La tosferina es una enfermedad infecciosa causada por Bordetella pertussis, que se diagnostica mediante el cultivo como técnica de referencia, la cual tiene como limitante una baja sensibilidad. Es debido a esto, que el presente trabajo se centró en evaluar a la técnica de PCR a punto final amplificando las secuencias IS481 y PT, como una metodología alternativa diagnóstica a partir de 100 muestras pareadas de hisopado nasofaríngeo de pacientes provenientes de distintas regiones de Venezuela. Dichas muestras pareadas constaron de un hisopado para realizar el cultivo bacteriano y el otro para la detección de ADN específico. La identificación microbiológica de B. pertussis incluyó el aislamiento del microorganismo en agar Regan-Lowe, identificación bioquímica y la confirmación por coaglutinación. El análisis de los resultados fue realizado empleando el programa SPSS 21.0.0., usando como herramienta estadística el test de McNemar. La sensibilidad obtenida por el protocolo de PCR a punto final fue 50%, en concordancia con reportes previos. De acuerdo al valor de p=0,002 obtenido, la detección de B. pertussis mediante los dos métodos presentó una diferencia para el diagnóstico de tosferina estadísticamente significativa, por lo que no es indiferente emplear ambas técnicas diagnósticas. Sin embargo, se recomienda emplear en forma combinada ambas metodologías para incrementar la probabilidad de realizar el diagnóstico.

Whooping cough is an infectious disease caused by Bordetella pertussis, diagnosed by culture as a reference technique, which has low sensitivity as limiting. It is because of this that the present work focused on evaluating the PCR technique endpoint amplifying IS481 and PT sequences, as an alternative methodology diagnostic from 100 paired samples of nasopharyngeal swabs from patients from different regions of Venezuela. Such paired samples comprised a swab for bacterial culture and the other for detection of specific DNA. Microbiological identification of B. pertussis included the isolation of the microorganism in agar Regan-Lowe, biochemical identification and confirmation by Coagglutination. The analysis of the results was performed using the SPSS program 21.0.0., as a statistical tool using the McNemar test. The sensitivity obtained by the PCR protocol endpoint was 50%, consistent with previous reports. According to the value of p = 0.002 obtained, detection of B. pertussis by the two methods showed a difference for the diagnosis of pertussis statistically significant, so it is not indifferent both diagnostic techniques employed. However, it is recommended to use both methods in combination to increase the likelihood of diagnosis.

Neisseria meningitidis es agente causal de meningitis y meningococcemia. Se realizó la presente investigación a fin de analizar fenotípicamente las cepas invasivas de N. meningitidis aisladas en Cumaná, estado Sucre. Se incluyó el total de cepas identificadas como N. meningitidis en el laboratorio de bacteriología del Hospital Universitario “Antonio Patricio de Alcalá”, durante los años 2009-2010; provenientes de muestras de líquido cefalorraquídeo (LCR) y sangre (hemocultivos). A cada aislamiento se le determinó la susceptibilidad antimicrobiana y el serogrupo respectivo. Durante el período en estudio se analizaron 10 cepas, de las cuales 5 provenían de LCR. El ensayo de susceptibilidad antimicrobiana reveló que las cepas presentaban sensibilidad a penicilina, cefotaxima, meropenem, rifampicina, ciprofloxacina y cloranfenicol siendo sólo resistentes al trimetoprim/ sulfametoxazol. El serogrupo más frecuente fue el B (8 cepas), aislándose un caso de serogrupo Y. Respecto al grupo etario de los pacientes, de las 10 cepas, 8 provenían de pacientes pediátricos. Este es el primer estudio con cepas de N. meningitidis aisladas en Cumaná, por lo que se hace imprescindible el análisis permanente de las cepas aisladas en la zona, con fines de monitoreo, principalmente, de la susceptibilidad antimicrobiana y los serogrupos circulantes.

Neisseria meningitidis is the causal agent for meningitis and meningococcemia. This research was performed to phenotypically analyze invasive strains of N. meningitidis isolated in Cumana, State of Sucre. The study included all strains identified as N. meningitidis isolated in the bacteriology laboratory at the University Hospital “Antonio Patricio de Alcalá,” during the years 2009-2010, coming from cerebrospinal fluid (CSF) samples and blood cultures. For each isolate, the antimicrobial susceptibility and respective serogroup were determined. During the period of study, 10 strains were analyzed, of which 5 came from CSF. The antimicrobial susceptibility test revealed that the strains showed sensitivity to penicillin, cefotaxime, meropenem, rifampicin, ciprofloxacin and chloramphenicol; they were resistant only to trimethoprim/ sulfamethoxazole. Serogroup B was the most frequent (8 strains); one case of serogroup Y was isolated. Regarding the patient’s ages, of the 10 strains, 8 were found in pediatric patients. This is the first study about strains of N. meningitidis isolated in Cumaná, so it is essential that permanent research regarding the strains isolated in the area is carried out for monitoring purposes, mainly in terms of antimicrobial susceptibility and the circulating serogroups.

