ABSTRACT Introduction: This paper shows the results obtained in the validation of in vitro serological assays to detect IgM, IgG antibodies, and total antibodies against SARS-CoV-2 UMELISA SARS-CoV-2 IgM, UMELISA ANTI-SARS-CoV-2 and UMELISA SARS-CoV-2 IgG developed by the Immunoassay Center. Methods: Panels of serum samples from negative and COVID-19 confirmed patients were used to determine the analytical performance of each assay. Results: UMELISA SARS-CoV-2 IgM, UMELISA ANTI-SARS-CoV-2 and UMELISA SARS-CoV-2 IgG assays demonstrated 100% clinical specificity for all assays; and 100% analytical specificity for the first two assays, and 93.1% for the last one. Clinical sensitivity was 64.3%, 80.8% and 97.5%, respectively. The positive predictive value was 100% in all assays, while the negative predictive value ranged from 83.3% to 95.2%. Concordance varied from 92.4% to 96.9%, and kappa index in every assay was very good. Assays sensitivity increased to 82.7%, 96.5% and 100 %, respectively for serum samples collected more than 14 days after onset of the symptoms. Conclusions: The assays demonstrated high sensitivity and specificity, which allows us to have Cuban technology-based tools for serological, epidemiological surveillance, and other types of studies, including those related to vaccines on a platform with wide national distribution.

RESUMEN Introducción: En el presente trabajo se muestran los resultados de la validación de los ensayos serológicos in vitro para la detección de anticuerpos IgM, IgG y anticuerpos totales contra el SARS-CoV-2 UMELISA SARS-CoV-2 IgM, UMELISA ANTI-SARS-CoV-2 y UMELISA SARS-CoV-2 IgG desarrollados por el Centro de Inmunoensayo (CIE). Métodos: Se utilizaron paneles de muestras de suero de individuos negativos y de casos confirmados de COVID-19 para determinar el desempeño analítico de cada ensayo. Resultados: La especificidad clínica de los ensayos UMELISA SARS-CoV-2 IgM, UMELISA ANTI-SARS-CoV-2 y UMELISA SARS-CoV-2 IgG fue del 100 % en todos los ensayos y la especificidad analítica fue de 100 % para los dos primeros ensayos y del 93,1 % para el último. La sensibilidad clínica fue de 64,3, 80,8 y 97,5 %, respectivamente. El valor predictivo positivo fue de 100 % en todos los ensayos, en tanto que el negativo osciló entre 83,3 y 95,2 %. La concordancia fluctuó entre 92,4 y 96,9 % y el índice kappa de todos los ensayos fue muy bueno. La sensibilidad de los ensayos se incrementó a 82,76, 96,5 y 100 %, respectivamente, en las muestras de suero colectadas con más de 14 días de iniciado el cuadro clínico. Conclusiones: Los ensayos demostraron una elevada sensibilidad y especificidad, lo que permite contar con herramientas basadas en una tecnología desarrollada en Cuba que posibilita la realización de estudios serológicos, vigilancia epidemiológica y de otro tipo, incluyendo los relacionados con vacunas en una plataforma con amplia distribución nacional.

ABSTRACT Cuba eliminated polio in 1962 and was among the first countries to do so. Since then, only 20 cases of vaccine-derived paralytic poliomyelitis have been reported. Because Cuba used oral poliovirus vaccine exclusively in two mass campaigns usually in February and April each year, Sabin viruses were detected only within approximately 6–8 weeks after each annual campaign. This made Cuba a very attractive site to study the epidemiology of poliomyelitis in a tropical country without risk of secondary transmission of Sabin viruses for a large part of each year, an advantage over countries that used oral poliovirus vaccine continuously throughout the year in routine immunization programs. This report summarizes the unique scientific collaboration between Cuba’s Ministry of Public Health and WHO, with participation by US scientists, in the global effort to eradicate polio.

Enteroviruses have been examined for their possible role in the etiology of type 1 diabetes mellitus (T1DM) for nearly 40 years; however, the evidence remains inconclusive so far. This article provides new findings from Cuban studies suggesting the involvement of enteroviruses, either with the clinical T1DM onset or the pre-clinical stages of the β- cell autoimmunity in populations with low incidence of diabetes and high enteroviral circulation. Potential mechanisms of pathogenesis such as direct β- cell lysis and molecular mimicry are also discussed.

