ABSTRACT Avian Infectious Bronchitis (IAB) is a viral disease that generates great economic losses in the poultry industry. Due to its structural components and particular immunogenic characteristics, the IB virus, the chicken coronavirus (Gallus gallus), has generated a great challenge for its control, given the emergence of different genotypes with global distribution with changing clinical manifestations. This has generated interest in the study and analysis of the dynamics of the phylogenetic evolution of the virus, as well as the impact on immunological activity, requiring the development of new vaccine strains based on the high variability of the S1 gene portion 1. In the present review, updated information on the phylogenetic evolution of IAV was compiled and the impact on the immunogenic response in poultry production systems is analysed.

RESUMEN La Bronquitis Infecciosa Aviar (BIA) es una enfermedad viral que genera grandes pérdidas económicas en la industria avícola. Por los componentes estructurales y características inmunogénicas particulares, el virus de la BIA, el coronavirus del pollo (Gallus gallus), ha generado un gran desafío para su control, dada la aparición de diferentes genotipos de distribución mundial con manifestaciones clínicas cambiantes. Esto ha generado un interés del estudio y análisis de la dinámica de la evolución filogenética del virus, así como el impacto en la actividad inmunológica exigiendo el desarrollo de cepa vacunales nuevas basadas en la alta variabilidad de la porción 1 gen S1. En la presente revisión se recopiló información actualizada sobre la evolución filogenética del VBIA y se analiza el impacto en la respuesta inmunogénica en sistemas de producción avícola.

Abstract Background: Nano-vitamins and minerals are used in animal nutrition to improve performance and health of broiler chickens as a potential alternative to antibiotic growth promoters. Objective: To evaluate the effect of several levels of a dietary nano α-tocopherol acetate plus selenium compound (NTS) on growth, intestinal histomorphometry, carcass traits, and immune status of broiler chickens. Methods: A total of 240 one-day-old Ross 308 chickens were randomly divided into four groups, each one with three pens (n=20 per pen). Four doses of nano α-tocopherol acetate and selenium (0, 5, 7, and 10 mg/kg) were included in the basal diet for 42 days. Results: Final body weight, cumulative body weight gain, and final conversion ratio significantly improved with increasing NTS levels (p<0.05). Carcass traits and weight of internal organs increased in the groups fed 7 and 10 mg/kg NTS. High NTS doses significantly increased immune vaccine titers against Newcastle disease, avian influenza virus, infectious bursal disease, and infectious bronchitis. Moreover, dietary addition of NTS improved intestinal morphometry. Conclusion: Thus, NTS (7 and 10 mg/kg) can be added to poultry rations to improve production, carcass characteristics, and immune status of broilers. Further studies are needed to evaluate NTS residues in meat.

Resumen Antecedentes: Las nano-vitaminas y minerales se utilizan en nutrición animal para mejorar el rendimiento y la salud de los pollos de engorde como una posible alternativa al uso de antibióticos promotores del crecimiento. Objetivo: Evaluar el efecto de varios niveles dietarios de un acetato de nano α-tocoferol más un compuesto de selenio (NTS) en el crecimiento, histomorfometría intestinal, características de la canal y estado inmunológico de pollos de engorde. Métodos: Un total de 240 pollos Ross 308 de un día de edad se dividieron aleatoriamente en cuatro tratamientos, cada grupo con tres corrales (n=20 por corral). Se incluyeron cuatro dosis de nano α-tocoferol acetato y selenio (0, 5, 7 y 10 mg/kg) en la dieta basal durante 42 días. Resultados: El peso corporal total, la ganancia de peso acumulada y la tasa de conversión alimenticia final mejoraron significativamente al aumentar el nivel de NTS (p<0,05). Las características de la canal y el peso de los órganos internos mejoraron en los grupos alimentados con 7 y 10 mg/kg de NTS. El incremento del nivel de NTS aumentó significativamente los títulos de vacunas inmunitarias contra la enfermedad de Newcastle, el virus de la influenza aviar, la enfermedad infecciosa de la bursa y la bronquitis infecciosa. Además, la adición dietaria de NTS mejoró algunas características morfométricas intestinales. Conclusión: Es viable agregar NTS (7 y 10 mg/kg) en la ración para mejorar la producción, las características de la canal y el estado inmunológico de pollos de engorde. Se necesitan más estudios para evaluar los residuos de NTS en la carne.

