La inducción de la síntesis de proteínas de choque térmico ha sido relacionada con la defensa del organismo frente a infecciones diversas. Este trabajo examina la acumulación de Hsp60 en Mus musculus infectados experimentalmente con un aislado equinos de Trypanosoma evansi, agente etiológico de la “derrengadera” en los Llanos venezolanos. Ratones NMRI (♀; 20 gr de peso corporal), normales e inmunosuprimidos (ciclofosfamida; 250 mg/kg) fueron inoculados intradermicamente con 1 tripomastigote/gr de peso corporal. La acumulación de Hsp60 se determinó mediante Western blot con el uso de un anticuerpo monoclonal en muestras de plasma obtenidas cada cuatro días post-inoculación. Los niveles de parasitemia también fueron registrados. Se observa acumulación diferencial y variable de Hsp60 que se correlaciona la parasitemia y la condición inmune del hospedador. Los resultados sugieren un control inmunológico en la regulación de la expresión de Hsp60, cuyos patrones de expresión dependen de la condición fisiológica del hospedador y los niveles de parasitemia.

Heat shock protein induction has been related to organism defense in diverse kinds of infection. This investigation examines Hsp60 accumulation in Mus musculus infected ex - perimentally with Trypanosoma evansi isolated from horse. This parasite is the causal agent of the “derrengadera” in Venezuelan planes. Normal and immunosupressed (cyclophosphamide( 250 mg/kg).) NMRI mice (♂; 20 gr body weight) were intra-dermal inoculated with 1 trypomastigote/ gr body weight; control groups were injected with distillated water in the same conditions. Hsp60 accumulation was analyzed by Western blot with a monoclonal antibody in plasma samples obtained each four days post-inoculation. Parasitemia levels were also registered. We observed a differential accumulation of Hsp60, which correlates with pa - rasitemia and immune conditions of the host. These results suggest an immunological control of Hsp60 expression that depends on the physiological condition of the host and parasitemia.

Las relaciones que se establecen entre géneros de la familia Trypanosomatidae en condiciones de coexistencia en el mismo medioambiente pueden estar vinculadas a respuestas compensatorias inter-poblacionales que incluyen cambios morfológicos (diferentes estadios) y morfométricos (diferencias mensurables). El análisis cuantitativo de tales respuestas en cultivos axénicos puros de Leishmania chagasi y Trypanosoma cruzi, así como en isomezclas axénicas de L. chagasi-T. cruzi mantenidas in vitro, no ha sido abordado, desconociéndose por lo tanto, particularidades biológicas. Muestras interdiarias de cultivo se fijaron, colorearon, observaron, digitalizaron y procesaron cuantitativamente. Además de cuantificar las densidades poblacionales, se registraron las magnitudes numéricas de variables morfométricas que, posteriormente, se analizaron con herramientas estadísticas. Los resultados indicaron cambios específicos en las variables investigadas, así como heterogeneidad morfométrica entre los mismos morfotipos de los mismos géneros al ser mantenidos en cultivos puros o mixtos. Los modelos de cambio morfométrico de L. chagasi y T. cruzi en cultivos puros difieren de los modelos de cambio morfométrico en los cultivos mixtos (L. chagasi-T. cruzi). Las metodologías biométricas discriminan, en términos morfométricos, poblaciones del mismo estadio (morfotipo) en ambientes diferentes.

The relations established among genera of the Trypanosomatidae family in coexisting conditions in the same environment may be linked to inter-population compensatory answers that include morphological (differences among stages) and morphometrical (measurable difference) changes. The quantitative analysis of these answers in Leishmania chagasi and Trypanosoma cruzi pure axenic cultures, as well as in L. chagasi - T. cruzi axenic iso-mixtures in vitro maintained has not been approached, and consequently, potentially useful biological particularities in the control of these important human parasites are unknown. Every other day culture samples were fixed, stained, observed, digitalized and quantitatively processed. In addition to quantify, the population densities and the appearance-disappearance stage (morphotypes) dynamics, the numeric magnitudes of the morphometric variables were recorded and later analyzed with multivariate statistical techniques. The results indicate specific changes in the investigated variables, as well as morphometric heterogeneity between the same morphotypes of the same genera when maintained in pure or mixed cultivation. The morphometric change models for L. chagasi and T. cruzi in pure culture differ from the models of morphometric change in mixed cultivation (L. chagasi-T. cruzi). The biometric methodologies discriminate in morphometric terms populations of the same stage (morfotype) in different environments.

