RESUMEN La preocupación de la sobrepoblación canina se relaciona con zoonosis como la rabia, la cual es responsable del 99% de los casos de rabia humana, causante de la muerte de aproximadamente 59,000 personas al año. La esterilización quirúrgica es un método de control eficaz, costoso e invasivo siendo su impacto limitado. Los efectos de los fitoestrógenos en la actividad reproductiva se han estudiado comúnmente en hembras, y un número limitado en machos. Por lo anterior, el objetivo de este estudio fue conocer el efecto de la administración subcutánea de coumestrol en la actividad gonadal de perros adultos como alternativa para su control reproductivo. Se determinaron los parámetros de evaluación seminal básica, la estructura del epidídimo mediante ecografía, características histológicas, así como la presencia del coumestrol mediante fluorescencia y los niveles séricos de testosterona y estrógenos. La administración de coumestrol durante cinco semanas redujo la producción espermática, y evidenció cambios en la eco densidad y celularidad del epidídimo, asociados a las concentraciones séricas de estradiol y testosterona. Por lo que, se concluye que el coumestrol administrado vía subcutánea tiene un efecto estrogénico que puede utilizarse como un método no invasivo para ayudar a controlar la fertilidad de perros adultos.

ABSTRACT The concern of canine overpopulation is related to zoonoses such as rabies, which is responsible for 99% of human rabies cases, causing the death of approximately 59,000 people per year. Surgical sterilization is an effective, costly and invasive control method with limited impact. The effects of phytoestrogens on reproductive activity have been commonly studied in females and a limited number in males. Therefore, the objective of this study was to know the effect of subcutaneous administration of coumestrol on the gonadal activity of adult dogs as an alternative for their reproductive control. Basic seminal evaluation parameters, epididymal structure by ultrasonography, histological characteristics, as well as the presence of coumestrol by fluorescence and serum levels of testosterone and estrogens were determined. The administration of coumestrol for five weeks reduced sperm production, and evidenced changes in the echodensity and cellularity of the epididymis, associated with serum concentrations of estradiol and testosterone. Therefore, it is concluded that coumestrol administered subcutaneously has an estrogenic effect that can be used as a non-invasive method to help control fertility in adult dogs.

Abstract SexedULTRA-4M™ is made using an improved method of sex-sorting sperm in a less damaging environment for better retaining sperm integrity throughout the sorting process. The objective of this research was to compare conventional (CONV) and SexedULTRA-4M™ (ULTRA-4M) semen for bovine IVP using four Angus bulls. Matured slaughterhouse oocytes (n = 4000) were divided into the CONV group and the ULTRA-4M group (2000 COCs for each semen type). The IVF process was implemented with CONV and ULTRA-4M semen from the same bull. The cleavage rates, eight cell embryos and blastocysts on day 7 of culture were evaluated for each semen type and each bull. The statistical analysis was carried out with the ANOVA procedure SAS software. The results were 54.45% ± 1.03 and 58.10% ± 1.07; 35% ± 1.57 and 39.15% ± 1.62; 22.8% ± 1.09 and 27.15% ± 1.12 for CONV and ULTRA-4M, respectively, for cleavage rate, eight cell embryos and blastocysts on day 7 for the average of all bulls, comparing only the semen type. Concerning only the semen type, ULTRA-4M was significantly superior to CONV for cleavage rates (P = 0.01) and blastocysts on day 7 (P = 0.009). There were no significant differences between the CONV and ULTRA-4M groups (P>0.05) for all variables analyzed for Bull 1 and Bull 4, however, for Bull 2 ULTRA-4M was significantly superior to CONV for cleavage rates and blastocysts on day 7 (P< 0.05). In Bull 3, ULTRA-4M was significantly higher (P< 0.05) for blastocysts on day 7 compared to CONV. In conclusion, under the conditions of this research the ULTRA-4M and CONV semen produced similar bovine IVP results overall.

