Justification: The measurement of hair cortisol, is a noninvasive technique that provides a retrospective of its accumulation over a period of time. Objective: To investigate the levels of cortisol in dogs as a biomarker of chronic stress, and the effect of factors such as season and deployment. Design: The study was conducted in the LIA, with a total of 24 dogs subjected to differential environmental conditions. Methods: Hair samples were analyzed by ELISA for measuring cortisol concentration after alcoholic extraction. Results: The mean concentration of cortisol in dogs was significantly higher in spring than summer, and no significant effects of deployment were found. Conclusion: This study reveals different levels of cortisol concentration in hair dog´s between seasons.

Justificación: La medición de cortisol en pelo, es una técnica no invasiva que proporciona una imagen retrospectiva de su acumulación durante un periodo de tiempo prolongado. Objetivo: Determinar los niveles de cortisol en pelo en perros de trabajo como biomarcador del estrés crónico, así como el efecto de factores como la estacionalidad y el despliegue en operaciones internacionales. Diseño: El estudio se realizó en el Laboratorio de Investigación Aplicada, con un total de 24 perros del ET sometidos a distintas condiciones ambientales. Metodología: Las muestras de pelo se analizaron mediante un ensayo tipo ELISA (Enzyme-LinkedImmuno-SorbentAssay) para medir la concentración de cortisol, previa extracción alcohólica. Resultados: La concentración media de cortisol fue significativamente superior en primavera respecto al verano y no se encontraron efectos significativos debidos al despliegue. Conclusión: El presente trabajo desvela una concentración diferencial en los niveles de cortisol en pelo de perros de trabajo debido a la estación del año.

Introduction: Animal welfare arises from the knowledge of animals as beings that experience pain, suffering or stress. The welfare assessment in foals includes behaviour, health and individual response to management. Evaluation should check for signs that may lead to stress situations. Objectives: Proposal a methodological basis for evaluating the welfare of future breeding horses and the welfare assessment of management system. Material and methods: Development of a protocol adapted to foals by weighting 45 indicators and welfare assessment of 104 foals breed in freedom (69 males and 35 females). Results: The implementation of the protocol resulted in the detection of significant deviation in the welfare of animals. Housing indicators revealed areas with wet condition and a risk of injury. Abnormal behaviours were not observed in the foal population. Health indicators revealed incidence of back pain (23.61%), nasal (76.47%) and ocular (16.35%) discharge, and a low level of alterations in the tegument (8.65%) consequence of itchiness or rubbing. A higher incidence of body lesions in the limbs was observed (90.38%). Conclusion: The protocol for welfare assessment developed in the present study provided first insights and detection of suboptimal health status and behaviour of the future breeding population.

Introducción: El bienestar animal surge del conocimiento de los animales como seres que experimentan dolor, sufrimiento o estrés. La evaluación del bienestar en potros incluye aspectos como el comportamiento, la salud, y la forma en la que los animales responden al manejo. La evaluación debería detectar signos que puedan derivar en situaciones de estrés. Objetivos: Establecer las bases metodológicas para la evaluación del bienestar de potros y caballos jóvenes y evaluar el sistema de manejo de los futuros reproductores. Material y métodos: Desarrollo de un protocolo adaptado para potros, mediante la ponderación de 45 indicadores y la evaluación de bienestar de 104 potros de recría en libertad (69 machos y 35 hembras). Resultados: Con el protocolo propuesto se pudieron observar algunas desviaciones en el estado de bienestar de los animales. Los indicadores de alojamiento revelaron que había zonas de humedad y otras con riesgo de lesión. En los indicadores de alimentación, la condición corporal era adecuada ya que sólo estaba aumentada en un 21,36 % de los casos. No se observaron comportamientos anormales. Los indicadores de salud mostraron algunos casos de dolor en el dorso (23,61%), bastantes con descarga nasal (76,47%) y también algunos con descarga ocular (16,35%), así como problemas dérmicos (8,65%) resultante de picazón o rascado. Se encontró una incidencia elevada de heridas en la región de las extremidades (90,38%). Conclusión: La metodología seguida para la evaluación del bienestar ha permitido obtener una primera información y determinar problemas de salud y comportamiento de la futura población reproductora.