Resumo Antecedentes: Nanovitaminas e minerais são utilizados na nutrição animal para melhorar o desempenho e a saúde de frangos de corte como uma possível alternativa ao uso de antibióticos promotores de crescimento. Objetivo: Avaliar o efeito de vários níveis dietéticos de um acetato de nano α-tocoferol mais um composto de selênio (NTS) no crescimento, histomorfometria intestinal, características de carcaça e estado imunológico de frangos de corte. Métodos: Um total de 240 pintos Ross 308 de um dia de idade foram divididos aleatoriamente em quatro tratamentos, cada grupo com três baias (n=20 em cada baia). Quatro doses de acetato de nano α-tocoferol e selênio (0, 5, 7 e 10 mg/kg) foram incluídas na dieta basal por 42 dias. Resultados: O peso corporal total, ganho de peso cumulativo e a conversão alimentar final melhoraram significativamente com o aumento do nível de NTS (p<0,05). As características da carcaça e o peso dos órgãos internos melhoraram nos grupos alimentados com 7 e 10 mg/kg de NTS. O incremento do nível de NTS aumentou significativamente os títulos de vacinas imunes contra a doença de Newcastle, vírus da gripe aviária, doença infecciosa da bolsa e bronquite infecciosa. Além disso, a adição dietética de NTS melhorou algumas propriedades morfométricas intestinais. Conclusão: É viável a adição de NTS (7 e 10 mg/kg) na ração para melhorar a produção, as características de carcaça e o estado imunológico de frangos de corte. Mais estudos são necessários para avaliar os resíduos de NTS em carnes.

Abstract Avian infectious bronchitis (IBV) generates significant economic losses. While vaccination decreases these losses, new viral strains are continually emerging. The objective of this research was to perform molecular characterization of IBV strains circulating in laying hen farms in Tungurahua province, Ecuador. Swabs and organ samples from 47 farms were collected and sequenced, and results were compared to 17 live vaccines used in the area Sixteen farms were positive for IBV as determined by amplification of the 5'UTR region and a S1 segment. The construction of a phylogenetic tree showed that 5 samples were in the same clade as the Massachusetts-type strains, linage GI-1; 7 samples were in the GI-13 lineage clade of vaccine type 793B strains, and 4 samples were into a clade of Q1 type strains. In conclusion, although studies that include the entire protein S sequence are necessary, we were able to detect three types of strains circulating in the province of Tungurahua, two of which are probably vaccine-derived and one has an unknown origin.

Resumen La bronquitis infecciosa aviar genera importantes pérdidas económicas y, si bien la vacunación disminuye dichas mermas, el surgimiento continuo de nuevas cepas virales complica el control de la infección. El objetivo de esta investigación fue caracterizar, mediante técnicas moleculares, las cepas del virus de la bronquitis infecciosa aviar circulantes en explotaciones de gallinas ponedoras de la provincia de Tungurahua, Ecuador. Se trabajó con muestras de hisopados y de órganos de 47 granjas y las secuencias obtenidas fueron comparadas con las correspondientes a 17 vacunas a virus vivo empleadas en la zona. Se encontraron 16 granjas positivas al amplificar la región 5’UTR y un segmento de S1. La construcción de un árbol filogenético mostró que cinco de las secuencias se ubicaron en el mismo clado de las cepas de tipo Massachusetts, linaje GI-1; siete se encontraron en el clado del linaje GI-13 o cepas tipo 793B y cuatro secuencias se agruparon en un clado de cepas tipo Q1, linaje G1-16. Si bien se requieren estudios moleculares más completos en los que se amplifique la totalidad del gen S a fin de obtener datos más concluyentes, se logró determinar que existen tres tipos de cepas circulando en la provincia de Tungurahua, dos posiblemente vacunales y otra de origen desconocido.

Resumen La enfermedad por el nuevo coronavirus 2019 (COVID-19) es causada por el virus denominado SARS-CoV-2, no obstante, en los pollos de corral los coronavirus causan Bronquitis Infecciosa Aviar. En la actualidad, se ha logrado analizar la secuencia genómica del virus SARS-CoV-2, el cual indica que éste emergió de un reservorio animal, incluso se ha considerado que un virus aislado de un murciélago, idéntico a SARS-CoV, sea el progenitor del nuevo coronavirus. En otros estudios, se ha evidenciado que la glicoproteína de la espícula viral tiene un alto grado de emparentamiento entre virus que infectan mamíferos y aves, que es la que permite el contacto con el huésped. Mientras que en el caso del IBV, al inhalarse, el virus se ligará a los receptores de glucoproteína que contienen ácido siálico en las células epiteliales ciliadas del tejido respiratorio, entonces la replicación viral dará como resultado la pérdida de la función ciliar, acopiamiento de moco, necrosis y descamación, provocando dificultad para respirar y asfixia. El IBV afecta tráquea, riñones y tracto reproductivo de muchas aves. En el caso de las gallinas, el IBV virémico causa lesiones en el magnum y en el útero. Esta revisión dilucida algunos puntos clave en las diferencias en el nuevo coronavirus y el virus de la bronquitis infecciosa. Es muy poco probable que SARS-CoV-2 infecte o cause enfermedades en las aves de corral.

