Resumen Introducción: La anfotericina B es un fármaco eficaz para el tratamiento de las distintas formas de leishmaniosis. Sin embargo, existen informes sobre su ineficacia en animales de laboratorio infectados experimentalmente conLeishmaniaspp.Es por ello que el objetivo del presente trabajo fue evaluar el balance de actividad-toxicidad a dosis de Anfotericina B superiores a 1 mg/kg, de modo que su uso como fármaco leishmanicida control positivo sea adecuado. Método: Se infectaron experimentalmente ratones BALB/c conL. amazonensisy se trataron con anfotericina B por vía intraperitoneal a dosis desde 5 mg/kg hasta 12,5 mg/kg, comenzando 21 días después de la infección. Durante once semanas a partir del comienzo del tratamiento se evaluó el tamaño de las lesiones y el peso corporal de los ratones. Tres días después de concluido el tratamiento se determinó el número de parásitos en las lesiones. Resultados: La anfotericina B a 5 mg/kg retrasó el crecimiento de las lesiones, pero no redujo su tamaño ni disminuyó significativamente el número de parásitos en la lesión. Dosis de 7,5 mg/kg a 10 mg/kg, cada 48 h durante 14 días (7 dosis) causaron una reducción significativa del tamaño de la lesión y de la carga parasitaria sin pérdida manifiesta de peso corporal y sin signos de toxicidad. La anfotericina B a 12,5 mg/kg fue más eficaz, pero produjo una toxicidad inaceptable. Conclusiones: Los resultados avalan el uso de la anfotericina B como control positivo en ratones BALB/c infectados experimentalmente conL. amazonensisen dosis de 7,5 mg/kg a 10 mg/kg para lograr un efecto comparable al observado en la práctica clínica.

Abstract Introduction: Amphotericin B is an effective drug for the treatment of the different clinical forms of leishmaniasis. However, there are reports of its ineffectiveness in animals experimentally infected withLeishmaniaspp. That is why, the objective of the present work was to evaluate the balance of activity-toxicity at amphotericin B doses over 1 mg/kg, so that its use as a positive control antileishmanial drug were adequate. Method: BALB/c mice were experimentally infected withL. amazonensisand treated with amphotericin B by intraperitoneal route at doses from 5 mg/kg to 12.5 mg/kg, beginning 21 days after infection. The size of the lesions and the body weight of the mice were measured for eleven weeks after the commencement of treatment. The number of parasites was also determined three days after the end of treatment. Results: Amphotericin B at 5 mg/kg retarded lesions growth but neither reduced lesion size nor the parasite load at lesion site. Doses of 7.5 mg/kg to 10 mg/kg, every 48 h for 14 days (7 doses) caused a significant reduction of lesion size and parasite load without evident loss of body weight and without signs of toxicity. Amphotericin B at 12.5 mg/kg was more effective but produced unacceptable toxicity. Conclusions: The results support the use of amphotericin B as a positive control drug in BALB/c mice experimentally infected withL. amazonensisat doses of 7.5 mg/kg to 10 mg/kg to achieve an effect comparable to that observed in clinical practice.

The aim of this study was to evaluate the in vitro activity of furvina against microorganisms isolated from the skin of canines with piodermatitis in of Santa Clara, Cuba. Resistance to antibacterial agents was assessed by the diffusion method in agar and the in vitro activity was evaluated quantitatively by the broth macrodilution method according to international clinical laboratory standards. Fifty multiresistant strains were identified, 47 from the genus Staphylococcus and 3 from Pseudomonas. The Fisher’s exact test showed highly significant sensibility of microorganisms of the genus Staphylococcus to ciprofloxacin. All strains were resistant to at least three antimicrobials. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) for furvina ranged from 2-16 mg/ml where 83.2% of the strains having a MIC of 4-8 mg/mL. The Minimum Bactericidal Concentration (MBC) ranged from 4-32 mg/ml where 86.2% of the isolates oscillating between 8 and 16 mg/ml. All strains showed a MIC50 against furvina of 5.59 µg/ml (4.70-6.48) and a MBC50 of 11.8 µg/ml (10.0-13.6). These results may infer that furvina exhibits an in vitro bactericidal activity against sensitive and resistant bacteria from canine skin lesions

