Resumen La identificación taxonómica de especies mediante análisis de variación de secuencias de ADN ortólogas, complementan la información obtenida con caracteres morfológicos. Estudios citogenéticos muestran taxones poliploides en la subfamilia Opuntioideae, Opuntia ficus-indica, contribuyendo a la variabilidad morfológica en los individuos de una población, e influyendo en la correcta identificación de las especies. Sin embargo, las longitudes de las secuencias en Opuntioideae están afectadas por la extracción de ADN puro. Se evaluaron y modificaron diferentes métodos de extracción y se estableció un procedimiento para obtener ADN de buena calidad, libre de inhibidores para amplificación de genes por reacción en cadena de la polimerasa. Las relaciones A260/A280 y A260/A230 variaron entre 1.6 a 2.1, revelando ausencia de contaminación con el protocolo modificado para la extracción de ADN a partir de hojas de algodón. Este método es de bajo costo comparado con los de casas comerciales y, por lo tanto, se puede aplicar en estudios con recursos limitados.

Abstract The taxonomic identification of species through analysis of the variation of orthologous DNA sequences, complement the information obtained with morphological characters. Cytogenetic studies indicate that polyploid taxa occur in the subfamily Opuntioideae, Opuntia ficus-indica, contributing to morphological variability in the individuals of a population, and influencing the correct identification of species. However, the lengths of the sequences in Opuntioideae are affected by the extraction of pure DNA. Different extraction methods were evaluated and modified, and a procedure was established to obtain good quality DNA, free of inhibitors for gene amplification by polymerase chain reaction. The ratio A260/A280 and A260/A230 ranged from 1.6 to 2.1, revealing absence of contamination with the modified protocol for DNA extraction from cotton leaves. This method is inexpensive compared to those of commercial manufacturers and, therefore, can be applied in studies with limited resources.

Resumen Aloe vera L. ha sido utilizada como planta medicinal y ornamental, por lo que ha adquirido gran importancia comercial; sin embargo, presenta una desventaja reproductiva en condiciones naturales que limita el abastecimiento de la demanda mundial. El objetivo del estudio fue evaluar el desarrollo de procesos organogénicos a partir de ápices meristemáticos y discos caulinares. Se emplearon como explantes, ápices meristemáticos y discos caulinares cultivados en medio Murashige y Skoog, suplementado con distintos reguladores de crecimiento. Se cuantificó el porcentaje de inducción callogénica y caulogénica. Los brotes regenerados fueron micropropagados en medio suplementado con 2 mg L-1 de BA y 0,1 mg L-1 de ANA y el enraizamiento fue ensayado bajo condiciones in vitro y ex vitro. El porcentaje más alto (100%) de callogénesis en ápices meristemáticos se cuantificó en presencia de 0,5 y 1 mg L-1 de 2,4-D y 3 mg L-1 de ANA y en discos caulinares en presencia de 0,5 mg L-1 de 2,4-D con 12.5%. Durante la caulogénesis, el promedio más alto de brotes/explante (1,1) se cuantificó en ápices meristemáticos en presencia de 5 mg L-1 de ANA; mientras que en discos caulinares se observó (1,3 brotes/explante), en presencia de 0,25 mg L-1 de 2,4-D. Después del segundo ciclo de micropropagación el promedio de brotes/explante desarrollados aumentó a 8,8. El mayor porcentaje (75,3%) de brotes enraizados se cuantificó en condiciones in vitro. En conclusión, el explante primario más aconsejable para iniciar procesos organogénicos en A. vera fue ápices meristemáticos cultivados en medio con 5,0 mg L-1 de ANA.

