ABSTRACT. Citrus tristeza virus (CTV) can be transmitted by several aphid species in a semi-persistent mode, with Toxoptera citricida being the most efficient vector. In Brazil, mild CTV isolates are used for pre-immunization of citrus trees against severe isolates. We aimed to determine the capacity and efficiency of T. citricida in separating the viral complex into haplotypes from three well-characterized CTV isolates (PIAC, CS1, and Forte Rolândia). Single-aphid transmission assays were conducted to determine CTV transmission efficiency. The results showed that T. citricida transmitted only haplotypes from the PIAC and CS1 isolates, with efficiencies of 8 and 4%, respectively. Both isolates caused mild CTV symptoms in Brazil. However, isolate Forte Rolândia, which causes severe symptoms in citrus trees, was not transmitted by T. citricida. The detection of CTV haplotypes from PIAC and CS1 isolates in sweet orange (Citrus sinensis) plants after a single aphid transmission occurred at different time points. The first haplotype observed was from PIAC 150 days after citrus was challenged by a single aphid, followed by CS1 at day 210 after transmission. In addition, differences in the single-strand conformation polymorphism patterns between the CTV isolates and CTV haplotypes were determined, suggesting that an aphid can acquire and transmit only one CTV haplotype to citrus plants during phloem feeding. The study of the mechanism of transmission by the vector can increase our knowledge of the interactions among hosts, vectors, and pathogens, which are often neglected. ABSTRACT (CTV semipersistent semi persistent mode Brazil preimmunization pre immunization T wellcharacterized well characterized PIAC, (PIAC CS Rolândia. Rolândia . Rolândia) Singleaphid Single 4 4% respectively However sinensis points 15 21 addition singlestrand strand determined feeding hosts vectors pathogens neglected 1 2

RESUMO O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade inseticida da fração hexânica e do composto poligodial obtidos de raízes de Drimys brasiliensis sobre a mortalidade de adultos e ninfas de um dia de Toxoptera citricida (pulgão-preto dos citros). Para a fração hexânica foram preparadas soluções nas concentrações de 0,12; 0,25; 0,50; 1,0 e 2,0 mg mL-1 e, para o composto poligodial, concentrações de 62,5; 125; 250 e 500 µg mL-1. Água e dimetilsulfóxido (5 µg mL-1) foram utilizados como controle. Para a fração hexânica foram testadas duas formas de aplicação: pulverizações sobre os insetos e imersão do ramo caulinar jovem de Citrus limonia na solução, o qual serviu como hospedeiro para os pulgões. A avaliação da mortalidade dos adultos e de ninfas foi realizada após 24 e 48 horas da aplicação das soluções. A fração hexânica de raízes ocasionou elevada mortalidade de ninfas e adultos. O menor valor de CL50 (0,301 mg mL-1) foi registrado para as ninfas quando as soluções foram aplicadas sobre o inseto. O composto poligodial, isolado da fração hexânica, e aplicado sobre o inseto, aumentou significativamente a mortalidade de adultos e ninfas, com valores de CL50 de 293,8 e 176,77 µg mL-1, respectivamente. A ação inseticida pode ser devida à presença deste composto.

ABSTRACT The aim of this study was to evaluate the insecticidal effects of a hexane fraction and polygodial compound obtained from Drimys brasiliensis roots on the mortality of adults and nymphs of Toxoptera citricida (black citrus aphid). For the hexane fraction, solutions of 0.12, 0.25, 0.50, 1.0, and 2.0 mg mL-1 were prepared, and for the compound, solutions of 62.5, 125, 250, and 500 µg mL-1 were prepared. A control with water and dimethylsulfoxide (5 µg mL-1) was also included. Two hexane-fraction-solution application methods were evaluated: spraying directly onto the insect, and submerging a young Citrus limonia shoots in the solution, which served as a refuge for the aphids. Nymph and adult mortality were assessed at 24 and 48 h after solution application. The hexane fraction caused high mortality amongst the T. citricida nymphs and adults. The lowest LC50 value (0.301 mg mL) was recorded in the nymphs when the solutions were applied directly onto the insects. The polygodial compound that was isolated from the hexane fraction significantly increased the mortality of adults and nymphs, with LC50 values of 293.8 and 176.77 µg mL-1, respectively. The insecticidal activity observed may have been caused by this compound.

