Abstract Aedes aegypti L. (Diptera: Culicidae) is the main transmitter of pathogens that cause human diseases, including dengue, chikungunya, zika and yellow fever. Faced with this problem, this study aims to select fungi with entomopathogenic potential against Ae. aegypti and develop formulations that optimize the control action of entomopathogenic fungi in the semi-field condition. 23 fungal strains native from Amazon were inoculated in Potato-Dextrose-Agar (PDA) culture medium for 14 days and then transferred by scraping to tubes containing 0.9% NaCl solution. To obtain the larvae, eggs were collected using traps in peridomestic environments for 7 days. 20 larvae of Ae. aegypti in 125 mL erlenmeyers containing 20 mL of conidial suspension at a concentration of 1x106 conidia/mL for initial selection and 1×104, 1×105, 1×106 and 1×107 conidia/mL for determination of LC50. Mortality was checked every 24 h for 5 days. The three fungi with the best virulence rates were identified using molecular techniques. The compatibility between fungi at a concentration of 1×106 conidia/mL and oily adjuvants, mineral oil and vegetable oil (andiroba, chestnut and copaiba) at concentrations of 0.1, 0.5 and 1% was evaluated. The germination capacity of 100 conidia per treatment was evaluated after incubation at 28 ºC for 24 h. To evaluate the entomopathogenic potential of the fungal formulations, conidial suspensions (1×106 conidia/mL) were added with 0.1% mineral and vegetable oil. The treatments were submitted to laboratory and semi-field conditions and mortality was verified every 24 h for 5 days. Beauveria sp. (4,458) (LC50 = 8.66× 103), Metarhizium anisopliae (4,420) (LC50 = 5.48×104) and M. anisopliae (4,910) (LC50 = 1.13×105) were significantly more effective in the larval control of Ae. aegypti, in relation to the other fungal morphospecies evaluated. Mineral oil was better compatible in all treatments evaluated. Beauveria sp. (4,458) was considerably less virulent under semi-field conditions. M. anisopliae (4,910) formulated with mineral oil increased larval mortality to 100% on the 4th day in the laboratory and on the 5th day in the semi-field. Fungal formulations developed from native Amazonian isolates represent a promising tool for the development of strategies to control Ae. aegypti. L Diptera (Diptera Culicidae diseases dengue chikungunya fever problem Ae semifield semi field condition 2 PotatoDextroseAgar Potato Dextrose Agar PDA (PDA 1 09 0 9 0.9 solution 12 x 1x10 conidiamL 1104 104 1×104 1105 105 1×105 1106 106 1×10 1107 107 LC50 LC techniques adjuvants andiroba, andiroba (andiroba copaiba 01 0.1 05 0. 10 (1×10 sp 4,458 4458 4 458 (4,458 (LC5 866 8 66 8.66 103, 103 , 103) 4,420 4420 420 (4,420 5.48×104 548104 48 M 4,910 4910 910 (4,910 1.13×105 113105 13 th semifield. field. 1x1 110 1×1 LC5 (1×1 4,45 445 45 (4,45 (LC 86 6 8.6 4,42 442 42 (4,42 5.48×10 54810 4,91 491 91 (4,91 1.13×10 11310 1x 11 1× (1× 4,4 44 (4,4 8. 5.48×1 5481 4,9 49 (4,9 1.13×1 1131 (1 4, (4, 5.48× 548 1.13× 113 ( (4 5.48 54 1.13 5.4 1.1 5. 1.
Resumo Aedes aegypti L. (Diptera: Culicidae) é o principal transmissor de patógenos que causam doenças humanas, incluindo dengue, chikungunya, zika e febre amarela. Diante desse problema, este estudo tem como objetivo selecionar fungos com potencial entomopatogênico frente ao Ae. aegypti e desenvolver formulações que otimizem a ação de controle de fungos entomopatogênicos na condição de semi-campo. 23 cepas fúngicas nativas da Amazônia foram inoculadas em meio de cultura Potato-Dextrose-Agar (PDA) por 14 dias e depois transferidas por raspagem para tubos contendo solução de NaCl 0,9%. Para obtenção das larvas, os ovos foram coletados por meio de armadilhas em ambientes peridomiciliares por 7 dias. 20 larvas de Ae. aegypti em erlenmeyers de 125 mL contendo 20 mL de suspensão de conídios na concentração de 1×106 conídios/mL para seleção inicial e 1×104, 1×105, 1×106 e 1×107 conídios/mL para determinação de CL50. A mortalidade foi verificada a cada 24 horas durante 5 dias. Os três fungos com as melhores taxas de virulência foram identificados por meio de técnicas moleculares. Foi avaliada a compatibilidade entre fungos na concentração de 1×106 conídios/mL e adjuvantes oleosos, óleo mineral e óleo vegetal (andiroba, castanha e copaíba) nas concentrações de 0,1, 0,5 e 1%. A capacidade germinativa de 100 conídios por tratamento foi avaliada após incubação a 28 ºC por 24 h. Para avaliar o potencial entomopatogênico das formulações fúngicas, suspensões de conídios (1×106 conídios/mL) foram adicionadas de óleo mineral e vegetal a 0,1%. Os tratamentos foram submetidos a condições de laboratório e semi-campo e a mortalidade foi verificada a cada 24 horas durante 5 dias. Beauveria sp. (4.458) (LC50 = 8,66×103), Metarhizium anisopliae (4.420) (LC50 = 5,48×104) e M. anisopliae (4.910) (LC50 = 1,13×105) foram significativamente mais eficazes no controle larval de Ae. aegypti, em relação às demais morfoespécies fúngicas avaliadas. O óleo mineral foi melhor compatível em todos os tratamentos avaliados. Beauveria sp. (4.458) foi consideravelmente menos virulento em condições de semi-campo. M. anisopliae (4.910) formulado com óleo mineral aumentou a mortalidade larval para 100% no 4º dia no laboratório e no 5º dia no semi-campo. Formulações fúngicas desenvolvidas a partir de isolados nativos da Amazônia representam uma ferramenta promissora para o desenvolvimento de estratégias de controle de Ae. aegypti. L Diptera (Diptera Culicidae humanas dengue chikungunya amarela problema Ae semicampo. semicampo semi campo. campo 2 PotatoDextroseAgar Potato Dextrose Agar PDA (PDA 1 09 0 9 0,9% 12 1106 106 1×10 conídiosmL 1104 104 1×104 1105 105 1×105 1107 107 CL50 CL moleculares oleosos andiroba, andiroba (andiroba copaíba 01 0,1 05 0, 1% 10 h (1×10 0,1% sp 4.458 4458 4 458 (4.458 LC50 LC (LC5 8,66×103, 866103 8,66×103 , 8 66 103 8,66×103) 4.420 4420 420 (4.420 5,48×104 548104 48 M 4.910 4910 910 (4.910 1,13×105 113105 13 avaliadas avaliados º 0,9 110 1×1 CL5 (1×1 4.45 445 45 (4.45 LC5 (LC 86610 8,66×10 6 4.42 442 42 (4.42 5,48×10 54810 4.91 491 91 (4.91 1,13×10 11310 11 1× (1× 4.4 44 (4.4 8661 8,66×1 5,48×1 5481 4.9 49 (4.9 1,13×1 1131 (1 4. (4. 866 8,66× 5,48× 548 1,13× 113 ( (4 86 8,66 5,48 54 1,13 8,6 5,4 1,1 8, 5, 1,