Abstract The new coronavirus 2019 disease (COVID-19) is caused by the virus called SARS-CoV-2, however, in free-range chicken’s coronaviruses cause Avian Infectious Bronchitis. Currently, it has been possible to analyze the genomic sequence of the SARS-CoV-2 virus, which indicates that it emerged from an animal reservoir, it has even been considered that a virus isolated from a bat, identical to SARS-CoV, is the parent of the new coronavirus. In other studies, it has been shown that the glycoprotein of the viral spicule has a high degree of relationship between viruses that infect mammals and birds, which is the one that allows contact with the host. Whereas in the case of IBV, when inhaled, the virus will bind to sialic acid-containing glycoprotein receptors in hair epithelial cells of respiratory tissue, then viral replication will result in loss of ciliary function, mucus clearance, necrosis, and peeling, causing shortness of breath and suffocation. IBV affects the trachea, kidneys, and reproductive tract of many birds. In chickens, viremic IBV causes lesions in the magnum and the uterus. This review elucidates some key points in the differences between the novel coronavirus and the infectious bronchitis virus. SARS-CoV-2 is highly unlikely to infect or cause disease in poultry.

Resumo A nova doença coronavírus 2019 (COVID-19) é causada pelo vírus denominado SARS-CoV-2, no entanto, em galinhas caipiras, os coronavírus causam bronquite infecciosa aviária. Atualmente, foi possível analisar a sequência genômica do vírus SARS-CoV-2, o que indica que ele emergiu de um reservatório animal, inclusive se considerou que um vírus isolado de um morcego, idêntico ao SARS-CoV, é o progenitor do novo coronavírus. Em outros estudos, foi demonstrado que a glicoproteína da espícula viral possui alto grau de parentesco entre os vírus que infectam mamíferos e aves, o que permite o contato com o hospedeiro. Enquanto no caso do IBV, quando inalado, o vírus se liga aos receptores de glicoproteína contendo ácido siálico nas células epiteliais ciliadas do tecido respiratório, a replicação viral resultará em perda da função ciliar, acúmulo de muco , necrose e descamação, causando falta de ar e sufocação. O IBV afeta a traqueia, os rins e o trato reprodutivo de muitas aves. No caso das galinhas, o IBV virêmico causa lesões no magno e no útero. Esta revisão elucida alguns pontos-chave nas diferenças entre o novo coronavírus e o vírus da bronquite infecciosa. É altamente improvável que o SARS-CoV-2 infecte ou cause doenças em aves.

The aim of this study was to determine the presence of serum antibodies against four respiratory pathogens (avian influenza [AI], Newcastle disease [NDV], avian infectious bronchitis [IBV] and avian infectious laryngotracheitis [ILT]) that could affect migratory aquatic and resident birds of three high Andean lagoons of Ecuador. Blood samples (n=153) were collected from birds of seven species in the Andean lagoons of Colta, Yambo and Yahuarcocha. The presence of antibodies (Ab) against IBV and ILT was detected by an indirect ELISA (ELISAi) and by the haemagglutination inhibition test (HI); and NDV and avian influenza (H5N1 and H7N3) were detected by an ELISAc and HI. Seropositivity to NDV was 3.2% (5/153), with three cases in Yahuarcocha in the Neotropical cormorant (Phalacrocorax brasilianus), one case in Colta in the Andean coot (Fulica ardesiaca) and one in Yambo in the Andean reddish duck (Oxyura ferruginea). The seropositivity against AI was 13% (20/153), mainly in the Andean reddish duck and the Southern silvery grebe (Podicceps occipitalis) in Colta, and in the yellow-billed pintail (Anas georgica), Andean coot and Andean reddish duck in Yambo. Likewise, serum Ab was found against IBV in two cormorants in Yahuarcocha. No antibodies against ILT were found

