RESUMEN El principal vector intradomiciliar del Trypanosoma cruzi en el Cono Sur de América Latina ha sido el Triatoma infestans. En la última década se ha declarado la interrupción de transmisión de la enfermedad por esta especie en varias áreas endémicas. El T. cruzi interactúa con triatominos silvestres y reservorios mamíferos, por ello hay un riesgo permanente de la invasión de viviendas por especies secundarias como T. sordida y nativas de focos selváticos como: T. guasayana, T. guasu, Panstrongylus geniculatus, P. megistus que deben ser vigiladas para evitar el proceso de colonización de las viviendas. El objetivo fue evaluar el potencial riesgo de transmisión de la enfermedad de Chagas por especies secundarias de triatominos capturados en etapa de vigilancia entomológica en áreas endémicas de las regiones Oriental y Occidental del país. Se aplicaron técnicas moleculares asociadas a indicadores entomológicos a un total de 759 ejemplares de 4 especies de triatominos capturados en las dos regiones. Se detectó colonización del 19% por la especie T. sordida en viviendas del Departamento de Concepción. De las especies T. guasayana, T. guasu, P. geniculatus consideradas especies del ambiente selvático, se capturó al menos 1 ejemplar en cada departamento en el intradomicilio. De 759 ejemplares analizados, se detectaron 17 con infección natural con T. cruzi (2,2%), de los cuales 2 eran de P. geniculatus y 1 de T. guasayana, ambos del intradomicilio. Estos hallazgos ponen en evidencia que existe un potencial riesgo de transmisión de T. cruzi por estas especies de triatominos.

ABSTRACT The main intradomiciliary vector of Trypanosoma cruzi in the Southern Cone of Latin America has been Triatoma infestans. In the last decade, the decrease in transmission of the disease by this species has been declared in endemic areas. T. cruzi interacts with wild triatomines and mammalian reservoirs, therefore there is a permanent risk of invasion of dwellings by secondary species such as T. sordida and native to jungle foci such as: T. guasayana, T. guasu, Panstrongilus geniculatus, P. megistus that should be monitored to avoid the process of colonization of dwellings. The objective of the study was to evaluate the potential risk of transmission of Chagas disease by secondary triatomine species captured in the entomological surveillance stage in endemic areas of the Eastern and Western regions of the country. Molecular techniques associated with entomological indicators were applied to a total of 759 specimens of 4 species of triatomines captured in the two regions. Colonization of 19% by the species T. sordida was detected in dwellings of the department of Concepción. At least one specimen of the species T. guasayana, T. guasu, P. geniculatus considered species of the jungle environment was captured in each department in the intradomiciliary environment. Of the total number of specimens analyzed (759), 17 were detected with natural infection with T. cruzi (2.2%), of which 2 were of P. geniculatus and 1 of T. guasayana both from intradomiciliary environment. These findings show that there is a potential risk of transmission of T. cruzi by these triatomine species.

Abstract Background: COVID-19 is an eminently respiratory transmissible infection of respiratory initiation, the existence of other sources of contagion is discussed. The ACE2 viral receptor has also been detected in the uterus and vagina; Hence, the involvement of the SARS-CoV-2 virus on the genitourinary system and its possible repercussions on pregnancy has been raised. Aim: To determine the presence of SARS-CoV-2 in endocervical samples of women with COVID-19 in the departments of Paraguay. Methods: Designed as a prospective observational of transverse cohort. Two hundred women were recruited from August 2020 to February 2021, with no more than 48/72 hours of a previous positive nasopharyngeal swab result for SARS-CoV-2 by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (rt-RT-PCR) and who agreed to participate in the study. A clinical epidemiological questionnaire was completed. The samples were taken in health services of the MSPYBS (Public Ministry of Health and Social Welfare), homes and shelters in the different departments of Paraguay. Each patient underwent a swab (dacron swabs) or endocervical cytobrush for the detection of SARS-CoV-2 by rt-RT-PCR. Results: Women recruited had a mean age of 46.5 years (95% CI 31,562.5). They reported contagion with SARS-CoV-2: 75.5% in the community, 13.5% at home, 8.5% in the place of work and 1.5% abroad. The clinical manifestations were: 30% flu syndrome, 22.5% fever, 20% cough, 15.5% anosmia, 15.5% digestive disorders, among other symptoms. The swabs or endocervical cytobrush samples subjected to rt-RT-PCR for the detection of SARS-CoV-2 were negative in the 200 study women. Discussion: It should be noted that the vaginal samples were taken within 24-72 hours after obtaining a positive result for SARS-CoV-2 in the nasopharyngeal swab and that 62.5% of the women were hospitalized in respiratory modules. The reason for the negativity of the exams and their significance are discussed. Conclusión: No SARS Cov-2 infection was detected in the endocervical region of 200 women with clinical manifestations of COVID 19 and evaluated within 48/72 hours of a positive nasopharyngeal result for SARS Cov-2. The results in the study population agree with the findings of other studies reported in the literature.

