Abstract Introduction. In organic agriculture, green manures and biocontrols are used as methods for fertilization and pest control. However, their independent application of these inputs increases production costs. A pelletized formulation is proposed to allow simultaneous application of both inputs. Objective. To evaluate the effect of pelletized Mucuna pruriens (L.) DC. inoculated with Trichoderma harzianum Rifai on nutritional intake, agricultural yield, and regulation of Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici in tomato (Solanum lycopersicum L.). Materials and methods. The experiment was carried out in 2022 in Tablón del Guarco, Cartago, Costa Rica, using a randomized complete block design with seven treatments and seven repetitions. Two formulations (A and B) of biopellet (M. pruriens + zeolite + T. harzianum) were applied at three dosages (15, 30, 50 g/plant). T. harzianum was added at a rate of 5 g/kg of biopellet. Applications of each treatment were conducted every 15 days for a total of eight applications. At the time of planting, F. oxysporum was inoculated (100 mL/plant with a concentration of 1 x 103 CFU). Results. The application of biopellet achieved a yield and weight of high-quality fruits similar to the commercial control. There were no significant differences among treatments for second and third-quality fruits. The technical efficiency in controlling F. oxysporum reached 97.6 % with biopellet. This amendment increased the levels of Carbon (C), Nitrogen (N), and organic matter in the soil and affected the nutritional content of the plant foliage in the first 60 days after sowing. Conclusions. The biopellet has the capacity to make chemical and organic contributions to the soil, which improves the nutrition of the tomato crop. It could be also a biocontrol alternative against F. oxysporum and compatible with T. harzianum.

Resumen Introducción. En agricultura orgánica, se utilizan abonos verdes y biocontroladores como métodos de fertilización y control de plagas. Sin embargo, la aplicación independiente de estos incrementa los costos de producción. Se propone una presentación peletizada que permita la aplicación conjunta de ambos insumos. Objetivo. Evaluar el efecto de Mucuna pruriens (L.) DC. peletizada e inoculada con Trichoderma harzianum Rifai en el aporte nutricional, el rendimiento agrícola y la regulación de Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici en tomate (Solanum lycopersicum L.). Materiales y métodos. El experimento se ejecutó el año 2022 en Tablón del Guarco, Cartago, Costa Rica, bajo un diseño de bloques completos al azar con siete tratamientos y siete repeticiones. Se aplicaron dos formulaciones (A y B) de biopélet (M. pruriens + zeolita + T. harzianum) en tres dosificaciones (15, 30, 50 g/planta). La adición de T. harzianum se efectuó a razón de 5 g por cada kilo del biopélet. Se realizaron aplicaciones cada 15 días por tratamiento para un total de ocho aplicaciones. Se inoculó F. oxysporum (100 mL/planta con una concentración de 1 x 103 UFC) a la siembra. Resultados. La aplicación del biopélet mostró un rendimiento y peso de frutos de primera calidad similar al testigo comercial. En frutos de segunda y tercera calidad, no hubo diferencias significativas entre tratamientos. La eficiencia en el control de F. oxysporum alcanzó el 97,6 % con biopélet. Esta enmienda aumentó los niveles de Carbono, Nitrógeno y materia orgánica en el suelo e influenció el contenido nutricional en el follaje a los 60 días después de la siembra. Conclusiones. El biopélet tiene la capacidad de realizar aportes químicos y orgánicos al suelo, por lo cual mejora la nutrición del cultivo del tomate. Los resultados sugieren además que es una alternativa de biocontrol contra F. oxysporum y compatible con T. harzianum.

Abstract Introduction. Endophytic fungi (EF) in grapevines (Vitis vinifera) have great potential for agricultural applications and may represent possible biological control agents for vineyards. Objective. To isolate and identify endophytic fungi (EF) from grapevine plants with antibiosis capacity against Botrytis cinerea. Materials and methods. Young and mature branches from forty healthy grapevine plants were collected from seven production lots in the Cañete province, Lima, Peru, during March to May 2022. EF isolation was performed on 702 sections of disinfected tissues using potato dextrose agar (PDA) culture medium, and identification was carried out at the genus level. Secondary metabolites were extracted from twenty-eight EF strains to determine the mycelial inhibition of the pathogen. An analysis of variance (ANOVA) was conducted on the evaluated parameters using the Minitab statistical program. Results. A total of 129 EF strains were isolated from leaves and stems of young and mature grapevine branches, encompassing seven genera (Trichoderma, Aspergillus, Alternaria, Cladosporium, Fusarium, Nigrospora, and Stemphylium). The highest frequency was found in leaves and mature branches. Trichoderma and Alternaria were the most frecuent genera in grapevine plants, with 22.48 % and 21.71%, respectively. Metabolites obtained from the EFVH-01 strain of the genus Cladosporium, and EF-99 and EF-70 strains of the genus Alternaria, had the greatest effect on mycelial inhibition of the pathogen. Conclusions. Strains of endophytic fungi from the genera Cladosporium and Alternaria showed antibiosis capacity against Botrytis cinerea at the laboratory scale, which could potential biocontrol agents of pathogens in grapevine cultivation.