Infecciones murinas experimentales con un aislado venezolano de Trypanosoma evansi ocasionan cambios ma - cros copicos y ultraestructurales en el rinon de los ratones. La modificacion macroscopica se restringe a palidez progresiva del organo. Por su parte, las alteraciones ultraestructurales incluyen incremento del grosor de la membrana basal glomerular, asi como del espesor de la membrana basal de los tubulos contorneados proximales, cambios en la colocacion y el agrupamiento de las mitocondrias asociadas a la lamina basal, asi como extenso deterioro epitelial. Los tripanosomas intravasculares fueron detectados en la circulacion renal a partir de dia 9 post-infeccion. Se discute al respecto del dano glomerular, sugiriendo que las alteraciones submicroscopicas debilitarian la funcion tubular, contribuyendo mediante un proceso nefritico al desarrollo de una falla renal aguda que culminaria con la muerte del hospedador experimental. La significancia de los cambios ultraestructurales fue corroborada estadisticamente

Murine experimental inoculations with a Venezuelan isolate of Trypanosoma evansi cause macroscopic and ultrastructural changes in the kidney of the infected animals. The macroscopic modifications are restricted to the progressive paleness of the organ. By its part, the ultrastructural alterations include thickness enlargement of the glomerular basal and the proximal tubule basal membranes, changes in the mitochondrial grouping and layout close to the basal membrane, as well as extensive epithelial damage. Intra vascu - lar trypanosomes were seen in the renal circulation from day 9 post-infection and on. The glomerular injury is discussed, suggesting that submicroscopic alterations could weaken the tubular function contributing through a nephritic process with the development of an acute renal failure culminating in the experimental host¡¦s death. The significance of the sequential increasing ultrastructural changes was statistically corroborated

El mecanismo adaptativo entre Leishmania y Trypanosoma ante la competencia por los recursos nutricionales en ambientes compartidos ha sido pobremente investigado. En particular, el estudio de la conducta trófica entre Leishmania chagasi y Trypanosoma cruzi podría contribuir al entendimiento de situaciones de gran relevancia médica en humanos, como son las infecciones mixtas por ambos tripanosomatídeos. En este trabajo se establecieron cultivos axénicos puros de Leishmania chagasi y Trypanosoma cruzi, así como cultivos axénicos mixtos (L. chagasi + T. cruzi) en médio BHI. Se registraron los cambios de dinámica poblacional (organismos por mililitro), la evolución de la estructura de las poblaciones, las variaciones de las concentraciones de colesterol, glucosa y proteínas totales, así como los cambios de pH en el medio de cultivo. El manejo cuantitativo de los conjuntos numéricos generados experimentalmente se abordó con técnicas univariadas (Análisis de la Varianza) y multivariadas (Análisis Discriminante Múltiple). Los resultados demuestran diferencias estadísticas significativas entre las medias de los parámetros considerados y prueban que el comportamiento “in vitro” investigado en el cultivo mixto L. chagasi - T. cruzi difiere taxativamente del estudiado en los cultivos puros de L. chagasi y T. cruzi.

The adaptive mechanisms between Leishmania and Trypanosoma facing the competence for the nutritional resources in shared environments have been poorly investigated. Particularly, the study of the trophic behavior between Leishmania chagasi and Trypanosoma cruzi could contribute to the understanding of relevant medical situations, as mixed human infections. In this work pure axenic cultures of Leishmania chagasi and Trypanosoma cruzi, as well as mixed cultures (L. chagasi + T. cruzi) were established in BHI medium. Changes of population dynamics (organisms/mL), the evolution of the population’s structure, the variations of the concentration of cholesterol, glucose and total proteins, as well as the changes of the medium’s pH were registered. The generated numerical sets were tackled with univariate (Analysis of Variance) and multivariate (Multiple Discriminant Analysis) techniques. The results demonstrate significant statistical differences between the media of the considered parameters and prove that the “in vitro” behavior investigated in the L. chagasi - T. cruzi mixed culture precisely differs from the L. chagasi and T. cruzi pure cultures.

To study the influence of host age, inoculum size, and route of infection on Trypanosoma (Herpetosoma) rangeli, 12 lots of 6.0 g albino mice (NMRI strain) were infected up. with from 25x10¹ to 25x10(6) trypomastigotes/gram body weight harvested from LIT medium. The lower inocula produced low but persistent parasitemias, while the higher inocula produced high levels of parasitemia that fell quickly, suggesting the mobilization of resistance mechanisms. In other experiments, i.p. inoculation produced higher parasitemias than s.c. inoculation, and 6.0 g mice had higher parasitemias than 16.0 or 26.0 g mice. Thus, a standard methodology would seem to be necessary in the study of the various strains and/or species that may make up the T. rangeli complex.

Para estudiar la influencia de la edad del hosvedador. del tamano del inoculo y su ruta de administración sobre la infection por Trypanosoma (Herpetosoma) rangeli, fueron inoculados i.p. 12 lotes de ratones albinos (cepa NMRI) de 6.0gdepeso con 25.0 - 2.5x10(6) metatripomastigotes/g obtenidos del medio LIT. Los inóculos mas bajos produjeron parasitemias bajas pero persistentes; los inóculos mas elevados originaron niveles altos de parasitemias que cayeron prontamente, sugiriendo la mobilization de mecanismos de resistencia a niveles diferentes de actividad. En otros experimentos, la inoculation i.p. y el uso de ratones de 6.0 g dieron parasitemias mas elevadas que cuando se usaron inoculaciones s.c. o animates de 16.0 y 26.0g. Estos resultados indican la necesidad de emplear una metodologia uniforme cuando se investigue elposible carácter heterogénico del complejo de T. rangeli.