Resumen Introducción: El COVID-19 es eminentemente una infección de transmisión e inicio respiratorio, se discute la existencia de otras fuentes de contagio. El receptor viral ACE2 también ha sido detectado en el útero y en la vagina; de allí se ha planteado el compromiso del virus SARS-CoV-2 sobre el sistema genitourinario y sus posibles repercusiones en el embarazo. Objetivo: Determinar la presencia de SARS-CoV-2 en muestras endocervicales de mujeres con COVID-19 en departamentos del Paraguay. Pacientes y Métodos: Diseño observacional prospectivo, de corte transverso. Se reclutaron 200 mujeres desde agosto 2020 hasta febrero 2021, con no más de 48/72 h de un resultado previo positivo de hisopado nasofaríngeo para SARS-CoV-2 por retrotranscriptasa reversa-reacción en cadena de la polimerasa (en inglés rt-RT-PCR) y que aceptaron ingresar al estudio. Se llenó un cuestionario clínico epidemiológico. Las tomas de muestras se realizaron en servicios de salud del Ministerio de Salud Pública y Bienestar Social (MSP y BS), domicilios y albergues de los distintos departamentos de Paraguay. Cada paciente fue sometida a un hisopado con hisopos de dacron o citobrush endocervical para la detección de SARS-CoV-2 por rt RT-PCR. Resultados: Las mujeres estudiadas tenían una edad media de 46,5 años (IC 95% 31,5-62,5). Refirieron contagio comunitario con SARS-CoV-2 en 75,5%, 13,5% en el hogar, 8,5% en el lugar de trabajo y 1,5% en el extranjero. Las manifestaciones clínicas fueron: 30%, síndrome gripal, fiebre 22,5%, tos 20%, anosmia 15,5%, trastornos digestivos 15,5%, y otros se presentaron con menor frecuencia. Las muestras de hisopados o citobrush endocervical sometidas a rt-RT-PCR para la deteccción de SARS Cov-2, resultaron negativas en las 200 mujeres de estudio. Discusión: Cabe destacar que las muestras vaginales fueron tomadas dentro de las 24-72 h de haber obtenido un resultado positivo para SARS-CoV-2 en el hisopado nasofaríngeo y que 62,5% de las mujeres se encontraban internadas en módulos respiratorios. Se discute la razón de la negatividad de los exámenes y su trascendencia. Conclusión: No se detectó infección con SARS-CoV-2 en la región endocervical de 200 mujeres con manifestaciones clínicas de COVID 19 y evaluadas dentro de las 48/72 h de un resultado positivo nasofaríngeo para SARS Cov-2. Los resultados en la población de estudio concuerdan con otros estudios reportados en la literatura científica.