Resumen Introducción. Los hongos endófitos (HE) de la vid (Vitis vinifera) tienen un gran potencial de aplicación en la agricultura y pueden representar posibles agentes de control biológico de los viñedos. Objetivo. Aislar e identificar los hongos endófitos (HE) de plantas de vid con capacidad de antibiosis hacia Botrytis cinerea. Materiales y métodos. Se colectaron ramas jóvenes y maduras de cuarenta plantas sanas de vid de siete lotes de producción en la provincia de Cañete, Lima, Perú, durante los meses de marzo a mayo 2022. El aislamiento de HE se realizó de 702 secciones de tejidos desinfectados en medio de cultivo papa dextrosa agar (PDA) y la identificación fue a nivel de género. Se extrajeron metabolitos secundarios de veintiocho cepas de HE para determinar la inhibición micelial del patógeno. Se llevó a cabo un análisis de varianza (ANDEVA) de los parámetros evaluados con el programa estadístico Minitab. Resultados. Se aislaron un total de 129 cepas de HE de hojas y tallos de ramas jóvenes y maduras de vid, que correspondieron a siete géneros (Trichoderma, Aspergillus, Alternaria, Cladosporium, Fusarium, Nigrospora y Stemphylium). La mayor frecuencia se presentó en las hojas y rama madura. Trichoderma y Alternaria fueron los géneros más frecuentes en las plantas de vid con 22,48 % y 21,71 %, respectivamente. Los metabolitos obtenidos de las cepas HEVH-01 del género Cladosporium, HEV-99 y HEV-70 del género Alternaria, tuvieron mayor efecto en la inhibición micelial del patógeno. Conclusiones. Cepas de hongos endofitos del género Cladosporium y Alternaria mostraron capacidad de antibiosis hacia Botrytis cinerea a escala de laboratorio, los cuales podrían ser potenciales biocontroladores de patógenos en el cultivo de vid.

Abstract Introduction. “Green mold,” caused by Penicillium digitatum is one of the phytosanitary issues that limits citrus production. For its control, synthetic fungicides are used, which have lost effectiveness due to resistance developed by the fungus. An alternative is the use of endophytic fungi with biocontrol action. Objective. To evaluate the effect of secondary metabolites (SM) from endophytic fungi (EF) on the mycelial inhibition of Penicillium digitatum and the effectiveness of disease control in mandarin fruits (Citrus reticulata) post-harvest. Materials and methods. The study was conducted in 2022, using a completely randomized experimental design in the Plant Health Laboratory at the Universidad Nacional de Cañete (UNDC), Lima, Peru. For the antibiosis test, secondary metabolites were extracted from ten strains of EF from the genera Trichoderma sp., Fusarium sp., and Aspergillus sp., where mycelial inhibition of the pathogen (%) was evaluated. SMs were sprayed at 15 % (v/v) concentration on mandarin fruits that were disinfected and inoculated with the pathogen by spraying (1x 105 CFU/cc). Additionally, a commercial biocontrol, a vegetable oil, and a fungicide were used. After 6 and 9 days, disease incidence (%) and severity index (0, 1, 2, 3) were evaluated. Results. Secondary metabolites from strains the HEA-111 (Aspergillus), HEA-109 (Fusarium), and HSA-1 (Trichoderma) showed the highest mycelial inhibition with 95.05 %, 87.51 %, and 47.47 %, respectively. In mandarin fruits treated with SMs from strains HEA-109 and HSA-1, there was a control of 80 % and 55 %, respectively. Conclusions. SMs from EF were effective in inhibiting the mycelial growth of P. digitatum and reduces disease progression in mandarin fruits post-harvest.

Resumen Introducción. El “moho verde” causado por Penicillium digitatum es uno de los problemas fitosanitarios que limita la producción en los cítricos. Para su control se utilizan fungicidas sintéticos, que han perdido eficacia, debido a la resistencia generada por el hongo. Una alternativa, es el uso de hongos endófitos con acción biocontroladora. Objetivo. Evaluar el efecto de metabolitos secundarios (MS) de hongos endófitos (HE) en la inhibición micelial de Penicillium digitatum y la eficacia de control de la enfermedad, en frutos de mandarina (Citrus reticulata) después de la cosecha. Materiales y métodos. El estudio se realizó en 2022, bajo un diseño experimental completo al azar, en el laboratorio de Sanidad Vegetal, Universidad Nacional de Cañete (UNDC), Lima, Perú. Para la prueba de antibiosis se extrajeron los metabolitos secundarios de diez cepas de HE de los géneros Trichoderma sp., Fusarium sp. y Aspergillus sp., en donde se evaluó la inhibición micelial del patógeno (%). Se asperjaron MS a una concentración del 15 % (v/v) sobre frutos de mandarina que fueron desinfectados e inoculados con el patógeno por aspersión (1x105 UFC/cc). Adicionalmente, se utilizaron un biocontrol comercial, un aceite vegetal y un fungicida. Después de 6 y 9 días, se evaluaron la incidencia (%) y el índice de severidad (0,1,2,3) de la enfermedad. Resultados. Los metabolitos secundarios de las cepas HEA-111 (Aspergillus), HEA-109 (Fusarium) y HSA-1 (Trichoderma) presentaron la mayor inhibición micelial con 95,05 %, 87,51 % y 47,47 %, respectivamente. En los frutos de mandarina tratados con los MS de las cepas HEA-109 y HSA-1, hubo un control del 80 % y 55 %, respectivamente. Conclusiones. Los MS de HE tuvieron efecto en la inhibición micelial de P. digitatum y redujeron el avance de la enfermedad en frutos de mandarina después de la cosecha.