El objetivo del presente fue evaluar la actividad in vitro de la furvina frente a microorganismos aislados de la piel de caninos con piodermitis de la ciudad de Santa Clara, Cuba. La resistencia a los agentes antibacterianos se determinó mediante el método de difusión en agar y la actividad in vitro se evaluó cuantitativamente mediante macrodilución en caldo según procedimientos internacionales. Se identificaron 50 cepas multirresistentes, siendo 47 del género Staphylococcus y 3 del género Pseudomonas. El test exacto de Fisher demostró sensibilidad altamente significativa de los microorganismos del género Staphylococcus para la ciprofloxacina. Todas las cepas fueron resistentes al menos a tres de los antibacterianos enfrentados. Las muestras evaluadas mostraron una Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) entre 2-16 mg/ml frente a furvina, destacándose que el 83.2% de las cepas osciló entre 4 y 8 g/ml, y una Concentración Bactericida Mínima (CBM) entre 4-32 mg/ml, resaltando que el 86.2% de los aislados osciló entre 8 y 16 mg/ml. Todas las cepas evaluadas mostraron una CIM50 frente a furvina de 5.59 mg/ml (4.70-6.48) y una CBM50 de 11.8 mg/ml (10.0-13.6). Los resultados permiten inferir que furvina posee una actividad bactericida in vitro frente a las cepas sensibles y resistentes, aisladas de lesiones en la piel de caninos

Despite recent advances in the treatment of some forms of leishmaniasis, the available drugs are still far from ideal due to inefficacy, parasite resistance, toxicity and cost. The wide-spectrum antimicrobial activity of 2-nitrovinylfuran compounds has been described, as has their activity against Trichomonas vaginalis and other protozoa. Thus, the aim of this study was to test the antileishmanial activities of six 2-nitrovinylfurans in vitro and in a murine model of leishmaniasis. Minimum parasiticide concentration (MPC) and 50% inhibitory concentration (IC50) values for these compounds against the promastigotes of Leishmania amazonensis, Leishmania infantum and Leishmania braziliensis were determined, as were the efficacies of two selected compounds in an experimental model of cutaneous leishmaniasis (CL) caused by L. amazonensis in BALB/c mice. All of the compounds were active against the promastigotes of the three Leishmania species tested. IC50 and MPC values were in the ranges of 0.8-4.7 µM and 1.7-32 µM, respectively. The compounds 2-bromo-5-(2-bromo-2-nitrovinyl)-furan (furvina) and 2-bromo-5-(2-methyl-2-nitrovinyl)-furan (UC245) also reduced lesion growth in vivo at a magnitude comparable to or higher than that achieved by amphotericin B treatment. The results demonstrate the potential of this class of compounds as antileishmanial agents and support the clinical testing of Dermofural(r) (a furvina-containing antifungal ointment) for the treatment of CL.

The anti-typhoid vaccine vax-TyVi® consists in the Vi capsular polysaccharide of Salmonella typhi, which is diluted in an isotonic buffer solution with phenol as a preservative. Each dose of 0,5 mL contains 25μg of polysaccharide as an active component. The vaccination schedule in Cuba against typhoid fever includes the application of vax-TyVi® to 9-10 year-old students (5th grade, primary school), a second dose for 12-15 year-olds (8th grade, secondary school ) and the third dose for 16-17 year-olds (11th grade). The high-risk population is additionally immunized. The present work describes the local tolerance assay undertaken for vax-TyVi® as part of its preclinical safety studies. A total of 170 rats were treated with either the vaccine, the placebo (all components, but the active ingredient) or were not treated and served as controls. Clinical observations were made daily during the whole study. Water and food intakes were measured and anatomopathological studies were conducted on animals that were sacrificed 3, 7, 14, 21, 28, 35 and 42 days after the inoculation. No animal died or showed symptoms of toxicity. Body weight and the intakes of food and water were statistically similar in the three experimental groups and there were no tissue changes indicative of local or systemic toxicity. Results suggest that vax-TyVi® is potentially innocuous at the inoculation site.

