Abstract SexedULTRA-4M™ is made using an improved method of sex-sorting sperm in a less damaging environment for better retaining sperm integrity throughout the sorting process. The objective of this research was to compare conventional (CONV) and SexedULTRA-4M™ (ULTRA-4M) semen for bovine IVP using four Angus bulls. Matured slaughterhouse oocytes (n = 4000) were divided into the CONV group and the ULTRA-4M group (2000 COCs for each semen type). The IVF process was implemented with CONV and ULTRA-4M semen from the same bull. The cleavage rates, eight cell embryos and blastocysts on day 7 of culture were evaluated for each semen type and each bull. The statistical analysis was carried out with the ANOVA procedure SAS software. The results were 54.45% ± 1.03 and 58.10% ± 1.07; 35% ± 1.57 and 39.15% ± 1.62; 22.8% ± 1.09 and 27.15% ± 1.12 for CONV and ULTRA-4M, respectively, for cleavage rate, eight cell embryos and blastocysts on day 7 for the average of all bulls, comparing only the semen type. Concerning only the semen type, ULTRA-4M was significantly superior to CONV for cleavage rates (P = 0.01) and blastocysts on day 7 (P = 0.009). There were no significant differences between the CONV and ULTRA-4M groups (P>0.05) for all variables analyzed for Bull 1 and Bull 4, however, for Bull 2 ULTRA-4M was significantly superior to CONV for cleavage rates and blastocysts on day 7 (P< 0.05). In Bull 3, ULTRA-4M was significantly higher (P< 0.05) for blastocysts on day 7 compared to CONV. In conclusion, under the conditions of this research the ULTRA-4M and CONV semen produced similar bovine IVP results overall.

Abstract Background: The main function of extender solutions for trout semen is to preserve viability while keeping the sperm motility inactivated. The longer the sperm remain viable and inactivated the better, so that later they can be intentionally activated when the sperm must travel to reach the egg micropyle for fertilization. In rainbow trout (Oncorhynchus mykiss), considerable advances have been made concerning the production of sperm extenders, quality control protocols, and the handling of gametes. However, the protocols for using an extender can differ considerably, especially regarding the extender composition. Additionally, the precise impact of pH on sperm motility, and its effect in the design and selection of a sperm extender remain unclear. Goals: The aim of this study was to determine the effect of pH on rainbow trout sperm motility and activation during storage at 5 °C and using 5 different extenders. Methods: Three simple composition sperm extenders (306, 512, and Mounib) and two complex composition sperm extenders (Erdahl & Graham, and Hank’s) were tested at different pHs (7, 7.2, 7.4, 7.6, 7.8, 8.0, and 8.2), as well as 3 activation solutions (DIA 532, saline solution, and pond water). Results: The extenders showed a high buffer capacity. The highest percentages of motility were obtained with DIA 532. Extenders 306, 512, and Hanks exhibited a positive relationship between pH and % motility. Erdahl & Graham and Mounib extender did not induce motility in rainbow trout sperm at different pHs. Conclusions: A positive relationship was found between the pH and motility of trout sperm, as well as a negative effect regarding the activation solution DIA 532 with the 306, 512, and Hanks extenders.

Resumen Antecedentes: La función principal de los diluyentes o soluciones extensoras es conservar la viabilidad y mantener inactiva la movilidad espermática el mayor tiempo posible para, posteriormente, permitir al espermatozoide llegar al micrópilo y fecundarlo. En la trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) la elaboración de estos diluyentes ha logrado avances importantes al establecer protocolos de control y manejo de gametos, los cuales difieren mucho en su composición. No obstante, no ha quedado establecido cuál es el mecanismo de acción del pH sobre la movilidad espermática ni su efecto en la elaboración de estas soluciones. Objetivos: Evaluar el efecto del pH de cinco soluciones extensoras a 5 ºC sobre la movilidad espermática de trucha arcoíris durante la activación de espermatozoides. Métodos: Se recolectaron muestras de semen de 96 machos y se probaron 3 soluciones extensoras de composición simple (306, 512 y Mounib) y dos de composición compleja (Erdahl & Graham y Hanks), con diferentes pH (7, 7.2, 7.4, 7.6, 7.8, 8.0 y 8.2), así como tres soluciones activadoras (DIA 532, suero salino fisiológico y agua de estanque). Resultados: Los extensores presentaron una alta capacidad de amortiguamiento porque fueron esterilizados. Los mayores porcentajes de activación de movilidad se obtuvieron con DIA 532. Las soluciones extensoras 306, 512 y Hanks mostraron una relación positiva entre el pH y el porcentaje de movilidad. Las soluciones de Erdahl & Graham y Mounib no permitieron la activación del movimiento de espermatozoides sin importar el pH. Conclusiones: Con las soluciones 306, 512 y Hanks se encontró una relación positiva entre el pH y el porcentaje de movilidad de espermatozoides de trucha y un efecto inverso con la solución de activación DIA 532.