O ecossistema citrícola abriga muitas espécies de inimigos naturais, entre eles Chrysoperla externa (Hagen, 1861) que apresenta um grande potencial como agente de controle biológico de pragas. Neste trabalho, objetivou-se avapar o efeito das presas Planococcus citri (Risso, 1813) e Toxoptera citricida (Kirkaldy, 1907) sobre o desenvolvimento das fases de larva e pupa de C. externa. O ensaio foi conduzido em sala cpmatizada a uma temperatura de 25±1ºC, 70±10% UR e fotofase de 12 horas, sendo os tratamentos constituídos pelo fornecimento contínuo e alternado dessas duas presas em cada ínstar do predador, além de ovos de Anagasta kuehniella (Zeller, 1879), utilizados para fins de comparação. Foram avaliados o tempo de vida e a viabilidade das fases de larva, pupa e do período larva-adulto de C. externa. Constatou-se que T. citricida fornecido isoladamente ao longo do desenvolvimento larval ou em dois ínstares consecutivos do predador, não foi uma presa adequada, constatando-se 100% de mortalidade no período larva-adulto. Quando as larvas alimentaram-se de P. citri fornecida em dois ínstares do predador, a viabilidade no período larva-adulto foi semelhante à dieta constituída por apenas ovos de A. kuehniella, exceto quando se alimentaram de T. citricida no primeiro ínstar.

The citrus-growing ecosystem houses a great deal of species of natural enemies, among them Chrysoperla externa (Hagen, 1861), which presents a great potential for use in the bipogical contrp of pests. The aim of this work was to evaluate the effects of the preys Planococcus citri (Risso, 1813) and Toxoptera citricida (Kirkaldy, 1907) on the development of larva and pupa of C. externa. The trial was carried out in an accpmatized room at 25±1ºC, 70±10% RH and 12-hour photophase, the treatments consisting of the continuous and alternate supply of those two preys in each instar of the predator, in apition to eggs of Anagasta kuehniella (Zeller, 1879) utilized for comparison purposes. Both the white mealybug and the aphids were given in sufficient amounts to the C. externa larvae to be able to feed ad libitum. The pfetime and the survival rate of the phases of larva, pupa and the larval-adult period of C. externa were evaluated. It was found that T. citricida given either singly along the larval development or in two consecutive instars of the predator was not an adequate prey, 100% of mortapty over the larval-adult period being found. When the larvae fed on P. citri, given in two instars of the predator, the survival rate in the larval-adult period was similar to the diet constituted of only A. kuehniella eggs, except when fed with T. citricida in the first instar.

Individuals of Toxoptera citricida (Kirkaldy) and Aphis spiraecola (Patch) collected in 16 commercial citrus orchards of the São Paulo and Minas Gerais States of Brazil were analyzed for virus presence. Orchards of Minas Gerais were selected because citrus trees exhibit symptoms of citrus sudden death (CSD) and in São Paulo due the presence of severe strains of Citrus tristeza virus (CTV), in order to detect genomic sequences of any of these strains that could be associated to CSD. Samples made up of 20 aphids from the localities of Comendador Gomes, Frutal, Prata and Uberlândia, in the State of Minas Gerais, a CSD associated virus (CSDaV) was often found through nested RT-PCR; in samples from São Paulo, none showed positive for the same primers. With the aim to find relationships between the presence of a specific strain of CTV and the expression of CSD, specific probes were used for sequences associated to severity of isolates. The results were negative and the most promising option was to detect CTV sequence variants acquired by aphids through SSCP, to determine if there was a preference for any of the variants. No CTV sequence variants exclusive to trees with CSD symptoms were detected in aphids, but CTV was more prevalent than CSDaV in both aphid species (98 and 90% vs. 42 and 10%). Results confirm the presence of CSDaV in aphids colonizing trees with or without CSD symptoms. However, detection of CSDaV was more frequent under the CSD condition and five times higher in T. citricida.

