RESUMEN La diarrea epidémica porcina (DEP) es una enfermedad contagiosa producida por el virus del mismo nombre que es clasificado dentro del género Alphacoronavirus, familia Coronaviridae. Este virus produce diarrea, vómitos y pérdida de peso en cerdos de todas las edades, pero en los cerditos neonatos alcanza una morbilidad y mortalidad de hasta el 100%. En Ecuador, fue diagnosticada por primera vez en el 2014 mediante PCR convencional o en punto final. Actualmente existe la necesidad de contar con un ensayo ultrasensible, específico, que permita trabajar un gran número de muestras para facilitar la vigilancia epidemiológica de nuevos brotes y detectar animales portadores. Se desarrolló y evaluó un ensayo de PCR en tiempo real con un colorante intercalador de ADN como el SYBR Green para detectar el virus de la DEP (VDEP) en heces de cerdos, con cebadores que tienen como diana el gen N del virus. En la evaluación de la sensibilidad analítica se utilizó un patrón de ARN del VDEP sintetizado en el laboratorio, determinándose que el límite de detección del ensayo desarrollado fue de 4 copias de ARN del VDEP, comparando con la PCR en punto final que fue 100 veces más sensible, la especificidad del ensayo se basó en la posibilidad de detectar falsos positivos mediante la curva de disociación. Los valores de Ct (valor umbral) en el análisis intra e inter-ensayo mostraron coeficientes de variación válidos. En la evaluación del desempeño diagnóstico, el ensayo detectó 18 muestras positivas de un total de 52 para un 100% de concordancia con el PCR en punto final. Se concluye que el ensayo de PCR en tiempo real con SYBR Green desarrollado es altamente sensible, específico, reproducible y rápido para el diagnóstico del VDEP en homogenados de mucosa intestinal de cerdos.

ABSTRACT Porcine epidemic diarrhea (PED) is a contagious disease caused by its virus, classified within the genus Alphacoronavirus, family Coronaviridae. This virus causes diarrhea, vomiting and weight loss in pigs of all ages, especially in neonatal piglets, with morbidity and mortality of up to 100%. In Ecuador, the disease was diagnosed for the first time in 2014 by conventional or endpoint PCR. Currently, there is a need for an ultrasensitive and specific assay, which allows working a large number of samples to facilitate epidemiological surveillance of new outbreaks and detect carrier animals. A real-time PCR assay intercalating DNA dyes such as SYBR Green was developed and assessed to detect PED virus (PEDv) in swine feces with primers targeting the N-gene of the virus. A PEDv RNA standard synthesized in the laboratory was used in the assessment of the analytical sensitivity. The detection limit of the developed assay was determined to be 4 copies of PEDv RNA, compared to endpoint PCR which was 100 times more sensitive. Assay specificity was based on the possibility of detecting false positives using the melting curve. Cycle threshold (Ct) values in intra- and inter-assay analysis showed valid coefficients of variation. When assessing diagnostic performance, the assay detected 18 positive samples out of a total of 52 for 100 % agreement with the endpoint PCR. It is concluded that the developed SYBR Green-based real-time PCR assay is highly sensitive, specific, reproducible and rapid for the detection of PEDv in swine intestinal mucosa homogenates.

Bovine tuberculosis (BTB) is a chronic and contagious disease that affects domestic animals, wildlife, and humans. Caused by Mycobacterium bovis, BTB causes major economic losses and poses a serious constraint to international livestock trade. Moreover, in developing countries where BTB controls are lacking, M. bovis is a public health concern. In most developing countries, the prevalence of BTB in livestock is unknown because the information is either not reported or not available. In Ecuador, there is no national BTB control program. This article reviews the BTB situation in Ecuador by examining exhaustive data from tuberculin testing surveys and slaughterhouse surveillance studies conducted in 1972-2008 in a variety of the country's geographic areas. In Ecuador, several factors, including the dairy industry's expansion (preempted by the high demand for milk and its by-products), intensified efforts to increase the cattle population, the presence of M. bovis, and a lack of BTB controls, have caused a rise in BTB prevalence, and consequently, a growing push for the implementation of a national BTB control program.

La tuberculosis bovina es una enfermedad contagiosa crónica que afecta a los animales domésticos, los animales salvajes y los seres humanos. Es producida por Mycobacterium bovis; causa grandes pérdidas económicas y plantea una grave limitación para el comercio ganadero internacional. Por otro lado, en los países en desarrollo donde no hay controles de la tuberculosis bovina, la infección por M. bovis representa un problema de salud pública. En la mayoría de los países en desarrollo, la prevalencia de tuberculosis en el ganado se desconoce porque la información no se comunica o no se consigue. En el Ecuador no hay un programa nacional de control de la tuberculosis bovina. En este artículo se revisa la situación de la tuberculosis bovina en el Ecuador, sobre la base de un análisis de los datos exhaustivos obtenidos de encuestas sobre pruebas de tuberculina y de los estudios de vigilancia llevados a cabo en mataderos entre 1972 y 2008 en varias zonas geográficas del país. En el Ecuador varios factores, como el crecimiento de la industria láctea (impulsado por la alta demanda de leche y sus derivados), los intensos esfuerzos para aumentar la población bovina, la presencia de M. bovis y la falta de controles de la tuberculosis bovina, han ocasionado un aumento de la prevalencia de esta y, en consecuencia, representan una motivación creciente para llevar a cabo un programa nacional de control de la tuberculosis bovina.