Abstract Introduction. Supply chain issues have increased the costs of raw material and reduced the availability of materials for the production of biological control agents. This can result in greater disease pressure and lower yields on farms. Objective. To determine the effect of different amounts of starch and the use of local ingredients in small- and large-scale fermentation processes for Trichoderma harzianum. Materials and methods. The study was conducted in San José, Costa Rica, between 2016 and 2018. Flask experiments were performed to investigate the reduction or elimination of starch in commercial fermentation media. Fermentation vessel trials were conducted to evaluate the effectiveness of an alternative local medium, which included three treatments: 1) commercial medium as a control, 2) 10 % molasses medium, and 3) 10 % molasses with 0.5% yeast extract. Viable spore counts were performed to determine colony-forming units (CFU/mL). Results. Reducing starch to 10 % of the original medium had no impact on CFU/mL. However, the absence of starch resulted in uneven growth during fermentation. Molasses produced approximately half the CFU/mL compared to the commercial medium but exceeded the threshold of 107 CFU/mL used in studies for the biological control of plant pathogens. Results obtained in a commercial-scale fermenter were similar to those of pilot-scale fermentation. Conclusion. Reducing starch content in the commercial medium did not affect growth, but the absence of starch led to solid mycelium clumps. The use of a local molasses-based medium on a commercial scale feasible as long as the required viable spore count for field use is maintained.

Resumen Introducción. Los problemas en la cadena de suministro aumentaron los costos de las materias primas y redujeron la disponibilidad de materiales para la producción de agentes de control biológico. Esto puede ejercer mayor presión de enfermedades y menores rendimientos en las granjas. Objetivo. Determinar el efecto de diferentes cantidades de almidón y el uso de ingredientes locales en procesos de fermentación a pequeña y gran escala para Trichoderma harzianum. Materiales y métodos. El estudio se ralizó en San José, Costa Rica, entre 2016 y 2018. Se realizaron ensayos en matraces para investigar la reducción o eliminación de almidón en medios de fermentación comerciales. Se llevaron a cabo ensayos en recipientes de fermentación para evaluar la efectividad de un medio local alternativo, que incluyó tres tratamientos: 1) medio comercial como control, 2) melaza al 10 % y 3) melaza al 10 % con 0,5 % de extracto de levadura. Se realizaron recuentos de esporas viables para determinar las unidades formadoras de colonias (UFC/mL). Resultados. La reducción de almidón al 10 % del medio original no tuvo impacto en las UFC/mL. Sin embargo, la ausencia de almidón resultó en un crecimiento desigual durante la fermentación. La melaza produjo aproximadamente la mitad de las UFC/mL en comparación con el medio comercial, pero superó el umbral de 107 UFC/mL utilizado en estudios para el control biológico de patógenos de plantas. Los resultados obtenidos en un fermentador a escala comercial fueron similares a los de la fermentación a escala piloto. Conclusión. La reducción del contenido de almidón en el medio comercial no afectó al crecimiento, pero la ausencia de almidón provocó acumulaciones sólidas de micelio. El uso de un medio de melaza de origen local a escala comercial parece factible mientras se mantenga un recuento de esporas viables requeridas para su uso en el campo.

Resumen El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto combinado de dos tácticas de biocontrol de plagas: la biofumigación con Brassicajuncea y la inoculación de Trichoderma harzianum, sobre el crecimiento in vitro del patógeno Phomopsis spp., agente etiológico de la cancrosis en el cultivo de pecán (Carya illinoinensis). Se trituraron plantas de B. juncea y se colocaron en envases de poliestireno en dosis de 10 y 30 g. Luego, en cada uno de estos recipientes se introdujo una caja de Petri con un disco con micelio dePhomopsis spp. o T. harzianum o ambos hongos (cultivo dual). Se incubó en cámara de cultivo. Los parámetros evaluados fueron la superficie de las colonias y el porcentaje de inhibición miceliar de Phomopsis spp. Los datos se analizaron con estadística no paramétrica mediante la prueba de Kruskal-Wallis. Se obtuvieron los siguientes resultados: i) B. juncea no afectó el crecimiento de T. harzianum; ii) la dosis de 30 g de B. juncea suprimió completamente el crecimiento de Phomopsis spp.; iii) T. harzianum inhibió significativamente el crecimiento de las colonias de Phomopsis spp.; iv) la combinación de T. harzianum y la biofumigación con 10 g de B. juncea mostró sinergia sobre el control del crecimiento de Phomopsis spp. La biofumigación con B. juncea, la aplicación de T. harzianum y la combinación de ambas técnicas podrían ser alternativas promisorias para el control biológico de Phomopsis spp.

Abstract This work aimed to evaluate the combined effect of two pest biocontrol strategies: biofumigation with Brassica juncea and inoculation of Trichoderma harzianum, on the in vitro growth of the pathogen Phomopsis spp., an etiological agent of canker disease in pecan crops (Carya illinoinensis). B. juncea plants were crushed and placed in polystyrene recipients in doses of 10 and 30 g. Then, a Petri dish was introduced to each recipient, with a disk with a grown mycelium of Phomopsis spp. or T. harzianum, or both fungi (dual culture). Treatments were incubated in a culture chamber. The parameters evaluated were colonies’ surface area and percentage of mycelial inhibition of Phomopsis spp. Data were analyzed with non-parametric statistics using the Kruskal-Wallis test. The results indicated that: i) B. juncea did not affect the growth of T. harzianum; ii) the 30 g dose of B. juncea completely suppressed the growth of Phomopsis spp.; iii) T. harzianum significantly inhibited the growth of Phomopsis spp. colonies; iv) the combination of T. harzianum and biofumigation with 10 g of B. juncea showed synergy on the growth control of Phomopsis spp. Biofumigation with B. juncea, the application of T. harzianum, and the combination of both techniques could be promising alternatives for the biological control of Phomopsis spp.