Se analizaron individuos de Toxoptera citricida (Kirkaldy) y Aphis spiraecola (Patch) recolectados en 16 huertas comerciales de cítricos en los Estados de São Paulo y Minas Gerais, para evaluar la presencia de virus. Las huertas de Minas Gerais se seleccionaron debido a que los árboles de cítricos exhibían síntomas de muerte súbita de los cítricos (MSC) y en São Paulo debido a la presencia de variantes severas del Citrus tristeza virus (CTV), que pudieran permitir detectar secuencias genómicas de cualquiera de estas variantes en asociación con MSC. En grupos muestrales de 20 áfidos, provenientes de las localidades de Comendador Gomes, Frutal, Prata y Uberlândia, del Estado de Minas Gerais, se encontró con frecuencia un CSD associated virus (CSDaV) mediante el uso de RT-PCR y PCR anidado; en muestras de São Paulo, ninguna fue positiva para los mismos iniciadores. Con el objetivo de encontrar relación entre la presencia de una variante específica de CTV y la expresión de MSC, se usaron sondas específicas para secuencias asociadas a la severidad de los aislamientos. Los resultados fueron negativos y la opción más viable fue detectar variantes de secuencias de CTV adquiridas por áfidos a través de SSCP para determinar si existió preferencia por alguna de las variantes. No se detectaron en áfidos variantes de secuencias de CTV exclusivas a árboles con síntomas de MSC, pero el CTV fue más común que el CSDaV en ambas especies de áfidos (98 y 90% vs. 42 y 10%). Los resultados confirman la presencia del CSDaV en áfidos que colonizaron árboles con o sin síntomas de MSC. Sin embargo, la detección del CSDaV fue más frecuente en la condición de MSC y cinco veces mayor en T. citricida.

Os afídeos são importantes pragas em citros como vetores de vírus fitopatogênicos. O objetivo do trabalho foi avaliar a diversidade de espécies de afídeos alados e a ocorrência estacional dos afídeos em um pomar de citros localizado em Taiúva, SP. Para as coletas de afídeos foram utilizadas armadilhas do tipo bandejas amarelas com água e placas adesivas amarelas. Foram realizadas quatro amostragens semanais em cada estação climática, durante o ano agrícola de 2004/2005. Foram capturados exemplares de afídeos das espécies: Aphis gossypii Glover, Aphis spiraecola Patch, Toxoptera citricida Kirkaldy e Toxoptera aurantii (Boyer de Fonscombe), Rhopalosiphum maidis (Fitch), Pentalonia nigronervosa Coquerel, Uroleucon ambrosie (Thomas) e Acyrthosiphon bidenticola Smith. As espécies A. spiraecola e T. citricida foram as mais abundantes, sendo caracterizadas como espécies comuns em todo o período avaliado. Coletaram-se mais afídeos alados no outono/2004, em relação às demais estações e maior quantidade e diversidade de espécies de afídeos foi obtida em bandejas com água.

The aphids are important pests of the citrus orchards, as they act as vectors of the phytopathogenic virus. The research aimed to estimate the diversity of the species of winged aphids and the occurrence in each season in a citrus orchard of citrus in Taiúva, State of São Paulo. The yellow trap type Moericke and yellow trap stick were used for the catches, on four weeks samplings, in each season, from April/2004 until April/2005. The species colleted were Aphis gossypii Glover, Aphis spiraecola Patch, Toxoptera citricida Kirkaldy e Toxoptera aurantii (Boyer de Fonscombe), Rhopalosiphum maidis (Fitch), Pentalonia nigronervosa Coquerel, Uroleucon ambrosie (Thomas) e Acyrthosiphon bidenticola Smith. The species A. spiraecola and T. citricida were the most abundant, and classificated as common species. A peak of winged applied capture was during the Autumn/2004, and the yellow trap with water captured more aphids than the yellow trap stick.

A utilização de extratos de plantas pode ser uma alternativa para o controle de pragas. Dentre as plantas com atividade inseticida, destacam-se a erva-de-rato (Palicourea marcgravii) e o subproduto (manipueira) da produção de farinha de mandioca (Manihot esculenta), plantas comuns na região Amazônica. Esse trabalho teve, como principal objetivo, investigar o potencial inseticida da manipueira e do extrato de erva-de-rato sobre Toxoptera citricida (pulgão-preto do citros). Os extratos liofilizados de manipueira e de erva-de-rato foram pulverizados sobre plantas de citros contendo pulgões em cinco concentrações (10mg/ml, 20mg/ml, 30mg/ml, 40mg/ml e 50mg/ml). Todas as concentrações analisadas causaram mortalidade dos pulgões superior a 50%, sendo que a maior concentração causou a mortalidade de todos os insetos. O potencial destes extratos demonstrado no experimento coloca os mesmos como uma alternativa ao uso de inseticidas sintéticos no controle do pulgão-preto dos citros.

