Abstract Introduction. Endophytic fungi (EF) in grapevines (Vitis vinifera) have great potential for agricultural applications and may represent possible biological control agents for vineyards. Objective. To isolate and identify endophytic fungi (EF) from grapevine plants with antibiosis capacity against Botrytis cinerea. Materials and methods. Young and mature branches from forty healthy grapevine plants were collected from seven production lots in the Cañete province, Lima, Peru, during March to May 2022. EF isolation was performed on 702 sections of disinfected tissues using potato dextrose agar (PDA) culture medium, and identification was carried out at the genus level. Secondary metabolites were extracted from twenty-eight EF strains to determine the mycelial inhibition of the pathogen. An analysis of variance (ANOVA) was conducted on the evaluated parameters using the Minitab statistical program. Results. A total of 129 EF strains were isolated from leaves and stems of young and mature grapevine branches, encompassing seven genera (Trichoderma, Aspergillus, Alternaria, Cladosporium, Fusarium, Nigrospora, and Stemphylium). The highest frequency was found in leaves and mature branches. Trichoderma and Alternaria were the most frecuent genera in grapevine plants, with 22.48 % and 21.71%, respectively. Metabolites obtained from the EFVH-01 strain of the genus Cladosporium, and EF-99 and EF-70 strains of the genus Alternaria, had the greatest effect on mycelial inhibition of the pathogen. Conclusions. Strains of endophytic fungi from the genera Cladosporium and Alternaria showed antibiosis capacity against Botrytis cinerea at the laboratory scale, which could potential biocontrol agents of pathogens in grapevine cultivation.

Resumen Introducción. Los hongos endófitos (HE) de la vid (Vitis vinifera) tienen un gran potencial de aplicación en la agricultura y pueden representar posibles agentes de control biológico de los viñedos. Objetivo. Aislar e identificar los hongos endófitos (HE) de plantas de vid con capacidad de antibiosis hacia Botrytis cinerea. Materiales y métodos. Se colectaron ramas jóvenes y maduras de cuarenta plantas sanas de vid de siete lotes de producción en la provincia de Cañete, Lima, Perú, durante los meses de marzo a mayo 2022. El aislamiento de HE se realizó de 702 secciones de tejidos desinfectados en medio de cultivo papa dextrosa agar (PDA) y la identificación fue a nivel de género. Se extrajeron metabolitos secundarios de veintiocho cepas de HE para determinar la inhibición micelial del patógeno. Se llevó a cabo un análisis de varianza (ANDEVA) de los parámetros evaluados con el programa estadístico Minitab. Resultados. Se aislaron un total de 129 cepas de HE de hojas y tallos de ramas jóvenes y maduras de vid, que correspondieron a siete géneros (Trichoderma, Aspergillus, Alternaria, Cladosporium, Fusarium, Nigrospora y Stemphylium). La mayor frecuencia se presentó en las hojas y rama madura. Trichoderma y Alternaria fueron los géneros más frecuentes en las plantas de vid con 22,48 % y 21,71 %, respectivamente. Los metabolitos obtenidos de las cepas HEVH-01 del género Cladosporium, HEV-99 y HEV-70 del género Alternaria, tuvieron mayor efecto en la inhibición micelial del patógeno. Conclusiones. Cepas de hongos endofitos del género Cladosporium y Alternaria mostraron capacidad de antibiosis hacia Botrytis cinerea a escala de laboratorio, los cuales podrían ser potenciales biocontroladores de patógenos en el cultivo de vid.

Abstract Introduction. “Green mold,” caused by Penicillium digitatum is one of the phytosanitary issues that limits citrus production. For its control, synthetic fungicides are used, which have lost effectiveness due to resistance developed by the fungus. An alternative is the use of endophytic fungi with biocontrol action. Objective. To evaluate the effect of secondary metabolites (SM) from endophytic fungi (EF) on the mycelial inhibition of Penicillium digitatum and the effectiveness of disease control in mandarin fruits (Citrus reticulata) post-harvest. Materials and methods. The study was conducted in 2022, using a completely randomized experimental design in the Plant Health Laboratory at the Universidad Nacional de Cañete (UNDC), Lima, Peru. For the antibiosis test, secondary metabolites were extracted from ten strains of EF from the genera Trichoderma sp., Fusarium sp., and Aspergillus sp., where mycelial inhibition of the pathogen (%) was evaluated. SMs were sprayed at 15 % (v/v) concentration on mandarin fruits that were disinfected and inoculated with the pathogen by spraying (1x 105 CFU/cc). Additionally, a commercial biocontrol, a vegetable oil, and a fungicide were used. After 6 and 9 days, disease incidence (%) and severity index (0, 1, 2, 3) were evaluated. Results. Secondary metabolites from strains the HEA-111 (Aspergillus), HEA-109 (Fusarium), and HSA-1 (Trichoderma) showed the highest mycelial inhibition with 95.05 %, 87.51 %, and 47.47 %, respectively. In mandarin fruits treated with SMs from strains HEA-109 and HSA-1, there was a control of 80 % and 55 %, respectively. Conclusions. SMs from EF were effective in inhibiting the mycelial growth of P. digitatum and reduces disease progression in mandarin fruits post-harvest.