La vacuna antitifoídica vax-TyVi® consiste en una preparación de polisacárido capsular Vi de Salmonella typhi, el cual es diluido en una solución buffer isotónica solución amortiguador, a la que se le añade fenol como preservo. Cada dosis de 0,5 mL contiene 25 μg de polisacárido como sustancia activa. En nuestro país el esquema de vacunación contra la fiebre tifoidea con vax- TyVi® se aplica a los alumnos de 9-10 años (5to grado), una 2da dosis a la edad de 12-13 años (8vo grado) y una 3ra dosis a la edad de 16-17 años (11no grado). Además, es vacunado el personal de riesgo de Salud Pública y el personal que manipula alimentos. En el presente trabajo se describe el ensayo de tolerancia local llevado a cabo con la vacuna vax-TyVi® durante su fase de estudios preclínicos, actualmente utilizada en la vacunación contra la fiebre tifoidea en Cuba. Se empleó un total de 170 ratas que fueron tratadas con la vacuna, su placebo (todos los componentes, excepto la materia prima activa), o que no recibieron tratamiento alguno (controles). Se realizaron observaciones clínicas diarias durante todo el ensayo, se determinó el consumo de agua y alimentos y se realizaron investigaciones anatomopatológicas a animales sacrificados 3, 7, 14, 21, 28, 35 y 42 días después de la inoculación. No se observaron muertes ni síntomas de toxicidad; no se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre los pesos vivos, el consumo de agua ni el de alimentos entre los grupos del ensayo. Tampoco se observaron lesiones anatomopatológicas que indicaran toxicidad por parte del producto inoculado. Los resultados permitieron concluir que la potencialidad de la vacuna vax-TyVi® para producir efectos adversos locales es baja.

The single-dose toxicological test for the leptospirosis vaccine vax-SPIRAL was made in rats. No clinical toxicity symptoms were found. The differences between the evaluated variables were not important from the biological point of view.

Se realizó la prueba toxicológica de dosis única para la vacuna antileptospirósica vax-SPIRAL en ratones. No se encontraron síntomas clínicos de toxicidad y las diferencias entre las variables evaluadas no fueron importantes desde el punto de vista biológico.

It was demonstrated that there is a relation of cell concentration with the parasite reading in an ELISA reader. It was determined that absorbance showed significant values in wavelengths of visible range and the possible minimum wavelength (450 nm)was chosen to guarantee the maximum sensitivity. Likewise, it was confirmed that absorbance significantly increased (p<0.001) after the plate was filled up, it stabilized in the 40m-2h time interval when applying 100, 150, 200 or 300 ml per well of the various cell concentrations, it was proved that the optimum volume was 150 ml, a r2= 0,9986 was reached, and the coefficient of correction(p<0,001) and the gradient(p<0,001)were highly significant. In the 5 x 104 to 1.5 x 107 cell/mL interval, there was an average variation coefficient of 1.75% (0.25-3.17%). Under these conditions, the quantification limit was 5,14 x 104 cell/mL. Finally, it was shown that the correlation of counting in Neubauer chamber and optical density was significant.

Se demostró que existe relación entre la concentración celular y la lectura de los parásitos en un lector de ELISA. Se determinó que la absorbancia tiene valores significativos en las longitudes de onda del rango visible y se escogió la longitud de onda mínima posible (450 nm) para garantizar un máximo de sensibilidad. Pudo comprobarse que ocurre un aumento significativo de la absorbancia (p<0,001) después de llenada la placa, que se estabiliza en el intervalo de 40 min hasta 4 h. Al aplicar 100, 150, 200 ó 300 µL por pozo de las diferentes concentraciones de células se demostró que el volumen óptimo era de 150 µL, se obtuvo un r2 = 0,9986, y resultaron altamente significativos el coeficiente de correlación (p<0,001) y la pendiente (p<0,001). En el intervalo de 5 x 104 a 1,5 x 107 células/mL se obtuvo un coeficiente de variación medio de 1,75 % (0,25-3,17 %). En estas condiciones el límite de cuantificación fue de 5,14 x 104 células/mL. Por último se demostró que hubo significación de la correlación entre el conteo en cámara de Neubauer y la densidad óptica.