Foram analisados vinte e sete isolados de fungos entomopatogênicos procedentes de diversos hospedeiros e regiões. A produção de conídios dos patógenos foi efetuada em placas de Petri contendo meio de cultura BDA. Insetos de terceiro instar de Leptopharsa heveae foram inoculados com uma suspensão fúngica na concentração de 1 x 10(9) conídios/mL. Avaliações de mortalidade confirmada foram efetuadas a cada dois dias e evidenciaram grande variação de virulência, sendo o isolado 1.189, de Metarhizium anisopliae, o mais virulento. Os cinco melhores isolados, mais os dois tidos como padrão por empresas do setor de heveicultura, foram então submetidos aos testes de produção. Para tanto, pré-matrizes em placas de Petri contendo meio de cultura BDA foram preparadas. A partir destas placas, matrizes contendo arroz como meio de cultura foram inoculadas com suspensão de conídios originária das pré-matrizes na concentração de 5 x 10(7) conídios/mL. Concluído o desenvolvimento dos patógenos nas matrizes, sacos de polipropileno contendo canjica de milho como meio de cultura foram inoculados com 40 mL da suspensão obtida a partir das matrizes. Após 15 dias de incubação, o conteúdo das sacolas foi avaliado quanto à produção e viabilidade de conídios. O isolado 1200, de Isaria fumosorosea, apresentou os melhores resultados de rendimento total e taxa de viabilidade e o isolado E9 de Metarhizium anisopliae foi o mais virulento ao percevejo de renda.

Twenty-seven strains of entomopathogenic fungi from diverse hosts and geographic regions were tested for their virulence, total conidia production and viability rate. The conidia production was made in PDA medium. Leptopharsa heveae third instar nymphs were inoculated with fungi suspension at the concentration of 1 x 10(9) conidia/mL. In each two days, confirmed mortality evaluations were done and a large variation of virulence was observed, been 1,189, of Metarhizium anisopliae, the best one. The top five strains, plus the two standards, were then submitted to production tests. For this purpose, pre-matrices in PDA medium were prepared, from which matrices in rice medium were after inoculated at the concentration of 5 x 10(7) conidia/mL. From the rice matrices, polypropylene bags with maize medium were inoculated with 40 mL of these suspensions. After fifteen days of incubation, the bags content were evaluated for total conidia production and their viability. The 1200 strain, of Isaria fumosorosea, presented the best results in total yield and viability rate; to E9 strain of de Metarhizium anisopliae was more virulent to rubber tree lacebug.

RESUMO O objetivo do trabalho foi verificar a patogenicidade dos conídios do isolado JAB 02 de Lecanicillium lecanii, produzidos em meio de cultura contendo acaricidas e inseticidas, ao ácaro rajado Tetranychus urticae. Foi feita uma mistura dos inseticidas (acefato, ciromazina, endosulfan, cloridrato de formetanato, imidacloprido, metiocarbe, metomil, monocrotofós e tiametoxam) e acaricidas (abamectina e propargite) ao meio de cultura BDA que foi vertido em placas de Petri. Após a solidificação, a inoculação do fungo foi realizada com alça de platina, através de três pontos, e as placas foram incubadas durante 16 dias em temperatura de 25,5 ± 0,5º C e fotofase de 12 horas. Após o crescimento do fungo, as colônias foram recortadas e transferidas para tubos de ensaio contendo água destilada e espalhante adesivo. A suspensão obtida de cada tratamento foi padronizada em 1 x 107 con./mL e 1 mL foi pulverizado em folhas de feijão de porco. Poste riormente à pulverização, os ácaros foram transferidos para as folhas e a mortalidade avaliada, sob microscópio estereoscópico, no 2º, 4º e 6º dias após a aplicação. A presença dos acaricidas e inseticidas no meio de cultivo não afetou a patogenicidade dos conídios de L. lecanii que causaram no 6º dia de avaliação mortalidades confirmadas de 47 a 76% do ácaro rajado T. urticae.

