pathogens, and marine biofilm-forming bacteria was evaluated, using the well diffusion technique. Results 73 % of the isolated bacteria produced substances capable of inhibiting the growth of at least one of the microorganisms evaluated. Antagonism was only observed for 15 of the 36 target bacteria, Photobacterium damselae subsp. damselae was the most sensitive, which was inhibited by 51 % of the marine bacteria. Regarding the activity by site and season of collection, a greater number of active isolates against aquaculture pathogens was observed, predominating the dry season isolates for Mapachitos and Santispac, while in El Sargento the highest number of active isolates was obtained during the rainy season. Conclusion Marine bacteria from hydrothermal systems are able to produce antimicrobial metabolites that could be used in different areas e.g. health and industry.

Abstract The objective of this study was to evaluate the inhibitory capacity of Lactiplantibacillus plantarum LP5 against Campylobacter coli in in vitro biofilm formation and competitive exclusion assays. Biofilm formation by C. coli NCTC11366, C. coli DSPV458, C. coli DSPV541 and C. coli DSPV570 was evaluated by OD measurement. The inhibitory capacity of L. plantarum LP5 against C. coli was evaluated on glass, nylon and aluminium discs, added with L. plantarum and incubated at 37°C for 72 h. C. coli was added to each washed well. The plates were incubated at 42°C for 72 h in microaerophilic conditions and the biofilms were detached for quantification. The four strains of C. coli were classified as moderate biofilm former. The competitive exclusion test showed that the biofilm formation of the C. coli strains in all materials was significantly higher than the biofilm formation of each pathogen in the presence of L. plantarum LP5 biofilms. Although it is necessary to carry out more tests to confirm the ability of C. coli to survive in hostile environments until reaching the host, this study would allow progress in the elucidation of its behaviour through the formation of biofilms.

Resumen El objetivo de este estudio fue evaluar la capacidad inhibitoria de Lactiplantibacillus plantarum LP5 frente a Campylobacter coli en ensayos de formación de biopelículas in vitro y exclusión competitiva. La formación de biopelículas por C. coli NCTC11366, C. coli DSPV458, C. coli DSPV541 y C. coli DSPV570 fue evaluada mediante medición de DO. La capacidad inhibitoria de L. plantarum LP5 frente a C. coli fue evaluada sobre discos de vidrio, nailon y aluminio. Sobre una biopelícula de L. plantarum se adicionó C. coli para cuantificar el efecto inhibidor de L. plantarum LP5 sobre el patógeno. Las cuatro cepas de C. coli fueron clasificadas como moderadas formadoras de biopelículas. El ensayo de exclusión competitiva mostró que la formación de biopelículas de las cepas de C. coli en todos los materiales fue significativamente mayor que la formación de biopelículas de cada patógeno en presencia de biopelículas de L. plantarum LP5. Si bien es necesario realizar más pruebas para confirmar la capacidad de supervivencia de C. coli en ambientes hostiles hasta llegar al huésped, este estudio permitiría avanzar en el esclarecimiento de su comportamiento mediante la formación de biopelículas.

ABSTRACT: The aim of this study is to evaluate the effect of two ethyl cyanoacrylate-based adhesives on the growth of Candida albicans biofilms on a heat-polymerized resin, after 7, 14, and 30 days of exposure. Ninety circular (10 x 2 mm) heat-polymerized resin specimens were equally divided into three groups: control, conventional ethyl cyanoacrylate (ECAc), and ethyl cyanoacrylate gel (ECAg). Two layers of 50 µL of each material were applied to the respective groups. C. albicans SC5314 strain was activated and standardized to 107 cells/mL-1. Specimens were immersed in 1 mL of artificial saliva and deposited in 1 mL fungal suspension, washed, and immersed in 1 mL of RPMI for 7, 14, and 30 days. The medium was changed at 48-hour intervals. The final suspension was diluted (10 -1 to 10-4) and deposited on Sabouraud dextrose agar for 48 h at 37 °C. After this period, the colonies were quantified using the CFU/mL calculation. Data were evaluated using one- way ANOVA and Tukey’s test for post-hoc analysis (P=0.05). It was observed that both adhesives significantly reduced (P<0.05) biofilm formation compared to the control at all evaluated periods. In conclusion, an immediate and long-term inhibitory effect on C. albicans biofilm formation was observed.

RESUMEN: El objetivo del estudio fue evaluar el desarrollo microbiano en superficies de resina acrílica de termopolimerización, acondicionadas previamente, con adhesivos a base de etil cianoacrilato después de 7, 14 y 30 días de exposición en biofilm de Candida albicans. Noventa muestras circulares (10 x 2 mm) de resina acrílica de termopolimerización se dividieron por igual en tres grupos: control, etil cianoacrilato convencional (ECAc) y etil cianoacrilato en gel (ECAg). Se aplicaron dos capas de 50 µl de cada adhesivo en cada muestra. Simultáneamente, se activó la cepa C. albicans SC5314 y se estandarizó a 107 células/ml-1. Las muestras fueron sumergidas en 1 mL de saliva artificial por dos horas y luego se depositó 1 mL de suspensión fúngica por una hora. En seguida cada muestra se lavó y se sumergió en 1 mL de RPMI durante 7, 14 y 30 días, con cambios del medio a cada 48 horas. La suspensión final se diluyó (10-1 a 10-4) y se depositó en agar dextrose Sabouraud durante 48 h a 37° C. Después de este período, las colonias se cuantificaron mediante el cálculo de UFC / mL. Los datos obtenidos se evaluaron por medio del test ANOVA-one way y la prueba de Tukey para el análisis post- hoc (p = 0,05). Se observó que ambos adhesivos redujeron significativamente (P<0,05) la formación del biofilm de Candida albicans al ser comparados con el grupo control en todos los períodos evaluados. Los adhesivos a base de etil cianoacrilato poseen un efecto inhibidor de biofilm de Candida albicans de hasta 30 días, al ser aplicados dos veces en resinas acrílicas de termopolimerización.