ABSTRACT The current study aimed to investigate the ectoparasitic diversity and gill alterations in Hoplerythrinus unitaeniatus (Characiformes: Erythrinidae) and Cichlasoma bimaculatum (Perciformes: Cichlidae) and evaluate the microbiological and physicochemical quality of water samples deriving from a Quilombola zone in Maranhão State, Brazil. Water samples and 42 fish specimens, 21 H. unitaeniatus and 21 C. bimaculatum, were collected from a floodable environment. Water samples were subjected to physicochemical and microbiological analyses in the laboratory environment. Fish specimens were euthanized to collect and identify ectoparasites in animals’ mucus, body surface, and gills, as well as to enable the histological analysis of the second right gill arch. The herein-identified ectoparasites have shown 30.95% prevalence and comprised three phyla: Platyhelminthes, Trematoda and Arthropoda. The herein-identified main histological changes comprised incomplete and complete fusion of several lamellae, lifting of respiratory epithelium, lamellar disorganization, lamellar epithelial hyperplasia, and blood sinus dilation. The herein calculated histological alteration index has shown that 23.80% of specimens presented mild-to-moderate tissue damage, 4.77% presented moderate-to-severe tissue changes, and 9.52% presented irreparable tissue damage. It was possible concluding that histological gill lesions identified in fish specimens analyzed may be adaptive responses to the affected environment and the incidence of ectoparasites.

RESUMO: Objetivou-se com o estudo detectar Cryptosporidium sp. em ostras de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão e determinar o(s) tecido(s) eletivo(s) para pesquisa desse protozoário. Para a realização do estudo foram adquiridas 200 ostras de cultivo do município de Raposa e 100 de Paço do Lumiar, além de 100 ostras extraídas de estoque natural do município de Primeira Cruz, totalizando 400 ostras. Estas foram agrupadas em 80 pools constituídos por cinco animais. De cada pool, as brânquias e a massa visceral foram removidas totalizando 160 pools, sendo 80 para o grupo das brânquias e 80 para o grupo de massa visceral. Na sequência, procedeu-se à extração de DNA de cada pool com a utilização de kit comercial com modificações. Posteriormente, realizou-se a detecção do DNA do protozoário por meio da técnica de Nested-PCR. Com a técnica utilizada, foi detectado o DNA do protozoário pesquisado em 2,5% (n=2/80) pools apenas de brânquias, sendo 1,25% pools (n=1/80) oriundos de cultivo e os outros 1,25% (n=1/80) de estoque natural. Com os resultados obtidos nesse estudo, conclui-se que as ostras analisadas do gênero Crassostrea sp., oriundas de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão, estavam contaminadas por Cryptosporidium sp. e podem se reverter em fontes potenciais para seres humanos e outros animais. Para a pesquisa de Cryptosporidium sp. em ostras, as brânquias são o tecido eletivo.

ABSTRACT: This study detected Cryptosporidium spp. in cultivated oysters and the natural oyster stock of the state of Maranhão and determine the elective tissue(s) to examine this protozoan. For this purpose, 200 cultivated oysters were purchased from the municipality of Raposa and another 100 from Paço do Lumiar. Additionally, 100 oysters were extracted from the natural stock of the municipality of Primeira Cruz, thus making up a total of 400 oysters. They were grouped into 80 pools consisting of 5 oysters each. From each pool, the gills and visceral mass were removed to obtain 160 pools, 80 pools for the gill group and another 80 for the visceral mass group. Then, DNA was extracted from each pool using a commercial kit with modifications. Subsequently, the protozoan DNA was detected using nested polymerase chain reaction. With this technique, the DNA of the protozoan under investigation was detected in 2.5% (n = 2/80) of the pools containing gills, with 1.25% of the pools (n = 1/80) belonging to the cultivation group of oysters and the other 1.25% (n = 1/80) to the natural stock. With the results obtained in this study, it was concluded that the analyzed oysters of the genus Crassostrea, from cultivation and natural stock groups, found in the state of Maranhão, were contaminated by Cryptosporidium spp. and may become potential sources of infection in humans and other animals. In addition, the gills are the elective tissue for the study of Cryptosporidium spp. in oysters.

Resumo Anaplasma marginale é uma bactéria Gram-negativa intracelular obrigatória de eritrócitos de ruminantes e responsável pela anaplasmose bovina. A diversidade genética de A. marginale tem sido caracterizada com base nas sequências das principais proteínas de superfície (MSPs), como a MSP1α. O objetivo deste estudo foi investigar a diversidade genética de A. marginale em bovinos no estado do Maranhão, Nordeste do Brasil. Dessa forma, 343 amostras de sangue foram submetidas ao ensaio iELISA, utilizando-se a proteína recombinante MSP5. Das 343 amostras de sangue, 235 (68,5%) foram escolhidas aleatoriamente e submetidas à extração de DNA, qPCR e PCR convencional para gene msp1α, para determinação das sequências de aminoácidos e classificação dos genótipos. Os resultados do iELISA mostraram 81,34% de soropositividade (279/343), enquanto qPCR revelou 224 amostras positivas (95,32%). Dentre estas na qPCR, 67,4% (151/224) mostraram-se positivas no PCR convencional. Das 50 sequências obtidas, 21 cepas não haviam sido relatadas anteriormente. Em relação aos genótipos, H (26/50) e E (18/50) foram os mais frequentes, enquanto os genótipos F e C foram identificados apenas duas vezes cada, e B e G uma vez cada. Em conclusão, alta prevalência e marcante diversidade genética de A. marginale foram observadas em rebanhos leiteiros no estado do Maranhão.

