O citomegalovirus é um patógeno importante em indivíduos infectados pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV). A carga viral do CMV parece ser preditora da sintomatologia das infecções citomegálicas em pacientes com a síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS). Um protocolo de PCR multiplex que fornece informações de quantificação de DNA amplificando somente um ou dois genes alvo do CMV foi utilizado neste trabalho. Amostras mensais de sangue foram coletadas de 270 pacientes com AIDS. Vinte pacientes tiveram positividade para dois alvos por 3 ou mais consecutivas e apresentaram doença por CMV no decorrer do estudo. Os pacientes que não apresentaram positividade ou alternância de amostras positivas somente para um gene viral não desenvolveram doença ligada ao CMV. Os resultados sugerem que a PCR multiplex é um protocolo útil para a identificação dos pacientes com alta carga viral e maior risco de desenvolvimento de doença por CMV.

The human cytomegalovirus is an important pathogen in patients infected with the human immunodeficiency virus (HIV). The CMV viral load seems to be predictor of the development of the CMV disease in these patients. We used a multiplex PCR protocol that also provides quantitative information in those samples from which a single band is amplified and contains fewer viral genomes than those from which both targets are amplified. Monthly blood samples were collected from 270 AIDS patients. From twenty patients, two CMV targets were amplified three or more consecutive times and these patients developed CMV related disease during the study. In contrast, patients who did not result positive for both viral targets, for three or more consecutive times, or who had alternating positive and negative samples during the follow up did not present CMV related disease. The results suggest that the PCR multiplex can be used for the identification of HIV positive patients with higher risk of development of CMV disease.

A observação de que indivíduos homozigotos para uma deleção de 32 pares de base no gene que codifica para o receptor 5 de cc-quimiocinas apresentam um menor risco de contrair a infecção por HIV-1 levou à investigação da freqüência deste polimorfismo em várias populações mundiais. É importante investigar se o CCR5delta32 é um fator a ser considerado na epidemiologia do HIV em populações individuais. Com estes pressupostos em mente nós estabelecemos a freqüência do CCR5delta32 em uma grande amostra (907 indivíduos não-relacionados) da população urbana do sudeste brasileiro, estratificada da seguinte maneira: 322 indivíduos sadios, 354 pacientes com câncer colorretal e 229 doadores de sangue. Os três grupos apresentaram essencialmente a mesma freqüência alélica de CCR5delta32 e a comparação par-a-par não revelou diferenças significativas. Assim, os nossos resultados podem ser agrupados para fornecer uma estimativa confiável de 0,053 ± 0,005 da freqüência alélica de CCR5delta32. Os doadores de sangue compreendiam 50 indivíduos soronegativos para HTLV-I, 115 indivíduos assintomáticos por ELISA mas com resultados indeterminados em Western blot, 49 indivíduos soropositivos para HTLV-I mas assintomáticos e 15 indivíduos soropositivos para HTLV-I sintomáticos com mielopatia. Foi observado um sugestivo gradiente decrescente da freqüência alélica de CCR5delta32 nestas categorias. Entretanto, quando aplicamos o teste exato de Fisher, não emergiram diferenças significativas. Para uma melhor avaliação da influência do alelo CCR5delta32 na probabilidade de infectar-se com HTLV-I ou de desenvolver doença clínica serão necessários estudos com um maior número de doadores de sangue.

The identification of a 32-bp deletion in the cc-chemokine receptor-5 gene (CCR5delta32 allele) that renders homozygous individuals highly resistant to HIV infection has prompted worldwide investigations of the frequency of the CCR5delta32 allele in regional populations. It is important to ascertain if CCR5delta32 is a factor to be considered in the overall epidemiology of HIV in individual populations. With this in mind we determined the CCR5delta32 allele frequency in a large sample (907 individuals) of the southeastern Brazilian urban population, stratified as follows: 322 healthy unrelated individuals, 354 unselected colorectal cancer patients, and 229 blood donors. The three groups displayed essentially identical allelic frequencies of CCR5delta32 and pairwise comparisons did not show significant differences. Thus, our results can be pooled to provide a reliable estimate of the CCR5delta32 allele frequency in the southeastern Brazil of 0.053 ± 0.005. The blood donors comprised 50 HTLV-I serologically negative individuals, 115 non-symptomatic individuals HTLV-I positive by ELISA but with indeterminate Western blot results, 49 healthy blood donors HTLV-I positive both at ELISA and Western blot and 15 patients with clinical spinal cord disease (HAM). A suggestive trend was observed, with the CCR5delta32 frequencies decreasing progressively in these four categories. However, when we applied Fischer's exact test no significant differences emerged. We believe that further studies in larger cohorts should be performed to ascertain whether the CCR5delta32 allele influences the chance of becoming infected or developing clinical symptoms of HTLV-I infection.