El objetivo del estudio fue determinar la presencia de anticuerpos séricos frente a cuatro patógenos respiratorios (influenza aviar [AI], enfermedad de Newcastle [NDV], bronquitis infecciosa aviar [IBV] y laringotraqueítis infecciosa aviar [ILTV]) que podrían afectar a las aves acuáticas migratorias y residentes de tres lagunas altoandinas del Ecuador. Se colectaron 153 muestras de sangre de aves de siete especies en las lagunas andinas de Colta, Yambo y Yahuarcocha. La presencia de anticuerpos (Ac) contra IBV e ILTV se detectó por un ELISA indirecto (ELISAi) y por la prueba de inhibición de la hemoaglutinación (HI); para NDV e influenza aviar (H5N1 y H7N3) se usó un ELISAc e HI. La seropositividad a NDV fue de 3.2% (5/153), habiendo tres casos en Yahuarcocha en el cormorán neotropical (Phalacrocorax brasilianus), un caso en Colta en la focha andina (Fulica ardesiaca) y uno en Yambo en el pato rojizo andino (Oxyura ferruginea). La seropositividad contra AI fue de 13% (20/153), mayormente en el pato rojizo andino y el zambullidor plateado (Podicceps occipitalis) en Colta, y en el ánade piquiamarillo (Anas georgica), focha andina y pato rojizo andino en Yambo. Asimismo, se encontró Ac séricos contra IBV en dos cormoranes en Yahuarcocha. No se encontraron anticuerpos contra ILTV

RESUMEN Objetivo. El objetivo de este estudio fue identificar los diferentes genotipos del virus de bronquitis infecciosa (VBI) presente en granjas avícolas comerciales de diferentes localidades del departamento de Tolima, Colombia. Materiales y métodos . Se recolectaron 105 muestras de hisopados traqueales provenientes de aves de 21 granjas. Las aves habían sido vacunadas contra el VBI. Se realizó un "screen" para identificar muestras positivas y posteriormente la secuenciación de la región parcial de la subunidad S1 y el análisis filogenético de los aislamientos con las cepas de referencia, incluidas las vacunas utilizadas actualmente en el país. Resultados. Aves de todas las granjas tenían signos respiratorios, pero sólo cuatro granjas confirmaron la enfermedad. Las muestras positivas de VBI (HT6, HT9, HT10 y HT11) fueron patogénicas para embriones de 9 días de edad. La muestra HT6 se agrupó en el mismo clúster que las cepas de la vacuna Massachusetts. Las muestras HT9 y HT11 mostraron 99% de similitud y agrupan genéticamente distantes de las cepas de referencia y de los aislados. El HT10 mostró baja similitud con aislamientos y cepas de referencia, agrupándose separadamente en otro clúster. Conclusiones. Nuevos genotipos circulan en el departamento del Tolima, donde hay un riesgo de recombinación genética. Se estima que las vacunas utilizadas no están ofreciendo una protección cruzada contra los nuevos genotipos.

ABSTRACT Objective. The aim of this study was identify the different genotypes of infectious bronchitis virus (IVB) present in commercial poultry farms from different localities of the Tolima Department, Colombia. Materials and methods. 105 samples of tracheal swabs of poultry of 21 farms were collected. Poultry had been vaccinated against IVB. An screen to identify positive samples and posteriorly the sequencing of the partial region of the S1 subunit and phylogenetic analysis of the isolates with the reference strains, including the vaccine currently used in the country was performed. Results . Poultry all farms had respiratory signs, but only four farms was confirmed the disease. Positive samples of the IBV (HT6, HT9, HT10 and HT11) were pathogenic for embryos 9-days-old. The HT6 sample was grouped in the same cluster that the Massachusetts strains. The HT9 and HT11 samples showed 99% similarity and were grouped genetically distant from the reference strains and other isolated. The HT10 sample showed low similarities with the isolates and reference strains, grouping alone in another cluster. Conclusions . New genotypes are circulating in the Tolima Department, where there is a risk of genetic recombination. Is believed that vaccines used were not providing cross-protection against the new genotypes.