The utilization of plant extracts might be an alternative for the control of crop pests. Between the plants with insecticide potential, stands-out: Erva-de-rato (Palicourea marcgravii) and the Cassava, a byproduct of the manipueira (Manihot esculenta),common plants in the amazon region. That work had as main objective , to investigate the insecticide potential of Manihot esculenta (manipueira of cassava) and Palicourea marcgravii (erva-de-rato) on Toxoptera citricida (brown citrus aphid), in experimental conditions. The freeze dryed Manipueira and and Erva-de-rato extracts, were sprayed on citrus plants infected by brown citros aphid. In laboratory, extracts of these two plants were obtained in five concentrations (10mg/ml, 20mg/ml, 30mg/ml, 40mg/ml and 50mg/ml). All the analyzed concentrations (10 to 50mg/ml) caused mortality on T. citricida of above 50%, and the higher concentration of 50mg/ml caused the mortality of all the insects (n = 100%) in application processes contact. The potential of these extracts, as demonstrated in the tests, confirms that they can be an insecticide alternative, for the control of the brown citrus aphid.

O objetivo deste estudo foi investigar se existe interação olfativa no sistema tritrófico entre Lysiphlebus testaceipes Toxoptera citricida e Citrus aurantium. A resposta de machos e fêmeas de L. testaceipes a diferentes fontes de odor da planta hospedeira C. aurantium, o afideo parasita T. citricida e o complexo afideo-planta foram investigados com um olfatômetro do tipo tubo em Y. Os experimentos de laboratório foram conduzidos, expondo-se machos e fêmeas de L. testaceipes de diferentes idades, individualmente, a oito tratamentos com diferentes fontes de odor. A resposta do parasitóide foi tomada depois de 15 minutos de exposição aos voláteis de diferentes fontes de odor, baseando-se na orientação dos parasitóides a uma câmara particular. Setenta por cento de L. testaceipes machos e fêmeas, exibiram maior atração ao odor das folhas infestadas pelo afídeo. Não houve diferença significativa entre idade e entre sexo do parasitóide na sua escolha do odor. Os compostos orgânicos liberados por estas combinações agiram como semioquímicos na interação tritrófica, o que indica que afídeos, ao se alimentarem das folhas, induzem atração no parasitóide L. testaceipes.

The objective of this study was to establish whether there are olfactory interactions in the Lysiphlebus testaceipes Toxoptera citricida and Citrus aurantium tritrophic system. The response of male and female L. testaceipes to different odour sources of the host plant C. aurantium, the aphid host T. citricida and aphid-plant complex were investigated using a Y-tube olfactometer. Laboratory experiments were conducted by exposing individually aged male and female L. testaceipes to eight different odour treatments. Response of the parasitoids was taken after 15 min exposure to the volatiles from the different odour sources and based on their orientation to the particular chamber. Seventy percent of both male and female L. testaceipes showed high attractivity to aphid infested leaves. There was no significant difference based on age and sex of the parasitoid on their choice of odour. The organic compounds released by these combinations acted as semiochemicals in the tritrophic interactions and it is suggested that insect feeding induced attraction of the parasitoid L. testaceipes.

O estudo da distribuição espacial de pragas é fundamental para elaboração de planos de amostragem para o uso do manejo integrado de pragas. Para o afídeo Toxoptera citricida (Kirkaldy), estudou-se a distribuição espacial em talhões de pomares de citros comerciais de laranja-doce [Citrus sinensis (L.) Osbeck] da variedade Pêra, com 5; 9 e 15 anos de idade, durante o período de setembro de 2004 a abril de 2005. Foram realizadas 14 amostragens de número de T. citricida em intervalos aproximados de 15 dias entre as mesmas, utilizando-se de armadilhas adesivas de cor amarela (0,11 x 0,11 m) fixadas à planta, a 1,5 m de altura aproximadamente. As armadilhas foram distribuídas na área, a cada cinco plantas na linha, em linhas alternadas, totalizando 137 armadilhas no talhão com 5 anos, 140 no talhão com 9 anos e 80 no talhão com 15 anos. Os índices de dispersão utilizados foram: razão variância média (I), índice de Morisita (Idelta), coeficiente de Green (Cx) e expoente k da distribuição Binomial Negativa. O índice que melhor representou a agregação do pulgão foi o expoente k da distribuição Binomial Negativa, e a distribuição binomial negativa foi o modelo que melhor se ajustou aos dados. Através destas análises, verificou-se que a maioria das amostragens apresentou uma distribuição agregada da população de T. citricida.

