ABSTRACT Purpose: This study investigates the protective effect of cilostazol on the development and evolution of diabetic retinopathy in rats. Methods: Sixty male rats were divided into four groups: untreated nondiabetic rats, untreated diabetic rats, cilostazol-treated nondiabetic rats, and cilostazol-treated diabetic rats. The thickness of the internal limiting membrane to the outer limiting membrane, inner plexiform layer, inner nuclear layer, and outer nuclear layer were measured. The number of cell nuclei per 50-μm length in retinal sections was counted to quantify the degree of retinal cell loss. Results: The number of nuclei in the ganglion cell layer was significantly higher in untreated nondiabetic rats (p<0.05). The mean number of nuclei in the cilostazol-treated nondiabetic rats was significantly higher than that in the cilostazol-treated diabetic rats (p<0.05). The cilostazol-treated nondiabetic rats had a significantly higher mean nuclei count in the inner nuclear layer and inner plexiform layer as compared with the other groups (p<0.05). The total mean retinal thickness of the cilostazol-treated nondiabetic rats was significantly higher than that of cilostazol-treated diabetic rats and untreated diabetic rats (p<0.05). Conclusion: By decreasing the loss of ganglion cells and reducing the sensorineural atrophy in the internal retinal layers, cilostazol had a protective effect against changes caused by diabetic retinopathy in diabetic rats.

RESUMO Objetivo: O objetivo deste estudo foi investigar o efeito protetor do cilostazol no desenvolvimento e na evolução da retinopatia diabética em ratos. Métodos: Sessenta ratos machos foram divididos em 4 grupos: ratos não-diabéticos não-tratados, ratos diabéticos não-tratados, ratos não-diabéticos tratados com cilostazol e ratos diabéticos tratados com cilostazol. A espessura da membrana limitante interna à membrana limitante externa, a camada plexiforme interna, a camada nuclear interna e a camada nuclear externa foram medidas. Para quantificar o grau de perda de células da retina, foi contado o número de núcleos de células por 50 μm de comprimento em secções retinianas. Resultados: O número de núcleos no GCL foi significativamente maior em Ratos não-diabéticos não-tratados com cilostazol (p<0,05). O número médio de núcleos em Ratos não-diabéticos tratados com cilostazol foi significativamente maior do que em Ratos diabéticos tratados com cilostazol (p<0,05). A contagem média de núcleos em camada nuclear interna e camada plexiforme interna de ratos não-diabéticos tratados com cilostazol foi significativamente maior do que nos outros grupos (p<0,05). A espessura retiniana média total de Ratos não-diabéticos tratados com cilostazol foi significativamente maior do que em Ratos diabéticos tratados com cilostazol e Ratos diabéticos não-tratados (p<0,05). Conclusão: Os resultados demonstraram que o cilostazol teve um efeito protetor contra as alterações causadas pela retinopatia diabética em ratos diabéticos, diminuindo a perda de células ganglionares e reduzindo a atrofia neurossensorial nas camadas retinianas internas.

Abstract Hydroxytyrosol (HT) is a natural phenolic compound found in leaves of olive trees. It is a photosensitive solid phytochemical constituent and an irritant substance to skin and mucosa as pure drug. HT is a lipophilic chemical constituent and shows low solubility in water, bitter taste, and instability to oxidizing atmosphere. Considering the limitations for its suitable therapeutic use, the aim of the present study was to obtain, to characterize, to quantify, and to evaluate the stability of HT-loaded poly(ԑ-caprolactone) nanocapsules for its further use in pharmaceutical and nutraceutical products. Nanocapsules were prepared by method of interfacial deposition of the preformed polymer. The formulations were characterized by morphological and spectroscopic methods. The UHPLC-PDA analytical method was developed and validated for quantifying the HT encapsulation. Physicochemical stability assay was performed for 120 days. Nanocapsules were successfully obtained by the proposed method. The morphological evaluation demonstrated the drug absence in the nanocapsule surface. Fourier-transform infrared spectroscopy demonstrated the drug nanoencapsulation. The analytical method was validated and confirmed a high HT encapsulation efficiency over 95%. Considering the physicochemical stability testing, the polydispersity index changed after 30 days for NC-2 (HT at 2 mg/mL) and after 90 days for NC-5 (HT at 5 mg/mL). Zeta potential changed after 60 days for both formulations (NC-2 and NC-5). pH values were modified after 60 days for NC-5 and after 90 days for NC-2. HT-loaded PCL nanocapsules demonstrate adequate physicochemical features and high drug encapsulation. The different formulations revealed stability changes from 30 to 90 days. Additional in vitro and in vivo evaluations may be performed in order to use these nanoformulations for treating several diseases based on oxidative-inflammatory environments.