Objetivo. Determinar la evolución de la resistencia a la eritromicina, el cloranfenicol, el trimetoprim-sulfametozaxol (SXT) y la vancomicina de aislamientos invasores de Streptococcus pneumoniae obtenidos de niños de 10 países de América Latina y del Caribe en seis años de vigilancia. Métodos. Se analizaron 8 993 aislamientos de S. pneumoniae recuperados entre 2000 y 2005 de niños menores de 6 años con infecciones invasoras, procedentes de Argentina, Brasil, Chile, Colombia, Cuba, México, Paraguay, República Dominicana, Uruguay y Venezuela. La sensibilidad a los antibióticos se determinó mediante los métodos establecidos y estandarizados en el proyecto SIREVA. La resistencia a múltiples antibióticos se definió como la resistencia a tres o más familias de antibióticos, de los no betalactámicos analizados en este estudio o de los betalactámicos evaluados en un estudio previo en el que 37,8% de estos aislamientos presentaron sensibilidad disminuida a la penicilina. Resultados. Se encontró algún grado de resistencia al SXT y la eritromicina (56,4% y 15,4% de los aislamientos estudiados, respectivamente) y 4,6% presentó alta resistencia al cloranfenicol. Todos los aislamientos fueron sensibles a la vancomicina. Se observó la mayor frecuencia de resistencia al SXT en los aislamientos de neumonía y a la eritromicina en los casos de sepsis (61,6% y 25,5%, respectivamente; P< 0,01). La mayor frecuencia de resistencia al SXT se observó en Brasil (71,9%) y a la eritromicina en México (38,2%) y Venezuela (32,9%). Los serotipos 14,6B, 19F y 23F fueron los que más frecuentemente se asociaron con la resistencia a los antibióticos estudiados. Conclusiones. Se observó una elevada y creciente frecuencia de aislamientos resistentes al SXT y la eritromicina, y una disminución en la proporción de aislamientos resistentes al cloranfenicol. Estas tendencias mostraron diferencias entre los países estudiados.

Objective. To examine the development of resistance to erythromycin, chloramphenicol, trimethoprim-sulfamethoxazole (TMP-SMZ), and vancomycin of the invasive isolates of Streptococcus pneumoniae obtained from children in 10 Latin American/Caribbean countries during six years of surveillance. Methods. Analysis of 8 993 isolates of S. pneumoniae recovered in 2000-2005 from children with invasive infections, who were less than 6 years of age, and from Argentina, Brazil, Chile, Colombia, Cuba, Dominican Republic, Mexico, Paraguay, Uruguay, or Venezuela. Antibiotic susceptibility was determined through the methods established and standardized by the SIREVA project. Multidrug resistance was defined as: resistance to three or more antibiotics of the same class; to the non-beta-lactams analyzed by this study; or, to the beta-lactams evaluated by a previous study, in which 37.8% of these isolates showed decreased susceptibility to penicillin. Results. Some degree of resistance was found to TMP- SMZ and erythromycin (56.4% and 15.4% of the isolates studied, respectively), with 4.6% highly resistant to chloramphenicol. All isolates were susceptible to vancomycin. The highest prevalence of TMP-SMZ resistance was observed in the pneumonia isolates; and that of erythromycin, in cases of sepsis (61.6% and 25.5%, respectively; P < 0.01). The highest prevalence of TMP-SMZ resistance was found in Brazil (71.9%), and that of erythromycin, in Mexico (38.2%) and Venezuela (32.9%). The 14, 6B, 19F, and 23F serotypes were most often associated with resistance to the antibiotics in the study. Conclusions. High and increasing rates of isolates resistant to TMP-SMZ and erythromycin were observed, as well as a decreasing percentage of isolates resistant to chloramphenicol. These trends highlight differences among the countries studied.

OBJECTIVE: To examine the development of resistance to erythromycin, chloramphenicol, trimethoprim-sulfamethoxazole (TMP-SMZ), and vancomycin of the invasive isolates of Streptococcus pneumoniae obtained from children in 10 Latin American/Caribbean countries during six years of surveillance. METHODS: Analysis of 8 993 isolates of S. pneumoniae recovered in 2000-2005 from children with invasive infections, who were less than 6 years of age, and from Argentina, Brazil, Chile, Colombia, Cuba, Dominican Republic, Mexico, Paraguay, Uruguay, or Venezuela. Antibiotic susceptibility was determined through the methods established and standardized by the SIREVA project. Multidrug resistance was defined as: resistance to three or more antibiotics of the same class; to the non-beta-lactams analyzed by this study; or, to the beta-lactams evaluated by a previous study, in which 37.8% of these isolates showed decreased susceptibility to penicillin. RESULTS:Some degree of resistance was found to TMP-SMZ and erythromycin (56.4% and 15.4% of the isolates studied, respectively), with 4.6% highly resistant to chloramphenicol. All isolates were susceptible to vancomycin. The highest prevalence of TMP-SMZ resistance was observed in the pneumonia isolates; and that of erythromycin, in cases of sepsis (61.6% and 25.5%, respectively; P < 0.01). The high-est prevalence of TMP-SMZ resistance was found in Brazil (71.9%), and that of erythromycin, in Mexico (38.2%) and Venezuela (32.9%). The 14, 6B, 19F, and 23F serotypes were most often associated with resistance to the antibiotics in the study. CONCLUSIONS: High and increasing rates of isolates resistant to TMP-SMZ and erythromycin were observed, as well as a decreasing percentage of isolates resistant to chloramphenicol. These trends highlight differences among the countries studied.