Abstract Endophytic fungi are plant symbiont microorganisms, diverse and abundant in tropical regions, with great potential as biocontrol agents of agricultural fungal diseases. The objective of the present work was to evaluate in vitro antifunfal activity of endophytic fungi associated with creole cultivars of Cucumis sativus and Lagenaria siceraria from Yucatán. The endophytic strains were isolated and identified from different organs, to be subjected to dual confrontations and antibiotic tests. Twenty species with antifungal effects against Corynespora cassiicola, Colletotrichum truncatum and Fusarium equiseti were identified, obtaining inhibition ranges of 17.72-100%, 16.51-91.55% and 4.64-91.89%, respectively. Aspergillus flavus, Lasiodiplodia pseudotheobromae and Trichoderma longibrachiatum exhibited the highest percentages of inhibition against the three phytopathogens. Likewise, these three species of endophytes demonstrated an antibiotic effect in their extracts, mainly inhibiting the growth of F. equiseti by up to 46.46%. The L. pseudotheobromae strain has characteristics that give it potential as an antifungal agent, so its applications and growth conditions should continue to be explored. This work represents a first effort to understand the diversity of endophytic fungi in native crops in the region.

Resumen Los hongos endófitos son microorganismos simbiontes de plantas, diversos y abundantes en regiones tropicales, con gran potencial como agentes biocontroladores de enfermedades fúngicas agrícolas. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la actividad antifúngica in vitro de los hongos endófitos asociados con cultivares criollos de Cucumis sativus y Lagenaria siceraria de Yucatán. Las cepas endófitas fueron aisladas e identificadas de diferentes órganos de las plantas, para posteriormente ser sometidas a enfrentamientos duales y pruebas de antibiosis. Se identificaron 20 especies de hongos endófitos con efectos antifúngicos contra Corynespora cassiicola, Colletotrichum truncatum y Fusarium equiseti, obteniendo rangos de inhibición de 17.72-100%, 16.51-91.55% y 4.64-91.89%, respectivamente. Aspergillus flavus, Lasiodiplodia pseudotheobromae y Trichoderma longibrachiatum exhibieron los mayores porcentajes de inhibición contra los tres fitopatógenos. Así mismo, estas tres especies de endófitos demostraron un efecto antibiótico en sus extractos, al inhibir principalmente el crecimiento de F. equiseti hasta en un 46.46%. La cepa de L. pseudotheobromae tiene características que le confieren un potencial como agente antifúngico, por lo que se deberán seguir explorando sus aplicaciones y condiciones de crecimiento. Este trabajo representa un primer esfuerzo por conocer la diversidad de hogos endófitos en los cultivos criollos de la región.

RESUMEN Trichoderma, un género de hongos filamentosos es ampliamente utilizado en la agricultura debido a sus propiedades y usos diversos, destacando su habilidad para funcionar como un agente biocontrolador contra diversos fitopatógenos. El éxito de Trichoderma se basa en múltiples mecanismos de acción, que incluyen antibiosis, micoparasitismo, competencia por espacio y nutrientes, producción de enzimas y metabolitos secundarios con actividad antimicrobiana y la estimulación de la respuesta de defensa de las plantas ante los patógenos. Esta mini revisión se centra en los mecanismos de acción de Trichoderma como biocontrolador y sus potencialidades para el uso en la agricultura. Este género de hongos filamentosos con capacidad para inhibir el crecimiento de patógenos, estimular el crecimiento de las plantas y mejorar la calidad del suelo lo convierten en un recurso valioso para los agricultores. El conocimiento de estos mecanismos puede ayudar a mejorar aún más su uso en la agricultura y promover prácticas agrícolas sostenibles.

ABSTRACT Trichoderma, a genus of filamentous fungi, is widely used in agriculture due to its various properties and uses, particularly its ability to function as a biocontrol agent against various phytopathogens. The success of Trichoderma is based on multiple mechanisms of action, including antibiosis, mycoparasitism, competition for space and nutrients, production of enzymes and secondary metabolites with antimicrobial activity, and stimulation of the plant defense response against pathogens. This mini review focuses on the mechanisms of action of Trichoderma as a biocontrol agent and its potential for use in agriculture. Its ability to inhibit the growth of pathogens, stimulate plant growth, and improve soil quality makes it a valuable resource for farmers. Understanding these mechanisms can further improve its use in agriculture and promote sustainable agricultural practices.

Abstract Introduction.Soybean establishes a symbiosis with Bradyrhizobium japonicum that allows it to fix atmospheric N. Coinoculation with other plant growth-promoting microorganisms can increase Biological Nitrogen Fixation (BNF) and plant growth. Objective. Determine if inoculation with P-solubilizing fungi (SP), Aspergillus flavus (S1) and Trichoderma longibrachiatum (S2), affects growth and BNF variables in soybeans. Materials and methods. In the greenhouse on an Andisol and an Ultisol, growth variables and BNF were evaluated in soybeans inoculated with B. japonicum and 2 SPs. Five treatments were evaluated: an absolute control (T), addition of phosphate rock (RF), addition of RF and inoculation with B. japonicum (BRF) and the addition of RF, B. japonicum and the 2 SPs independently (BRFS1 and BRFS2). An unrestricted randomized design with 4 repetitions was established and the data was analyzed according to normality, either with ANDEVA and DGC at 5% or Kruskal Wallis at 5%. Results. The responses obtained showed a positive effect on the evaluated variables when soybeans were inoculated with SP in addition with B. japonicum. The effect was a trend in Andisol, for the variables aerial fresh weight and number of nodules and their dry weight, while for Ultisol significance was found for these same variables, as well as for aerial dry weight, leaf area and N content and foliar P, with the greatest effect in BRFS2. In absolute terms, the highest P content in the soil microbial biomass and the highest SP population was found in the treatment with the presence of S2. The populations of N Fixers (NF) in the soil were higher for T and RF that did not have inoculation with B. japonicum. Conclusion. Inoculation with SP fungi can positively affect BNF, foliar N and P amounts as well as soybean plant growth.