Objetivo. Evaluar la dinámica serológica contra el virus de bronquitis infecciosa aviar y su relación con la presentación y/o antecedentes de signos clínicos y hallazgos patológicos, bajo condiciones de campo. Materiales y métodos. Se realizó un muestreo al azar en dos fases, en pollo de engorde y reproductoras de granjas del Departamento de Cundinamarca. En la primera fase se tomó muestra de sangre a un total de 224 aves, distribuidas en 7 granjas. En la segunda fase, realizada 20 días posteriores al primer muestreo, se tomó una segunda muestra al mismo número de aves empleadas inicialmente. Las muestras de los sueros obtenidos se emplearon para la realización del inmunoensayo ligado a enzima (ELISA), diseñado para detectar anticuerpos frente al virus de la bronquitis infecciosa aviar en suero sanguíneo. Resultados. Se obtuvo que del total de las granjas analizadas el 85.72% mostró reactividad serológica al virus de la Bronquitis Infecciosa aviar (VBIA), con correlación ante la presencia de los signos clínicos o antecedentes respiratorios en granja.

Objective. Evaluate the serological dynamics against avian infectious bronchitis virus and its relationship with the presentation and / or a history of clinical signs and pathological findings, under field conditions. Materials and methods. A random sampling was conducted in two phases, in broiler and breeder farms located in the Department of Cundinamarca. In the first phase blood sample were taken from a total of 224 birds, distributed over the 7 farms. In the second phase, carried out 20 days after the first, a second sample was collected from the same number of birds used in the first phase. The serum samples were used to carry out the enzyme linked immunoassay (ELISA) intended to detect antibodies against avian infectious bronchitis virus in blood serum. Results. As a result it was found that from the total farms analyzed the 85.72% showed serologic reactivity against Avian Infectious Bronchitis Virus (AIBV) that correlated to the presence of clinical signs or previous history of respiratory disease in the farm.

Avian infectious bronchitis virus (IBV) and bovine coronavirus (BCoV) are pathogens of veterinary importance that affect birds and bovine in Cuba; however, molecular characteristics and genetic diversity of these viruses are unknown. This study was aimed at determining the molecular characteristics and genetic diversity of both agents, based in the spike S gene. A molecular analysis was carried out from field strains of BCoV collected between 2009 and 2011 and phylogenetic studies were conducted using partial or complete S gene sequences as phylogenetic markers. Besides, studies of phylogenetic inference were carried out in S1 region of recent isolates of IBV. All Cuban bovine coronavirus sequences were located in a single cluster supported by 100 % bootstrap and 1.00 posterior probability values. The Cuban BCoV sequences were also clustered with the USA BCoV strains corresponding to the GenBank accession numbers EF424621 and EF424623, suggesting a common origin for these viruses. This phylogenetic cluster was also the only group of sequences in which no recombination events were detected. Of the 45 amino acid changes found in the Cuban strains, four were unique. On the other hand, two putative genotypes genetically different to the Massachusetts genotype H120 strain used in the Cuban vaccination program were found in the flocks assessed. In addition, a potential nephropathogenic IBV isolate was found by first time in Cuba. This research won the 2012 Award of the Cuban National Academy of Sciences.

El virus de la bronquitis infecciosa aviar (IBV) y el coronavirus bovino (BCoV) son agentes patógenos de importancia veterinaria porque afectan a las aves y al ganado bovino en Cuba. Como se desconocen sus características moleculares y diversidad genética, el objetivo de esta investigación fue determinarlas en ambos agentes, a partir del gen de la espícula S. Se analizaron cepas de campo de BCoV, recolectadas entre los años 2009 y 2011, y se compararon filogenéticamente según varios marcadores del gen S. Además se hicieron estudios de inferencia filogenética en una región de S1 de aislados recientes del IBV. Todas las cepas de BCoV cubanas se localizaron en un mismo grupo filogenético con un soporte estadístico del 100 % y valor de probabilidad posterior 1.00. Las secuencias de coronavirus bovino cubanas se agruparon con cepas de BCoV de EE.UU. con números de acceso en el GenBank de EF424621 y EF424623, que sugiere un origen común para estos virus. Este grupo filogenético fue el único en cuyas secuencias no se detectaron eventos de recombinación. De los 45 cambios de aminoácidos en las cepas cubanas, cuatro fueron únicos. En las granjas evaluadas se detectaron dos posibles genotipos genéticamente diferentes al genotipo Massachusetts de la cepa H120 usada en el programa de vacunación cubano. Además, se halló un potencial aislado de IBV nefropatogénico encontrado por primera vez en Cuba. Este trabajo mereció el Premio Anual de la Academia de Ciencias de Cuba del año 2012.