Introduction: The germoplasm bank management involves the conservation and use of semen doses, but can also be a source of study on the quality of stallions and semen properties for use after thawing. A criterion for measuring the semen quality may be based on differences in expression of some genes involved in spermatogenesis and sperm maturation. Objective: Analysis of genes expressed in equine cryopreserved sperm that can provide adequate amplification, specificity and stability for use as future reference genes in gene expression studies. Material and methods: Purification of live sperm through a discontinuous concentration gradient from cryopreserved semen straws corresponding to four stallions. Organic extraction of ribonucleic acids with deoxyribonuclease treatment and the selective amplification of seven candidate genes using a retrotranscription and a real time chain reaction of the polymerase in one step mode. Specificity is tested by melting curves and agarose gel electrophoresis. Also the stability of the genes is calculated. Results: Three of the selected genes, α-actin, Ubiquitin B and Ribosomal protein L32 were properly amplified. β-Actin and Ubiquitin B showed the best stability. Conclusion: mRNA was amplified from equine cryopreserved semen samples, being the β-Actin and the Ubiquitin B genes the most suitable reference genes of the seven candidates analyzed.

Introducción: La gestión de bancos de germoplasma implica la conservación y uso de dosis seminales, pero también pueden ser una fuente de estudio sobre la calidad de los sementales y las propiedades del semen para su empleo post descongelación. Un criterio para medir la calidad seminal puede basarse en las diferencias de expresión de algunos genes implicados en la espermatogénesis y la maduración espermática. Objetivo: Análisis de genes expresados en semen equino criopreservado que ofrezcan una adecuada amplificación, especificidad y estabilidad para su empleo como genes de referencia en futuros estudios de expresión genética. Material y métodos: Purificación de espermatozoides vivos mediante un gradiente de concentración discontinua a partir de pajuelas de semen criopreservado correspondiente a cuatro sementales. Extracción orgánica de ácidos ribonucleicos con tratamiento con la enzima desoxiribonucleasa y la amplificación selectiva de siete genes candidatos mediante retrotranscripción y reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real en un solo paso. Resultados: Tres de los genes seleccionados, β-Actina , Ubiquitina B y proteína Ribosomal L32 se amplifican correctamente. β-Actina , Ubiquitina B manifiestan la mayor estabilidad. Conclusión: En los espermatozoides procedentes de muestras de semen criopreservado equino se puede detectar la presencia de ARNm, siendo el gen de la β-Actina y de la Ubiquitina B los más indicados como genes de referencia de los siete candidatos analizados.

Troops deployed in operational areas where malaria is endemic, need accurate information on the health risk for this disease to make decisions about the most appropriate prevention measures. The carrier status of a mosquito is classically determined by the presence or absence of sporozoites of Plasmodium spp. in the salivary glands. Protocols based on DNA amplification in real time (qPCR) are very sensitive, however there are difficulties in qPCR due to inhibitors present in tissues of the mosquito, therefore it is necessary to work one by one. In this paper we design a qPCR to amplify a preserved region among different species of mosquitoes and other Diptera, in order to compare various DNA extraction protocols to determine the most efficient one when processing batches of 10 mosquitoes.

Las tropas que despliegan en zonas de operaciones endémicas de malaria, necesitan de una información precisa del riesgo sanitario para la toma de decisiones acerca de las medidas de prevención más adecuadas. El estado de portador de un mosquito se determina clásicamente por la presencia o ausencia de esporozoitos de Plasmodium spp. en las glándulas salivales. Los protocolos basados en la amplificación del ADN en tiempo real (qPCR) son muy sensibles, sin embargo existen dificultades en la qPCR debido a inhibidores presentes en los tejidos del mosquito, lo que obliga a trabajar de uno en uno. En este trabajo se diseña una qPCR para amplificar una región conservada entre mosquitos de diferentes especies y otros dípteros, con el objetivo de comparar varios protocolos de extracción de ADN y determinar el más eficiente a la hora de procesar lotes de 10 mosquitos.