Resumen Introducción. La soya establece una simbiosis con Bradyrhizobium japonicum para fijar N atmosférico. La coinoculación con otros microorganismos promotores del crecimiento (MPC) puede incrementar la Fijación Biológica de Nitrógeno (FBN) y el crecimiento de las plantas. Objetivo. Determinar si la inoculación con los hongos solubilizadores de P (SP), Aspergillus flavus (S1) y Trichoderma longibrachiatum (S2), afecta variables de crecimiento y de FBN en soya. Materiales y métodos. En un Andisol y un Ultisol en invernadero, se evaluaron variables de crecimiento y FBN en soya inoculada con B. japonicum y 2 SP. Se evaluaron 5 tratamientos: un testigo absoluto (T), adición de roca fosfórica (RF), adición de RF e inoculación con B. japonicum (BRF) y la adición de RF, B. japonicum y los 2 SP de manera independiente (BRFS1 y BRFS2). Se estableció un diseño irrestricto al azar con 4 repeticiones y los datos se analizaron según la normalidad, con ANDEVA y DGC al 5% o Kruskal Wallis al 5%. Resultados. Se obtuvo un efecto positivo sobre las variables evaluadas, cuando la soya se inoculó con los SP además de B. japonicum. El efecto fue tendencia en el Andisol, para las variables peso fresco aéreo y número de nódulos y su peso seco, mientras que para el Ultisol se encontró significancia para estas mismas variables, así como para el peso seco aéreo, área foliar y contenido de N y P foliar, el efecto fue mayor en BRFS2. En términos absolutos el mayor contenido de P en la biomasa microbiana del suelo y la mayor población de SP se encontró en el tratamiento con la presencia de S2. Las poblaciones de Fijadores de N fueron mayores para T y RF. Conclusión. La inoculación con hongos SP puede afectar positivamente la FBN, las cantidades de N y P foliar así como el crecimiento de las plantas de soya.

Abstract The marketing of microbial pesticides has increased exponentially in recent years. Almost 70 % of the products marketed use as active ingredient conidia of biocontrol fungi, and One of the most frequently used criteria to evaluate the quality of these products is conidial germination test, Specifically, this methodology is used to select and assess the viability and vigor of elite strains with biological potential. Some of the factors that influence conidial germination over time, include the selection of culture medium, temperature, incubation time, and the addition of germination synchronizing agents. The optimization for each elite strain allows the characterization of a microorganism behavior over time, ensuring its biological activity and effective management as a biological resource for commercial purposes. The main objective of this study was to identify the optimal conditions (culture media, incubation time, and synchronizing agent concentration) for the germination of three elite strains: Trichoderma koningiopsis (Th003), Lecanicillium lecanii (Vl026), and Metarhizium robertsii (Mt004), which are active ingredients in biopesticides. As a result, the optimal conditions selected are as follows: agar-water medium with 0.0003 % benomyl for Th003 with an incubation period of 18 hours, agar-water medium with 0.0003 % benomyl for Vl026 with an incubation period of 24 hours, and PDA agar supplemented with 0.0003 % benomyl for Mt004 with an incubation period of 18 hours. These conditions will allow a precise evaluation of the germination of the biological control agents ensuring over time their viability and vigor as active ingredients in biopesticides.

Resumen La comercialización de plaguicidas microbianos ha aumentado de manera exponencial en los últimos años. Casi el 70 % de los productos que se comercializan utilizan como principio activo conidios de hongos biocontroladores y uno de los criterios más utilizados para evaluar la calidad de estos productos es la prueba de germinación de conidios. Específicamente, se utiliza para la selección y la evaluación de la viabilidad y vigor de cepas élite con potencial biológico. Algunos de los factores que influyen en la germinación de los conidios incluye la selección del medio del cultivo, la temperatura, el tiempo de incubación y la adición de sustancias sincronizadoras de germinación. La optimización para cada cepa élite permite estimar el comportamiento del microorganismo, lo que garantizará su actividad biológica y eficacia, al ser un recurso biológico con fines comerciales. El objetivo de este trabajo fue seleccionar las condiciones óptimas (medios de cultivo, tiempo de incubación y concentración de sustancia sincronizadora) para la germinación de tres cepas élite Trichoderma koningiopsis (Th003), Lecanicillium lecanii (Vl026) y Metarhizium robertsii (Mt004), las cuales son principios activos de bioplaguicidas en proceso de comercialización. Como resultado se seleccionó el medio de cultivo de agar agua con benomil al 0,0003 % con un tiempo de lectura de 18 h para Th003 y de 24 h para Vl026. Para la cepa Mt004, el medio de cultivo que favoreció la germinación sincrónica de los conidios fue agar PDA suplementado con benomil al 0,0003 % con un tiempo de lectura de 18 h. Estas condiciones permitirán a través del tiempo realizar una correcta evaluación de la germinación de los agentes de control biológico y garantizar su viabilidad y vigor como principio activo de bioplaguicidas.

