O objetivo deste trabalho foi obter plantas transgênicas de laranja 'Valência' com o gene cecropin MB39 controlado pelo promotor do gene da fenilalanina-amônia-liase de citros, visando a expressão gênica específica nos vasos do xilema. A transformação genética foi realizada via Agrobacterium tumefaciens por meio do co-cultivo de segmentos de epicótilo. Onze plantas transgênicas foram identificadas por PCR, pela amplificação do fragmento esperado de 189 pb, as quais foram aclimatizadas em casa de vegetação. A integração do transgene foi confirmada em três plantas pela análise de transferência de Southern.

The objective of this work was to produce 'Valencia' sweet orange transgenic plants with the cecropin MB39 gene controlled by a phenylalanine ammonia-lyase gene promoter from citrus in order to direct gene expression in xylem vessels. The genetic transformation was mediated by Agrobacterium tumefaciens with the co-culture of epicotyl segments. Eleven transgenic plants were selected by PCR with the amplification of a 189 bp fragment, which were acclimatized to greenhouse. The integration of the transgene was confirmed in three plants by Southern blot analysis.

O estabelecimento de protocolos para regeneração de plantas in vitro é essencial para o uso de técnicas de transformação genética no melhoramento de citros. Visando à obtenção de um protocolo eficiente de regeneração in vitro para laranja-azeda (Citrus aurantium), laranjas 'Natal' e 'Pêra' (C. sinensis), limão 'Volkameriano' (C. volkameriana) e citrange 'Carrizo' (Poncirus trifoliata x C. sinensis), avaliou-se a resposta morfogênica de diferentes regiões do epicótilo (basal, mediana e apical) em relação a distância do nó cotiledonar, na presença (1,0 mg/L-1) ou ausência de 6-BAP, em meio de cultura MT. Após 60 dias, avaliaram-se a porcentagem de explantes responsivos e o número de gemas adventícias por explante. A resposta morfogênica em função da região do epicótilo e da presença ou ausência da citocinina (6-BAP) foi influenciada pelo genótipo. A presença de 6-BAP no meio de cultura promoveu aumento na porcentagem de explantes responsivos para citrange 'Carrizo'. A suplementação do meio de cultura com a citocinina 6-BAP proporcionou aumento no número de brotos por explante para citrange 'Carrizo', laranja 'Natal' e limão 'Volkameriano'.

The establishment of an in vitro plant regeneration protocol is essential for the use of genetic transformation techniques in Citrus breeding programs. Aiming to obtain an efficient protocol of in vitro regeneration for sour orange (Citrus aurantium), sweet oranges 'Natal' and 'Pêra' (C. sinensis), 'Volkamer' lemon (C. volkameriana) and 'Carrizo' citrange (Poncirus trifoliata x C. sinensis), the morphogenetic response was evaluated for different epicotyl's regions (basal, medium and apical) regarding the distance from the cotyledonary node, in presence (1,0 mg/L-1) or absence of 6-BAP in MT medium. After 60 days, the percentage of responsive explants and number of shoots per explants were evaluated. The morphogenetic response related to the epicotyl's region and the presence or absence of the cytokinin (6-BAP) were genotype influenced. The presence of 6-BAP in the culture medium showed a greater percentage of responsive explants for 'Carrizo' citrange. The addition of 6-BAP to the culture medium provided an increase in the number of shoots per explants for 'Carrizo' citrange, 'Natal' sweet orange and 'Volkamer' lemon.

O objetivo deste trabalho foi realizar a transformação de plantas de tabaco e laranja 'Valência' com o gene GUS controlado pelo promotor do gene da fenilalanina amônia-liase (PAL) de citros (CsPP). Foi realizada transformação genética por meio do co-cultivo de explantes de tabaco e laranja 'Valência' com Agrobacterium tumefaciens que continha o vetor binário CsPP-GUS/2201. Após a transformação e a regeneração, a detecção da atividade de GUS por ensaios histoquímicos revelou que o promotor CsPP, preferencialmente, mas não exclusivamente, confere expressão gênica em tecidos do xilema de tabaco. Expressão mais baixa de GUS também foi detectada na região de tecido de pecíolo, em plantas transgênicas (CsPP) de tabaco e laranja 'Valência'.

The objective of this work was the transformation of tobacco and 'Valencia' sweet orange with the GUS gene driven by the citrus phenylalanine ammonia-lyase (PAL) gene promoter (CsPP). Transformation was accomplished by co-cultivation of tobacco and 'Valência' sweet orange explants with Agrobacterium tumefaciens containing the binary vector CsPP-GUS/2201. After plant transformation and regeneration, histochemical analyses using GUS staining revealed that CsPP promoter preferentially, but not exclusively, conferred gene expression in xylem tissues of tobacco. Weaker GUS staining was also detected throughout the petiole region in tobacco and citrus CsPP transgenic plants.