In order to dissect the histopathological changes produced by the infection of avian infectious bronchitis virus in previously vaccinated egg-laying hens from a poultry farming unit, 35 White Leghorn egg-laying hens that had been in production for 9 to 10 months (twenty seven of which had clinical symptoms corresponding to respiratory disease and eight apparently healthy individuals) were selected for further study. After clinical examination and necropsy, they were classified into apparently healthy, mild, moderate or severe according to the severity of the clinical-pathological process. Samples were taken from paranasal sinuses, trachea and lungs for histopathological study, and trachea-lung pools were prepared from four individuals for virus isolation and molecular biology assays. The presence of mucus was evidenced with Schiff’™s non-enzymatic histochemical staining, and histomorphometric analyses were used to estimate the number of glands in the tracheal mucosa. The proportions of histopathological lesions were compared, using one-way Anova to determine gland loss at the tracheae with a significance level of p < 0.05 in both cases. Histopathological analysis of the epithelia of paranasal sinuses, trachea and bronchia revealed the presence of epithelial erosion, mucous exudate and hyperplasia of mucosa-associated lymphoid tissue. Glandular cysts were observed at the paranasal sinuses, and epithelial metaplasia was detected in the trachea. It was possible to isolate and identify infectious bronchitis coronavirus from the original samples and from samples passaged in chicken embryos.

Con el objetivo de determinar los cambios histopatológicos causados por el virus de bronquitis infecciosa aviar en gallinas ponedoras vacunadas, afectadas con síndrome respiratorio crónico, en una unidad avícola, se seleccionaron 35 gallinas White Leghorn, entre 9 y 10 meses de postura (27 con diagnóstico clínico presuntivo de enfermedad respiratoria y ocho sin alteraciones aparentes. Se les realizó el examen clínico y la necropsia, y se clasificaron en cuatro grupos según el proceso clínico-patológico: leve, moderado, severo y control sano. Se tomaron muestras de los senos paranasales, la tráquea y los pulmones (histopatología) y mezclas de muestras de tráquea-pulmón, de tres y cuatro aves para el aislamiento del coronavirus de la bronquitis infecciosa y el análisis de biología molecular, respectivamente. Se aplicó la técnica histoquímica no enzimática del ácido periódico de Schiff, para demostrar la presencia de moco; y se cuantificaron las glándulas de la mucosa de la tráquea (histomorfometría). Se compararon las proporciones de las lesiones histopatológicas y se hizo un análisis de varianza de una vía para determinar las pérdidas de las glándulas en la tráquea, con un nivel de significación en ambos análisis de p < 0.05. Mediante técnicas histopatológicas, en el epitelio de los senos paranasales, la tráquea y los bronquios, se observó erosión del epitelio y exudado mucoso e hiperplasia del tejido linfoide asociado a mucosa. En los senos paranasales se observaron quistes glandulares y en la tráquea se observó metaplasia epitelial. A partir de muestras originales y pases en embrión de pollos se aisló e identificó el coronavirus de la bronquitis infecciosa.

The study evaluated the interference in the immune protection system against Newcastle disease (ENC) caused by the vaccination against Avian Metapneumovirus (aMPV) in a simultaneous vaccination against ENC and Infectious Bronchitis (BI) in oneday- old broilers. Four hundred Cobb-Vantress 500 broilers were distributed into four groups. Group I vaccinated at 1-day-old against BI (H120), ENC (VG/GA) and aMPV (11/ 94) with revaccination at day 9 against ENC (VG/GA). Group II vaccinated at 1-day-old against BI (Ma5), ENC (C2) and aMPV (11/94) and revaccinated at day 9 against ENC (Clone 30). Group III vaccinated at 1-day-old against BI and ENC (VG/GA) and revaccinated at day 9 against ENC (VG/GA). Group IV received no vaccine. All groups were challenged at day 30 with a velogenic viscerotropic strain of ENC virus. Mortality, clinical signs, serologic response, post-vaccination reaction, and productive performance were evaluated. Mortality was 12 and 16% for groups vaccinated against aMPV versus 23% for the non-vaccinated group against aMPV, and 88% for the control group; however, no significant difference was found between the three vaccinated groups. Findings indicate that vaccination against aMPV in broilers did not cause interference in the protection against ENC in any of the vaccinated groups; besides, there was less post-vaccination reaction with the enteric strain vaccine instead of a respiratory strain of ENC.