Abstract The use of alternative tree and shrub species such as Hibiscus rosa sinensis L, for feeding ruminants, can provide high amounts of feed biomass and high protein content. The most commonly used propagation methods for the production of seedlings of this species are by grafting, layering and cuttings, with the latter method standing out, because it allows obtaining a greater number of seedlings per branch in less time. The objective of the research was to evaluate the effect of alternative rooting agents on wasp flower (H. rosa-sinensis L.) cuttings, under nursery conditions. Five rooting agents were evaluated consisting of Aloe vera, cinnamon, Aloe + molasses + egg (A+M+E), Moringa oleífera and the antagonistic fungus Trichoderma sp, plus a control consisting of the addition of water. The variables evaluated were number of roots per plant, root length, number of regrowths, fresh root weight per plant, dry root weight per plant, root biomass and survival percentage. The data were organized in a Microsoft Excel 2013 spreadsheet, then analyzed in the statistical program InfoStat 2020. The treatment with Trichoderma sp favors the vegetative growth of H. rosa-sinensis, followed by the A+M+E, Moringa and cinnamon treatments. The treatments with the highest percentage of survival were Moringa, cinnamon, Aloe, and Trichoderma sp, considered as excellent, while the A+M+H and control treatments were considered good.

Resumen El uso de las especies alternativas de árboles y arbustos como son Hibiscus rosa sinensis L, para la alimentación de rumiantes, puede proporcionar altas cantidades de biomasa alimenticia y alto contenido de proteína. Los métodos de propagación más utilizados para la producción de plántulas de esta especie son por injerto, acodo y esquejes, destacándose este último método, porque permite obtener un mayor número de plántulas por rama en menor tiempo. El objetivo de la investigación fue evaluar el efecto de enraizadores alternativos sobre esquejes de flor de avispa (H. rosa-sinensis L.), bajo condiciones de vivero. Se evaluaron cinco enraizadores que consistieron en aloe vera, canela, aloe + melaza + huevo (A+M+H), Moringa oleifera y el hongo antagonista Trichoderma sp, además de un testigo que consistió en la adición de agua. Las variables evaluadas fueron número de raíces por planta, longitud de raíces, número de rebrotes, peso fresco de raíz por planta, peso seco de raíz por planta, biomasa de raíces y porcentaje de sobrevivencia. Los datos fueron organizados en una hoja de cálculo de Microsoft Excel 2013, posteriormente fueron analizados en el programa estadístico InfoStat 2020. El tratamiento con Trichoderma sp favorece el crecimiento vegetativo de H. rosa-sinensis, seguido de los tratamientos A+M+H, Moringa y canela. Los tratamientos con mayor porcentaje de sobrevivencia fueron Moringa, canela, aloe y Trichoderma sp, considerados como excelentes, mientras que los tratamientos A+M+H y testigo fueron considerados buenos.

Resumen La secadera o mal de almácigo causada por Fusarium circinatum es un problema importante en la producción de planta en viveros forestales. El objetivo de esta investigación fue evaluar a Trichoderma harzianum como alternativa para controlar de manera preventiva a F. circinatum con el método de aplicación y la utilización de dos mezclas de sustratos: (1) turba de musgo, agrolita y vermiculita, y (2) aserrín, corteza de pino y turba de musgo. Se utilizaron tres formas de aplicación de T. harzianum: al sustrato, a la semilla y sin el hongo; lo que dio un total de 12 tratamientos con arreglo factorial completamente al azar (2×3×2). Se evaluó el efecto del sustrato, la forma de aplicación de T. harzianum y su interacción sobre la patogenicidad e incidencia de F. circinatum y las propiedades morfológicas de las plántulas. Los resultados indicaron que las características morfológicas en el crecimiento de la cepa coinciden con los descritos para F. circinatum y resultó ser patogénica, ya que causó enfermedad. La patogenicidad de F. circinatum disminuyó en aquellos tratamientos en los que se adicionó T. harzianum al sustrato, y presentó una respuesta positiva en la mezcla a base de aserrín con lo cual se aseguró una mejor calidad de planta. La aplicación de T. harzianum al sustrato y el uso de la mezcla a base de aserrín pueden servir como una alternativa para el control de F. circinatum, además de proveer mejores índices de calidad de planta.

Abstract The drying or seedbed evil caused by Fusarium circinatum is a problem of importance in plant production in forest nurseries. The aim of this study was to assess Trichoderma harzianum as an alternative to prevent F. circinatum with the method of application and the use of two mixtures of substrates: (1) Peat moss, agrolite and vermiculite, and (2) Sawdust, pine bark and peat moss. Three forms of application of T. harzianum were made: to the substrate, to the seed and without the fungus, which gave a total of 12 treatments with completely at random factorial arrangement (2×3×2). The effect of the substrate was evaluated, the form of application of T. harzianum and its interaction on the pathogenicity and incidence of F. circinatum and the morphological properties of the seedlings. The results indicate that the morphological characteristics in the growth of the strain coincide with those described for F. circinatum and turned out to be pathogenic when causing disease. The pathogenicity of F. circinatum decreased in those treatments where T. harzianum was applied to the substrate, showing a positive response in the sawdust-based mixture and ensuring a better plant quality. The application of T. harzianum to the substrate and the use of sawdust-based mixture can serve as an option for the F. circinatum fungus, providing better plant quality indexes.