OBJECTIVE: Little is known about the prevalence and distribution of Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (KSHV) infection in the Caribbean. The aim of this study was to determine rates of KSHV seropositivity in various populations in Cuba. METHODS: During the years 1998 to 2002 we screened serum samples from 410 subjects in Cuba. Serologic screening for KSHV antibodies was a two-step process using (1) indirect immunofluorescence assay (IFA) specifically reactive to the KSHV latency-associated nuclear antigen (LANA) encoded by open reading frame 73 (ORF73), and (2) confirmatory immunoblot using recombinant KSHV ORF65.2, a lytically expressed, 20-kilodalton protein as the target antigen. Five different populations were studied: (1) 45 AIDS patients with Kaposi's sarcoma (AIDS-KS), (2) 154 HIV-1-infected patients without clinical evidence of KS, (3) 171 HIV-negative blood donors, (4) 27 consecutive kidney transplant recipients, who were HIV-negative, and (5) 13 contacts (sexual contacts or relatives) of the AIDS-KS-affected patients. RESULTS: Among the 45 AIDS-KS subjects, 35 of them (77.8%) were KSHV-seropositive. Thirty-two of the 154 HIV-positive patients without KS (20.8% of them) were KSHV-seropositive, and 6 of the 13 contacts of KS-affected patients (46.2% of them) were infected with KSHV. In contrast to other researchers, we did not find in the populations that we studied in Cuba that KSHV seropositivity was associated with male homosexual or bisexual activity. We found high KSHV seropositivity rates among women reporting sexual contact with bisexual men and among men who had acquired an HIV infection in Africa. There were low rates of KSHV infection among the blood donors (1.2%) and the renal transplant recipients (0.0%). The low rates of KSHV infection that we found among the non-HIV-infected populations in Cuba are similar to patterns found in populations in Europe and in the United States. CONCLUSIONS: Together with similar results from Brazil, Jamaica, and the United States of America, our results suggest that KSHV infection is uncommon in some populations in the Western Hemisphere and that KSHV is largely confined to patients with AIDS-associated KS.

OBJETIVO: Se sabe poco acerca de la prevalencia y distribución en el Caribe de la infección por el herpesvirus asociado con el sarcoma de Kaposi (HVSK). El objetivo del presente estudio fue determinar las tasas de seropositividad a HVSK en diversas poblaciones en Cuba. MÉTODOS: Durante el período de 1998 a 2002 se examinaron muestras de suero de 410 personas en Cuba. El tamizaje serológico de los anticuerpos contra HVSK se realizó en dos pasos con las siguientes técnicas: 1) ensayo de inmunofluorescencia indirecta (IFI) con reactividad específica a la porción del antígeno de HVSK asociado a la latencia (ANAL) que está codificada por la plantilla de lectura abierta 73 (ORF73), y 2) inmunoblot (Western) confirmatorio, usando como antígeno blanco la proteína ORF65.2 de HVSK recombinante, que tiene 20 kilodaltones y se expresa durante la infección lítica. Cinco poblaciones diferentes fueron estudiadas: 1) 45 pacientes de sida con sarcoma de Kaposi (sida-KS); 2) 154 pacientes infectados por VIH-1 pero sin signos clínicos de sarcoma de Kaposi (SK); 3) 171 donantes de sangre con seronegatividad a VIH; 4) 27 receptores consecutivos de transplantes renales con seronegatividad a VIH y 5) 13 contactos (sexuales o por parentesco) de los pacientes de sida con SK. RESULTADOS: De las 45 personas con sida y SK, 35 (77,8%) mostraron seropositividad a HVSK. Treinta y dos (20,8%) de los 154 pacientes con seropositividad a VIH pero sin SK mostraron seropositividad a HVSK, y 6 de los 13 contactos (46,2%) de pacientes con SK estaban infectados por HVSK. A diferencia de otros investigadores, los autores del presente estudio no encontraron ninguna asociación entre la seropositividad a HVSK y la actividad homosexual o bisexual en personas de sexo masculino en las poblaciones cubanas estudiadas. En cambio, sí hallaron tasas elevadas de seropositividad a HVSK en mujeres que declararon haber tenido contacto sexual con hombres bisexuales y en hombres que habían adquirido la infección por VIH en el África. Las tasas de infección por HVSK fueron bajas en los donantes de sangre (1,2%) y en los receptores de transplantes renales (0,0%). Las tasas de infección por HVSK halladas en las poblaciones cubanas sin infección por VIH fueron tan bajas como las observadas en Europa y Estados Unidos de América. CONCLUSIONES: Nuestros resultados, sumados a otros resultados parecidos obtenidos en Brasil, Estados Unidos y Jamaica, indican que la infección por HVSK es poco frecuente en algunas poblaciones del hemisferio occidental y que está confinada mayormente a pacientes con KS en presencia de sida.

