Resumo A finalidade do presente estudo foi avaliar a presença de anticorpos anti- Toxocara, em frangos de corte naturalmente infectados (n = 189), no Norte do Paraná, Sul do Brasil. Os frangos foram criados em sistema semi-intensivo, em pequenas propriedades rurais (n = 7). Os testes sorológicos foram realizados pela técnica de ELISA, para detecção de anticorpos IgY (IgG), com pré-adsorção do soro com antígenos de Ascaridia galli. Foi observada uma prevalência de 67,7% (128/189; IC 95% = 61,1-74,4). A frequência de animais soropositivos por propriedade variou de 29,6% a 100%. Os valores da Densidade Ótica e do Índice de Reatividade observados no teste de ELISA indicaram uma possível cronicidade de infecção dos frangos avaliados. Não foi observada correlação entre a positividade dos animais, quando comparada a área (p = 0,382) e a densidade populacional de cães por propriedade (p = 0,785). O presente estudo verificou uma alta prevalência de anticorpos anti-Toxocara em frangos de corte criados em sistema semi-intensivo e oferece dados que apontam esses animais como bons indicadores de contaminação ambiental por agentes de larva migrans . Estudos futuros são necessários para avaliar os fatores de risco associados e a possibilidade da transmissão de toxocaríase ao ser humano pela ingestão de carne de frango.

Abstract The aim of this study was to evaluate the presence of anti-Toxocara antibodies in naturally infected broiler chickens (n = 189) from the state of Paraná, southern Brazil. The chickens were reared in a semi-intensive system by small family farmers (n = 7). An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was performed to detect the presence of anti- Toxocara spp. IgY after serum adsorption with Ascaridia galli antigens. An overall seroprevalence of 67.7% (128/189; 95% CI = 61.1-74.4) was observed. The frequency of positive animals by farm ranged from 29.6% to 100%. The optical density and reactivity index values observed in ELISA test indicated the possible chronicity of infection of the evaluated chickens. Associations between the presence of antibodies and the area where the chickens were reared (p = 0.382) or the population density of dogs on the farm (p = 0.785) were not observed. This study shows a high prevalence of Toxocara spp. antibodies in broiler chickens reared in semi-intensive systems and provides evidence that chickens are a good indicator of environmental contamination by larva migrans agents. Further studies are necessary to assess the risk factors associated with poultry infection and the likelihood of toxocariasis transmission to humans via the ingestion of free-range chicken meat.

Resumo O objetivo deste estudo foi o de avaliar a cinética e a avidez de anticorpos anti-Toxocara canis, em coelhas infectadas experimentalmente com ovos embrionados de Toxocara canis. Foram utilizados 17 coelhos New Zealand de linhagem branca, com quatro meses de idade, distribuídos em dois grupos. No grupo experimental, doze coelhas foram infectadas, oralmente, com 1.000 ovos larvados de T. canis. Um segundo grupo (n=5), não infectado, foi utilizado como controle. Nos dias 7, 14, 21, 28 e 60 pós-infecção (DPI), foram coletadas amostras de soro para análise. O teste de ELISA indireto foi realizado para avaliar o índice de reatividade (IR) de anticorpos IgG anti-T. canis e para cálculo do índice de avidez (IA). A soroconversão nos animais ocorreu a partir do140 DPI, com verificação de alto IA (superior a 50%), com exceção de um animal, que apresentou médio IA. Aos 60 DPI, todos os animais foram soropositivos e mantiveram alto IA. Os dados mostram que em coelhos infectados por T. canis, anticorpos IgG específicos formam-se precocemente (14 DPI), apresentando alto índice de avidez e que se mantém durante o curso da infecção.

Abstract An evaluation was made of the kinetics and avidity of anti-Toxocara antibodies (IgG) in rabbits experimentally infected with embryonated Toxocara canis eggs. Seventeen four month old New Zealand White rabbits were distributed into two groups. In the experimental group, twelve rabbits were infected orally with 1,000 embryonated T. canis eggs. A second group (n = 5), uninfected, was used as a control. Serum samples were collected for analysis on days 7, 14, 21, 28 and 60 post-infection (DPI). An indirect ELISA test was performed to evaluate the reactivity index (RI) of IgG anti-T. canis antibodies and to calculate the avidity index (AI). The animals showed seroconversion from the 14th DPI, with high AI (over 50%) except for one animal, which presented an intermediate AI. At 60 DPI, all the animals were seropositive and maintained a high AI. The data indicated that specific IgG antibodies formed early (14 DPI) in rabbits infected with T. canis, with a high avidity index that persisted throughout the course of the infection.