Resumen Introducción. El “moho verde” causado por Penicillium digitatum es uno de los problemas fitosanitarios que limita la producción en los cítricos. Para su control se utilizan fungicidas sintéticos, que han perdido eficacia, debido a la resistencia generada por el hongo. Una alternativa, es el uso de hongos endófitos con acción biocontroladora. Objetivo. Evaluar el efecto de metabolitos secundarios (MS) de hongos endófitos (HE) en la inhibición micelial de Penicillium digitatum y la eficacia de control de la enfermedad, en frutos de mandarina (Citrus reticulata) después de la cosecha. Materiales y métodos. El estudio se realizó en 2022, bajo un diseño experimental completo al azar, en el laboratorio de Sanidad Vegetal, Universidad Nacional de Cañete (UNDC), Lima, Perú. Para la prueba de antibiosis se extrajeron los metabolitos secundarios de diez cepas de HE de los géneros Trichoderma sp., Fusarium sp. y Aspergillus sp., en donde se evaluó la inhibición micelial del patógeno (%). Se asperjaron MS a una concentración del 15 % (v/v) sobre frutos de mandarina que fueron desinfectados e inoculados con el patógeno por aspersión (1x105 UFC/cc). Adicionalmente, se utilizaron un biocontrol comercial, un aceite vegetal y un fungicida. Después de 6 y 9 días, se evaluaron la incidencia (%) y el índice de severidad (0,1,2,3) de la enfermedad. Resultados. Los metabolitos secundarios de las cepas HEA-111 (Aspergillus), HEA-109 (Fusarium) y HSA-1 (Trichoderma) presentaron la mayor inhibición micelial con 95,05 %, 87,51 % y 47,47 %, respectivamente. En los frutos de mandarina tratados con los MS de las cepas HEA-109 y HSA-1, hubo un control del 80 % y 55 %, respectivamente. Conclusiones. Los MS de HE tuvieron efecto en la inhibición micelial de P. digitatum y redujeron el avance de la enfermedad en frutos de mandarina después de la cosecha.

Abstract Introduction. Supply chain issues have increased the costs of raw material and reduced the availability of materials for the production of biological control agents. This can result in greater disease pressure and lower yields on farms. Objective. To determine the effect of different amounts of starch and the use of local ingredients in small- and large-scale fermentation processes for Trichoderma harzianum. Materials and methods. The study was conducted in San José, Costa Rica, between 2016 and 2018. Flask experiments were performed to investigate the reduction or elimination of starch in commercial fermentation media. Fermentation vessel trials were conducted to evaluate the effectiveness of an alternative local medium, which included three treatments: 1) commercial medium as a control, 2) 10 % molasses medium, and 3) 10 % molasses with 0.5% yeast extract. Viable spore counts were performed to determine colony-forming units (CFU/mL). Results. Reducing starch to 10 % of the original medium had no impact on CFU/mL. However, the absence of starch resulted in uneven growth during fermentation. Molasses produced approximately half the CFU/mL compared to the commercial medium but exceeded the threshold of 107 CFU/mL used in studies for the biological control of plant pathogens. Results obtained in a commercial-scale fermenter were similar to those of pilot-scale fermentation. Conclusion. Reducing starch content in the commercial medium did not affect growth, but the absence of starch led to solid mycelium clumps. The use of a local molasses-based medium on a commercial scale feasible as long as the required viable spore count for field use is maintained.

Resumen Introducción. Los problemas en la cadena de suministro aumentaron los costos de las materias primas y redujeron la disponibilidad de materiales para la producción de agentes de control biológico. Esto puede ejercer mayor presión de enfermedades y menores rendimientos en las granjas. Objetivo. Determinar el efecto de diferentes cantidades de almidón y el uso de ingredientes locales en procesos de fermentación a pequeña y gran escala para Trichoderma harzianum. Materiales y métodos. El estudio se ralizó en San José, Costa Rica, entre 2016 y 2018. Se realizaron ensayos en matraces para investigar la reducción o eliminación de almidón en medios de fermentación comerciales. Se llevaron a cabo ensayos en recipientes de fermentación para evaluar la efectividad de un medio local alternativo, que incluyó tres tratamientos: 1) medio comercial como control, 2) melaza al 10 % y 3) melaza al 10 % con 0,5 % de extracto de levadura. Se realizaron recuentos de esporas viables para determinar las unidades formadoras de colonias (UFC/mL). Resultados. La reducción de almidón al 10 % del medio original no tuvo impacto en las UFC/mL. Sin embargo, la ausencia de almidón resultó en un crecimiento desigual durante la fermentación. La melaza produjo aproximadamente la mitad de las UFC/mL en comparación con el medio comercial, pero superó el umbral de 107 UFC/mL utilizado en estudios para el control biológico de patógenos de plantas. Los resultados obtenidos en un fermentador a escala comercial fueron similares a los de la fermentación a escala piloto. Conclusión. La reducción del contenido de almidón en el medio comercial no afectó al crecimiento, pero la ausencia de almidón provocó acumulaciones sólidas de micelio. El uso de un medio de melaza de origen local a escala comercial parece factible mientras se mantenga un recuento de esporas viables requeridas para su uso en el campo.

Summary: The use of rhizobacteria has the ability to colonize the root system, promote plant growth and biocontrol or suppress phytopathogenic fungi. The objective of this research was to select and analyze fluorescent rhizobacteria solubilizing nitrogen, phosphorus and potassium, producing lytic enzymes with antagonistic activity towards P. palmivora and L. theobromae. The bacteria were isolated from root and leaf tissue of endemic CCN-51 cacao cultivars from the provinces of Los Ríos, Santa Elena and Esmeralda. Characterization of antagonistic activity was based on the selection of proteolytic activity, siderophore production and fluorescent pigmentation under ultra violet light. In addition, antagonistic activity was performed using cell extracts. Nine bacterial strains (BF 567, FZ 9-7, LH 5-10, MH 4-20, MN 5-20, MN 5-19, AC3, PV-25) with protease production, siderophore production and fluorescence emission were selected. The ability of the bacteria to solubilize complex minerals (nitrogen, phosphorus and potassium) was analyzed and their solubilization efficiency varied, ranging from 50 to 100 %. The antagonistic factor of cell supernatants from FZ 9-7, BF 567 and PV-25 inhibited mycelial growth toward P. palmivora and L. theobromae by 40, 60 and 85%, respectively. The use of rhizobacteria could be used as an alternative biofertilizer to chemical fertilizers and biological control of phytopathogenic soil fungi through their volatile emissions.