To determine the prevalence rates and serovar distribution of Chlamydia trachomatis cervical infections in Cuban women, two different groups were selected. Group I consisted of 60 human immunodeficiency virus (HIV-1) seropositive women from different regions of Cuba and group II of 60 randomly selected women HIV seronegative and apparently healthy. C. trachomatis was detected in cervical scrapes by mean of nested polymerase chain reaction (PCR) specific for major out membrane protein. The overall prevalence rate of C. trachomatis in cervical scrapes determined by nested PCR was 10% in group I and the estimated prevalence was 6.6% for group II; 83.3% of HIV seropositive women with C. trachomatis infection reported history of pelvic inflammatory disease followed by cervicitis (50%). The control group C. trachomatis-infected women referred a history of cervicitis in 75% of cases. Other reports in the latter group included infertility and pelvic inflamatory disease in 50%. The present study is the first report of C. trachomatis prevalence in Cuba. It showed that there was not significantly difference in the prevalence rate of C. trachomatis between both groups.

Las infecciones producidas por herpesvirus desempeñan un papel fundamental en la patología postrasplante lo que hace imprescindible tener caracterizada desde el punto de vista serológico a la población candidata de recibir un injerto renal. Se detectaron títulos de anticuerpos IgG mediante inmunofluorescencia indirecta contra virus herpes simple (VHS), virus Epstein Barr (VEB) y citomegalovirus (CMV), en 100 pacientes sometidos a tratamiento hemodialítico en el Instituto de Nefrología. Se detectó una prevalencia de anticuerpos de 100 % para el CMV y de 95 % para el VHS y el VEB. Los títulos promedios geométricos (TPG) de anticuerpos contra CMV resultaron ser significativamente superiores. No se encontró correlación entre los TPG y el sexo, la edad, el tiempo de evolución de la enfermedad, el número de transfusiones y el número de trasplantes.

The multiple polymerase chain reaction technique was used to detect in a single assay tube the presence of herpes simplex virus (HSV), Citomegalovirus (CMV). Epstein Barr virus (EBV), varicella zoster virus (VZV), and/or human herpes virus-6 (HHV6). 50 cerebrospinal fluids from patients with AIDS and clinically suspected to have meningoencephalitis due to HSV were received and analyzed at the laboratories of Sexually Transmitted Diseases of the Virology Department of the "Pedro Kourí" Tropical Medicine Institute from 1993 to 1996. 4 of them were positive to HSV, 3 to CMV, 2 to VZV, and 1 to HHV6 for a positivity of 20 %. The results of the PCR were correlated to the clinical findings presented by the patients at the time of the lumbar puncture. The introduction of this technique in the laboratory allows to have an easy, fast and useful tool for the diagnosis of meningoencephalitis due to herpesvirus.

Se utilizó la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (RCP) múltiple para detectar, en un solo tubo de reacción, la presencia del virus de herpes simple (VHS), Citomegalovirus (CMV), virus de Epstein Barr (VEB), virus de la varicela zóster (VVZ) y/o el virus del herpes humano 6 (VHH6). Cincuenta líquidos cefalorraquídeos de pacientes con el síndrome de inmunodeficiencia adquirida y con sospecha clínica de meningoencefalitis por el VHS, recibidos en el Laboratorio de Enfermedades de Transmisión Sexual del Departamento de Virología del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" entre los años 1993 y 1996 fueron analizados; de éstos, 4 resultaron positivos al VHS, 3 a CMV, 2 al VVZ y 1 al VHH6, para 20 % de positividad. Se correlacionaron los resultados de la RCP con los hallazgos clínicos que presentaban los pacientes en el momento que se les realizó la punción lumbar. La introducción de esta técnica en el laboratorio permite contar con una herramienta útil, por su sencillez y rapidez, para el diagnóstico de las meningoencefalitis por herpesvirus.