O teste imunoenzimático (ELISA) constitui a ferramenta mais utilizada no diagnóstico individual da toxocaríase humana e/ou em inquéritos soroepidemiológicos para pesquisa de anticorpos IgG anti-Toxocara spp. Tendo em vista a elevada freqüência da toxocaríase (32,2% e 56,0%) observada em crianças atendidas em Unidades Básicas de Saúde de municípios do noroeste do Paraná, durante pesquisas realizadas ao longo dos últimos oito anos, o objetivo deste trabalho foi comparar estas frequências em crianças encaminhadas a uma unidade de Pneumologia do serviço de saúde pública da cidade de Maringá, noroeste do Estado do Paraná, Brasil e descrever os achados laboratoriais, clínicos e epidemiológicos das crianças soropositivas. A pesquisa foi realizada no Centro de Especialidades Regional - CISAMUSEP - entre julho de 2009 a julho de 2010, em crianças com idade entre um e 15 anos. De 167 crianças investigadas, sete (4,2%) apresentaram anticorpos IgG anti-Toxocara spp. Entre elas, duas (1,2%) crianças soropositivas apresentaram eosinofilia (baixos níveis), seis mostraram níveis elevados de IgE e cinco, teste alérgico positivo, principalmente para ácaros. Concluindo, no noroeste do estado do Paraná foram observados raros casos de crianças com toxocaríase envolvendo o trato respiratório e que foram atendidas por serviços públicos de Pneumologia ainda que na região estudada tenha sido observada elevada prevalência de toxocaríase em crianças assistidas pelas Unidades Básicas de Saúde (BHU).

The enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) is the most widely used tool to detect anti-Toxocara IgG antibodies for both serodiagnostic and seroepidemiological surveys on human toxocariasis. In the last eight years a high prevalence of toxocariasis (32.2-56.0%) has been reported in children attending public health units from municipalities in the state of Paraná, Brazil. Therefore, the aim of this work was to compare the frequency found among the general child population with that of children attending a public pneumology service in Maringá, Paraná, Brazil and describe the laboratorial, clinical and epidemiological findings. The research was conducted at the Consórcio Público Intermunicipal de Saúde do Setentrião Paranaense (CISAMUSEP) from July 2009 to July 2010 among children aged between one and 15 years. From a total of 167 children studied, only 4.2% (7/167) tested positive for anti-Toxocara spp. IgG antibodies and presented mild eosinophilia (2/7), increased serum IgE levels (6/7) and a positive allergy test for mites (5/7). The presence of pets (dogs or cats) at home did not correlate with the seroprevalence. In conclusion, cases of toxocariasis involving the respiratory tract are rare in children attending a public health pneumology unit in the northwestern region of Paraná State, despite the high prevalence of this type of toxocariasis among the infantile population attending Basic Health Units in the same geographical area.

O objetivo do presente estudo foi avaliar o perfil das enzimas creatinoquinase (CK), creatinoquinase-MB (CK-MB) e lactato desidrogenase (LDH) em ratos Wistar infectados com 250 (GI, n = 24) ou 1000 (GII, n = 24) ovos de Toxocara canis. Os animais foram avaliados nos dias 7, 15, 30, 60, 120 e 180 pós-infecção (DPI). Observou-se que apenas os animais do GI apresentaram aumento da atividade de CK e CK-MB aos 15 e 30 DPI, respectivamente. Anticorpos anti-T. canis foram detectados por ELISA nos animais infectados. Apesar da presença de infiltrado eosinofílico em três animais infectados, nenhuma larva foi recuperada do coração pela digestão ácida ou pela técnica de Baermann. Eosinofilia foi observada em todos os momentos em GI e GII, sem diferença significativa entre os grupos (p = 0,2239). Pode-se considerar que as lesões cardíacas foram um achado eventual no modelo murino para toxocaríase.

The aim of this study was to evaluate the profile of the enzymes creatine kinase (CK), creatine kinase MB (CK-MB) and lactate dehydrogenase (LDH) in Wistar rats infected with 250 (GI, n = 24) or 1000 (GII, n = 24) Toxocara canis eggs. Animals were evaluated on days 7, 15, 30, 60, 120 and 180 post-infection (DPI). Only the GI rats showed an increase in CK and CK-MB, at 15 and 30 DPI, respectively. Anti-Toxocara spp. antibodies were detected by ELISA in infected animals. Despite of the presence of eosinophilic infiltrate in the heart of three infected animals, none larva was recovered from the organ neither by acid digestion nor by Baermann procedure. Eosinophilia was observed in both groups but there was no significant difference in the eosinophil counts between GI and GII (p = 0.2239). It is possible to consider that cardiac lesion is an eventual finding in murine model for toxocariasis.