Abstract Anaplasma marginale is an obligate intracellular Gram-negative bacterium found in ruminants’ erythrocytes and is the etiological agent of bovine anaplasmosis. The bacterium’s genetic diversity has been characterized based on sequences of major surface proteins (MSPs), such as MSP1α. The aim of the present study was to investigate the genetic diversity of A. marginale in cattle in the state of Maranhão, northeastern Brazil. To this end, 343 blood samples were harvested and subjected to iELISA assays using the recombinant surface protein MSP5. Out of 343 blood samples, 235 (68.5%) were randomly chosen and submitted to DNA extraction, qPCR and conventional PCR targeting the msp1α gene to determine amino acid sequences and classify the genotypes. The iELISA results showed 81.34% seropositivity (279/343), whereas qPCR revealed 224 positive samples (95.32%). Among these qPCR-positive samples, 67.4% (151/224) were also positive in the cPCR. Among the 50 obtained sequences, 21 strains had not been previously reported. Regarding the genotypes, H (26/50) and E (18/50) were identified most often, while genotypes F and C were only identified twice each and B and G once each. In conclusion, high prevalence and genetic diversity for A. marginale were observed in dairy cattle herds in the state of Maranhão.

RESUMO: Os objetivos do estudo foram determinar a prevalência da brucelose bovina, relacionar resultados laboratoriais de amostras séricas reagentes com a sorologia de animais que apresentavam bursites e, ainda, identificar possíveis fatores de risco para a enfermidade. Para isso, no abate foram coletadas 1.265 amostras de sangue bovino, entre machos e fêmeas, procedentes de diferentes municípios maranhenses e de outras regiões do Brasil, abatidos em dois frigoríficos com Serviço de Inspeção Federal e dois com Serviço de Inspeção Municipal, nas regionais de Açailândia e Imperatriz. As amostras foram testadas para a presença de anticorpos específicos pelos testes do antígeno acidificado tamponado e 2-mercaptoetanol combinado à soroaglutinação lenta (2-ME + SAL). Para realizar o estudo dos fatores de risco, adicionalmente aplicou-se um questionário epidemiológico com 100 proprietários que forneceram animais aos frigoríficos. Foram também coletadas 15 amostras de material de bursite de animais que apresentaram a referida lesão no momento do abate. Do total de amostras analisadas, 39 foram reagentes ao antígeno acidificado tamponado e 15 foram confirmadas no 2-ME + SAL. Apenas um macho foi reagente, o que resultou em prevalência de 1,19%. Das 15 amostras de material de bursites coletadas, uma foi reagente no teste 2-ME + SAL. Os fatores de risco identificados no estudo foram: ocorrência de abortamentos, venda de animais sem exames e não realização de exames que atestem os animais antes da inclusão nos rebanhos para abate. Concluiu-se que a infecção por Brucella abortus em animais abatidos nos frigoríficos avaliados está presente e ocorre com maior frequência em fêmeas.

ABSTRACT: The aims of the current study were to investigate the prevalence of bovine brucellosis, to correlate laboratory results of serum reactive samples to the serology of animals presenting serous pouches, and to identify possible risk factors for the development of the disease. In order to do so, 1,265 bovine blood samples were collected from male and female animals bred in different counties in Maranhão state, Brazil, and in other regions of the country. The animals were slaughtered in two slaughterhouses controlled by the Federal Inspection Service (FIS), and in two others controlled by the Municipal Inspection Service (MIS), of regions such as Açailândia and Imperatriz. Samples were tested for specific antibodies by using buffered acidified antigen (BAA) and 2-mercaptoethanol in combination with slow serum agglutination (2-ME + SSA). Additionally, an epidemiological questionnaire was applied to 100 owners, who provided animals to the slaughterhouses, to enable investigating the risk factors for bovine brucellosis. Fifteen serous pouches of animals presenting this lesion were also collected at slaughter time. Thirty-nine out of the analyzed samples were reacted to BAA, whereas 15 reacted to the 2-ME + SSA test; only one male was reagent and it resulted in 1.19% prevalence. One out of the 15 collected serous pouches reacted to the 2-ME + SSA test. The risk factors identified in this study were: the incidence of miscarriages, the sale of animals without previous examination, and the failure in testing the animals before introducing them in herds and before slaughter. It was possible to conclude that the animals slaughtered in the herein evaluated slaughterhouses were infected with Brucella abortus, as well as that this infection prevailed in females.