ABSTRACT When molecular techniques for the detection of natural infection and blood meal source in secondary vectors of Chagas disease are applied to specimens captured in endemic areas, historically occupied by Triatoma infestans, provide more accurate answers to questions about transmissibility of the illness and further contribute to the epidemiological studies. The aim of this study was to evaluate the impact of intra and peridomiciliary infestation of Triatoma sordida in households from the departments of the Eastern Region of Paraguay, under entomological surveillance during the period 2007 to 2015, by using the molecular biomarkers technology. A total of 559 specimens of T. sordida captured in 253, 91 and 52 households from Paraguarí, San Pedro and Cordillera departments, respectively, were analyzed. The infestation detected was from 24% to 48% as well as a high intradomicialiary colonization from 5% to 36% in the three departments. The molecular detection of natural infections ranged from 14% to 44% and in 111 specimens the meal source was identified. The molecular marker cytochrome b allowed to demonstrate, for the first time, high frequency of triatomines with human blood as a food source, mainly in Cordillera as it was determined in 82% (28/34) of the T. sordida captured. These findings demonstrate a progress of T. sordida into the ecological niche of T. cruzi and the abillity of this secondary species as a vector of the transmission of T. cruzi in communities from the Eastern Region of Paraguay.

RESUMEN Las técnicas moleculares para la detección de infección natural y fuente de alimentación en vectores secundarios de la enfermedad de Chagas cuando son aplicadas a ejemplares capturados en áreas endémicas, históricamente ocupadas por Triatoma infestans, proporcionan a las investigaciones epidemiológicas respuestas más exactas con relación a la transmisibilidad de la enfermedad. El presente estudio tiene como objetivo emplear biomarcadores moleculares para evaluar el impacto de la infestación intra y peridomicilar de Triatoma sordida en viviendas bajo vigilancia entomológica de departamentos de la Región Oriental del Paraguay en el período 2007 al 2015. Un total de 559 ejemplares de T. sordida capturados en 253, 91 y 52 viviendas de los departamentos Paraguarí, San Pedro y Cordillera, respectivamente fueron analizados. La infestación detectada fue del 24% al 48% así como una elevada colonización intradomiciliar del 5% al 36% en los tres departamentos. La detección molecular de infección natural osciló entre el 14% y 44%; y en 111 ejemplares se determinó la fuente de alimentación. El marcador molecular citocromo b permitió demostrar por vez primera un elevado porcentaje de triatominos con sangre humana como fuente de alimentación, principalmente en Cordillera con un 82% (28/34 T. sordida capturados). Estos hallazgos dejan en evidencia el avance del T. sordida en la ocupación del nicho ecológico de T. cruzi y la capacidad de esta especie secundaria como vector en la transmisión de T. cruzi en comunidades de la Región Oriental.

ABSTRACT In the present study we evaluated entomological indicators (infection rates, colonization and natural infection) of Triatoma sordida specimens captured in the intra and peridomicile of households of the Paraguayan Chaco in the period 2014 to 2016. The objective was to compare with the previously reported findings in the period 2010 to 2013 in the same region. In addition, the detection of the blood meal source has been incorporated as a complement to define the risk of domiciliation of this secondary vector. Molecular techniques associated with entomological and epidemiological indicators were applied to 220 T. sordida specimens captured in 67 dwellings in 24 locations in the Chaco. Infestation and colonization by T. sordida was detected in the intradomicile 13/67 (19%) and 5/13 (38%) and in the peridomiciliary 54/67 (81%) and 43/54 (80%), respectively. Infection with T. cruzi was detected in 17.3% of the samples analyzed. The blood meal source could be detected in only 13 of 220 specimens (6%), all were positive for chicken blood and corresponded to capture in the peridomicile. The rate of intradomiciliary infestation was 19%, higher than in previous years and similar to the historically endemic areas of the Western Region (18%-20%). The risk of intradomiciliary transmission remains high because in 3 out of 5 dwellings with nymphs of T. sordida, the specimens were infected with T. cruzi. The entomological indicators obtained in the present study agree with previous results of our team, and confirm the vectorial capacity of this secondary triatomine in the transmission of Chagas disease.