Abstract Aloe vera L. has been used as a medicinal plant and ornamental, so that this plant has acquired great commercial importance. However, A. vera L. has a reproductive disadvantage under natural conditions limiting supply of world demand. The objective of this study was evaluated process organogenesis development from meristematic tip and cauline discs. Meristematic tip and cauline discs were used as explants and cultured on Murashige and Skoog medium supplemented with different growth regulators. The percentage of organogenic and callogenic induction was quantified. Regenerated shoots were micropropagated on medium supplemented with 2 mg L-1 BA and 0.1 mg L-1 NAA, and rooting was tested under in vitro and ex vitro conditions. Highest percentage of callus formation in meristematic tip was quantified in presence of 0.5 and 1 mg L-1 2,4-D and 3 mg L-1 NAA and in cauline disks in presence of 0.5 mg L-1 of 2,4-D. During caulogenesis, highest average number of shoots per explant (1.1) was quantified from meristematic tip in presence of 5 mg L-1 NAA, while in cauline disk (1.3 shoots/explant) were quantified in presence 0.25 mg L-1 2,4-D. After micropropagation cycle second, the average number of shoots per explant increased to 8.8. The highest percentage (75.3%) of rooted shoots was quantified in vitro conditions. In conclusion, the primary explant more desirable to initiate organogenic processes in A. vera was meristems cultured in medium with 5.0 mg L-1 NAA.

En el 2009 se plantaron 4088 hectáreas de algodón genéticamente modificado en el departamento de Tolima (Colombia), sin embargo, hay ciertas incertidumbres acerca de las medidas de contención necesarias para impedir el movimiento de polen y semillas desde los campos GM regulados, hacia los campos adyacentes de cultivos convencionales. En este estudio se evaluó el flujo de genes mediado por polen y semillas desde variedades GM hacia variedades convencionales o individuos ferales, en el cultivo del algodón. Para detectar el flujo de genes se utilizaron ImmunostripTM, PCR y ELISA. Cincuenta y seis refugios, 27 campos con algodón convencional y cuatro individuos ferales de la empresa "Remolinos S.A." localizada en El Espinal (Tolima) fueron analizados en el primer semestre de 2010. Los resultados indicaron presencia de plantas GM en 45 refugios (80,4 %) y 26 campos de algodón convencional (96 %), además de un flujo génico mediado por polen en un campo de algodón convencional y nueve refugios. En todos los campos cultivados con algodón convencional se evidenció flujo de genes desde algodón GM. Solo en dos refugios y en dos individuos ferales no se evidenció flujo de genes desde algodón GM.

In 2009, 4088 hectares of genetically modified (GM) cotton were planted in Tolima (Colombia), however there is some uncertainty about containment measures needed to prevent the flow of pollen and seed from regulated GM fields into adjacent fields. In this study, the gene flow from GM cotton varieties to conventional or feral cotton plants via seed and pollen was evaluated. ImmunostripTM, PCR and ELISA assays were used to detect gene flow. Fifty six refuges, 27 fields with conventional cotton and four feral individuals of the enterprise "Remolinos Inc." located in El Espinal (Tolima) were analyzed in the first half of 2010. The results indicated seed mediated gene flow in 45 refuges (80.4 %) and 26 fields with conventional cotton (96 %), besides pollen mediated gene flow in one field with conventional cotton and nine refuges. All fields cultivated with conventional cotton showed gene flow from GM cotton. Two refuges and two feral individuals did not reveal gene flow from GM cotton.

En Colombia los estudios para establecer métodos modernos de propagación y selección de materiales vegetativos de uchuva (Physalis peruviana) son escasos; por tanto, es necesario explorar técnicas alternativas como la aplicación de radiación ionizante, la cual permite ampliar la variabilidad genética, obtener plántulas con características fenotípicas favorables y contribuir al mejoramiento de la productividad. Con el objeto de inducir alteraciones cromosómicas, yemas axilares de P. peruviana cultivadas en medio MS suplementado con 0.1 mg/lt de BA y 0.05 mg/lt de AIB fueron irradiadas con 50, 100, 200 y 300 Grays (Gy) de radiación gamma. El experimento se llevó a cabo utilizando un diseño completamente al azar, con cinco tratamientos, cada uno con 30 unidades experimentales. Después de nueve subcultivos (ciclos de multiplicación de 30 días cada uno), los microtallos regenerados de yemas irradiadas presentaron menor viabilidad que los regenerados de yemas no irradiadas. Las plántulas regeneradas de yemas irradiadas con 100 Gy presentaron mayor porcentaje de enraizamiento, longitud del tallo y número de hojas; la dosis de 300 Gy inhibió el desarrollo de tallos y primordios radicales, aunque los explantes permanecieron viables. En células de ápices radicales tomados de plántulas regeneradas de yemas irradiadas se observaron puentes en anafase y telofase, cromosomas rezagados y cromosomas aislados, siendo mayor la frecuencia de los cromosomas rezagados. El mayor porcentaje de células con alteraciones cromosómicas se cuantificó en ápices radicales de plántulas regeneradas de yemas irradiadas con 200 Gy. En invernadero, 86 - 93.8% de plántulas regeneradas de yemas irradiadas y no irradiadas fueron viables.