RESUMEN El cultivo de quinua es afectado por diversas enfermedades, entre las cuales, el mildiu (Peronospora variabilis Gaum) es la más importante por su prevalencia, severidad e impacto económico. Los hongos endófitos antagonistas representan una opción sustentable para el manejo sanitario de los cultivos. El objetivo del trabajo fue determinar el comportamiento endofítico de cepas locales de Trichoderma asperelloides en plántulas de quinua. Se utilizó la técnica de cultivo para el re-aislamiento del hongo de secciones de raíz, tallo y hoja a los 15 y 30 días después de la aplicación del hongo (dda), y se realizó la observación microscópica de cortes histológicos para caracterizar la colonización del hongo a los 30 dda. El diseño definió los efectos fijos: genotipo de quinua (AMMA-18, RQ-252-18 y RQ-SAC-18), cepa de T. asperelloides: (T1, T15, T16); órgano: raíz, tallo, hoja, y momento de evaluación (15 y 30 dda). La mayor ocurrencia de re-aislamientos fue a los 15 dda en RQ-252-18 desde las tres secciones, seguido por AMMA-2018 y RQ-SAC-18. Se registró diferencias significativas en los niveles de interacción RQ-252-18/T16 siendo superiores los re-aislamientos desde raíz y hoja. A los 30 dda, no se observaron diferencias entre genotipos, y re-asliamientos eran significativamente mayores desde la raíz. El re-aislamiento fue dependiente del tiempo desde la aplicación y la combinación genotipo/cepa. Se observó colonización intercelular de hifas del hongo en el tejido epidérmico y del córtex de tallo y raíz. El trabajo amplía los registros de T. asperelloides como endófito de quinua para futuros estudios de interacción múltiple con P. variabilis u otros factores estrés biótico y/o abiótico.

ABSTRACT The quinoa crop is affected by various diseases, with mildew (Peronospora variabilis Gaum) being the most important due to prevalence, severity and economic impact. Antagonistic endophytic fungi represent a sustainable option for the sanitary management of crops. The objective of the work was to determine the endophytic behavior of local strains of Trichoderma asperelloides in quinoa seedlings. The culture technique was used to re-isolate the fungus from root, stem and leaf sections at 15 and 30 daa and microscopic observation of histological sections to characterize the colonization of the fungus at 30 daa. The design defined the fixed effects: quinoa genotype (AMMA-18, RQ-252-18 and RQ-SAC-18), T. asperelloides strain: (T1, T15, T16); organ: root, stem, leaf, and evaluation time 15 and 30 daa. The highest occurrence of re-isolations was at 15 daa in RQ-252-18 from the three sections, followed by AMMA-2018 and RQ-SAC-18. Significant differences were recorded in the RQ-252-18/T16 interaction levels, with re-isolations from root and leaf being higher. At 30 daa, there were no differences between genotypes, but between type of organ, always superior in root. Re-isolation was dependent on the time since application and the genotype/strain combination. Intercellular colonization of fungal hyphae was observed in the epidermal tissue and stem and root cortex. The work expands the records of T. asperelloides as a quinoa endophyte for future multiple interaction studies with P. variabilis or other biotic and/or abiotic stress factors.

Abstract In the states of Michoacán, Mexico and California, USA, blackberry (Rubus sp.) production is affected by wilt, which causes the loss of thousands of hectares. In the present work, the causative agent of the disease was identified and control alternatives with antagonistic microorganisms were proposed. In 2022, the causative agent of the disease was isolated and morphologically identified from an orchard in Tocumbo, Michoacán. A preliminary laboratory bioassay was performed with strains of B. subtilis, B. amyloliquefaciens, P. fluorescens, and Trichoderma spp., native to Tacámbaro and Taretan, Mich. The outstanding strains were tested in a greenhouse on plants of blackberry cv Tupy as a preventive measure and as a control, under an experimental design of randomized blocks with six repetitions. In the preliminary tests, all the strains used showed an inhibition of the mycelial growth of the pathogen greater than 50%, with Trichoderma sp. from Tacámbaro, B. subtilis and P. fluorescens standing out. In the tests carried out in situ, preventively applied treatments decreased the incidence of wilt by 57% to 66%. In terms of severity and plant height, Trichoderma sp. stood out, while the percentage of root necrosis decreased by 56% to 70% with all treatments. Control treatments also showed antagonistic efficacy, although to a lesser extent, they decreased the incidence of wilt by 2 to 58% and the percentages of root necrosis by 19 to 62%. Antagonistic microorganisms can be incorporated as a comprehensive management strategy with high efficiency.

Resumen En los estados de Michoacán, México y California, EUA, la producción de zarzamora (Rubus sp.) se ve afectada por una marchitez que ocasiona la pérdida de miles de hectáreas. En el presente trabajo se identificó el agente causal de la enfermedad y propuso alternativas de control con microorganismos antagonistas. En el año 2022 de un huerto en Tocumbo, Michoacán, se aisló e identificó morfológicamente al agente causal de la enfermedad. Se realizó un bioensayo preliminar en laboratorio con cepas de B. subtilis, B. amyloliquefaciens, P. fluorescens y Trichoderma spp, nativas de Tacámbaro y Taretan, Mich. Las cepas sobresalientes se probaron en invernadero en plantas de zarzamora cv Tupy de forma preventiva y como control, bajo un diseño experimental de bloques al azar con seis repeticiones. En las pruebas preliminares todas las cepas utilizadas mostraron una inhibición del crecimiento micelial del patógeno superior al 50%, sobresaliendo Trichoderma sp. de Tacámbaro, B. subtilis y P. fluorescens. En las pruebas realizadas in situ los tratamientos aplicados de forma preventiva disminuyeron la incidencia de marchitez desde 57 hasta 66%. En términos de severidad y altura de la planta destacó Trichoderma sp., mientras que el porcentaje de necrosis radicular disminuyó desde 56 hasta 70% con todos los tratamientos. Los tratamientos de control también mostraron eficacia antagonista, aunque en menor medida, disminuyeron la incidencia de marchitez desde 2 al 58% y los porcentajes de necrosis radicular desde 19 a 62%. Los microorganismos antagonistas pueden incorporarse como una estrategia de manejo integral con gran eficiencia.