O objetivo do presente trabalho foi determinar a ocorrência e os fatores de risco associados à identificação da anemia infecciosa equina (AIE) em equídeos de tração na Cidade de São Luís - MA. Amostras de sangue de 154 equídeos apreendidos em vias públicas, pelo Setor de Apreensão de Animais de Tração da Secretaria Municipal de Urbanismo e Habitação, foram coletadas no período de abril a agosto de 2011. Foram analisadas as fichas de atendimento individual para a determinação dos fatores de risco associados a esta enfermidade. Dos animais analisados, 5,20% (8/154) foram positivos. Dentre os fatores de risco avaliados, presença de insetos, permanência dos equídeos em aglomerações por mais de oito horas diárias, condição corporal, estado nutricional, uso repetido de uma mesma agulha entre diferentes equídeos, ocorrência de episódios febris, mucosas amareladas e ausência de conhecimento sobre AIE apresentaram significância estatística (P<0,05) associada à AIE. Os resultados do estudo indicaram que a ocorrência da AIE para equídeos de tração apreendidos na Cidade de São Luís - MA foi baixa. Mesmo assim há a necessidade da realização de diagnóstico sistemático e monitoramento dos animais, além da implantação de medidas de controle, realização de exames sorológicos e implementação da legislação vigente.

The objective of this study was to determine the occurrence and risk factors associated with the identification of equine infectious anemia (EIA) in traction equines in the city of São Luiz - MA. We collected blood samples from 154 equines seized on public roads by the Sector of Animal Traction Seizure of the Municipal Urban Development and Housing Department between April and August of 2011. We analyzed the medical records to determine the individual risk factors associated with this disease. Of the animals tested, 5.20% (8/154) were positive. Among the risk factors evaluated, the presence of insects, permanence of the animals in agglomerations for longer than 8 hours per day, body condition, nutritional status, repeated use of the same needle among different equines, occurrence of febrile episodes, yellowish mucous and lack of knowledge on IEA showed to be statistically significant (P <0.05) associated with the IEA. The study results indicate that the occurrence of the IEA in traction equines in the City of São Luiz - MA was low. Still there is the necessity of systematic diagnosis and monitoring of animals, as well as employment of control measures, serological tests and implementation of current legislation.

O presente estudo teve como objetivo determinar a frequência e os fatores de risco para a infecção pelo vírus da diarreia viral bovina (BVDV) em fêmeas bovinas leiteiras na região amazônica maranhense. Amostras de soro de animais não vacinados contra o BVDV e provenientes de 40 propriedades foram submetidas à técnica de ELISA indireto. Em cada propriedade avaliada, aplicou-se ainda um questionário epidemiológico para investigar os fatores de risco que poderiam estar associados à infecção pelo vírus. As amostras foram coletadas de animais que apresentavam ou não sinais clínicos sugestivos da infecção pelo BVDV. Das 400 amostras de soro analisadas, 61,5% (n=246) foram reagentes com a detecção de bovinos sorologicamente positivos em 95% (n=38) das propriedades. Dentre os fatores de risco avaliados, produção de leite (1-5L), ausência de assistência veterinária, uso de monta natural e monta natural associada à inseminação artificial apresentaram significância estatística (P<0,05) associada à infecção pelo BVDV. Os resultados do estudo indicam que a frequência de anticorpos contra o BVDV foi elevada na região amazônica maranhense e que os fatores relacionados às características das propriedades e ao manejo foram associados ao risco de infecção pelo BVDV.

This study was performed in order to determine the frequency of bovine viral diarrhea virus (BVDV), and the main factors related to the frequency of the infection in dairy cows not vaccinated against BVDV from Maranhense Amazon region. Serum samples were submitted to an indirect ELISA test for detection of BVDV antibodies. An epidemiological questionnaire was applied for each herd to investigate variables that could beassociated with this infection. Serum samples were collected from 40 farms, with or without clinical signs of BVDV infection. From 400 serum samples examined, 61.5% (n=246) in 95% (n=38) of the herds were positive for ELISA. Variables identified as risk factors such as milk production (1-5L), absence of veterinary assistance, use of natural breeding or natural breeding associated with artificial insemination. These risk factors presented statistical significance (P<0.05) associated to BVDV infection. These results indicate that BVDV infection is high in the studied region and that factors related to the herd characteristic and management were associated with the risk of infection by BVDV.

Amostras de sangue foram coletadas de bovinos que apresentaram sinais de anemia, letargia, fraqueza e perda de peso. Trypanosoma vivax foi detectado em esfregaços sanguíneos de um bezerro. Este trabalho registra, pela primeira vez, a ocorrência de T. vivax no Estado do Maranhão, Região nordeste do Brasil, e fornece os dados biométricos do parasito.

Blood samples from cattle presenting signs of anemia, lethargy, weakness and general weight loss were collected. Trypanosoma vivax was detected in the blood smears of a calf. This paper reports the first recorded occurrence of T. vivax in the state of Maranhão, northeastern region of Brazil, and provides the biometrical data of the parasite.