ABSTRACT The objective of this study was to evaluate the effect of pesticides on the pathogenicity of conidia of Lecanicillium lecanii, strain JAB 02, produced in culture media containing acaricides and insecticides, to the two-spotted mite Tetranychus urticae. A blend was made of insecticides (acephate, cyromazine, endosulfan, formetanate hydrochloride, imidacloprid, methiocarb, methomyl, monocrotophos, thiamethoxam) and acaricides (abamectin and propargite) in the culture media PDA, that was poured into a Petri dishes. After solidification, the fungus inoculation was realized at three points and the dishes were incubated for 16 days at a temperature of 25.5 ± 0.5º C and 12 hours of photophase. After the fungus growth, the colonies were cut out and removed to test tubes containing distilled water and detergent Tween 80Ò. The fungus suspension obtained for each treatment was standardized at 1 x 107 con./mL and 1 mL was sprayed on Canavalia ensiformis leaves. After the spraying, 15 mites were placed on each leaf disk and after 2, 4 and 6 days the mortality was evaluated in a stereoscopic microscope. The presence of acaricides and insecticides in the culture media did not affect the pathogenicity of conidia of L. lecanii, which on the 6th evaluation day presented a confirmed mortality in the range of 47 to 76% on two-spotted mites T. urticae.

RESUMO O trabalho teve os seguintes objetivos: 1) avaliar diferentes substratos para a produção semissólida dos fungos Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana; 2) verificar a tolerância dos conídios produzidos ao efeito da radiação ultravioleta e da temperatura; e 3) avaliar a patogenicidade dos conídios a Diatraea saccharalis. Para ambos os fungos, foram utilizadas 6 repetições para cada tratamento: amido de milho, arroz integral, arroz parboilizado tipo1, arroz tipo 1 e 2, aveia em flocos, canjiquinha, farelo de trigo, farinhas de mandioca crua, de milho amarela e de trigo especial, fubá, milho em grãos, polvilho azedo, soja em grãos, trigo moído e turfa. Os conídios foram quantificados em câmara de Neubauer e a determinação da viabilidade foi realizada através da observação em microscópio, dos conídios germinados e não germinados, após espalhamento da suspensão fúngica em placas de Petri contendo BDA. No ensaio com radiação os fungos foram expostos à radiação por 25 e 50 segundos e foi considerado um tratamento sem exposição; para temperatura os fungos foram expostos a 20, 25, 30 e 35o C. Utilizando a torre de Potter, 2 mL de cada suspensão fúngica dos tratamentos foram pulverizados em lagartas de D. saccharalis. As maiores concentrações de conídios de M. anisopliae e B. bassiana foram encontradas nos tratamentos com arroz parboilizado tipo 1, arroz tipo 1 e 2, farinha de milho amarela, fubá e trigo moído e a viabilidade dos conídios produzidos superou os 94%. Quanto maior o tempo de exposição à radiação menor foi o número de conídios viáveis; também ocorreu perda significativa da viabilidade dos conídios quando expostos à temperatura de 35o C. Os fungos foram patogênicos para D. saccharalis.

ABSTRACT The present study was aimed to evaluate different (semi-solid) media for the production of Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana propagules, and to evaluate the tolerance of these propagules to ultraviolet radiation and temperature. The experiments were performed at the Biological Control Laboratory of the Instituto Biológico at Campinas, São Paulo, Brazil. For both fungi, 6 repetitions were performed for each of the 17 treatments: corn starch, full rice, parboiled rice, type-1 rice, type-2 rice, oat flakes, canjiquinha [grits], wheat flour, raw cassava flour, yellow corn flour, special wheat flour, corn flour, corn in grains, cassava starch, soy in grains, crushed wheat, and turf. The viability analysis was done in plastic plates containing BDA. For the bioassays involving exposure to ultraviolet light and temperature, BDA was also used for viability analysis, and each treatment was exposed to the UV radiation for 0, 25 and 50 seconds, the temperature exposure being at 20, 25, 30 and 35º C. Using a Potter tower, 2 mL of fungus suspension from each treatment was inoculated to the Diatraea saccharalis caterpillars. Regarding the sporulation, the largest concentrations of M. anisopliae and B. bassiana were found for the treatments with parboiled rice, type-1 rice, type-2 rice, yellow corn flour, corn flour and crushed wheat. The viability of all treatments was superior to 94.00%. Also, the longer the duration of the exposition to the UV, the 2Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Ciências Agronômicas, Botucatu, SP, Brasil.