RESUMEN En el presente estudio evaluamos indicadores entomológicos (índices de infección, colonización e infección natural) de ejemplares de Triatoma sordida capturados en el intra y peridomicilio de viviendas del Chaco Paraguayo en el período 2014 al 2016. El objetivo fue comparar con los hallazgos previamente reportados en el periodo 2010 al 2013 en la misma región. Además se ha incorporado la detección de fuente de alimentación como complemento para definir el riesgo de domiciliación de este vector secundario. Se aplicaron técnicas moleculares asociados a indicadores entomológicos y epidemiológicos a 220 ejemplares de T. sordida capturados en 67 viviendas de 24 localidades del Chaco. Se detectó infestación y colonización por T. sordida en el intradomicilio 13/67 (19%) y 5/13 (38%) y en el peridomicilio 54/67 (81%) y 43/54 (80%), respectivamente. Se detectó infección con T. cruzi en un 17,3% de los ejemplares analizados. La fuente de alimentación pudo detectarse en tan solo 13 de 220 ejemplares (6%), todos resultaron positivos para sangre de gallina y correspondían a captura en el peridomicilio. El índice de infestación intradomiciliar fue del 19%, superior al de años anteriores y similar a las zonas históricamente endémicas de la Región Occidental (18%-20%). El riesgo de transmisión intradomiciliar sigue siendo elevado porque en 3 de 5 viviendas con ninfas de T. sordida, los ejemplares estaban infectados con T. cruzi. Los indicadores entomológicos obtenidos en el presente estudio concuerdan con resultados previos de nuestro equipo, y confirman la capacidad vectorial de este triatomino secundario en la transmisión de la enfermedad de Chagas.

BACKGROUND Since the early 1990s, programs to control Chagas disease in South America have focused on eradicating domiciliary Triatoma infestans, the main vector. Seroprevalence studies of the chagasic infection are included as part of the vector control programs; they are essential to assess the impact of vector control measures and to monitor the prevention of vector transmission. OBJECTIVE To assess the interruption of domiciliary vector transmission of Chagas disease by T. infestans in Paraguay by evaluating the current state of transmission in rural areas. METHODS A survey of seroprevalence of Chagas disease was carried out in a representative sample group of Paraguayans aged one to five years living in rural areas of Paraguay in 2008. Blood samples collected on filter paper from 12,776 children were tested using an enzyme-linked immunosorbent assay. Children whose serology was positive or undetermined (n = 41) were recalled to donate a whole blood sample for retesting. Their homes were inspected for current triatomine infestation. Blood samples from their respective mothers were also collected and tested to check possible transmission of the disease by a congenital route. FINDINGS A seroprevalence rate of 0.24% for Trypanosoma cruzi infection was detected in children under five years of age among the country’s rural population. Our findings indicate that T. cruzi was transmitted to these children vertically. The total number of infected children, aged one to five years living in these departments, was estimated at 1,691 cases with an annual incidence of congenital transmission of 338 cases per year. MAIN CONCLUSION We determined the impact of vector control in the transmission of T. cruzi, following uninterrupted vector control measures employed since 1999 in contiguous T. infestans-endemic areas of Paraguay, and this allowed us to estimate the degree of risk of congenital transmission in the country.

ABSTRACT The Gran Chaco is an eco-region that includes Argentina, Bolivia and Paraguay; where the vectorial transmission of Chagas disease by Triatoma infestans (main vector) is a public health problem up to date. The Paraguayan Chaco occupies 25% of this region, characterized by low population density and dispersed locations. The aim of this study was to determine the potential role of the specie Triatoma sordida (secondary vector) in the domestic cycle of transmission of Trypanosoma cruzi. Molecular techniques associated with entomological and epidemiological indicators were applied in 436 specimens of T. sordida captured in 147 dwellings of the Paraguayan Chaco. Infestation rate and colonization by T. Sordida was detected in the intradomicile and peridomiciliary in 12 (8.2%) and 79 (53.7%) of the 147 dwellings, respectively. In 12 houses were colonization was observed, at least one specimen was PCR-T. cruzi positive, and in two of them genotype TC2 of T. cruzi were detected innymphs by molecular characterization. Adults and nymphs in the peridomiciliary of 4 houses were positive for genotype TC1.A high risk of indoor transmission of T. cruzi is estimated in 87%. These results demonstrate adaptive capacity of this specie in the intradomicile, and increased vector potential to transmit Chagas disease in the Paraguayan Chaco.