A finalidade do presente estudo foi avaliar a prevalência de anticorpos anti-Toxocara spp. em crianças de duas diferentes classes sociais do município de Presidente Prudente, São Paulo, Brasil, e os fatores protetores e de risco associados à toxocaríase. Foram incluídas no estudo 126 crianças de classe média (CM) e 126 de baixa renda (BR). O teste ELISA foi realizado para avaliar a seroprevalência. Um questionário foi aplicado aos pais ou responsáveis pelas crianças para análise dos fatores protetores e de risco. A prevalência na população foi de 11,1%, sendo de 9,5% (12/126) e 12,7% (16/127) para os subgrupos CM e BR. A seropositividade foi inversamente proporcional à renda familiar. Observou-se que uma alta renda familiar foi considerado um fator de proteção tanto para a população total como para ambos os subgrupos CM e BR. Da mesma forma, ser criança do sexo feminino foi outro fator de proteção para a população total e para os dois subgrupos. Possuir gato foi um fator de risco para a população total e para os dois subgrupos estudados, enquanto que possuir cão foi considerado como fator de risco apenas para as crianças de classe média. Os fatores protetores e de risco podem ser diferentes em uma mesma população a depender do estrato social. Dessa forma, é relevante avaliar esses fatores independentemente para diferentes classes sócio-econômicas para elaboração de futuros estudos e programas de prevenção à infecção humana por Toxocara spp. e outros geohelmintos.

The aim of this study was to analyze the prevalence of Toxocara spp. antibodies in children from two different socioeconomic classes in the Presidente Prudente municipality, São Paulo State, Brazil, and the protective and risk factors associated with toxocariasis. One hundred and twenty-six middle-class (MC) and 126 disadvantaged children (DC) were included in this study. Anti-Toxocara ELISA test was performed in order to evaluate seroprevalence. A survey was applied to the children's guardians/parents in order to analyze the protective and risk factors. The overall prevalence was 11.1%, and of 9.5% (12/126) and 12.7% (16/126) for MC and DC subgroups, respectively. Toxocara seropositivity was inversely proportional to the family income. A high household income was considered a protective factor for toxocariasis in the total population and in both MC and DC subgroups. Being a girl was considered a protective factor for the total population and for both subgroups. Whilst being an owner of cat was a risk factor for children belonging to the total and for both MC and DC subgroups, having dog was considered as a risk factor for only the MC. Epidemiologic protective/factor risks can be distinct depending on the strata of the same population. Thus, it is relevant to evaluate these factors independently for different socioeconomic classes in order to design future investigations and programs for preventing the infection of human beings by Toxocara spp. and other geohelminths.

Métodos imunológicos desempenham papel importante no diagnóstico da toxocaríase, entretanto há poucos estudos sobre marcadores diagnósticos e de acompanhamento terapêutico. Foi padronizado ensaio de immunoblot (IB) empregando antígeno de excreção-secreção de Toxocara canis para pesquisa de anticorpos IgG, IgE e IgA em 27 crianças com toxocaríase nas formas visceral (23), mista visceral e ocular (3) e ocular (1), por 22-116 meses após quimioterapia. Foram observados dois perfis de reatividade dos anticorpos: permanência contra todas as frações no decorrer do estudo; diminuição ou negativação contra algumas ou todas as frações, porém, essas mudanças não se correlacionaram com tempo de tratamento. A sensibilidade do IB foi 100,0% para anticorpos IgG específicos para frações de massa molecular de 29-38, 48-54, 95-116, 121-162, > 205 kDa, 80,8% para IgE específicos para 29-38, 48-54, 95-121, > 205 kDa e 65,4% para IgA específicos para 29-38, 48-54, 81-93 kDa. Anticorpos IgG específicos para frações de baixa MM (29-38 e 48-54 kDa) podem ser sugeridos como candidatos a marcadores diagnósticos. Por sua vez, anticorpos IgG para fração > 205 kDa, IgA para 29-38, 48-54, 81-93 kDa e IgE para 95-121 kDa podem ser candidatos a marcadores terapêuticos. A identificação de epítopos antigênicos relacionados a estes marcadores poderá ser importante para o desenvolvimento de ensaios altamente sensíveis e específicos no diagnóstico e avaliação terapêutica da toxocaríase.