RESUMO Este estudo teve o objetivo de selecionar isolados do fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae para o controle de adultos de Rhynchophorus palmarum (L.) (Coleoptera: Curculionidae) e avaliar a compatibilidade de agrotóxicos utilizados nesta cultura com o isolado que ocasionasse maior mortalidade dos adultos. Para tal, adultos do inseto foram imersos em suspensões de seis isolados do fungo na concentração de 109 conídios.mL-1 e, após 24 dias, o isolado IBCB 348 causou maior mortalidade (87,5%) e foi utilizado para o teste de compatilibidade, por meio do cálculo da fórmula de T, com inseticidas, herbicidas e fungicidas comerciais utilizados na cultura. Nenhum dos fungicidas e herbicidas testados foram compatíveis com o patógeno. Os inseticidas Calypso, Dipterex 500 e Sevin 480 SC, na concentração mínima recomendada pelo fabricante, foram os únicos produtos classificados como compatíveis com o isolado IBCB 348 de M. anisopliae.

ABSTRACT This study was aimed to screen the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae for the control of Rhynchophorus palmarum (L.) (Coleoptera: Curculionidae) adults and to evaluate the compatibility of agrochemicals used in this crop with the strain that caused the highest insect mortality. To this end, adult insects were immersed in suspensions of 6 strains at a concentration of 109 conidia.mL-1, and after 24 days the isolate IBCB 348 caused the highest mortality (87.5%) and was used in the compatibility test, using calculations by way of the T formula, with commercial insecticides, herbicides and fungicides used in the crop. Among the tested strains, IBCB 348 was the most efficient in the control of this pest, causing 87.5% of weevil mortality. None of the tested fungicides and herbicides were compatible with the pathogen. The insecticides Calypso, Dipterex 500 and Sevin 480 SC, at the lowest dose recommended by the manufacturer, were the only products classified as compatible with the strain IBCB 348 of M. anisopliae.

RESUMO O efeito de oito inseticidas e doze fungicidas, utilizados na cultura da goiaba, foi avaliado sobre o fungo Beauveria bassiana sob condições in vitro e de semi-campo. Em laboratório, o efeito foi verificado misturando-se os agrotóxicos ao meio de cultura BDA, nas concentrações recomendadas, e os parâmetros avaliados foram o diâmetro médio das colônias, o número de conídios produzidos e a virulência sobre Galleria mellonella. Em condições de semi-campo, preparações dos produtos químicos e do entomopatógeno foram pulverizadas em mudas de goiaba de três diferentes formas, a saber: primeiramente os produtos químicos e depois o fungo; primeiro o fungo e posteriormente o produto químico e os dois simultaneamente. Após a aplicação, folhas foram coletadas e lavadas obtendo-se uma suspensão que foi plaqueada em BDA para avaliação da esporulação, viabilidade e virulência dos conídios dos fungos. Os resultados mostraram que, in vitro, somente o inseticida Actara 250 WG foi compatível com o fungo e os demais produtos foram classificados como moderadamente compatível, tóxicos e muito tóxicos. Para os testes de semicampo, a forma de aplicação interferiu no desenvolvimento do fungo e, além disso, Cuprozeb PM, Manzate 800 PM e Cerconil PM não afetaram o entomopatógeno em nenhum dos parâmetros avaliados, portanto são indicados para serem utilizados num programa de manejo integrado de pragas. Nos testes de virulência, os conídios não tiveram sua viabilidade afetada, mostrando-se patogênicos a traça-dos-favos, G. mellonella.