El estudio evaluó la interferencia en la protección contra la enfermedad de Newcastle (ENC) ocasionada por la vacunación contra Metapneumovirus (aMPV) en un programa de vacunación simultánea al primer día de edad contra ENC y Bonquitis Infecciosa (BI) en pollos de carne. Se usaron 400 pollos de carne Cobb-Vantress 500 divididos en cuatro grupos. El grupo I vacunado al primer día contra BI (H120), ENC (VG/GA) y aMPV (11/94) y revacunado al día 9 contra ENC (VG/GA). El Grupo II vacunado al primer día contra BI (Ma5), ENC (C2) y aMPV (11/94) y, revacunado al día 9 contra ENC (Clone 30). El grupo III vacunado al primer día contra BI (H120) y ENC (VG/GA) y revacunado al día 9 contra ENC (VG/GA). El Grupo IV no fue vacunado. Todos los grupos fueron desafiados el día 30 con una cepa velogénica viscerotrópica del virus de ENC. Se valuó mortalidad, signos clínicos, respuesta serológica, reacción post vacunal y parámetros productivos. La mortalidad fue de 12 y 16% para los grupos vacunados contra aMPV versus 23% para el grupo no vacunado contra aMPV, y 88% para el control sin vacunas; sin embargo, las diferencias entre los tres grupos vacunados no fueron significativas. Los resultados indican que la vacunación contra aMPV en pollos de carne no ocasionó interferencia en la protección contra la ENC en ninguno de los grupos vacunados simultáneamente contra la ENC, BI y aMPV al primer día de edad, y se vio menor reacción post vacunal usando la cepa entérica que con la cepa de tropismo respiratorio del virus de la ENC.

In order to evaluate the serological response to agents associated to chronic respiratory syndrome in poultry, 120 White Leghorn replacement layers, having received all the vaccines of the immunization program currently applied in Cuba, were selected and sampled monthly from the 12th to the 50th week of age. The samples were assayed for antibodies against Mycoplasma gallisepticum (by fast serum plate agglutination), Ornithobacterium rhinotracheale and Avian Infectious Bronchitis Virus (by ELISA), and Newcastle Disease Virus (by hemagglutination inhibition assay, HIA); comparing the proportion of birds positive to Mycoplasma gallisepticum, Ornithobacterium rhinotracheale, or with HIA titers higher than 1/8, and performing an analysis of variance for the geometric means of the antibody titers against the Avian Infectious Bronchitis Virus at p < 0.05 for statistical significance, as implemented in the Comprop-1 and Statgraphics Plus 5.1 statistical software packages. The results corroborated the presence of M. gallisepticum and provided the first evidence of positive reactions to O. rhinotracheale in laying hens with chronic respiratory syndrome. The serological kinetics of the bird population vaccinated against avian infectious bronchitis evidenced a second seroconversion event, probably due to the circulation of this infectious agent. No serological responses against Newcastle Disease Virus were detected. Further studies for the isolation and characterization of different O. rhinotracheale serovars from laying hens with chronic respiratory syndrome are required.

Para evaluar la respuesta serológica de agentes asociados al síndrome respiratorio crónico de las aves, se seleccionaron 120 pollonas de reemplazo de ponedoras, de la raza White Leghorn, que habían recibido todas las vacunas de acuerdo con el programa de inmunización vigente en Cuba. Desde las 12 hasta las 50 semanas de edad, mensualmente se muestrearon estas aves. Las muestras se evaluaron para la detección de anticuerpos contra Mycoplasma gallisepticum (mediante seroaglutinación rápida en placa) y Ornithobacterium rhinotracheale, contra el virus de la bronquitis infecciosa aviar (mediante ELISA) y el virus de la enfermedad de Newcastle (mediante la inhibición de la hemoaglutinación IHA). Se compararon proporciones de aves positivas a Mycoplasma gallisepticum, a Ornithobacterium rhinotracheale, y aves reactoras con títulos de la IHA superiores a 1/8, y se hizo un análisis de varianza simple para las medias geométricas de los títulos de anticuerpos contra bronquitis infecciosa aviar. Los niveles de significación en ambos análisis fueron de p < 0.05, apoyados en los paquetes estadísticos Comprop-1 y Statgraphics Plus 5.1. Los resultados corroboraron la presencia de Mycoplasma gallisepticum, observándose reacciones positivas a O. rhinotracheale por primera vez en gallinas ponedoras afectadas por el síndrome respiratorio crónico. La cinética serológica en la población de aves vacunadas contra la bronquitis infecciosa aviar mostró una segunda seroconversión, posiblemente relacionada con la circulación del agente. No se evidenció respuesta serológica a la infección con la enfermedad de Newcastle. Se debe continuar el estudio de aislamiento y caracterización de los diferentes serovares de O. rhinotracheale en gallinas ponedoras afectadas por el síndrome respiratorio crónico.