RESUMEN El gran Chaco es una eco-región que incluye Argentina, Bolivia y Paraguay; donde la trasmisión vectorial de la enfermedad de Chagas por Triatoma infestans (vector principal), constituye hasta la fecha un problema de salud pública. El Chaco paraguayo ocupa el 25% de esta región, caracterizada por una baja densidad poblacional y localidades dispersas. El objetivo de este estudio fue determinar el rol potencial de la especie Triatoma sordida (vector secundario) en el ciclo doméstico de transmisión de Trypanosoma cruzi. Se aplicaron técnicas moleculares asociadas a indicadores entomológicos y epidemiológicosa 436 ejemplares de T. sordida capturados en 147 viviendas del Chaco Paraguayo. Se detectó infestación y colonización en el intradomicilio y peridomicilio por T. sórdida en 12 (8.2%) y 79 (53.7%) viviendas de las 147 evaluadas, respectivamente. Al menos un ejemplar infectado con T. cruzi fue detectado por PCR en las 12 viviendas con colonización intradomiciliar y en dos de ellas por caracterización molecular se detectó en ninfas el genotipo TC2. Adultos y ninfas en el peridomicilio de 4 viviendas dieron positivo para el genotipo TC1. Se estima un elevado riesgo de transmisión de T. cruzi intradomiciliar del 87%. Estos resultados evidencian capacidad adaptativa de esta especie en el domicilio, y un incremento de su potencial vectorial para transmitir la enfermedad de Chagas en el Chaco Paraguayo.

ABSTRACT Leishmania/HIV coinfection is frequent and generally they are visceral leishmaniasis cases (VL). However, Leishmania infantum, the etiological agent, could also cause cutaneous forms in HIV-positive patients. The parasites reach the skin through diffusion, a new infection or a reactivation of a latent infection. There are molecular techniques that confirm the diagnosis and characterize Leishmania species. These patients also present other opportunistic infections like histoplasmosis, well known as an AIDS marker and caused by Histoplasma capsulatum. In this work, we describe one HIV/histoplasmosis/VL coinfection case associated to cutaneous lesions. The patient was a male, adult, coming from the city of J.A. Saldívar, HIV positive (since 2010), without antiretroviral treatment. He was hospitalized in 2012 at the Instituto de Medicina Tropical (IMT) with fever, anemia, hepatosplenomegaly, bone marrow smear and rK39 both negative for Leishmania. He was treated with Amphotericin B. In 2013, he presented a prolonged febrile syndrome and Leishmania amastigotes were observed in the bone marrow. In 2014, the patient presented ulcerations on the face where H. capsulatum fungal spores and Leishmania amastigotes were observed. L. infantumwas confirmed by molecular methods. In the case under study we can conclude that the dermal manifestation was caused by L. infantum according to the characterization by molecular techniques, and simultaneously H. capsulatum was present due to his immunological status. It should be emphasized the importance of the differential diagnosis in order to apply the right treatment and also the uncommon clinical manifestation that is not associated to this Leishmania species.

RESUMEN La coinfección Leishmania/VIH es frecuente y por lo general son casos de leishmaniosis visceral (LV), sin embargo, Leishmania infantum, el agente etiológico, también puede causar formas cutáneas en pacientes VIH-positivos. Los parásitos llegan a la piel por difusión, en una nueva infección o reactivación de una infección latente. Existen técnicas moleculares que confirman el diagnóstico y caracterizan a la especie. En estos pacientes también se presenta como infección oportunista la histoplasmosis, reconocida como marcador de SIDA y causada por Histoplasma capsulatum. En este trabajo describimos un caso de coinfección SIDA, histoplasmosis y LV asociado a lesiones cutáneas. Paciente de sexo masculino, adulto, residente en J.A. Saldívar, VIH positivo (2010), sin tratamiento antirretroviral. En el 2012 es internado en el Instituto de Medicina Tropical (IMT) con fiebre, anemia, hepato-esplenomegalia, frotis de médula ósea y rk39 negativos para Leishmania, recibe tratamiento con Anfotericina B. En el 2013 presenta síndrome febril prolongado y en médula ósea se encuentran amastigotes de Leishmania sp. En el 2014 presenta úlceras en el rostro en las que se observan es porosmicóticos de H. capsulatum y amastigotes de Leishmania sp. Se confirma L. infantum por técnicas de biología molecular. En el caso estudiado concluimos que la presentación dérmica es causada por L. infantum, caracterizada por técnicas moleculares, eH. capsulatum que se presenta en concomitancia debido al estado inmunológico. Cabe resaltar la importancia del diagnóstico diferencial para aplicar el tratamiento correcto y además la manifestación clínica que normalmente no es asociada a esta especie de Leishmania.