Introduction: Any information obtained to contribute to the assessment of the risk of malaria outbreaks in the force deployed in area of operations is of greatest interest to preventive medicine services. Following a pilot study of entomological surveillance, carried out at the base of Herat (Afghanistan) in 2008, further protocolised research was recently performed also in Qala i Naw base. Material and methods: Between June and September 2010 an entomological survey took place at the bases of Herat and Qala i Naw (Afghanistan), using for the purpose CDC traps with white and ultraviolet light, as well as a Sentinel trap type with specific chemical attractant BG-Lure®. The females of Anopheles were analysed with the real-time polymerasa chain reaction (PCR) in order to look for the possible infection with Plasmodium spp. Results: Mosquitoes belonging to various genera were captured. All anopheline females were analysed by real-time PCR and all of them were negative to Plasmodium spp. Discussion: Among the captured specimens, Anopheles hyrcanus is a potential vector of malaria in the area. Due to its presence in the base of Herat, we should assess the possible presence of reservoirs of Plasmodium spp. in inhabited areas close to the base, as well as the influence of external factors, such as prevailing winds in this region that could drive infected mosquitoes toward the base from those areas. With the obtained results we could establish a simple protocol to assess the risk of malaria, detecting potential vectors (medium risk) and real vectors (high risk).

Introducción: Cualquier información obtenida para contribuir a la evaluación del riesgo de aparición de brotes de malaria en la fuerza desplegada en zonas de operaciones es de máximo interés para los servicios de medicina preventiva. Tras un estudio piloto de vigilancia entomológica, realizado en la base de Herat (Afganistán) en 2008, se han realizado ahora nuevos estudios protocolizados y con más medios en dicha base, así como en la situada en Qala i Naw (Afganistán). Material y métodos: Entre junio y octubre de 2010 se realizaron muestreos entomológicos en las bases de Herat y Qala i Naw, empleando trampas luminosas de succión tipo mini CDC con luz blanca y ultravioleta, así como una trampa de succión tipo BG-Sentinel de BioGents GmbH con atrayente químico. Las hembras de anofelinos se analizaron mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en busca de su posible infección por Plasmodium spp. Resultados: Se capturaron culícidos pertenecientes a diversos géneros, entre ellos del género Anopheles. Todas las hembras de anofelinos fueron analizadas mediante PCR a tiempo real, siendo todas negativas a Plasmodium spp. Discusión: Entre los ejemplares capturados, Anopheles hyrcanus es un potencial vector de malaria en la zona. Dada su presencia en la base de Herat, habría que valorar la posible existencia de reservorios de Plasmodium spp. en las zonas habitadas cercanas a la misma, y la influencia de factores externos, tales como los vientos predominantes en esa región, que pueden empujar a los mosquitos infectados hacia la base, desde esas zonas. Con los resultados obtenidos se puede establecer un protocolo sencillo de evaluación del riesgo de padecer malaria detectando mosquitos portadores potenciales (riesgo medio) y reales (riesgo alto).

Genetic diversity of Brazilian buffaloes is studied using a panel of twenty-five DNA microsatellite markers (CSSM41, CSSM8, CSRM60, CSSM33, BM1818, HEL13, MAF65, CSSME70, HSC,BRN, CSSM36, CSSM22, HAUT24, BM1824, SRCRSP8, TGLA227, ILSTS33, INRA23, BM8125, CSSM19, INRA37, CSSM66, ILSTS011, OarFCB48, SPS115). Forty samples randomly chosen from each of the Brazilian Buffaloes populations (Carabao, Jafarabadi, Mediterraneo, Murrah and Baio) were analyzed. Anyway the homogeneity test between observed and expected heterozygosity and the results of the Hardy-Weinberg equilibrium pointed out the stability of Baio and Carabao populations. Genetic distances, factorial analysis and individual assignation values showed that Baio, Mediterraneo and Murrah form a common genetic cluster as shown by their high genetic similarity in spite of their morphological divergence. That Carabao is a member of a different subspecies is confirmed. These findings demonstrate the success of Brazilian Baio and Carabao conservation efforts, and point to the need to develop new strategies of conservation for the remaining Brazilian buffalo populations.