Resumen: El empleo de rizobacterias tiene la capacidad de colonizar el sistema radicular, promover el crecimiento en plantas y la capacidad biocontroladora o suprimir hongos fitopatógenos. El objetivo de esta investigación fue seleccionar y analizar las rizobacterias fluorescentes solubilizadoras de nitrógeno, fósforo y potasio, productoras de enzimas líticas de actividad antagonistas hacia P. palmivora y L. theobromae. Las bacterias se aislaron del tejido radicular y foliar de cultivares endémicos de cacao CCN-51 de las provincias de Los Ríos, Santa Elena y Esmeralda. La caracterización de la actividad antagonista se apoyó en la selección de actividad proteolítica, producción de sideróforos y pigmentación fluorescente bajo luz ultra violeta. Además, se realizó la actividad antagonista mediante los extractos celulares. Se seleccionaron nueve cepas bacterianas (BF 567, FZ 9-7, LH 5-10, MH 4-20, MN 5-20, MN 5-19, AC3, PV-25) con producción de proteasa, sideróforos y emisión de fluorescencia. Se analizó la capacidad de las bacterias para solubilizar minerales complejos (nitrógeno, fosforo y potasio) su eficiencia de solubilización vario, oscilando entre 50 y 100%. El factor antagónico de los sobrenadantes celulares de FZ 9-7, BF 567 y PV-25 inhiben el crecimiento del micelio hacia P. palmivora y L. theobromae en un 40, 60 y 85%, respectivamente. La utilización de las rizobacterias podría usarse como biofertilizante alternativo a los fertilizantes químicos y control biológico de hongos fitopatógenos del suelo a través de sus emisiones volátiles.

Summary: The cocoa crop is very susceptible to nutritional deficiencies and moniliasis caused by the phytopathogen Moniliophthora roreri. One of the alternatives to synthetic chemicals are compounds based on silicon (Si). In the present investigation, the ef fect of silicon as a biostimulant in cocoa cultivation and as a biological control agent for M. roreri was evaluated. In the experiment, five Si treatments were used: T1 (4.00 kg ha-1), T2 (3.00 kg ha-1), T3 (2.00 kg ha-1) and T4 (1.5 kg ha-1) and a control treatment (without application). Production indicators, ear number, fresh and dry weight of almonds, dry weight of 100 almonds and crop yield were determined. In addition, the incidence and severity of the disease at 60, 120 and 180 days af ter the application of Si and the ef ficiency of the treatments. The significantly higher results for the variables: Production, ear number, fresh and dry weight of almond and dry weight of 100 almonds, were obtained by applying 4 kg ha-1 of Si, all doses of Si exceeded the control (P ≤ 0.05) in the variables related to production. In the control of the phytopathogen (M. roreri), the dose of 4 kg ha-1 Si decreased the incidence and severity of the disease by more than 50%. The application of Si can be an option in cocoa cultivation as a biostimulant and biological control agent for M. roreri.

Resumen: El cultivo del cacao es muy susceptible a deficiencias nutrimentales y a la moniliasis ocasionada por el fitopatógeno Moniliophthora roreri. Una de las alternativas a los productos químicos sintéticos son los compuestos a base de silicio (Si). En la presente investigación se evaluó el efecto del silicio como bioestimulante en el cultivo de cacao y agente de control biológico de M. roreri. En el experimento se utilizaron cincos tratamientos de Si: T1 (4.00 kg ha-1), T2 (3.00 kg ha-1), T3 (2.00 kg ha-1) y T4 (1.5 kg ha-1) y un tratamiento control (sin aplicación). Se determinaron los indicadores de producción, número de mazorca, peso fresco y seco de almendras, peso seco de 100 almendras y el rendimiento del cultivo. Además, de la incidencia y severidad de la enfermedad a los 60, 120 y 180 días después de la aplicación del Si y la eficiencia de los tratamientos. Los resultados significativamente superiores para las variables: Producción, número mazorca, peso fresco y seco de almendra y peso seco de 100 almendra, se obtuvieron mediante la aplicación de 4 kg ha-1 de Si, todas las dosis de Si superaron al control (P ≤ 0.05) en las variables relacionas a la producción. En el control del fitopatógeno (M. roreri), la dosis de 4 kg ha-1 Si disminuyó la incidencia y la severidad de la enfermedad en más del 50%. La aplicación de Si puede ser una opción en el cultivo de cacao como bioestimulante y agente de control biológico de M. roreri.

Resumen El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto combinado de dos tácticas de biocontrol de plagas: la biofumigación con Brassicajuncea y la inoculación de Trichoderma harzianum, sobre el crecimiento in vitro del patógeno Phomopsis spp., agente etiológico de la cancrosis en el cultivo de pecán (Carya illinoinensis). Se trituraron plantas de B. juncea y se colocaron en envases de poliestireno en dosis de 10 y 30 g. Luego, en cada uno de estos recipientes se introdujo una caja de Petri con un disco con micelio dePhomopsis spp. o T. harzianum o ambos hongos (cultivo dual). Se incubó en cámara de cultivo. Los parámetros evaluados fueron la superficie de las colonias y el porcentaje de inhibición miceliar de Phomopsis spp. Los datos se analizaron con estadística no paramétrica mediante la prueba de Kruskal-Wallis. Se obtuvieron los siguientes resultados: i) B. juncea no afectó el crecimiento de T. harzianum; ii) la dosis de 30 g de B. juncea suprimió completamente el crecimiento de Phomopsis spp.; iii) T. harzianum inhibió significativamente el crecimiento de las colonias de Phomopsis spp.; iv) la combinación de T. harzianum y la biofumigación con 10 g de B. juncea mostró sinergia sobre el control del crecimiento de Phomopsis spp. La biofumigación con B. juncea, la aplicación de T. harzianum y la combinación de ambas técnicas podrían ser alternativas promisorias para el control biológico de Phomopsis spp.