The study of insects' spatial distribution is fundamental to elaborate potential sampling plans to be used in integrated pest management. Spatial distribution of Toxoptera citricida was studied in plots of commercial orange orchards (Citrus sinensis) from 'Pêra' variety of 5, 9 and 15 years old, respectively, from September 2004 to April 2005. It was carried through 14 fortnightlies Toxoptera citricida samplings numbers, utilizing yellow adhesive traps (0.11 x 0.11 m) settled on the plant at 1.5 m of height approximately. The traps were distributed in the area each five plants in the line, in alternated lines, totalizing 137 traps in the 5 years plot, 140 in the 9 years plot and 80 in the 15 years plot. The dispersion indexes used were: variance/mean relationship (I), index of Morisita (Idelta), coefficient of Green (Cx) and k exponent of negative binomial distribution. The best aggregation index was the k exponent of negative binomial distribution and negative binomial distribution was the best of the data models. Through these analyses it was verified that most of the samplings presented an aggregated distribution of the brown citrus aphid population.

O controle biológico de insetos vetores de Phyllocnistis citrella em citros tem se mostrado ineficiente e o uso de inseticidas apresenta poucas opções. O objetivo do trabalho foi avaliar a eficiência de inseticidas sistêmicos, aplicados via tronco, no controle de Oncometopia facialis (Signoret) (Hemiptera: Cicadellidae), Phyllocnistis citrella Staiton (Lepidoptera: Gracillaridae) e Toxoptera citricida (Kirkaldy) (Hemiptera: Aphididae) em citros. A eficiência para O. facialis foi determinada pelo método de confinamento, utilizando-se 5 cigarrinhas adultas por repetição. Para P. citrella avaliou-se o número de folhas com lagartas em 3 ramos/planta e para T. citricida o número de ramos infestados. O acefate Pellet 970, vamidotion CE 300, monocrotofós CE 400, acetamipride PM e SL, e imidaclopride SL, nas doses testadas, controlam O. facialis, mas com períodos residuais variando de 12 a 104 dias, sendo os mais eficientes acetamipride SL (1,0 g i.a. por planta) e imidaclopride (1,0 g i.a. por planta). Os inseticidas acefate, vamidotion, monocrotofós, acetamipride e imidaclopride foram eficientes no controle de T. citricida e de P. citrella, com exceção de acetamipride PM nas doses de 0,4 e 0,6 g i.a. por planta. Acetamipride e imidaclopride apresentaram período de controle para P. citrella superior a 42 dias.

Methods of biological control of Phyllocnistis citrella in citrus are inefficient and chemical control is limited to a few options. The purpose of this study was to determine the efficiency of systemic insecticides to control Oncometopia facialis (Signoret) (Hemiptera: Cicadellidae), Phyllocnistis citrella Stainton (Lepidoptera: Gracillariidae), and Toxoptera citricida (Kirkaldy) (Hemiptera: Aphididae) in citrus plant. The tests was performed enclosing the insects on branches, using five adults of O. facialis per plants. The citrus leaf miner were assessed on three new branches per plant, and for aphids, the number of infested branches was quantified. The insecticides acephate Pellet 970, vamidothion CE 300, monocrotophos CE 400, acetamiprid PM e SL, and imidacloprid SL were efficient to control O. facialis, however with different residual periods, ranging from 12 to 104 days. Acetamiprid SL (1.0 g a.i./plant) and imidacloprid were the most efficient. All tested insecticides were efficient to control T. citricida and P. citrella, except acetamiprid PM (0.4 and 0.6 g a.i./plant). Acetamiprid and imidacloprid showed a period for citrus leaf miner control greater than 42 days.