Abstract INTRODUCTION: Paraguay was among the 16 countries that reported zero indigenous malaria cases in 2014. METHODS: A cross-sectional observational descriptive study was performed in 100 adults from Santa Teresa, Paraguay. Parasite detection was carried out using seminested multiplex polymerase chain reaction (PCR) and microscopy. RESULTS Among the participants, 44% were female and 56% were male, and 89% had a malaria history. No parasites were detected with either of the methods. CONCLUSIONS: There were no asymptomatic cases in Santa Teresa, and this finding is very promising. A longitudinal study should be performed to confirm that there are no asymptomatic cases in this locality.

Adenoviruses cause a variety of diseases that range from mild to fatal in vulnerable patients. Its evolution occurs as a process of selection pressure; for example, genetic recombination generates intermediate strains that can be more infectious or pathogenic than parental strains. This study sought to determine the diversity of circulating adenoviruses in Paraguayan children less than 5 years of age hospitalized with acute lower respiratory infection, by using molecular biology and bioinformatics tools, though amplification of penton, hexon and fiber genes in 26 samples of nasopharyngeal aspirates. It was demonstrated the circulation of three species: B (4/26), C (21/26), and D (1/26), as well as recombination events corresponding to the HAdV-D isolate, with at least three different genotypes (D49, D9 y D15). The HAdV-D are associated with gastrointestinal or ocular diseases, and less commonly with respiratory infections. Recently, however, it has been reported changes in behavior of these viruses due to recombination, allowing them to expand their host cell repertoire. These data extend the knowledge about the genetic diversity of HAdV in Paraguay and strongly support the importance of genomic analysis using bioinformatics tools in epidemiological surveillance of emerging recombinant strains of HAdV.

Los adenovirus humanos (HAdV) causan una diversidad de patologías que pueden ser leves o incluso mortales en pacientes vulnerables. Su evolución ocurre conforme actúa una presión de selección; por ejemplo, la recombinación genética genera cepas híbridas que pueden ser más infectivas o más patogénicas que las parentales. Este estudio buscó determinar la diversidad de HAdV circulantes en niños paraguayos menores de 5 años hospitalizados por infección respiratoria aguda baja, mediante el uso de herramientas de biología molecular y bioinformática, para lo cual fueron amplificados los genes hexon, penton y fibra en 26 muestras de aspirados nasofaríngeos. Se demostró la circulación de tres especies: B (4/26), C (21/26), y D (1/26), así como también eventos de recombinación en el aislado correspondiente a HAdV-D, al menos con tres genotipos distintos (D49, D9 y D15). Los HAdV-D están asociados a enfermedades gastrointestinales, oculares y, menos comúnmente a infecciones respiratorias. Sin embargo, recientemente se han reportado cambios en el comportamiento de estos virus debido a recombinación, lo que les permite expandir su repertorio de células huésped. Estos datos amplían los conocimientos acerca de la diversidad genética de HAdV en el Paraguay y apoyan fuertemente la importancia de los análisis genómicos mediante herramientas bioinformáticas en la vigilancia epidemiológica de las cepas recombinantes emergentes de HAdV.

The Enterovirus genus is a viral group that affects a wide host range, including humans (species A, B, C and D), cause respiratory, gastrointestinal, and neurologic disease, among others, and are highly contagious. The symptoms range from mild to severe. The objective of this study was to perform a nucleotidic variation, phylogenetic and selective pressure analyses of the VP4 gene from the four enterovirus species that affect humans. Ninety-two nucleotide sequences (available in the GenBank database) were employed; they were edited with BioEdit software and aligned with Clustal W; the phylogenetic relationships were determined with MEGA6, and the evolutive pressures with SNAP and SLAC algorithms. It was found an intra-species nucleotide identity of at least 43,2% (species B) to 72,6% (species D). The more variable genotypes by species were EV-71 (A), Echovirus 2 (B), EV-118 (C), and EV-94 (D). The selective pressure analysis showed that VP4 gene of the four species evolves by negative pressure. This would indicate that the high mutation rate and recombination events do not have a significant role in the evolution of this gene, probably due to the internal localization of the VP4 protein.