Abstract This work aimed to evaluate the combined effect of two pest biocontrol strategies: biofumigation with Brassica juncea and inoculation of Trichoderma harzianum, on the in vitro growth of the pathogen Phomopsis spp., an etiological agent of canker disease in pecan crops (Carya illinoinensis). B. juncea plants were crushed and placed in polystyrene recipients in doses of 10 and 30 g. Then, a Petri dish was introduced to each recipient, with a disk with a grown mycelium of Phomopsis spp. or T. harzianum, or both fungi (dual culture). Treatments were incubated in a culture chamber. The parameters evaluated were colonies’ surface area and percentage of mycelial inhibition of Phomopsis spp. Data were analyzed with non-parametric statistics using the Kruskal-Wallis test. The results indicated that: i) B. juncea did not affect the growth of T. harzianum; ii) the 30 g dose of B. juncea completely suppressed the growth of Phomopsis spp.; iii) T. harzianum significantly inhibited the growth of Phomopsis spp. colonies; iv) the combination of T. harzianum and biofumigation with 10 g of B. juncea showed synergy on the growth control of Phomopsis spp. Biofumigation with B. juncea, the application of T. harzianum, and the combination of both techniques could be promising alternatives for the biological control of Phomopsis spp.

ABSTRACT Colombia is the ninth largest producer of dragon fruit in the world and the department of Boyacá is the largest with 440 hectares planted. Bacterial phytopathogens can cause pitahaya fruit losses and low yields by producing stem soft rot. This research aimed to study and identified possible agents of bacterial diseases of pitahaya in Boyacá, Colombia. Thirteen farms in the region were selected to take 20 samples by means of a targeted and random sampling of stem and fruit tissues with soft rot symptoms in the early stages of the disease. A process of microbiological isolation, biochemical and molecular taxonomic identification of the isolated bacteria. The 16s rRNA gene sequences of the V2-V5 region were edited by removing the primers, assembling and obtaining the consensus sequence of the primers 1100R-337F and 800R -518F. The phylogenetic analysis was performed by BLAST at NCBI, using the "Classifier" and "SeqMatch" tools from the RDP website, and phylogenetic trees were created by multiple alignment using the MUSCLE algorithm and the Tamura Nei distance method was performed. Signs like blisters and mucilaginous fluids, symptoms like yellow and brown chlorotic spots, soft rot, and liquefaction were identified, and possible vectors like flies and ants were report. Twenty-five bacterial morphotypes were identified classifieds in 4 phyla, 9 families and 13 genera. The analysis of the 16S rRNA gene sequences of the bacterial strains showed a 98 to 100% identity with Enterobacter cloacae, Pectobacterium carotovora and Paenibacillus glucanolyticus, reported in other studies as causing the soft rot of the pitahaya stem and fruit. New species were reported as possible pathogenic bacteria of pitahaya: Pantoea cypripedii, Kluyvera intermedia and Klebsiella oxytoca. Infectivity assays did not have positive results. The microbiota identified in the stages of the necrotrophic phase or final stage of soft rot of the stem belong to the genera Achromobacter, Sphingobacterium, Pseudomonas, Klebsiella, Paenibacillus, Bacillus, Stenotrophomonas and Microbacterium. In the fly Leptoglossus zonatus associated with the crop were identified Pseudomonas fulva and Lysinibacillus fusiformis were identified. This is also the first official report of a complex of possible phytopathogen bacteria of the order Enterobacterales (Enterobacteriacea, Erwiniaceae and Pectobacteriaceae family) in symptoms by bacterial disease on pitahaya Colombian crops. Identification of the bacteria in a pathogenic system can guide chemical and biological control practices in order to increase the productive and export potential of exotic and orphan crops from small local farmings.

RESUMEN Colombia es el noveno productor de pitahaya amarilla en el mundo y el Departamento de Boyacá es el mayor productor con 440 hectáreas plantadas. Los fitopatógenos bacterianos pueden causar pérdidas de frutos de pitahaya y bajos rendimientos al producir la pudrición blanda de los tallos. El objetivo de esta investigación fue estudiar e identificar posibles agentes de enfermedades bacterianas de la pitahaya en Boyacá, Colombia. Trece (13) fincas de la región fueron seleccionadas para la toma de 20 muestras mediante un muestreo dirigido y al azar de tejidos de tallo y frutos con síntomas de pudrición blanda en estadios iniciales de la enfermedad. Se realizó un proceso de aislamiento microbiológico, identificación bioquímica y taxonómica molecular de las bacterias aisladas. Las secuencias del gen ARNr 16s de la región V2-V5 fueron editadas mediante la eliminación de los primers, ensamblaje y obtención de la secuencia consenso de los primers 1100R-337F y 800R -518F. El análisis filogenético fue hecho por BLAST en el NCBI, por las herramientas "Classifier" y "SeqMatch", del sitio Web del RDP y se realizaron árboles filogenéticos mediante alineamiento múltiple usando el algoritmo MUSCLE y el método de distancias de Tamura Nei. Se registraron signos como ampollas y fluidos mucilaginosos, síntomas como manchas cloróticas amarillas y marrones, pudrición blanda y licuefacción, y se reportaron posibles vectores como moscas y hormigas. Veinticinco (25) morfotipos de bacterias fueron clasificados en 4 filos, 8 familias y 13 géneros. El análisis de las secuencias del gen ARNr 16S de las cepas bacterianas mostró una identidad del 98 al 100% con Enterobacter cloacae, Pectobacterium carotovora y Paenibacillus glucanolyticus, reportados en otros estudios como causantes de la pudrición blanda del tallo y fruto de pitahaya. Se reportaron nuevas especies como posibles bacterias patógenas de pitahaya: Pantoea cypripedii, Kluyvera intermedia y Klebsiella oxytoca. Los ensayos de infectividad no arrojaron resultados positivos. La microbiota identificada en los estadios de la fase necrotrofa o final de la pudrición blanda del tallo podría estar conformada por los géneros Achromobacter, Sphingobacterium, Pseudomonas, Klebsiella, Paenibacillus, Bacillus, Stenotrophomonas y Microbacterium. En la mosca Leptoglossus zonatus asociada al cultivo se identificó Pseudomonas fulva y Lysinibacillus fusiformis. Este es el primer registro oficial de un complejo de posibles bacterias fitopatógenas del orden Enterobacterales (familia Enterobacteriaceae, Erwiniaceae y Pectobacteriaceae) en síntomas por enfermedad bacteriana en cultivos colombianos de pitahaya. La identificación de las bacterias de un pato-sistema puede orientar las prácticas de control químico y biológico con el fin de incrementar el potencial productivo y de exportación de los cultivos exóticos y huérfanos de las pequeñas fincas locales.