Avian infectious bronchitis (AIB) is a viral disease worldwide distributed and it is considered one of the main causes of economic losses for poultry industry because of its characteristic of affecting development of broiler and laying hens. In Cuba, the current diagnosis is carried out by viral isolation and its identification by conventional methods is difficult. In order to identify the possible presence of avian infectious bonchitis virus in cuban isolates a reverse transcription-polymerase chain reaction assay (RT-PCR) specific for this virus was applied. Trachea-lung samples were taken as pooles of three and four birds after each necropsy, evaluating a total of eleven birds. The sequences of AIB virus were detected in two of three pools. In one of these pools the detection from clinical sample was also obtained, a very important aspect for its differentiation with serious diseases with a similar clinical course as Avian influenza and Newcastle disease. The RT-PCR showed a potential in order to be used in the identification of isolates from AIB virus, as well as in the direct examination of clinical samples opening the possibilities of its use in the quick, sensitive and specific detection of this agent in our country an essential aspect in the diagnosis and control of this viral infection.

La bronquitis infecciosa aviar (BIA) es una enfermedad viral ampliamente diseminada en el mundo y se considera una de las principales causas de pérdidas económicas significativas en la industria avícola, debido a que afecta el desarrollo de aves de engorde y ponedoras. En Cuba, el diagnóstico actual se realiza por aislamiento viral y es difícil su identificación por métodos convencionales. Para identificar la posible presencia del virus de la BIA en aislados cubanos se aplicó un ensayo de reverso transcripción acoplado a reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) específico para este virus. Las muestras de tráquea-pulmón fueron tomadas como grupos de tres y cuatro aves después de la necropsia de cada una, evaluándose un total de once aves. Las secuencias del virus de la BIA fueron detectadas en dos de los tres grupos evaluados. En uno de estos grupos se logró además, la detección del virus a partir de la muestra clínica; aspecto importante para la diferenciación con enfermedades graves que cursan con un cuadro clínico similar como la Influenza aviar y la Enfermedad de Newcastle. La RT-PCR mostró potencial para ser usado en la identificación de aislados del virus de la BIA, así como en el examen directo a partir de muestras clínicas, lo que aporta posibilidades de su empleo en nuestro país para la detección rápida, sensible y específica de este agente, aspecto esencial en el diagnóstico y control de esta infección viral.

A reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) assay, coupled with sequencing, was used to detect and genetically characterize different infectious bronchitis virus (IBV) isolates in Chile. The RT-PCR procedure included the use of the primers NT1 and NT2 that were located close to the N-terminus of the S1 gene and bracketed the hypervariable region, and the amplified sequences were aligned and analyzed with DNAman software, and compared with sequences from GenBank. The level of detection of the RTPCR assay was equivalent to virus isolation in eggs when testing tissues directly, but the assay was more sensitive when used to detect virus stored in allantoic fluid. The amplimers from all historical Chilean isolates were identical in size (193 bp) and exhibited 71-96% similarity on sequence analysis. These isolates showed between 68-97% similarity to strains from North America, Europe, Asia, New Zealand and Australia.

Una técnica de reacción en cadena de la polimerasa transcriptasa reversa (RT-PCR) junto a una secuenciación fue usada para detectar y caracterizar genéticamente virus diferentes de bronquitis infecciosa aviar (VBIA) aislados en Chile. El procedimiento de RT-PCR incluyó el uso de los partidores NT1 y NT2, los cuales se localizaron cerca del término N del gen S1 y cubrieron la región hipervariable. La secuencia amplificada fue alineada y analizada con el programa computacional DNAman, y comparada con secuencias reportadas en GenBank. El nivel de detección de la técnica de RT-PCR fue equivalente al aislamiento viral en huevos cuando se usaron directamente tejidos, pero el ensayo fue más sensitivo cuando fue usado para detectar virus almacenados en fluido alantoideo. Los amplificados de todos los aislados históricos de Chile fueron idénticos en tamaño (193pb) y exhibieron entre ellos, al analizar la secuencia una similitud del 71 al 96%. Estos aislados mostraron entre 68 y 97% de similitud con cepas de Estados Unidos, Europa, Asia, Nueva Zelandia y Australia.