El género Enterovirus es un grupo viral que afecta a un amplio rango de hospederos, entre ellos los humanos (especies A, B, C, y D), causan enfermedades respiratorias, gastrointestinales, neurológicas, y otras, y son altamente contagiosos. Los síntomas pueden ser leves o graves. El objetivo del trabajo fue analizar la variación nucleotídica, filogenética y de presión evolutiva de secuencias nucleotídicas del gen VP4 de las cuatro especies que afectan a los humanos. Se emplearon 92 secuencias nucleotídicas disponibles en la base de datos GenBank; éstas se editaron con el software BioEdit y se alinearon con Clustal W; las relaciones filogenéticas se determinaron con MEGA6, y las presiones evolutivas con los algoritmos SNAP y SLAC. Se encontró que la identidad nucleotídica mínima intra-especie fue de 43,2% (especie B) a 72,6% (especie D). Los genotipos más variables por especie fueron EV-71 (A), Echovirus 2 (B), EV-118 (C), y EV-94 (D). El análisis de presión evolutiva mostró que el gen VP4 en las cuatro especies evoluciona bajo presión selectiva negativa. Esto indicaría que la alta tasa mutacional y eventos de recombinación no tienen un rol significativo en la evolución de este gen, debido probablemente a la localización interna de la proteína VP4.

Extended spectrum beta-lactamases (ESBLs), are enzymes responsible for the hydrolysis of the beta-lactam ring and resistance to both cephalosporins and penicillins, except carbapenems, therefore inhibiting its therapeutics activity. Even though, detection of the phenotypic resistance mechanism by conventional methods is possible, only molecular methods allow identification of the gene responsible for the resistance. The objective of this retrospective study was to identify the blaCTX-M2, blaPER-2, blaSHV, blaTEM genes in ESBL-producing enterobacteriaceae isolates, recovered from clinical samples collected between July 2007 and April 2008, from two reference hospitals in Asunción, Paraguay. Molecular gene detection was performed by polymerase chain reaction using specifics oligonucleotides. Out of the tested 232 ESBL-producing isolates, 83% (n=192) carried at least one of the bla genes as follows; 49% (94/192) blaCTX-M2, 45% (86/192) blaSHV, 40% (77/192) blaTEM and 7% (13/192) blaPER-2. In the rest 17% (n=40) none of the genes included in this study was detected; in 47% (90/192) more than one gene was detected, resulting blaCTX-M2 + blaTEM + blaSHV as the most frequent combination in 32 isolates. The presence of blaCTX-M2, as the most frequent codifying genes of BLEE is in agreement with previous reports in Paraguay and Argentina. This is the first report of the presence of blaTEM and blaSHV circulating in Paraguay. It is of much importance the study of others codifying resistance genes, taking into account the emergence of other BLEE in the region, such as blaCTX-M15, predominantly with ceftazidimase activity.

Las betalactamasas de espectro extendido (BLEE), son enzimas responsables de la hidrólisis del anillo betalactámico de penicilinas y cefalosporinas, excepto carbapemenes, inhibiendo así su actividad terapéutica. Si bien es posible la detección fenotípica de este mecanismo de resistencia por métodos convencionales, sólo los métodos moleculares permiten la identificación del gen responsable de dicha resistencia. El objetivo de este estudio descriptivo retrospectivo fue identificar los genes blaCTX-M2, blaPER-2, blaSHV y blaTEM, en aislamientos de enterobacterias productoras de BLEE,; de muestras clínicas colectadas entre julio 2007 y abril 2008, provenientes de dos hospitales de referencia de Asunción, Paraguay. La detección molecular de los genes se realizó por reacción en cadena de la polimerasa empleando oligonucleótidos específicos. De los 232 aislados BLEE analizados, el 83% (n=192) portó al menos un gen bla, en el 17% (n=40) restante no fue detectado ninguno de los genes incluido en el estudio. Se observaron las siguientes frecuencias: 49% (94/192) blaCTX-M2, 45% (86/192) blaSHV, 40% (77/192) blaTEM y 7% (13/192) blaPER-2. En el 47% (90/192) se detectó más de un gen, siendo la combinación blaCTX-M2+blaTEM+blaSHV, la más frecuente observada en 32 aislados. El blaCTX-M2 como el gen más frecuente en este estudio; concuerda con lo reportado en nuestro país y en Argentina. Este es el primer reporte de la presencia de blaTEM y blaSHV en Paraguay. Es de gran importancia el estudio de otros genes codificantes de resistencia, considerando la emergencia de otras BLEE en la región como blaCTX-M15 con actividad predominantemente ceftazidimasa.