ABSTRACT Hop stunt viroid (HSVd) is the causal agent of citrus cachexia, which can lead to significant crop losses. As part of a preventive management strategy, it is essential to use healthy plants from a certification program. This study aimed to evaluate the healthiness of 17 citrus cultivars against HSVd using both biological and molecular diagnostics. For biological diagnosis, Etrog citron (Citrus medica L.) clone Arizona 861 S1 was used as an indicator plant, incorporating negative and positive controls for HSVd infection. For molecular diagnosis, reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) technique was employed with specific primers for viroid detection. Results indicated that six months after inoculation, the positive control exhibited symptoms associated with viroid infection, such as necrosis in the petiole and stem, leaf epinasty, and necrosis in the midvein. In contrast, both the negative control and evaluated citrus cultivars showed no symptoms. These findings were supported by molecular analysis, which allowed the amplification of a viroid genome region only in the positive control. Both biological and molecular diagnosis confirmed the absence of HSVd in the citrus varieties assessed. This study will allow the evaluation of the citrus plant collections used in the foundation category as a source of buds for plant multiplication of registered and certified seeds for citrus propagation nurseries in Colombia.

RESUMEN El viroide del enanismo del lúpulo (HSVd) es el agente causal de la cachexia de los cítricos, que puede provocar pérdidas significativas en el cultivo. Como parte de una estrategia de manejo preventivo, es indispensable utilizar plantas sanas provenientes de un programa de certificación. Este estudio tuvo como objetivo evaluar la sanidad de 17 cultivares de cítricos frente a HSVd, utilizando diagnósticos biológico y molecular. Para el diagnóstico biológico, se empleó como planta indicadora cidro Etrog (Citrus medica L.) clon Arizona 861 S1, incluyendo controles negativos y positivos para la infección por HSVd. Para el diagnóstico molecular se utilizó la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa con Transcriptasa Inversa (RT-PCR) con cebadores específicos para la detección del viroide. Los resultados indicaron que seis meses después de la inoculación, el control positivo mostró síntomas asociados con la infección por el viroide, como necrosis en el peciolo y tallo, epinastia foliar y necrosis en vena media. Por el contrario, tanto el control negativo como los cultivares de cítricos evaluados no presentaron síntomas. Estos resultados fueron corroborados por el análisis molecular, que permitieron amplificar una región del genoma del viroide, únicamente en el control positivo. Ambos diagnósticos biológico y molecular confirmaron la ausencia de HSVd en las variedades de cítricos evaluadas. Este estudio permitirá la evaluación de las colecciones de plantas de cítricos utilizadas en la categoría fundación como fuente de yemas para la multiplicación de semilla registrada y certificadapara los viveros productores de material de propagación de cítricos en Colombia.

Abstract Introduction The Dark Winged Fungus Gnat, Bradysia impatiens Johannsen, is a significant pest in modern forest nurseries in Mexico, as it causes plant mortality. However, studies on adult monitoring are scarce. Objectives Determine the most suitable trap for monitoring B. impatiens, characterize its population levels and identify associated organisms, including its natural enemies. Materials and methods The attraction effect of B. impatiens to two types of yellow sticky traps (circular and flag paper trap) and a colorless trap was evaluated. After selecting the best trap, the capture of B. impatiens and associated organisms was compared across four forest nurseries to determine the species' population levels. Capture data were analyzed using generalized linear models with negative binomial regression. Results and discussion Flag paper trap was the most efficient for capturing adults. Based on weekly captures, three population levels were subjectively rated: low (<30 adults), medium (30-60 adults), and high (>60 adults). Coenosia attenuata Stein was found as a natural enemy of the pest; however, the capture percentage was low (1.78 %), so the traps do not pose a threat to their populations. Kleidotoma sp., a possible parasitoid of the pest and C. attenuata, was also found. Conclusions An integrated pest management plan for B. impatiens is necessary, including flag paper trap and the predator C. attenuata as biological control in nurseries. C. attenuata, a predator of B. impatiens, is recorded for the first time in Tlaxcala.

Resumen Introducción El mosco fungoso negro Bradysia impatiens Johannsen es una plaga de importancia en los viveros forestales tecnificados de México, debido a que ocasiona mortalidad de la planta; sin embargo, los estudios sobre monitoreo de adultos son escasos. Objetivos Determinar la trampa más adecuada para el monitoreo de B. impatiens, caracterizar sus niveles poblacionales e identificar organismos asociados, entre ellos sus enemigos naturales. Materiales y métodos Se evaluó el efecto de atracción de B. impatiens a dos tipos de trampas pegajosas amarillas (circulares y bandera) y una incolora. Después de la selección de la mejor trampa, se comparó la captura de B. impatiens y organismos asociados en cuatro viveros forestales para determinar niveles poblacionales de la especie. Los datos de captura se analizaron con modelos lineales generalizados mediante regresión binomial negativa. Resultados y discusión La trampa bandera fue la más eficiente para la captura de adultos. Con base en la captura semanal, se calificaron subjetivamente tres niveles poblacionales: baja (<30 adultos), media (30-60 adultos) y alta (>60 adultos). Se encontró a Coenosia attenuata Stein como enemigo natural de la plaga; sin embargo, el porcentaje de captura fue bajo (1.78 %), por lo que las trampas no representan amenaza para sus poblaciones. También se encontró a Kleidotoma sp., posible parasitoide de la plaga y de C. attenuata. Conclusiones Es necesario un plan de manejo integrado de plagas para B. impatiens, que incluya la trampa bandera y el depredador C. attenuata como control biológico en viveros. La mosca C. attenuata, depredadora de B. impatiens, se registra por primera vez en Tlaxcala.