The vaccine against measles came into use in Cuba in 1971. During the seventies, a new early strategy for measles control was established, and it was followed by further efforts in the early eighties. Despite improvements to the control program, disease outbreaks continued to occur. In 1986, after examining the experience acquired through the control initiatives that were already in place, a new measles vaccination strategy was adopted. In time, the new vaccination strategy against measles came to have three main components: first, a single vaccination "catching-up" campaign targeting children 1 to 14 years of age. Second, efforts were made to achieve and maintain high vaccine coverage through mandatory vaccination services for 12-month-old children ("maintenance vaccination"). Finally, periodic "follow-up" campaigns were carried out for children 2 to 6 years of age. Steps were taken, for the purpose of monitoring the progress made so far toward eliminating measles, to strengthen disease surveillance systems, including the screening of suspected cases. The "catching-up" and "follow-up" campaigns both achieved greater than 98% coverage within targeted age groups. The routine vaccination program has also maintained high coverage. The high population immunity against measles that has been attained through these vaccination strategies has resulted in a rapid decrease in the incidence of the disease. From 1989 to 1992, less than 20 laboratory-confirmed cases were reported annually. In Cuba, the last case confirmed through serologic screening was reported in July 1993. Cuba's strategy for measles elimination has interrupted disease transmission and kept the causal virus from circulating on the island. Cuba's experience with measles elimination suggests that if an appropriate vaccination strategy is applied, measles can be globally eradicated.

La vacuna antisarampionosa se empezó a usar en Cuba en 1971. En los años setenta se implantó una estrategia inicial para el control del sarampión, y a ella le siguieron iniciativas adicionales a principios de los años ochenta. Pese a haberse mejorado el programa de control, siguieron produciéndose brotes de la enfermedad. En 1986, después de revisar las experiencias recogidas a partir de las iniciativas de control ya establecidas, se adoptó una nueva estrategia de vacunación antisarampionosa. Con el tiempo, la nueva estrategia de vacunación contra el sarampión llegó a tener tres componentes principales: primero, una campaña única de vacunación de "puesta al día" dirigida a niños de 1 a 14 años de edad. Segundo, se procuró lograr y mantener una alta cobertura con la vacuna mediante el ofrecimiento de servicios de vacunación obligatoria para niños de 12 meses de edad ("vacunación de mantenimiento"). Por último, se llevaron a cabo periódicamente campañas de "seguimiento" para niños de 2 a 6 años de edad. Con el fin de monitorear el territorio recorrido hacia le eliminación del sarampión, se ha hecho un esfuerzo por fortalecer la vigilancia de la enfermedad, de la cual forma parte la investigación de casos sospechados. Tanto la campaña general de "puesta al día" como la de "seguimiento" alcanzaron coberturas de más de 98% en los grupos de edad a los que fueron dirigidas. El programa de vacunación de rutina también ha mantenido una alta cobertura. La alta inmunidad poblacional contra el sarampión lograda mediante estas estrategias de vacunación dio por resultado una rápida reducción de la incidencia de la enfermedad. De 1989 a 1992, se notificaron menos de 20 casos anuales confirmados por laboratorios. En Cuba, el último caso confirmado por pruebas serológicas se presentó en julio de 1993. La estrategia para la eliminación del sarampión que se ha aplicado en Cuba ha interrumpido la transmisión de la enfermedad y ha impedido la circulación del virus causante en la isla. La experiencia de Cuba con la eliminación del sarampión sugiere que si se aplica una estrategia apropiada de vacunación, se puede erradicar el sarampión del mundo entero.

The immune response of a group of patients with epidemical neuropathy and of controls was studied by the immunoblotting technique against proteins of the Coxsackie virus and the proteins of slow effect isolated in our laboratory. 13 sera of patients with epidemical neuropathy and 9 sera of controls were studied. Of the 13 sera studied, 8 (61.5 %) recognized protein VPI and 2 sera (15.3 %) protein VP0 of the strain 47.93. Of the 9 controls studied, 4 (44.4 %) recognized protein VPI and 3 (33.3 %) protein VP0 only. With the antigen prepared from the slow effect strain it was obtained a specific signal in 5 (38.5 %) sera of patients and in 2 sera (22.5 %) of controls. It should be stressed that in this last case the protein observed had a molecular weight of 41 300 D, and that its size was smaller than that of the preceeding protein detected against the strain 47.93 was of 45 000 D.