RESUMO Objetivo: O objetivo deste estudo foi investigar o efeito protetor do cilostazol no desenvolvimento e na evolução da retinopatia diabética em ratos. Métodos: Sessenta ratos machos foram divididos em 4 grupos: ratos não-diabéticos não-tratados, ratos diabéticos não-tratados, ratos não-diabéticos tratados com cilostazol e ratos diabéticos tratados com cilostazol. A espessura da membrana limitante interna à membrana limitante externa, a camada plexiforme interna, a camada nuclear interna e a camada nuclear externa foram medidas. Para quantificar o grau de perda de células da retina, foi contado o número de núcleos de células por 50 μm de comprimento em secções retinianas. Resultados: O número de núcleos no GCL foi significativamente maior em Ratos não-diabéticos não-tratados com cilostazol (p<0,05). O número médio de núcleos em Ratos não-diabéticos tratados com cilostazol foi significativamente maior do que em Ratos diabéticos tratados com cilostazol (p<0,05). A contagem média de núcleos em camada nuclear interna e camada plexiforme interna de ratos não-diabéticos tratados com cilostazol foi significativamente maior do que nos outros grupos (p<0,05). A espessura retiniana média total de Ratos não-diabéticos tratados com cilostazol foi significativamente maior do que em Ratos diabéticos tratados com cilostazol e Ratos diabéticos não-tratados (p<0,05). Conclusão: Os resultados demonstraram que o cilostazol teve um efeito protetor contra as alterações causadas pela retinopatia diabética em ratos diabéticos, diminuindo a perda de células ganglionares e reduzindo a atrofia neurossensorial nas camadas retinianas internas.

ABSTRACT Purpose: This study investigates the protective effect of cilostazol on the development and evolution of diabetic retinopathy in rats. Methods: Sixty male rats were divided into four groups: untreated nondiabetic rats, untreated diabetic rats, cilostazol-treated nondiabetic rats, and cilostazol-treated diabetic rats. The thickness of the internal limiting membrane to the outer limiting membrane, inner plexiform layer, inner nuclear layer, and outer nuclear layer were measured. The number of cell nuclei per 50-μm length in retinal sections was counted to quantify the degree of retinal cell loss. Results: The number of nuclei in the ganglion cell layer was significantly higher in untreated nondiabetic rats (p<0.05). The mean number of nuclei in the cilostazol-treated nondiabetic rats was significantly higher than that in the cilostazol-treated diabetic rats (p<0.05). The cilostazol-treated nondiabetic rats had a significantly higher mean nuclei count in the inner nuclear layer and inner plexiform layer as compared with the other groups (p<0.05). The total mean retinal thickness of the cilostazol-treated nondiabetic rats was significantly higher than that of cilostazol-treated diabetic rats and untreated diabetic rats (p<0.05). Conclusion: By decreasing the loss of ganglion cells and reducing the sensorineural atrophy in the internal retinal layers, cilostazol had a protective effect against changes caused by diabetic retinopathy in diabetic rats.