ABSTRACT Introduction Our society’s characteristics, with their constant evolution and globalization, have shown a significant impact on the way jobs have been structured over the years, with one of the most highlighted aspects being the possibility of practicing telecommuting. The prevalence of telecommuting and other forms of remote work enabled by technological innovations has increased in recent years. Objectives Exploring the most recently published literature on telecommuting; examining its relationship with psychosocial risk factors and making inferences about the need for the implementation and improvement of policies aimed at promoting mental health in occupational settings, with a focus on preventing psychosocial risks. Methodology Integrative literature review using the terms "teleworking," "remote work," "telework," "telecommuting," "psychosocial risks," "mental health," and "occupational health" in both Portuguese and English. The primary databases used for the research included Pubmed, UpToDate, Clinical Key, Medscape, World Health Organization, International Labour Organization, Centers for Disease Control and Prevention, “Revista Portuguesa de Saúde Ocupacional” and “Direção Geral de Saúde”. A total of 24 documents with the highest relevance to the study’s theme were selected, published between 2010 and 2023. Discussion Psychosocial risks in telecommuting are undergoing constant changes and align with demographic, nature, content and organization. These changes may increase exposure to already recognized psychosocial risks or give rise to new emergent ones. The widespread and unexpected adoption of telecommuting due to COVID-19 with the simultaneous advancement of digitization processes have made telecommuting a more common practice. However, this mass adoption has increased instances of technological stress among workers, potentially leading to adverse consequences for mental health. While the widespread implementation of telecommuting aimed to protect workers from biological risks, it has, in various situations, increased social isolation, work-family conflicts, and a lack of social support, with negative consequences for the mental health of the working population. Conclusion The increasing of telecommuting in our society is leading to assess the psychosocial risk factors that arise with it, so that they are recognized by occupational health experts and intervened upon, thus ensuring that telecommuting becomes healthier.

RESUMO Introdução As sociedades atuais e a sua constante evolução e globalização, têm demonstrado um impacto significativo na forma como se estruturam os postos de trabalho ao longo dos anos, nos quais, mais recentemente e com maior tradução mediática, se destaca a possibilidade de praticar teletrabalho, potenciada pela inovação tecnológica. Objetivos Conhecer a literatura mais recentemente publicada acerca do teletrabalho; bem como a sua relação com fatores de risco de origem psicossocial e inferir sobre a necessidade de implementação e aperfeiçoamento de políticas voltadas para promoção da saúde mental em contexto ocupacional, com enfoque na prevenção dos riscos psicossociais. Metodologia Revisão da literatura integrativa com os termos “teleworking”, “remote work”, “telework”, “telecommuting”, “psychosocial risks”, “mental health” e “occupational health”, em português e em inglês. Foram utilizadas como principais bases de dados a Pubmed, UpToDate, Clinical Key, Medscape, World Health Organization, International Labour Organization, Centers for Disease Control and Prevention, bem como a Revista Portuguesa de Saúde Ocupacional e a Direção Geral de Saúde. Selecionaram-se os 24 documentos com maior relevância na temática em estudo, publicados entre 2010 e 2023. Discussão As fontes de riscos psicossociais do teletrabalho encontram-se em constante mudança e acompanham as alterações demográficas e da organização. A prática de teletrabalho parece ser uma oferta cada vez mais comum, a sua adoção em larga escala e inesperada devido à COVID-19 e coligada ao enorme avanço dos processos de digitalização, aumentaram as situações de stress tecnológico entre os trabalhadores, com possíveis consequências adversas para a saúde mental. Esta massificação do Teletrabalho, embora com o intuito de proteger os trabalhadores relativamente a um risco biológico aumentou, em diversas situações, o isolamento social, os conflitos trabalho-família e a falta de suporte social, com consequências negativas na saúde mental da população ativa. Conclusão Com o aumento deste tipo de trabalho emerge a necessidade de avaliar os fatores de risco psicossociais que surgem em conformidade, para que estes sejam reconhecidos pelos peritos em saúde ocupacional e intervencionados, assegurando assim que o teletrabalho se torna mais saudável.

Abstract Maize is considered the third most important grain crop in the world due to its economic, food and industrial interest. Throughout its phenology this crop is attacked by pests and diseases, which could have adverse effects on production. In order to control these problems, conventional management is generally used, causing ecological imbalances. For this reason, it is necessary to consider sustainable alternatives based on the knowledge of beneficial entomofauna. This research aimed to conduct a prospective analysis of the coccinelides associated with maize cultivation in the canton of Santa Ana, Ecuador. For this purpose, the coccinelides present under two different conditions were evaluated; with and without insecticide application. Five sampling techniques were used according to the research protocol and taxonomic classification was carried out. The data were interpreted using descriptive statistics, in addition, alpha and beta diversity was assessed. In the study, 297 individuals were found, gathered to: 1 order,1 family, 13 genera and 11 species. The greatest abundance was found in undisturbed conditions, determining that the most efficient trapping technique for their capture was the use of chromatic traps. This type of research is important to derive biological control programs in economically important crops.

Resumen El maíz es considerado el tercer cultivo de grano más importante del mundo debido a su interés económico, alimentario e industrial. A lo largo de su fenología este cultivo es atacado por plagas y enfermedades, que pueden generar efectos adversos sobre la producción. Para el control de estos problemas, generalmente se acude al manejo convencional, los cuales ocasionan desequilibrios ecológicos. Por esta razón, es necesario considerar alternativas sostenibles fundamentadas en el conocimiento de la entomofauna benéfica. Esta investigación tuvo por objetivo realizar un análisis prospectivo de los coccinélidos asociados al cultivo de maíz en el cantón Santa Ana, Ecuador. Para su efecto, se evaluaron los coccinélidos presentes en dos condiciones distintas: con y sin aplicación de insecticida. Se utilizaron cinco técnicas de muestreo, de acuerdo con el protocolo de investigación, y se procedió con la clasificación taxonómica. Los datos fueron interpretados mediante estadística descriptiva; además, se valoró la diversidad alfa y beta. En el estudio se encontraron 297 individuos, congregados a: 1 orden,1 familia, 13 géneros y 11 especies. La mayor abundancia se presentó en condiciones no intervenidas, determinándose que la técnica de trampeo más eficiente para su captura fueron las trampas cromáticas. Este tipo de investigación es importante para derivar programas de control biológico en cultivos de importancia económica.