ABSTRACT The effect of 8 insecticides and 12 fungicides used in guava crops was evaluated on the fungus Beauveria bassianain vitro and under semi-field conditions. The effect in the laboratory was verified adding pesticides to the PDA media, according to the recommended concentrations and evaluating the parameters of mean diameter of colonies, the number of conidia produced and the virulence on the Galleria mellonella. For the semi-field tests, the suspensions of the chemical products and of the fungi were sprayed on guava plants in three different ways: a) the fungi were sprayed on after the spraying of the chemical products; b) chemical products were sprayed on after the spraying of the fungi; c) chemical products and fungi were sprayed on all together. Subsequently, leaves were collected and washed to obtain a suspension that was transferred to PDA medium to evaluate the sporulation, viability and virulence of the fungus. The results sowed that: in vitro, only the Actara 250 WG was compatible with the fungus, the other products being classified as moderately compatible, toxic and very toxic. For the semifield tests, the manner of implementation interfered in the development of the fungus, and Cuprozeb PM, Manzate 800 PM and Cerconil PM did not affect the entomopathogen in any of the parameters measured, so are indicated for use in a program of integrated pest management. In tests of virulence, the viability of the conidia was not affected, the fungus being pathogenic to G. mellonella.

RESUMO Este trabalho teve como objetivo avaliar, em condições de laboratório e estufa, a compatibilidade de Lecanicillium lecanii, JAB 02, com agrotóxicos. A compatibilidade em laboratório foi verificada misturando-se os agrotóxicos ao meio de cultura BDA e os parâmetros utilizados para a avaliação foram: crescimento vegetativo, esporulação e viabilidade do entomopatógeno. Em condições de estufa, as suspensões dos agrotóxicos e, posteriormente, a do fungo foram pulverizadas em plantas de crisântemo. Após a aplicação, folhas foram coletadas e lavadas obtendo-se uma suspensão que foi plaqueada em BDA, sendo então avaliado o crescimento das colônias do fungo. Verificou-se, em laboratório, que a maioria dos inseticidas e os acaricidas foram compatíveis ao fungo, com exceção do inseticida Thiodan® classificado como muito tóxico. Todos os fungicidas testados foram classificados como tóxico e muito tóxico. Em condições de estufa, no tratamento com o fungicida Rovral® foi observado um número de colônias fúngicas formadas compatível com a testemunha, não afetando o desenvolvimento do fungo. Essa compatibilidade repetiu-se para os produtos Alto 100® e Thiodan® em alguns dos tempos avaliados. Os produtos Rovral® e Alto 100® podem ser utilizados, conjuntamente, quando aplicados previamente ao entomopatógeno.

ABSTRACT The objective of this study was to evaluate, under laboratory and greenhouse conditions, the compatibility of Lecanicillium lecanii, JAB 02, with pesticides. The compatibility in the laboratory was verified adding pesticides to the PDA media and evaluating the parameters of vegetative growth, sporulation and viability of the entomopathogen. In the greenhouse, L. lecanii were sprayed on chrysanthemum plants after the spraying of the pesticides; subsequently, four leaves of each treatment were collected and washed to obtain a suspension that was transfered to PDA medium to evaluate the growth of the fungus colonies in laboratory conditions. The acaricides and most of insecticides were compatible to the isolate JAB 02, except the insecticide Thiodan®, which was classified as very toxic. All the evaluated fungicides were classified as toxic or very toxic. In greenhouse assays, the fungicide Rovral® produced a number of grown colonies similar to those of the control, not affecting fungus growth. This compatibility was also shown by the products Alto 100® and Thiodan® in some of the evaluated periods. Rovral® and Alto 100® can be used, combined, when applied before the entomopathogen.

RESUMO O fungo entomopatogênico Beauveria bassiana já vem sendo utilizado no controle de várias pragas de importância econômica no Brasil, sendo patogênico à broca da cana de açúcar Diatraea saccharalis, que é considerada como uma das principais pragas que atingem esta cultura. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito das concentrações: 5 x 106, 1 x 107, 5 x 107, 1 x 108 e 5 x 108 con./ mL do isolado IBCB 66 de B. bassianaà esta broca. Com auxílio de uma torre de Potter foi aplicado 1 mL das suspensões fúngicas nas lagartas de D. saccharalis que posteriormente foram colocadas individualmente em tubos de criação com um pedaço de colmo jovem de cana. Estes tubos foram mantidos em câmara climatizada a 25,5 ± 0,5º C e UR em torno de 70% e as avaliações da mortalidade foram feitas diariamente até o sexto dia. As lagartas mortas foram colocadas em câmaras úmidas para a confirmação da morte pelo entomopatógeno. O fungo foi patogênico à D. saccharalis em todas as concentrações avaliadas e a CL50 determinada para o 6º dia foi de 1,58 x 107 con./mL.