Foi estudada a diversidade genética de búfalos do Brasil utilizando-se vinte e cinco marcadores microssatélites (CSSM41, CSSM8, CSRM60, CSSM33, BM1818, HEL13, MAF65, CSSME70, HSC, BRN, CSSM36, CSSM22, HAUT24, BM1824, SRCRSP8, TGLA227, ILSTS33, INRA23, BM8125, CSSM19, INRA37, CSSM66, ILSTS011, OarFCB48, SPS115). Foram analisadas amostras colhidas ao acaso de cinco populações, ou seja, raças Carabao, Jafarabadi, Mediterrâneo e Murrah, mais o tipo Baio. Em geral, os valores para a diferença entre as heterozigosidades (Ho - He) foram bastantes pequenas, significando equilíbrio nos marcadores utilizados para este tipo de estudo. Os valores do GST demonstraram um nível alto de diferenciação genética e os da estatística F: Fis (f), Fst (q) e Fit (F) demonstraram que os marcadores utilizados permitem inferir informações adequadas sobre as populações, podendo-se deduzir que os grupos Baio, Carabao, Jafarabadi e Mediterrâneo apresentam-se mais homogêneos que o grupo Murrah, o qual mostra níveis altos de endogamia. Os resultados dos estudos de distância genética mostraram que as populações de Baio, Mediterraneo e Murrah, agrupando-se em um cluster comum, demonstra alta similaridade genética, não obstante as suas divergências fenotípicas, confirmando que o grupo Carabao constitui uma diferente subespécie. Os resultados, principalmente das populações de Baio e Carabao, mostram o êxito do trabalho de con-servação genética e a necessidade de se desenvolver novas estratégias para a conservação do germoplasma dos búfalos do Brasil.

The wild boar, a cinegetic species of Iberian Peninsula, has numerous sub-populations ofSus scrofa mediterraneus. Doñana National Park is the most important biological reserves in Spain and the largest protected area with great ecological diversity, distributed on three basic types of ecosystems: sand dunes, beaches and marshes. Here live together a variety of species: mammals, birds, reptiles, fishes... and, among them, the wild boar. In order to determine the genetic diversity, also in comparison with other Spanish populations, we studied 25 microsatellite pigs markers and found genetic variation within and among populations by analysis of heterozygosity (0.53), number of alleles (5.60), deviation by HW equilibrium and Fis index (0.02).

El jabalí de interés cinegético en la península Ibérica, cuenta con numerosas sub-poblaciones de Sus scrofa mediterraneus. El Parque Nacional Doñana es la reserva biológica más importante de España y la mayor superficie protegida con gran diversidad ecológica distribuida en tres tipos básicos de ecosistemas: dunas, playas y marismas en los que cohabita gran variedad de mamíferos, aves, reptiles, peces.... entre los que se cuentan poblaciones de jabalí. Para conocer su diversidad genética, en comparación con otras poblaciones españolas, se han estudiado 25 marcadores microsatélites porcinos y se ha determinado la variación genética dentro y entre poblaciones mediante el análisis de la heterocigosis (0,53), número de alelos (5,60), desviación del equilibrio de HW y Fis (0,02).

Guaymi creole cattle were characterized by a 27 microsatellite panel, selected from a recommendation of FAO/ISAG. Random samples of DNA were taken from Guaymi creole cattle population in the highlands of the Chiriqui province in Ngöbe-Buglé region in the Panama Republic. From each microsatellite, was calculated the polymorphic information content (PIC), mean number of alleles (Na), observed heterozygosity (Ho), expected heterozygosity (He), the F IS statistic, the exact test for Hardy-Weinberg equilibrium (HWE). Besides a bottleneck study was calculated in this population. The result of the analysis show a PIC: 0.6899; Ne: 4.04; He: 0.7243; Ho: 0.7088; F IS: 0.0356. Three microsatellites were in unbalance (p<0.05). The Results are considered in the same range of values from other creoles, exotics and Spanish native populations. It requires more detailed studies of these populations and its relation to other cattle populations. No bottleneck was showed in the recent past.