Abstract The marketing of microbial pesticides has increased exponentially in recent years. Almost 70 % of the products marketed use as active ingredient conidia of biocontrol fungi, and One of the most frequently used criteria to evaluate the quality of these products is conidial germination test, Specifically, this methodology is used to select and assess the viability and vigor of elite strains with biological potential. Some of the factors that influence conidial germination over time, include the selection of culture medium, temperature, incubation time, and the addition of germination synchronizing agents. The optimization for each elite strain allows the characterization of a microorganism behavior over time, ensuring its biological activity and effective management as a biological resource for commercial purposes. The main objective of this study was to identify the optimal conditions (culture media, incubation time, and synchronizing agent concentration) for the germination of three elite strains: Trichoderma koningiopsis (Th003), Lecanicillium lecanii (Vl026), and Metarhizium robertsii (Mt004), which are active ingredients in biopesticides. As a result, the optimal conditions selected are as follows: agar-water medium with 0.0003 % benomyl for Th003 with an incubation period of 18 hours, agar-water medium with 0.0003 % benomyl for Vl026 with an incubation period of 24 hours, and PDA agar supplemented with 0.0003 % benomyl for Mt004 with an incubation period of 18 hours. These conditions will allow a precise evaluation of the germination of the biological control agents ensuring over time their viability and vigor as active ingredients in biopesticides.

Resumen La comercialización de plaguicidas microbianos ha aumentado de manera exponencial en los últimos años. Casi el 70 % de los productos que se comercializan utilizan como principio activo conidios de hongos biocontroladores y uno de los criterios más utilizados para evaluar la calidad de estos productos es la prueba de germinación de conidios. Específicamente, se utiliza para la selección y la evaluación de la viabilidad y vigor de cepas élite con potencial biológico. Algunos de los factores que influyen en la germinación de los conidios incluye la selección del medio del cultivo, la temperatura, el tiempo de incubación y la adición de sustancias sincronizadoras de germinación. La optimización para cada cepa élite permite estimar el comportamiento del microorganismo, lo que garantizará su actividad biológica y eficacia, al ser un recurso biológico con fines comerciales. El objetivo de este trabajo fue seleccionar las condiciones óptimas (medios de cultivo, tiempo de incubación y concentración de sustancia sincronizadora) para la germinación de tres cepas élite Trichoderma koningiopsis (Th003), Lecanicillium lecanii (Vl026) y Metarhizium robertsii (Mt004), las cuales son principios activos de bioplaguicidas en proceso de comercialización. Como resultado se seleccionó el medio de cultivo de agar agua con benomil al 0,0003 % con un tiempo de lectura de 18 h para Th003 y de 24 h para Vl026. Para la cepa Mt004, el medio de cultivo que favoreció la germinación sincrónica de los conidios fue agar PDA suplementado con benomil al 0,0003 % con un tiempo de lectura de 18 h. Estas condiciones permitirán a través del tiempo realizar una correcta evaluación de la germinación de los agentes de control biológico y garantizar su viabilidad y vigor como principio activo de bioplaguicidas.

Abstract The biological control in sugarcane in Venezuela has been established as a unique measure, having optimal results of the use of parasitoids and entomopathogens for the control of borers of the genus Diatraea, and later of the candelilla Aeneolamia spp., both key pests of the crop. For borers it was achieved after systematic releases of the Amazonian fly Lydella minense from the middle of the last century and then with the establishment of the braconid wasp Cotesia flavipes from 1987. For the biological control of Aenolamia varia, pest that involved the frequent application of insecticides, after the introduction of the use of the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae since 1977, has been established as an efficient measure for the control of its adults, however, the nymphs were less controlled. This aspect was resolved through the introduction of the entomopathogenic nematode Heterorhabditis bacteriophora in 2004, which has been widely used as a biological measure to avoid the application of insecticides. As an example, we have the Azucarera Río Turbio, although in the last harvests it has had a reduction in its areas due to different factors. During the last 58 years, Diatraea infestation shows a reduction of 15 to 3.18 %, which saves 170 552.62 metric tons with a value of US$ 49 196 045 and a cost of biological control of US$ 1 187 189 which translates into a benefit-cost of US$ 41.44. Before the establishment of biological control, Aeneolamia was controlled exclusively with chemical insecticides applied to foliage for adults and soil for nymphs. Simultaneously since then, the entomopathogenic fungus M. anisopliae produced by national companies has been used and this entomopathogen was used on 87 000 hectares between 1986 and 1990. Also since 2004, the methodology of using entomopathogenic nematodes to control Aeneolamia nymphs began.

Resumen El control biológico en caña de azúcar en Venezuela se ha logrado establecer como una medida única, con resultados óptimos del uso de parasitoides y entomopatógenos para el control de los taladradores del género Diatraea, y, posteriormente, de la candelilla Aeneolamia spp., ambas plagas claves del cultivo. Para los taladradores, se logró después de liberaciones sistemáticas de la mosca amazónica Lydella minense desde un inicio, a mediados del siglo XX y luego con el establecimiento de la avispa bracónida Cotesia flavipes, a partir de 1987. Para el control biológico de Aeneolamia varia, plaga que implicaba la aplicación frecuente de insecticidas, después de la introducción del uso del hongo entomopatógeno Metarhizium anisopliae desde 1977, se ha establecido como medida eficiente para el control de sus adultos, aunque las ninfas eran menos controladas. Este aspecto se resolvió mediante la introducción del nematodo entomopatógeno Heterorhabditis bacteriophora en 2004, el cual se viene utilizando en forma general, y prácticamente ya se tienen las medidas biológicas para evitar la aplicación de insecticidas. Como ejemplo se tiene a la Azucarera Río Turbio, aunque en las últimas zafras ha tenido una reducción en sus áreas, por diferentes factores. Durante los últimos 58 años, la infestación de Diatraea muestra una reducción de 15 a 3.18 %, con lo cual se salvan 170 552.62 toneladas métricas (TM), con un valor de US$ 49 196 045 y un costo del control biológico de US$ 1 187 189 lo que se traduce en un beneficio-costo de US$ 41.44. Antes del establecimiento del control biológico, Aeneolamia se controlaba exclusivamente con insecticidas químicos, aplicados al follaje para los adultos y al suelo para las ninfas. Simultáneamente desde entonces, se ha utilizado el hongo M. anisopliae producido por empresas nacionales, hasta cubrir 87 000 ha, entre 1986 y 1990. También, desde 2004 se inició la utilización de nematodos entomopatógenos para el control de ninfas de Aeneolamia.