In Colombia, studies carried out to establish modern methods for propagation and selection of plant of cape gooseberry (Physalis peruviana) are scarce so, it is necessary to explore alternative techniques such as the application of ionizing radiation, which enables greater genetic variability and to obtain seedlings with phenotypic characteristics that could be beneficial to contribute to improve productivity. To induce chromosomal alterations, axillary buds of P. peruviana with 50, 100, 200 and 300 Gy of gamma radiation were irradiated and were cultured in MS medium supplemented with BA 0.1 mg·L-1 plus IBA 0.05 mg·L-1. The experiment was conducted using a complete random design, five tests each with thirty experimental units were carried out. After nine subcultures (9 multiplication cycles, 30 days each), regenerated shoots of irradiated buds presented smaller viability than the regenerated non irradiated buds. The regenerated plantlets buds irradiated with 100 Gy had higher rooting percentage, shoot length and number of leaves; the dose of 300 Gy inhibited the development of shoots and roots, although the explants remained viable. In cells taken from radical tips of regenerated plantlets of irradiated buds were observed bridges in anaphase and telophase, laggards and isolated chromosomes, being higher the frequency of laggard chromosomes. The higher percentage of cells with chromosomal alterations was quantified in radical tips of regenerated plantlets of buds irradiated with 200 Gy. In greenhouse, 86-93.8% of regenerated plantlets of irradiated or not buds were viable.

Using stem apex as primary explants, a micropropagation protocol of Vaccinium meridionale was established. During establishment phase the effect of the MS/3, WPM, AND and Kyte media, supplemented with 2-iP plus IAA or BA plus IAA was studied. During microshoot proliferation the effect of MS/3 liquid, solid and double phase (the liquid phase in a solidified phase with agar) supplemented with 2-iP plus IAA was evaluated. In vitro and ex vitro rooting of microshoots and microshoots was accomplished using auxines and/or activated charcoal; for root development a substratum with abundant organic matter was utilized. Plantlet hardening was achived simultaneously with the radical development process. After establishment phase, the highest quantity of axillary buds/explant was quantified in cultures performed in MS/3 supplemented with 2-iP, 59.05 µM plus IAA 17.13 µM. During the microshoot proliferation phase the highest average production was obtained in double phase MS/3. After 60 days of hardening 88-100% of rooted microshoots was obtained; these plantlets showed growth reactivation.

Se desarrolló un procedimiento de micropropagación de plantas adultas de Vaccinium meridionale utilizando como explantes primarios ápices caulinares. Durante la fase de establecimiento in vitro de explantes se estudió el efecto de los medios MS/3, WPM, AND y el propuesto por Kyte para Blueberry, suplementados con 2-iP más AIA ó BA más AIA. Durante la proliferación de microtallos se evaluó el efecto del medio MS/3 líquido, sólido y en doble fase (una fase líquida sobre una fase solidificada con agar), suplementados con 2-iP más AIA. El enraizamiento in vitro y ex vitro de microtallos y macollas se indujo utilizando auxinas y/o carbón activado y para el desarrollo de raíces se utilizó un sustrato enriquecido con materia orgánica. El endurecimiento de plántulas se realizó de manera simultánea con el proceso de desarrollo radical. Después de la fase de establecimiento, la media más alta, 4.5, yemas axilares desarrolladas por explante viable, se cuantificó en MS/3 suplementado con 59.05 µM de 2-iP más 17.13 µM de AIA. Durante la fase de proliferación de microtallos la media más alta, 7.25, se cuantificó en MS/3 en doble fase. Después de 60 días de endurecimiento el 88-100% de los microtallos enraizaron y reactivaron su crecimiento.