Resumo Apesar de ser valiosa para a produção do adoçante natural curculina, a Curculigo latifolia tem crescimento baixo e é de difícil aclimatação. Portanto, para resolver esse problema, a cultura in vitro é um método alternativo para propagar essa espécie em diferentes condições de luz e citocininas. As citocininas e a luz têm papel importante na organogênese, no crescimento e na expressão gênica de muitas espécies. Assim, neste estudo, nosso objetivo foi melhorar o crescimento de C. latifolia em condições in vitro e a expressão do gene da curculina, por meio da adição de citocininas e diferentes exposições à luz. As mudas de quatro semanas foram subcultivadas em meio (MS sem hormônio) contendo 3 mg/L de benziladenina (BA) e várias concentrações de metatopolina (mT), incluindo 0,1 mg/L, 0,5 mg/L e 5 mg/L. Em seguida, as culturas foram incubadas sob diferentes tipos de luz (luzes LED vermelha, azul, branca e luz de fluorescência branca) com fotoperíodo de 16 horas de luz por 18 horas de escuridão, por 14 semanas, a 25 ± 2°C. Vários parâmetros, incluindo altura da planta, número de folhas, conteúdo de clorofila, estrutura estomática, densidade e expressão de curculina, foram observados a cada semana. Inesperadamente, nossos resultados mostraram que o crescimento de C. latifolia apresentou melhora significativa quando em tratamento sob luz LED branca sem nenhuma citocinina adicional. Em suma, a luz LED branca melhora ainda mais o fenótipo das plântulas, como a altura da planta, o número de folhas, a produção de clorofila e o número e a estrutura dos estômatos, ao passo que a luz LED vermelha leva à diminuição do fenótipo, mas aumenta a expressão do gene da curculina. curculina aclimatação Portanto problema organogênese espécies Assim estudo C MS hormônio mgL mg L BA (BA mT, mT , (mT) 01 0 1 0, 05 seguida luzes azul escuridão 2 2C 2°C parâmetros planta folhas estomática semana Inesperadamente adicional suma plântulas estômatos (mT
Abstract Despite being valuable for producing a natural sweetener Curculin, Curculigo latifolia has a low growth and difficult to domestificate. So, to solve this problem, propagation on in vitro culture will be an alternative method to propagated this spesies under different cytokinins and light condition. Cytokinins and light has major role in organogenesis, growth and gene expression of many species. Thus, in this study, we aimed to improve the Curculigo latifolia growth on in vitro condition and expression of curculin gene by combining cytokinins addition and different light exposure. Four weeks seedlings were sub-cultured into medium (MS free hormone) containing 3 mg/L benzyladenine (BA) and various concentrations of meta-Topolin (mT) including 0.1 mg/L, 0.5 mg/L, and 5 mg/L. The cultures then incubated under different light types (red, blue, white LED lights and white fluorescence light) with 16-h light/ 18-h dark photoperiod for 14 weeks at 25 ± 2°C. Several parameters, including plant height, leaf number, chlorophyll contents, stomatal structure, and density and curculin expression, were observed every week. Unexpectedly, our results showed that C. latifolia growth displayed significant improvement when it was treated under white LED light without any additional cytokinins. In sum, white LED light further improves plantlets phenotype, such as plant height, leaf number, chlorophyll production, and stomatal number and structure, whereas, red LED light lead to a decreased phenotypes but increase the curculin gene expression. Curculin domestificate So problem organogenesis species Thus study exposure subcultured sub cultured MS hormone mgL mg L BA (BA metaTopolin meta Topolin mT (mT 01 0 1 0. 05 red, (red blue 16h h 16 18h 18 2 2C C 2°C parameters height contents structure week Unexpectedly sum phenotype production whereas