RESUMO Objetivos: Avaliar se as concentrações séricas da lectina ligante de manose da via das lectinas do sistema complemento estão associadas à degeneração macular relacionada à idade. Métodos: Pacientes com degeneração macular relacionada à idade a controles pareados realizaram exame oftalmológico completo e imagens de tomografia de coerência óptica. As concentrações de lectina ligante de manose foram aferidas em amostras de sangue pelo método "time-resolved Immunofluorometric assay". Resultados: Um total de 136 indivíduos foram avaliados incluindo 68 com degeneração macular relacionada à idade (34 exsudativa e 34 não-exsudativa) e 68 controles. Concentrações medianas de lectina ligante de ma-nose foram 608 ng/mL (30-3,415 ng/mL) nos casos e 739 ng/mL (30-6,039 ng/mL) nos controles, não havendo diferença entre os grupos. Comparando degeneração macular relacionada a idade exsudativa (mediana de lectina ligante de manose 476 ng/mL; 30-3,415 ng/mL) e não-exsudativa (692 ng/mL; 30-2,587 ng/mL) também não apresentaram diferença. Conclusões: Concentrações séricas de lectina ligante de manose não estão relacionadas à degeneração macular relacionada a idade ou às formas exsudativa e não-exsudativa.

ABSTRACT Purpose: To assess whether the serum levels of mannose-binding lectin of the lectin complement pathway are associated with age-related macular degeneration. Methods: Patients with age-related macular degeneration and age-matched controls underwent full ophthalmologic examination and optical coherence tomography. Using a time-resolved immunofluorometric assay, blood samples were evaluated to determine the serum mannose-binding lectin levels. Results: A total of 136 individuals were evaluated, including 68 patients with age-related macular degeneration (34 exudative and 34 nonexudative) and 68 age-matched controls. The median mannose-binding lectin level was 608 ng/mL (range, 30-3,415 ng/mL) in patients with age-related macular degeneration and 739 ng/mL (range, 30-6,039 ng/mL) in controls, with no difference between the groups. Additionally, the median mannose-binding lectin level was 476 ng/mL (range, 30-3,415 ng/mL) in exudative cases and 692 ng/mL (range, 30-2,587 ng/mL) in nonexudative cases. Conclusions: Serum mannose-binding lectin levels were not associated with age-related macular degeneration or with the exudative and nonexudative forms of the disease.

RESUMO Objetivo: Avaliar o perfil epidemiológico e severidade da degeneração macular relacionada à idade (DMRI) no ambulatório de oftalmologia da Universidade Federal do Paraná (UFPR) em Curitiba, Paraná, Brasil. Métodos: Estudo transversal com dados coletados referentes as 6155 consultas oftalmológicas realizadas no período de novembro de 2011 a novembro de 2013. Destes, 346 pacientes possuíam doenças retinianas e foram avaliados por dois especialistas em retina à procura de sinais de DMRI. Os confirmados foram submetidos a um protocolo compreendendo acuidade visual, tonometria, biomicroscopia, oftalmoscopia indireta sob midríase e tomografia de coerência óptica (OCT). Resultados: Um total de 6155 pacientes foram submetidos à consulta oftalmológica na UFPR. Trezentos e quarenta e seis pacientes apresentaram doenças retinianas (incidência de 5.6%) e 68 destes (incidência de 19.6% dos pacientes com doenças de retina) apresentaram DMRI. A média de idade dos pacientes do ambulatório geral foi de 53 anos e em pacientes com doenças de retina foi de 60 anos. Pacientes com DMRI tinham em média 73 anos. Etnia, cor da íris, índice de massa corpórea (IMC) e tabagismo foram avaliados nos 68 pacientes diagnosticados com DMRI (34 exsudativa e 34 não exsudativa), mas nenhum dos parâmetros foram estatisticamente significantes. Conclusão: A maioria dos pacientes eram de origem europeia. Comparando com a literatura, uma maior proporção de casos avançados de DMRI (50% de forma exsudativa) foi encontrada. Em relação à etnia, tabagismo e IMC, não houve diferença entre pacientes com forma exsudativa e não exsudativa. Estes resultados podem ser comparados com estudos disponíveis, considerando a pouca informação referente a DMRI existente no Brasil.