OBJETIVO:Determinar la evolución de la resistencia a la eritromicina, el cloranfenicol, el trimetoprim-sulfametozaxol (SXT) y la vancomicina de aislamientos invasores de Streptococcus pneumoniae obtenidos de niños de 10 países de América Latina y del Caribe en seis años de vigilancia. MÉTODOS: Se analizaron 8 993 aislamientos de S. pneumoniae recuperados entre 2000 y 2005 de niños menores de 6 años con infecciones invasoras, procedentes de Argentina, Brasil, Chile, Colombia, Cuba, México, Paraguay, República Dominicana, Uruguay y Venezuela. La sensibilidad a los antibióticos se determinó mediante los métodos establecidos y estandarizados en el proyecto SIREVA. La resistencia a múltiples antibióticos se definió como la resistencia a tres o más familias de antibióticos, de los no betalactámicos analizados en este estudio o de los betalactámicos evaluados en un estudio previo en el que 37,8% de estos aislamientos presentaron sensibilidad disminuida a la penicilina. RESULTADOS: Se encontró algún grado de resistencia al SXT y la eritromicina (56,4% y 15,4% de los aislamientos estudiados, respectivamente) y 4,6% presentó alta resistencia al cloranfenicol. Todos los aislamientos fueron sensibles a la vancomicina. Se observó la mayor frecuencia de resistencia al SXT en los aislamientos de neumonía y a la eritromicina en los casos de sepsis (61,6% y 25,5%, respectivamente; P < 0,01). La mayor frecuencia de resistencia al SXT se observó en Brasil (71,9%) y a la eritromicina en México (38,2%) y Venezuela (32,9%). Los serotipos 14, 6B, 19F y 23F fueron los que más frecuentemente se asociaron con la resistencia a los antibióticos estudiados. CONCLUSIONES: Se observó una elevada y creciente frecuencia de aislamientos resistentes al SXT y la eritromicina, y una disminución en la proporción de aislamientos resistentes al cloranfenicol. Estas tendencias mostraron diferencias entre los países estudiados.

En los últimos años se ha observado mundialmente un incremento del aislamiento de cepas de Pseudomonas aeruginosa resistentes a múltiples antibióticos, siendo la producción de β-lactamasas la principal causa de resistencia a los antibióticos β-lactámicos, los cuales constituyen la única opción terapéutica en muchos casos. Las metalo-β-lactamasas (MBLs) son una familia de enzimas degradadoras de β-lactámicos que recientemente han emergido como determinantes de resistencia de importancia clínica y que son activas contra los carbapenem; no hidrolizan a los monobactámicos; son inhibidas por agentes quelantes de iones metálicos como el EDTA y el ácido dipicolínico; no son inhibidas por el ácido clavulánico, sulbactan ni tazobactan y presentan uno o dos iones de zinc en su sitio activo. Este reporte describe la detección de MBLs tipo VIM mediante ensayos fenotípicos y moleculares en nueve cepas de Pseudomonas aeruginosa resistentes a carbapenems aisladas de muestras clínicas de cuatro hospitales de Venezuela. Por métodos fenotípicos se evidenció que 100% de las cepas eran productoras de MBLs, y por PCR todas las MBLs resultaron ser de la familia VIM, las cuales confieren alto nivel de resistencia a los antibióticos β-lactámicos, con excepción del Aztreonam, único antibiótico al cual se observó sensibilidad, complicando así las opciones terapéuticas.

In recent years there has been a worldwide raise in the isolation of Pseudomonas aeruginosa strains with resistance to multiple antibiotics, being β-lactamase production the main cause of resistance to β-lactamic antibiotic (which are the only therapeutic option in many cases). The MBLs are an β-lactamic- degrading enzymatic family that have emerged as clinically relevant resistance determinants and are active against carbapemens, don´t hydrolise monobactams, have one or two zinc ions in its active site and are inhibited by metallic ions chelating agents such as EDTA and dipicolinic acid, but aren´t inhibited by β-lactamase inhibitors such as clavulanic acid, sulbactam or tazobactam. This report describes the detection of VIM-type MBLs by phenotypic and molecular methods in 9 carbapenemsresistant Pseudomonas aeruginosa strains isolated from clinical samples of four Venezuelan hospitals. By phenotypic methods it was evidenced that 100% of the strains were MBLs producers, and by final- point PCR it was determined that all the MBLs were from the VIM family, which confer high- level resistance to the β-lactamic antibiotics (except Aztreonam), and because they are carried by plasmids with the ability to transfer horizontally to other bacterial families, they can be responsible for therapeutic complications in an individual or the patients collective.