Introduction: Staphylococcus aureus is a bacterium with special characteristics of virulence and resistance to the antibiotics used in clinical practice, and whose spread presents a significant public health challenge. Objective: To identify the presence of S. aureus colonizing the oral cavities of children presenting for treatment at a dental clinic in Asunción, Paraguay and determine its sensitivity or resistance to antibiotics. Materials and Methods: We conducted a descriptive observational study of children aged 2-15 years from August to September 2013. Swab samples from oral cavities were taken and cultivated in mannitol salt agar. Isolates from S. aureus were tested for susceptibility to 11 antibiotics and molecular methods were used to identify the presence of the mecA gene and Panton-Valentine leukocidin (PVL) virulence factor. A questionnaire was used to identify socio-demographic and risk factors associated with S. aureus infection. Results: The study included 112 children. S. aureus was isolated in 37 swab samples (33%), and resistance to at least one antibiotic was found in 94.6% (35) of these. Resistance was found to penicillin in 89%, chloramphenicol in 16.2%, oxacillin in 10.8%, erythromycin in 8%, clindamycin in 8%, gentamicin in 5.4%, and 1 isolate (2.7%) was identified with intermediate resistance to ciprofloxacin. Multiple-drug resistance was found in 4 isolates containing the mecA gene. No sample with the PVL virulence factor was detected. Conclusion: The high prevalence of multidrug-resistant S. aureus in children with no risk factors such as prior hospitalization or antibiotic administration implies a high risk of endogenous infection as well as potential transfer of resistance determinants between microorganisms of the normal oral cavity flora.

Introducción: Staphylococcus aureus es un microorganismo que posee características particulares de virulencia y resistencia a los antibióticos para uso clínico cuya diseminación es de gran importancia en salud pública. Objetivo: Identificar S. aureus sensibles y resistentes a antimicrobianos, colonizantes en cavidad bucal de niños que concurrieron para un tratamiento a una Clínica Odontológica en Asunción. Materiales y Métodos: En este estudio descriptivo, observacional realizado de agosto a septiembre de 2013, se incluyeron niños de 2 a 15 años de edad. Hisopados de cavidad bucal fueron colectados y cultivados en agar-manitol-sal. Los aislados de S. aureus fueron caracterizados respecto a la susceptibilidad a 11 antibióticos y por métodos moleculares se buscó la presencia del gen mecA y del factor de virulencia pvl. Se empleó un cuestionario sobre datos socio-demográficos y factores de riesgo asociados a infección con S. aureus. Resultados: Se incluyeron 112 niños. Se aisló S. aureus en 37 (33%) hisopados y 35 (94,6%) aislados presentaban resistencia a al menos un antibiótico. Resultaron resistentes a: Penicilina (89%), Cloranfenicol (16,2%), Oxacilina (10,8%), Eritromicina (8%), Clindamicina (8%), Gentamicina (5,4%) y un aislado con resistencia intermedia a Ciprofloxacina (2,7%). Cuatro aislados de S. aureus presentaban resistencia a múltiples drogas, los mismos portaban el gen mecA. No se detectó portación del factor de virulencia PVL. Conclusión: La elevada portación en cavidad oral de S. aureus multiresistentes en niños sin factores de riesgo como hospitalización previa o consumo de antibióticos, implica un alto riesgo para posibles infecciones endógenas, además del potencial de transferencia de determinantes de resistencia entre gérmenes de flora bucal normal.