ABSTRACT Objective: To evaluate the profile and severity of age-related macular degeneration (AMD) in ophthalmology ambulatory of Federal University of Parana in Curitiba, Parana, Brazil. Methods: This was a cross-sectional study with data collected among the 6155 outpatients ophthalmic appointments (november 2011 to november 2013). In this 6155 patients, a total of 346 patients had retinal diseases and were screened by two retinal specialists for signs of AMD. If present, they were submitted to a protocol including a new ophthalmic evaluation comprising visual acuity, tonometry, biomicroscopy, dilated fundus examination and optical coherence tomography (OCT). Results: A total of 6155 patients underwent ophthalmologic evaluation for several reasons. Three hundred and forty six patients had retinal diseases (incidence of 5.6%) and 68 of these (incidence of 19.6% in retinal patients) had AMD. The mean age of all patients was 53 years and in retinal patients was 60 years. In AMD patients mean age was 73 years. Ethnicity, body-mass index (BMI) and smoking habits were evaluated in the 68 patients diagnosed with AMD (34 exudative and 34 non-exudative) but none of those parameters were statistically significant comparing exudative and non-exudative forms. Conclusion: Most of the patients were European descendants. A higher proportion of advanced cases of AMD comparing with literature was found (50% of exudative form). Regarding ethnicity, iris color, smoking habit and BMI, there was no difference comparing exudative and non-exudative forms. These results may be compared to available AMD studies, since there is little information about AMD in Brazil.

OBJETIVO: Reconhecer a capacidade regenerativa influenciada pela administração de estradiol. MÉTODOS: Utilizaram-se 42 ratos Wistar, fêmeas, divididos em dois grupos controle e experimento. Realizou-se a ressecção de, aproximadamente, 70% do fígado destes animais. Ratos do grupo controle receberam injeção intramuscular de um mililitro de óleo de amendoim, enquanto que os do grupo experimento receberam hexaidrobenzoato de estradiol (50µg) diluídos em um mililitro de óleo de amendoim. Fizeram-se as aferições com 36 horas e 7 dias, com 3 métodos: Fórmula de Kwon et al.21 para reconhecer ganho de volume, contagem das figuras de mitose existentes em 5 campos e percentual dos núcleos PCNA positivos em 5 campos. RESULTADOS: O ganho de volume (massa) foi semelhante nos dois grupos com 36 horas (p=0,1873) e maior no grupo experimento com 7 dias (p=0,0447). À microscopia observou-se número de figuras de mitose em número semelhante com 36 horas (p=0,3528) e tendência a ser maior no grupo experimento com 7 dias (p=0,0883). A média de núcleos PCNA positivos foi maior no grupo experimento tanto com 36 horas (p=0,0009) quanto com 7 dias (p=0,0000). CONCLUSÃO: O hexaidrobenzoato de estradiol favoreceu a regeneração hepática em ratos submetidos à hepatectomia 70%.

PURPOSE: To recognize the regenerative capacity influenced by the administrating of estradiol. METHODS: 42 female Wistar rats were used, divided into two groups, the control and the experiment group. A resection of approximately 70% of the liver was made in the liver of these animals. The control group received an intramuscular injection of one ml of peanut oil. The experiment group were given estradiol hexahydrobenzoate (50µg) diluted in one ml of peanut oil. Calibrations were done after 36 hours and 7 days, using three methods: the formula of Kwon et al.21, to recognize gain in volume, counting of the mitosis figures in five fields and the percentage of positive PCNA nuclei. RESULTS: Gain in volume (mass) was similar in both groups after 36 hours (p=0.1873) and higher in the experiment groups after seven days (p=0.0447). Microscopy showed a similar number of mitosis figures after 36 hours (p=0.3528) and a tendency to be higher in the experiment group after 7 days (p=0.0883). The average of positive PCNA nuclei was higher in the experiment group both after 36 hours (p=0.0009) and 7 days (p=0.0000). CONCLUSION: The estradiol hexahydrobenzoate improved liver regeneration in rats submitted to a 70% hepatectomy.