Se caracterizó la población bovina Guaymí con un panel de 27 microsatélites seleccionados a partir de las recomendaciones hechas por la FAO/ISAG. Se analizaron muestras aleatorias de ADN obtenidas de la población bovina criolla Guaymí que se encuentran ubicadas en el área que comprende la comarca indígena Ngöbe-Buglé en la zona montañosa de la provincia de Chiriquí en la República de Panamá. Para cada microsatélite se calcularon el contenido de información polimórfica (PIC), el número medio de alelos (Na), la heterocigosis observada (Ho), la heterocigosis esperada (He), el estadístico F IS, y equilibrio Hardy-Weinberg (HWE). Además se calculó si existía cuello de botella en esta población. Los valores obtenidos fueron: PIC: 0,6899; Ne: 4,04; He: 0,7243; Ho: 0,7088; F IS: 0,0356. Se observaron tres microsatélites en desequilibrio (p<0,05). Los valores encontrados se consideran dentro de los rangos obtenidos en otras poblaciones criollas, exóticas y autóctonas españolas. Se requiere realizar estudios más detallados de estas poblaciones y su relación con otras poblaciones bovinas. No se observa cuello de botella en el pasado reciente de esta población.

Geographical concentration and scarce census of the Retuertas horse force to design a complete conservation plan. One of the used tools as a mean of ex situ conservation was the creation of a germplasm bank. Previously, a study of the seminal quality and its aptitude for freezing was developed. Results were: volume 23.25±12.72 ml; concentration 335.83±135.60x10(6) spermatozoa/ ml; basal motility 3.83±0.98 (1-5) and progressive motility 60.42±15.42 (0-100%); all of them shown significant differences among stallions.

La concentración geográfica y el reducido censo del Caballo de las Retuertas obligaron a diseñar un plan de conservación integral. Una de las herramientas para la conservación ex situ fue la creación de un banco de germoplasma. Previamente, se estudió la calidad seminal y aptitud para congelación. Los resultados obtenidos fueron: volumen 23,25±12,72 ml, concentración 335,83±135,60x10(6) espermatozoides/ml; motilidad masal 3,83±0,98 (1-5) y motilidad progresiva 60,42±15,42 (0-100%), mostrando todas diferencias significativas en relación al semental.

Determinou-se a estrutura da raça Murciano-Granadina, usando-se 25 microssatélites e 266 animais de sete populações. Os resultados da diferenciação genética mostram que é possível diferenciar populações de Murciana e Granadina, apesar dos baixos valores de F ST obtidos - 0.0432. Os indivíduos foram designados às suas populações com taxa de sucesso superior a 80%. A análise bayesiana de agrupamento das frequências alélicas e a análise multivariada revelaram que as populações Murciana e Granadina foram agrupadas em diferentes clusters, uma vez que o melhor K obtido foi três. Os resultados demonstraram que Murciana e Granadina ainda são dois grupos genéticos distintos incluídos na denominação Murciano-Granadina. É possível manejar geneticamente essas populações dentro de um único livro de registro, porém adotando-se as modificações necessárias em relação à conservação e à diversidade genética, com base no uso de modelos de avaliação multirracial.

The population structure of the Murciano-Granadina breed was determined using 25 microsatellites from 266 goats of seven populations. The results of the genetic differentiation analysis showed that it is possible to differentiate the Murciana and Granadina populations even though a low F ST value (0.0432) had been obtained. Individuals could be assigned to their populations with a success rate of more than 80%. Bayesian-based clustering analysis of allele frequencies and multivariate analysis revealed that Murciana and Granadina populations were grouped in different clusters since K=3. The results demonstrate that Murciana and Granadina are still two different genetic groups included into Murciano-Granadina denomination. There is the opportunity to the genetically manage these populations, under a single herd-book but adding the necessary modifications to respect the conservation of the genetic diversity based on the use of multibreed models of genetic evaluation.