Resumen Actualmente en las plantaciones de Eucalyptus en Ecuador, la plaga más importante es Gonipterus sp., el control químico es la práctica más común, pero su alto costo e ineficacia ha llevado a la industria maderera a buscar alternativas, como el control biológico. El objetivo de esta investigación fue conocer aspectos relacionados a la biología y ecología de Podisus sp., depredador natural de Gonipterus sp. La recolección de estas especies se realizó en las plantaciones de la empresa NOVOPAN, ubicada en la provincia de Imbabura, para luego ser trasladados al laboratorio GDETERRA-ESPOCH, donde Podisus sp. fue criado en frascos herméticos de 100 ml, a una temperatura de 22°C y una humedad relativa del 43%. Inicialmente se alimentó con larvas de Gonipterus sp. y como alternativa larvas de Spodoptera frugiperda. Los resultados revelaron un ciclo biológico de huevo a adulto de 40-45 días, longevidad adulta 75 días y una producción de huevos de 30-35 por hembra. Al no obtener suficientes larvas de esta especie, se optó por larvas de Spodoptera frugiperda como alimento. El estudio concluye que es factible criar Podisus sp. en condiciones controladas utilizando larvas de Gonipterus sp. y Spodoptera frugiperda, siendo esta última más eficiente debido a su disponibilidad.

Abstract Currently, on Eucalyptus plantations in Ecuador, the most important pest is Gonipterus sp., and chemical control is the most common practice, but its high cost and inefficiency have led the timber industry to seek alternatives such as biological control. The objective of this research was to understand aspects related to the biology and ecology of Podisus sp., a natural predator of Gonipterus sp. These species were collected in NOVOPAN plantations located in the Imbabura province and then transferred to the GDETERRA-ESPOCH laboratory. Podisus sp. was reared in 100-ml airtight containers at a temperature of 22 °C and a relative humidity of 43%. Initially, they were fed Gonipterus sp. Larvae, and alternatively, larvae of Spodoptera frugiperda. Results revealed a biological cycle from egg to adult of 40 - 45 days, adult longevity of 75 days, and egg production of 30 - 35 per female. Due to insufficient larvae of Gonipterus sp., larvae of Spodoptera frugiperda were used as an alternative food source. The study concludes that it is feasible to rear Podisus sp. under controlled conditions using larvae of both Gonipterus sp. and Spodoptera frugiperda, with the latter being more efficient due to its availability.

RESUMEN El programa de mejoramiento de alfalfa requiere alternativas más amigables con el ambiente para incrementar la sanidad del cultivo. Las rlzobacterlas promotoras del crecimiento vegetal (RPCV) y endófltos de semillas constituyen una opción para inhibir hongos patógenos por la producción de compuestos antifúngicos o enzimas hidrolíticas. En Argentina, la alfalfa es afectada principalmente por Colletotr¡chum trifolii (Ct) y Phytophthora megasperma (Pm). Los objetivos fueron seleccionar bacterias con capacidad antifúngica contra Ct y Pm, e identificar una compatible con el rizobio INTA5 con baja emisión de N2O para constituir un consorcio bacteriano sustentable. Diez cepas mostraron capacidad antifúngica con medias de porcentaje de inhibición (PI) entre 41,74-91,28 para Ct y 56,23-77,59 relativos al control para Pm. B2, B4, SC6 y MN1 fueron seleccionadas por su mayor capacidad de biocontrol y se estudió la compatibilidad con INTA5. Sólo B4 resultó compatible, por ello fue evaluada contra Ct sobre plántulas de alfalfa en experimentos bajo condiciones controladas. Esta cepa incrementó el número de plántulas sobrevivientes cuando las mismas fueron inoculadas con Ct. La disponibilidad de un consorcio bacteriano que estimule tanto el biocontrol como la fijación biológica de nitrógeno representa la estrategia preferida por el programa de mejoramiento de alfalfa.

ABSTRACT Alfalfa breeding programs require environmentally friendly alternatives to improve plant growth and health. Plant Growth Promoting Rhizobacteria (PGPR) and endophytic bacteria offer a biological solution as they can inhibit phytopathogenic fungi by producing antifungal compounds or enzymes. In Argentina, alfalfa is primarily affected by Colletotrchum trifolii (Ct) and Phytophthora megasperma (Pm). The objectives of this study were to select bacterial isolates with antifungal inhibition against Ct and Pm and identify a biocontroller isolate compatible with the rhizobia INTA5 has and with low-N2O emissions, to constitute an eco-friendly bacterial consortium. Ten isolates demonstrated antifungal inhibition, with mean Inhibition Percentage (IP) values between 41.74-91.28 for Ct and 56.23-77.59 for Pm compared to the control. Among these isolates, B2, B4, SC6, and MN1 showed the highest inhibition performance and were selected to evaluate their compatibility with INTA5. Only B4 exhibited compatibility, which was further evaluated against Ct in an experiment with alfalfa seedlings under controlled conditions. The alfalfa seedlings treated with B4 increased the plant survival number against Ct. The availability of a bacterial consortium that promotes biocontrol and biological nitrogen fixation represents the preferred strategy for alfalfa breeding programs.