Um papel crucial para o gene da polipose cólica adenomatosa (APC) na carcinogênese colo-retal já está estabelecido, mas sua participação nos tumores gástricos permanece controversa. Mutações no APC foram detectadas com uma freqüência relativamente alta em tumores gástricos em pacientes japoneses, mas tais mutações foram relatadas como sendo muito raras em britânicos e em pacientes da região norte-central da Itália. Nós relatamos aqui a análise de 40 adenocarcinomas gástricos esporádicos primários e 35 adenocarcinomas cólicos esporádicos primários (de pacientes residentes em São Paulo, Brasil), quanto a mutações no gene APC entre os códons 686 e 1693, usando o teste da proteína truncada (PTT). Embora 19 mutações que levem a formação de uma proteína truncada tenham sido detectadas em 35 adenocarcinomas do colo (54,2%), não se encontrou nenhuma nos adenocarcinomas gástricos. Como um controle interno, as amostras tumorais foram também avaliadas quanto à presença de alterações de microssatélites, que também são características comuns a ambos os tipos de tumores. Encontrou-se instabilidade de microssatélites em uma amostra de tumor cólico e em 7 de tumores gástricos. Este fato sugere que, no que diz respeito a mutações do APC, os adenocarcinomas gástricos de pacientes brasileiros são semelhantes aos que ocorrem na Europa, e confirmam a diferença fundamental que existe tanto entre os carcinomas gástricos que ocorrem em diferentes regiões geográficas como entre a etiologia molecular de adenocarcinomas gástricos e colo-retais que ocorrem em São Paulo, Brasil.

A crucial role for the adenomatous polyposis colonic (APC) gene in colorectal carcinogenesis has been conclusively established, but, the role of APC in gastric tumors remains controversial. APC mutations have been detected at a relatively high frequency in gastric tumors of Japanese patients, yet such mutations have been reported to be extremely rare in British patients and patients from north-central-Italy. We here report the analysis of 40 primary sporadic gastric adenocarcinomas and 35 primary sporadic colon adenocarcinomas (from patients resident in São Paulo, Brazil), for mutations in the APC gene between codons 686 and 1693 using the protein truncation test. Although 19 truncating mutations were detected in 35 colon adenocarcinomas (54.2%) none were found in any of the gastric adenocarcinomas. As an internal control the tumor samples were also evaluated for microsatellite alterations, which are also common features of both tumor types. Microsatellite instability was present in 1 colon and 7 gastric tumor samples. This suggests that in relation to APC mutations gastric adenocarcinomas from Brazilian patients are similar to those that occur in Europe, and support a fundamental difference both between gastric carcinomas that occur in different geographical regions and between the molecular etiology of gastric and colorectal adenocarcinomas occurring in São Paulo, Brazil.

Foram estudados dez isolados de Schistosoma mansoni provenientes de pacientes residentes em Itaquara, Bahia, Brasil, tratados com oxamniquine eposteriormente com praziquantel, e ainda assim não curados. Caramujos (Biomphalaria glabrataj foram expostos a miracídios provenientes das fezes dos pacientes. Cercãrías eliminadas por estes caramujos e por moluscos coletados no peridomicílio dos pacientes foram utilizadas para infecção experimental de camundongos albinos. Os animais infectados foram tratados em dose única, via oral, com oxamniquine (25, 50 e 100 mg/kg) ou praziquantel (100, 200 e 400mg/kg). Foram realizados estudos de análise e comparação de DNA de cercãrías de S. mansoni eliminadas pelos caramujos e de vermes adultos recolhidos de camundongos infectados experimentalmente com os isolados dos 10 pacientes e ainda de cercãrías de S. mansoni eliminadas por moluscos naturalmente infectados coletados em Itaquara. A cepa LE (mantida rotineiramente no laboratório) foi usada como padrão de comparação da resposta aos agentes esquistossomicidas administrados. As respostas terapêuticas foram significativamente diferentes entre alguns dos isolados embora não fosse possível caracterizar nenhum como resistente. A análise dos perfis de amplificação de DNA nas cercãrías e nos vermes adultos dos isolados de S. mansoni demonstrou baixo grau de variabilidade indicando que estes são geneticamente próximos e revelando a ausência de rearranjos globais dentro dos genomas.

Ten inhabitants of Itaquara, Bahia, Brazil treated with oxamniquine and subsequently praziquantel were not cured. Schistosoma mansoni isolates derived from these patients were studied. Snails were infected with miracidia derivedfrom the feces of these patients and the cercariae produced used to infect albino mice. The animals were then treated with a single oral dose of oxamniquine (25, 50 and 100mg/kg) or praziquantel (100, 200 and 400 mg/kg). Tloe response to chemotherapy was significantly different in some of the isolates although it was not possible to characterize any of them as resistant, hi addition, DNA analysis of the isolates by means of "Random Amplified Polymorfhic DNA ''indicated a low degree of variability as compared with a laboratory strain, LE. Thus, it was not possible to characterize these organisms at a genetic level as a distinct strain.