Abstract Trichoderma is a cosmopolitan fungus widely distributed around the world. The different uses of this beneficial fungus are varied in several industries, like agriculture, textile, and paper, including the pharmaceutical industry. The genus Trichoderma has other mechanisms of action, including the production of different enzymes and secreted secondary metabolites used in various industries. The genomes of different Trichoderma species have been sequenced to identify the mechanisms for producing several compounds. The advancement of multiple technologies has allowed the development of transformation tools for the genetic improvement of Trichoderma, thus increasing biomass, primary and secondary metabolites, and enzymes. Therefore, genetic modification aims to increase compound production in several Trichoderma strains. Characterization of Trichoderma through gene expression analysis is essential for biotechnology applications. It helps counteract one of the most challenging problems for agriculture today, including climate change and the appearance of pathogens that attack crops with high commercial and food demand. In conclusion, this review analyzes various strategies to improve Trichoderma strains genetically and their multiple applications in the agricultural, textile, paper, and pharmaceutical industries. As a recommendation for future studies with potential impact, the optimization of specific genetic modifications in Trichoderma strains is recommended to improve their adaptability and effectiveness in combating emerging challenges in agriculture, especially those linked to climate change. Investigating possible synergies between genetically modified Trichoderma strains and environmentally sustainable agricultural practices could contribute to developing solutions for crop protection and yield improvement.

Resumen Antecedentes: El reto actual consiste en producir alimentos en sistemas resilientes al cambio climático y cuidar el medio ambiente. Objetivo: Evaluar la biofertilización orgánica y mineral en el crecimiento y desarrollo de posturas de Tithonia diversifolia durante la fase de vivero. Materiales y métodos: Se llevaron a cabo dos ensayos: E-I en la CPA “Renato Guitar” y E-II: en la Estación Experimental de Pastos y Forrajes Indio Hatuey (EEPFIH). Para el desarrollo de los mismos se empleó un diseño experimental totalmente aleatorizado con 15 y 10 réplicas, experimento I y II respectivamente. E-I se llevaron a cabo tres tratamientos: T-1: suelo 100% sin abonar, T-2: suelo 50% + biochar 50%, T-3: suelo 50%+ biochar 25% + ceniza de bagazo de caña 25%. El biochar se obtuvo de marabú (D. cinerea) y siempre fue embebido en microorganismos eficientes IHPLUS®BF. Se midieron parámetros fisiológicos del metabolismo primario y secundario a los 30 días, e indicadores morfológicos de crecimiento a los 30 y 60 días. En el E-II se trabajó con 5 tratamientos: T-1: Suelo sin abonar, T-2: Combinación de 50%suelo-50%compost + Rhizobium, T-3: Combinación de 50%suelo-50%compost + Trichoderma, T-4: Combinación de 50%suelo-50%compost con dolomita micronizada + Rhizobium y T-5: Combinación de 50%suelo-50%compost con dolomita micronizada + Trichoderma. Se midieron indicadores morfológicos de crecimiento a los 60 días y producción de biomasa aérea seca en el momento del trasplante. Resultados: los resultados arrojan que en el Ensayo- I la mejor variante fue T-3: suelo 50%+Biochar enriquecido IHPLUS®BF 25%+cenizas 25%. Ensayo- II, todas las variantes estudiadas fueron superior que el testigo. Conclusión: Los resultados permitieron confirmar la efectividad de dichas alternativas para cultivar plantas de T. diversifolia en condiciones de vivero.

Abstract Background: The current challenge is to produce food in systems that are resilient to climate change and take care of the environment. Aim. Evaluate organic and mineral biofertilization in the growth and development of Tithonia diversifolia positions during the nursery phase. Materials and methods: Two trials were carried out: E-I at the “Renato Guitar” CPA and E-II: at the Indio Hatuey Pasture and Forage Experimental Station (EEPFIH). For their development, a completely randomized experimental design was used with 15 and 10 replications, experiment I and II respectively. E-I, three treatments were carried out: T-1: 100% unfertilized soil, T-2: 50% soil + 50% biochar, T-3: 50% soil + 25% biochar + 25% cane bagasse ash. The biochar was obtained from marabou (D. cinerea) and was always embedded in efficient IHPLUS®BF microorganisms. Physiological parameters of primary and secondary metabolism were measured at 30 days, and morphological growth indicators at 30 and 60 days. In E-II, 5 treatments were used: T-1: Unfertilized soil, T-2: Combination of 50% soil-50% compost + Rhizobium, T-3: Combination of 50% soil-50% compost + Trichoderma, T-4: Combination of 50% soil-50% compost with micronized dolomite + Rhizobium and T-5: Combination of 50% soil-50% compost with micronized dolomite + Trichoderma. Morphological growth indicators were measured at 60 days and production of dry aerial biomass at the time of transplant. Results: the results show that in Trial-I the best variant was T-3: soil 50%+IHPLUS®BF enriched Biochar 25%+ash 25%. Test-II, all the variants studied were superior to the control. Conclusion: The results confirmed the effectiveness of these alternatives to grow T. diversifolia plants under nursery conditions.