In vitro embryo production (IVEP) has the potential to generate a large number of domestic animal embryos, as well as the implementation of other technologies from IVEP, such as transgenesis and cloning. The embryos produced in vitro are evaluated through morphological characteristics, but it is of great importance to determine if this evaluation corresponds to the viability of the embryos. The objective of the present study was to determine the relationship between the morphological evaluation and morula viability obtained in a single culture medium (SCM) or sequential medium (QCM) at 120 hours. The percentage of embryo division was 85 % in both culture media and morula percentage of 49 and 45 % for SCM and QCM, respectively (p>0.05). A higher number of quality one and two morulae was obtained in SCM compared to QCM (31 % and 44 % versus 13 % and 27 %, respectively) (p<0.05). It was not the same in quality 3 morulae, where SCM was higher than QCM (50 % and 18 %, respectively) (p<0.05). The total percentage of transferable morulae in SCM and QCM was 93 % and 90 %, respectively. The percentage of viable morulae was 98 % in both media, based on the number of viable blastomeres per morula, which were similar in SCM and QCM (14 ± 2 and 13 ± 2, respectively, p> 0.05). A positive correlation between the morphological quality and the viability of their blastomeres in morulae cultured with SCM and QCM (0.7415 and 0.7408, respectively) was determined. It is concluded that there is no difference between morulae obtained from SCM and QCM, but based on costs and embryons manipulation, SCM may be the best choice. The morphological evaluation of the embryos produced in vitro is a reliable method and the presence of vesicles in the blastomers did not affect the embryonic viability

La producción de embriones in vitro (PEIV) tiene potencial para generar un gran número de embriones de animales domésticos, así como la implementación de otras tecnologías a partir de la PEIV, como son la transgénesis y la clonación. Los embriones producidos in vitro se evalúan a través de las características morfológicas, pero es de gran importancia determinar si esta evaluación corresponde con la viabilidad de los embriones, por lo que el objetivo del presente estudio fue determinar la relación entre la evaluación morfológica y la viabilidad de mórulas obtenidas en un medio de cultivo simple (MCS) o secuencial (MCC) a las 120 horas de desarrollo. El porcentaje de división embrionaria fue de 85 % en ambos medios de cultivo y el porcentaje de mórulas de 49 y 45 % para el MCS y MCC, respectivamente (p>0.05). Se obtuvo un mayor número de mórulas de calidad 1 y 2 en MCS con relación a los MCC (31 % y 44 % frente a 13 % y 27 %, respectivamente) (p<0.05); no resultó igual en las mórulas de calidad 3, donde fue mayor el MCC con respecto al MCS (50 % y 18 %, respectivamente) (p<0.05), el porcentaje total de mórulas transferibles en los MCS y MCC fue de 93 % y 90 %, respectivamente. El porcentaje de mórulas viables fue de 98 % en ambos medios, sobre la base del número de blastómeros viables por mórula, que fueron similares en los MCS y MCC (14±2 y 13±2, respectivamente, p>0.05). Se determinó una correlación positiva entre la calidad morfológica con la viabilidad de sus blastómeros en las mórulas cultivadas con MCS y MCC (0.7415 y 0.7408, respectivamente). Se concluye que no hay diferencias entre las mórulas obtenidas de MCS y MCC, pero sobre la base de los costos y la manipulación de embriones el MCS puede ser la mejor elección. La evaluación morfológica de los embriones producidos in vitro es un método confiable y la presencia de vesículas en los blastómeros no afectó la viabilidad embrionaria