RESUMO Foi avaliado o comportamento de índices Doppler e a expressão de genes relacionados à neovascularização tumoral, visando caracterizar a vascularização das massas neoplásicas. Foram utilizadas 27 cadelas, com diagnóstico histopatológico de neoplasia mamária, sendo submetidas à avaliação Dopplerfluxométrica tumoral e à coleta de fragmentos neoplásicos para análise de expressão gênica de VEGF, FLT-1, FLK-1 e ATR1. Foram encontrados 22 tumores de origem epitelial (carcinomas) e cinco de origem mesenquimal (sarcomas). Observou-se correlação positiva entre o FLT-1 e as variáveis PS, PI e RI. O FLK-1 apresentou correlação igualmente positiva com os parâmetros PS e PI e uma tendência para RI, enquanto o VEGF retratou correlação positiva apenas com IP. O VEGF também mostrou correlação positiva com seus receptores, porém não apresentou correlação com o ATR1. O FLT-1 e o FLK-1 apresentaram ainda correlação positiva entre si e com o ATR1. Houve maior expressão média do VEGF nos tumores epiteliais do que nos mesenquimais. As variáveis PS, PI e RI, associadas com a expressão do VEGF e seus receptores, mostraram-se relevantes para caracterizar a neovascularização de tumores malignos, e a expressão diferenciada do VEGF entre os tipos tumorais pode ser um indicador auxiliar na caracterização de neoplasias mamárias malignas em cadelas.

ABSTRACT The behavior of the tumor Doppler indexes and gene expression related to neovascularization was evaluated aiming to improve the characterization of neoplastic masses vascularization. Twenty-seven bitches with histopathological diagnosis of mammary neoplasia were submitted to tumor Dopplerfluxometric evaluation and collection of neoplastic fragments to analyze the gene expression of VEGF, FLT-1, FLK-1 and ATR1. Were found 22 epithelial (carcinomas) and five mesenchymal (sarcomas) tumors. Positive correlation was observed between FLT-1 and PS, PI and RI. FLK-1 presented a similar positive correlation with the PS and PI parameters, and a tendency for RI (r= 0.45, P= 0.07), whereas VEGF showed a positive correlation just with PI. VEGF also showed a positive correlation with its receptors, but did not present a correlation with ATR1. FLT-1 and FLK-1 also showed positive correlation with each other, and with ATR1. There was higher mean expression of VEGF in epithelial tumors than in mesenchymal ones. The PS, PI and RI associated with the expression of VEGF and its receptors have been shown to be relevant to characterize neovascularization of malignant tumors, and the differentiated expression of VEGF between the types of mammary tumors, may be an auxiliary indicator in the characterization of malignant breast cancers in bitches.

RESUMO Polimorfismos Galway (Fec XG ) e Inverdale (Fec XI), relacionados ao gene BMP-15, e Booroola (FecB), localizado no gene BMPR-1B, foram investigados usando-se a técnica de reação em cadeia da polimerase - polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição (PCR-RFLP), em ovelhas Santa Inês (n= 574) e Morada Nova (n=282). O DNA foi extraído e amplificado por PCR com iniciadores específicos, que introduziram um sítio de restrição associado à mutação, em seguida os amplicons foram submetidos à ação de endonucleases. Não foram observadas as mutações Fec XG e Fec XI nas amostras estudadas. Amostras de seis animais com histórico de partos gemelares apresentaram polimorfismo para FecB semelhantes às amostras controle, mas esse padrão não foi confirmado pelo sequenciamento de nucleotídeos. Apesar da ausência dessas mutações nos animais das raças estudadas, outros fatores relacionados à prolificidade devem ser pesquisados para explicar os mecanismos da alta prolificidade desses animais.

ABSTRACT Polymorphisms in the BMP-15 gene related to Galway (FecXG) and Inverdale (FecXI) and in the BMPR-1B gene known as Booroola (FecB) mutations were investigated using the Polymerase Chain Reaction - Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP) method, on sheep from the breeds Santa Inês (n= 574) and Morada Nova (n=282). DNA was extracted and amplified through PCR with specific primers that introduced a restriction site in association with the mutation. The PCR products were submitted to endonucleases. The experiment found no FecXG and FecXI mutations. Six samples of animals with multiple offspring/birth history presented polymorphism for FecB similar to control samples, but this pattern was not confirmed by nucleotide sequencing. Although the absence of these mutations in the studied breeds, other factors related to prolificacy should be investigated to explain the inherent prolificity mechanisms.

A expressão de RNAm para leptina, receptor de leptina (obRb), adiponectina, receptor de adiponectina (AdipoR1) e resistina foi avaliada por meio da técnica de PCR em tempo real, em tecidos ovariano, hipofisário, adiposo do omento e da região perirrenal, em ovelhas alimentadas sem farelo de mamona ou com farelo de mamona detoxificada durante 14 meses. O tipo de dieta não afetou os níveis de RNAm para leptina, obRb, adiponectina, AdipoR1 e resistina nos diferentes tecidos avaliados (P>0,05). Nos tecidos ovariano e hipofisário, não foi verificada a expressão da adiponecina e da resistina, respectivamente. Como consequência, pode-se concluir que o farelo de mamona detoxificada pode ser utilizado como fonte proteica na dieta de ovelhas, sem afetar a expressão do gene resistina e dos genes leptina e adiponectina, bem como de seus receptores.

The expression of leptin, leptin receptor (obRb), adiponectin, adiponectin receptor (AdipoR1) and resistin was assessed by real-time PCR technique in ovarian, pituitary, and the omental adipose perirenal tissue in sheep feed without castor meal or with detoxified castor meal. The type of diet did not affect mRNA levels for leptin, obRb, adiponectin, resistin AdipoR1 evaluated in different tissues (P>0.05). However, in pituitary and ovarian tissues there was no expression of resistin and adiponectin, respectively. The detoxified castor meal can be used in sheep diets as alternative food protein without affecting the expression of leptin and adponectin as well as their receptors and resistin.