ABSTRACT The entomopathogenic fungus Beauveria bassiana has been used in the control of many pests affecting important crops in Brazil. It is pathogenic to the sugar cane borer Diatraea saccharalis which is considered one of the major pests of this crop. The objective of this work was to evaluate the effect of the concentrations: 5 x 106, 1 x 107, 5 x 107, 1 x 108 and 5 x 108 conidia/mL of the IBCB 66 strain of Beauveria bassiana to this borer. With the support of a Potter tower 1 mL of the fungus suspension was applied on the larvae of D. saccharalis that later were put indivudualy in tubes with a piece of young sugar cane. These tubes were kept in a climated room at 25.5 ± 0.5º C and RH around 70% and the evaluations of mortality were done daily until the sixth day. The dead larvae were put in humid chamber in order to confirm their death by the entomopathogen. The fungus was pathogenic to D. saccharalis in all the concentrations evatuated and the LC50 for the sixth day was determined in 1.58 x 107 con./mL.

RESUMO Lecanicillium lecanii é um entomopatógeno capaz de controlar várias pragas como afídeos, coccídeos e aleirodídeos. Na Europa é utilizado em culturas como pepino, tomate, ornamentais entre outras. Para que seja eficientemente utilizado no Brasil há necessidade de adaptá-lo às condições brasileiras de cultivo assim como produzi-lo em grandes quantidades. Assim, este trabalho objetivou avaliar diferentes concentrações de dextrose (D) e extrato de levedura (E.L.) em g/L, 60 g D – 60 g EL, 60 g D – 40 g EL, 60 g D – 20 g EL, 60 g D – 10 g EL, 40 g D – 40 g EL, 40 g D – 20 g EL, 40 g D – 10 g EL, 20 g D – 60 g EL, 20 g D – 40 g EL, sendo a dextrose a fonte de C e o extrato de levedura a fonte de N, na produção de massa seca e esporulação deste fungo. O fungo foi cultivado até o décimo dia, com avaliação a cada 2 dias. Verificou-se que combinações mais próximas de D-EL foram mais eficientes em relação à massa seca micelial e 8 dias de cultivo são suficientes para a produção máxima de conídios. Este fungo é exigente em carbono já que as combinações com maior dosagem de C (60 g D – 60 g EL, 60 g D – 40 g EL, 60 g D – 20 g EL, 60 g D – 10 g EL, 40 g D – 40 g EL) não diferiram estatisticamente.

ABSTRACT The strain JAB 02 of the entomopathogenic fungus Lecanicillium lecanii was cultivated in liquid media with different concentrations of dextrose (D) and yeast extract (YE) sources (60g D – 60 g YE, 60 g D – 40 g YE, 60 g D – 20 g YE, 60 g D – 10 g YE, 40 g D – 40 g YE, 40 g D – 20 g YE, 40 g D – 10 g YE, 20 g D – 60 g YE, 20 g D – 40g YE). The dextrose was used as carbon source and the yeast extract as a nitrogen source. The objective of this research was to evaluate the dry biomass and the sporulation of this strain. The fungus was cultivated for ten days after inoculation, with evaluations each 2 days. The combinations of dextrose and yeast extract tending to wand equals parts of each element were more efficient in regard to dry biomass. For sporulation, 8 days of growth are sufficient for greatest production of conidia. This strain is demands in carbon since the combinations 60 g D – 60 g YE, 60 g D – 40 g YE, 60 g D – 20 g YE, 60 g D – 10 g YE, 40 g D – 40 g YE did not differ statistically.