In human toxocariasis, there are few approaches using immunological markers for diagnosis and therapeutic assessment. An immunoblot (IB) assay using excretory-secretory Toxocara canis antigen was standardized for monitoring IgG, IgE and IgA antibodies in 27 children with toxocariasis (23 visceral, three mixed visceral and ocular, and one ocular form) for 22-116 months after chemotherapy. IB sensitivity was 100% for IgG antibodies to bands of molecular weight 29-38, 48-54, 95-116, 121-162, >205 kDa, 80.8% for IgE to 29-38, 48-54, 95-121, > 205 kDa, and 65.4% for IgA to 29-38, 48-54, 81-93 kDa. Candidates for diagnostic markers should be IgG antibodies to bands of low molecular weight (29-38 and 48-54 kDa). One group of patients presented the same antibody reactivity to all bands throughout the follow-up study; in the other group, antibodies decayed partially or completely to some or all bands, but these changes were not correlated with time after chemotherapy. Candidates for monitoring patients after chemotherapy may be IgG antibodies to > 205 kDa fractions, IgA to 29-38, 48-54, 81-93 kDa and IgE to 95-121 kDa. Further identification of antigen epitopes related to these markers will allow the development of sensitive and specific immunoassays for the diagnosis and therapeutic assessment of toxocariasis.

A toxocaríase é um problema de saúde pública mundial, com maior risco para crianças que podem, acidentalmente, ingerir ovos embrionados de Toxocara spp.. Os objetivos deste estudo foram avaliar a ocorrência de anticorpos anti-Toxocara spp. em crianças e adolecentes e as variáveis que podem estar envolvidas, bem como a contaminação ambiental por ovos de Toxocara spp., em locais de recreação, em áreas urbanas da mesorregião norte central, Paraná, Brasil. De junho de 2005 a março de 2007 foram coletadas 376 amostras de sangue de crianças e adolescentes de um a doze anos, de ambos os sexos, atendidas pelo Sistema Único de Saúde. As amostras foram analisadas pelo método de ELISA indireto para detecção de IgG anti-Toxocara e previamente absorvidas com antígeno de Ascaris suum. Foram consideradas reagentes as amostras com índice de reatividade > 1. A análise das amostras de areias (n = 19) e gramados (n = 15) de cada município foi realizada em todas as praças e escolas públicas. Das 376 amostras de soro, 194 (51,6%) foram positivas. A taxa de soroprevalência foi substancialmente mais elevada entre as crianças na faixa etária de até um a cinco (p = 0.001) e de seis a oito anos de idade (p = 0,022). Os sinais e sintomas clínicos investigados não mostraram diferenças estatísticas entre soropositivos e soronegativos (p > 0,05). Em 76,5% dos locais de recreação investigados, ovos de Toxocara foram detectados em pelo menos uma das cinco amostras. Os locais de recreação das escolas públicas estavam 2,8 vezes mais contaminados do que as praças. É importante a realização de programas educativos junto às famílias e educadores, o controle sanitário de animais e a higienização dos locais destinados à recreação para prevenção da toxocaríase.

Toxocariasis is a worldwide public-health problem that poses major risks to children who may accidentally ingest embryonated eggs of Toxocara. The objectives of this study were to investigate the occurrence of anti-Toxocara spp. antibodies in children and adolescents and the variables that may be involved, as well as environmental contamination by Toxocara spp. eggs, in urban recreation areas of north central mesoregion, Paraná State, Brazil. From June 2005 to March 2007. a total of 376 blood samples were collected by the Public Health Service from children and adolescents one to 12 years old, of both genders. Samples were analyzed by the indirect ELISA method for detection of anti-Toxocara antibodies. Serum samples were previously absorbed with Ascaris suum antigens, and considered positive with a reagent reactivity index >1. Soil samples from all of the public squares and schools located in the four evaluated municipalities that had sand surfaces (n = 19) or lawns (n = 15) were analyzed. Of the 376 serum samples, 194 (51.6%) were positive. The seroprevalence rate was substantially higher among children aging one to five years (p = 0.001) and six to eight years (p = 0.022). The clinical signs and symptoms investigated did not show a statistical difference between seropositive and seronegative individuals (p > 0.05). In 76.5% of the investigated recreation places, eggs of Toxocara were detected in at least one of the five collected samples. Recreation areas from public schools were 2.8 times more contaminated than from public squares. It is important to institute educational programs to inform families and educators, as well as to improve sanitary control of animals and cleaning of the areas intended for recreation in order to prevent toxocariasis.