Se estudió la respuesta inmune de un grupo de pacientes con neuropatía epidémica y de individuos controles mediante la técnica de inmunoblotting frente a las proteínas del virus Coxsackie y a las proteínas de la cepa de efecto lento aislada en nuestro laboratorio. Se estudiaron 13 sueros de pacientes con neuropatía epidémica y 9 sueros controles. De los 13 sueros estudiados, 8 (61,5 %) reconocieron a la proteína VP1 y 2 sueros (15,3 %) a la proteína VP0 de la cepa 47/93. De los 9 controles estudiados, 4 (44,4 %) reconocieron la proteína VP1 y 3 sueros (33,3 %) la proteína VP0 solamente. Con el antígeno preparado a partir de la cepa de efecto lento, en 5 (38,5 %) sueros de pacientes y 2 sueros (22,5 %) de controles se obtuvo una señal específica. Es de destacar en este último caso que la proteína observada tenía un peso molecular de 41 300 D, era de menor talla que la proteína precursora detectada frente a la cepa 47/93, que fue de 45 000 D.

The evolution serological response against the herpes simplex virus and citomegalovirus in HIV infected patients grouped into different stages of the disease was studied. Fluctuations in the TPG of antibodies were observed in these values in a cyclical way through time. There was a greater significant difference among the TPG of antibodies against HSV in the group of asymptomatic patients compared with AIDS patients and with those who died. There is a marked decrease in the TPG of antibodies against HSV and CMV approximately one year before the death of patients.

Se estudió la respuesta serológica evolutiva frente a los virus herpes simple y Citomegalovirus en pacientes infectados con el VIH, agrupados en diferentes estadios de la enfermedad. Se observaron fluctuaciones en los TPG de anticuerpos en estos valores de forma cíclica a través del tiempo. Se observó mayor diferencia significativa en los TPG de anticuerpos contra HSV en el grupo de pacientes asintomáticos con respecto a los pacientes SIDA y a los fallecidos. Existe una marcada caída en el TPG de anticuerpos contra HSV y CMV aproximadamente 1 año antes del fallecimiento de los pacientes.

The results obtained in the study of an aoutbreak of fever and reash ocurred in Havana City in March, 1995, are reported. Dengue, measles, rubella, herpes simplex, and Epstein Barr were discarded as causal agents of the outbreak in the samples of 35 patients. Parvovirus B19 was identified as the causing agent of the outbreak by the detection of IgM antibodies and the polymerase chain reaction technique (PCR). The infection produced by this agent was confirmed in 14/18 samples (77,7 %) by some of the techniques used. This study makes reference to the first outbreak of Parvovirus B19 that was proved in Cuba.

Se reportan los resultados obtenidos en el estudio de un brote de fiebre y rash ocurrido en Ciudad de La Habana en marzo de 1995. En las muestras de 35 pacientes se descartaron dengue, sarampión, rubéola, herpes simple y Epstein Barr como agentes causales del brote. Mediante la detección de anticuerpos IgM y la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (RCP) se identificó al Parvovirus B19 como agente causal del brote. En 14/18 muestras (77,7 %) se comprobó la infección por este agente por alguna de las técnicas empleadas. Este estudio se refiere al primer brote confirmado de Parvovirus B19 en Cuba.

Se presentan resultados que permiten plantear la existencia de relaciones antigénicas entre los virus aislados del líquido cefalorraquídeo de pacientes con neuropatía epidémica y estructuras del sistema nervioso central humano. Estas evidencias se han obtenido por 2 vías distintas e independientes: 1) por método de doble difusión en agarosa, inmunoblot e inmunohistoquímicos, comprobándose que los anticuerpos inducidos por los virus aislados reaccionan con antígenos del sistema nervioso central y periférico, 2) el suero obtenido por inmunización de un conejo con extracto de cerebro humano neutraliza los mismos virus que los neutralizados por los sueros hiperinmunes obtenidos con los aislamientos. Se discute la posible participación de los virus como mediadores de un proceso autoinmune en la etiopatogenia de la enfermedad.

En el presente trabajo se reportan las características físico-químicas presentadas por los agentes aislados en muestras de pacientes con neuropatía epidémica. Los Enterovirus aislados se comportaron en la forma descrita para estos virus. Los agentes productores de efecto citopático ligero (ECP-L) se comportaron en forma variable en lo que se refiere a la sensibilidad al cloroformo, por otra parte no fueron sensibles al ácido fosfonoacético (PAA) ni al cloruro de guanidina (GHCl) y crecieron en células previamente tratadas con bromodeoxiuridina (BDUR). Estos resultados sugieren la presencia de 2 agentes que recuerdan a los Enterovirus y a virus envueltos. Se necesita continuar profundizando en los estudios de caracterización de estos agentes.