Male mice (NMRI strain) of 3 and 5 g were inoculated i. p. with 8 x 10(6) and 9 x 10(4) metatrypomastigotes/g harvested from a 12-day-old LIT culture of Trypanosoma rangeli of the "Dog-82" strain. At regular intervals after inoculation, the animals were sacrificed and portions of heart, liver, spleen, lung, thigh, kidney, stomach, intestine, brain, sternum, and vertebral column were embedded in paraffin, sectioned, and stained with haematoxylin-eosin and Giemsa colophonium. Pathology was encountered in the first five tissues cited above. The subcutaneous, periosteal, interstitial, and peribronchial connective tissues, and later the muscle cells of the heart, were heavily parasitized by amastigotes and trypomastigotes. The possible reasons for the decrease in tissue parasitosis at the same time that the parasitemia is reaching its peak, and for the low level of inflammation in the parasitized tissues, are discussed. The observations of other workers, as well as the results described here, indicate that certain strains of T. rangeli under certain conditions may well cause pathological alterations in mammals.

Ratones machos (cepa NMRI) de 3 y 5 gr, inoculados i.p. con 8 x 10(6) y 9 x 10(4) metatripo- mastigotes/gr cosechados de cultivo LIT de 12 días de repique de la cepa "Perro-82" de Trypanosoma rangeli fueron procesados, em determinados períodos postinoculación, para seccionar y teñir con hematoxilina-eosina y Giemsa-colofonio trozos de corozón, hígado, bazo, pulmones, fémur, riñon, intestino, estómago, cerebro, cerebelo, esternón y columna vertebral. Se detallan los resultados preliminares sobre la histopatologia provocada por el T. rangeli en los cinco primeros órganos citados. Los tejidos conjuntivos subcutáneo, periosteal, intersticial y peribronquial, así como las miocélulas del corazón fueron altamente parasitados por amastigotes y tripomastigotes. Se discuten las posibles razones de la disminución del parasitismo tisular cuando la parasitemia se encontró en sus niveles máximos, así como la escasa inflamación obtenida en los tejidos parasitados. Las observaciones de varios autores sobre el comportamiento del protozoario en humanos y en animales de laboratorio así como los resultados descritos en este trabajo, plantean la posibilidad de que determinadas cepas de T. rangeli, en condiciones particulares, podrían causar alteraciones patológicas en el mamífero.

The method, site, and stage of multiplication of Trypanosoma (Herpetosoma) rangeli Tejera, 1920 has not hitherto been known. "We have now observed many intracellular nests or pseudocysts, containing amastigotes and trypomastigotes of this parasite in the heart, liver, and spleen of suckling (5.0 g) male white mice (NMRI strain) inoculated i.p. with 9 x 10(4) metatrypomastigotes/g body weight from a 12-day-old culture of the "Dog-82" strain of T. rangeli. At the peak of parasitemia (1.9 x 10(6) trypomastigotes/ml blood, 3 days post-inoculation) various tissues were taken for sectioning and staining. The heart was most intensely parasitized. The amastigotes were rounded or ellipsoidal, with a rounded nucleus and the kinetoplast in the form of a straight or curved bar; the average maximum diameter of 50 measured amastigotes was 4.2 p. Binary fission was seen in the nucleus and kinetoplast of some amastigotes; no blood trypomastigotes were seen in division. The above characteristics, as well as the location of the pseudocysts in the tissues, are similar to T. cruzi. Comparison of these results with those reported for other Herpetosoma suggest study of the taxonomic position of T. rangeli.

El método, sitio y estadio de multiplicación de Trypanosoma (Herpetosoma) rangeli Tejera, 1920 no había sido determinado hasta ahora. Nosotros hemos observado numerosos nidos o pseudoquistes intracelulares que contienen amastigotes y tripomastigotes de este parásito en el corazón, hígado y bazo de ratones albinos machos de 5,0 g de peso (cepa NMRI) inoculados por vía i.p. con 9,0 x 10(4) metatripomastigotes/g de repique de 12 días en medio LIT, cepa "Perro-82". En el pico de la parasitemia (1,9 x 10(6) tripomastigotes/ml de sangre, 3 días post-inoculación) fueron retirados varios órganos para seccionar y teñir con hematoxilina-eosina. El corazón fue el órgano mas intensamente parasitado. Los amastigotes son redondeados y ovalados, con núcleo redondeado y kinetoplasto en forma de barra recta o curva; el promedio del diámetro máximo de 50 amastigotes medidos fue de 4,2 m. Fue observada fisión binaria en el núcleo y kinetoplasto de algunos amastigotes; no fue vista división en los tripomastigotes sanguícolas. Las características anteriores, así como también la localización de los pseudoquistes en los tejidos, son similares a T. cruzi. La comparación de estos resultados con los reportados para otros Herpetosoma sugiere el estudio de la posición taxonómica de T. rangeli.