SUMMARY: In order to evaluate the effect on sexual behavior and spermatic parameters of white New Zealand rabbits, at the onset of puberty, they were fed a standard diet supplemented with canola oil (obesogenic). Two groups were formed; one of which received daily 180 g of a standard commercial diet supplemented with 13 ml of canola oil during 12 weeks, while the second group (control) were fed daily 180 g of only the standard commercial diet. Starting at 20-weeks of age, seminal volume, en masse and individual sperm motility, and sperm concentration per mm3 were measured from each individual, as well as the behaviors olfactory exploration, chinning, and first and second attempt at mounting were assessed. No significant differences were found between groups in terms of seminal volume, and en masse and individual sperm motility count and percentage (P>0.05). In relation to sexual behavior, the group fed with supplemental canola oil showed reduced the response time to females in the sexual behaviors of chinning, olfactory exploration, and first and second attempt at mounting when compared to the control group (P<0.01). The data indicate that the addition of canola oil to a standard rabbit diet at the start of puberty and continued for 12 weeks increases the body mass index and reduces the response time in sexual behaviors such as olfactory exploration, chinning, and second attempt at mounting when interacting with female stimulus. Nevertheless, the seminal parameters did not show any modification. Other studies are needed to show the benefits or disadvantages of the addition of varying inclusion percentages of other vegetable oils, to evaluate their effects on reproductive efficiency in breeder male rabbits.

RESUMEN: Con el propósito de evaluar en conejos Nueva Zelanda blanca de granja el efecto de una dieta estándar suplementada con aceite de canola (obesogénica) sobre el comportamiento sexual y los parámetros espermáticos al inicio de la pubertad, se formaron dos grupos. Un grupo recibió una dieta consistente de 180 g al día de una dieta estándar comercial adicionada con 13 ml de aceite de canola durante 12 semanas y al otro grupo (testigo) se le suministró 180 g por día de la misma dieta estándar sin aceite de canola. A partir de las 20 semanas de edad en cada individuo se midió el volumen seminal, la motilidad espermática en masa e individual, la concentración espermática por mm3 y se evaluaron la conducta de: exploración olfatoria, frotamiento del mentón (Chinning), primer intento de monta y segundo intento de monta. En las variables volumen seminal, conteo y porcentaje de motilidad espermática en masa e individual no hubo diferencia significativa entre ambos grupos (P>0,05). Con respecto al comportamiento sexual, el grupo suplementado con aceite vegetal presentó menor tiempo de respuesta a la hembra estímulo en las conductas de frotamiento del mentón, exploración olfatoria y segundo intento de monta con respecto al grupo testigo (P<0,01). Los datos obtenidos indican que la adición de aceite de canola a la dieta estándar de conejos al inicio de la pubertad durante 12 semanas aumenta el índice de masa corporal de los individuos y disminuye el tiempo de respuesta en las conductas de exploración olfatoria, de frotamiento del mentón y de segundo intento de monta al interaccionar con la hembra estímulo. Sin embargo, no modificó los parámetros seminales evaluados. Es necesario realizar otros estudios con el fin de evaluar en conejos sementales el beneficio o desventaja sobre su eficiencia reproductiva al utilizar diferentes porcentajes de inclusión en la dieta de otros aceites vegetales.

Two groups were formed in order to evaluate the effect of an obesogenic diet on body and liver weight, body fat accumulation and the histometric characteristics of liver and testicles of New Zealand rabbits during the peripuberal period. One group received a standard farm diet and the other received a standard farm diet with canola oil added. During the study, weight of both groups was recorded. At the end of the study, the rabbits were euthanized and liver, testicles, and visceral, scapular and scrotal fat were weighed. Tissue samples were obtained from liver and testicles to carry out histometric analysis. Body weight, body mass index, liver and visceral fat weight were significantly different (P<0.01) in the obesogenic diet when compared to the control group. Notwithstanding, there were no significant differences between both groups in testicular weight, and scapular and scrotal fat (P>0.01). Histometry of the liver of the obesogenic diet group showed the greater total area and greater nucleus area of hepatocytes in the square lobe, right lobe and left lobe medial segment (P<0.01). Histometry of both testicles of individuals from the obesogenic diet group had a greater germinal epithelial thickness and intertubular intersticium (P<0.01). It is concluded that New Zealand male rabbits that received an obesogenic diet during 12 weeks had a higher liver and body weight, as well as, an important increased visceral fat. Furthermore, said diet caused histometric changes in liver and testicles. This set confirms that the domestic rabbit is a good model for the study of the body fat accumulation process associated to the consumption of an obesogenic diet and its effects on liver and testicles.

Con el propósito de evaluar el efecto de una dieta obesogénica sobre el peso corporal, hepático, acumulo de grasa corporal y las características histométricas del hígado y testículo de conejos Nueva Zelanda durante el período peripuberal, se formaron dos grupos; a uno se le proporcionó una dieta estándar de granja y el otro recibió una dieta estándar de granja adicionada con aceite de canola. Durante el estudio se registró el peso corporal de ambos grupos. Al final del estudio los conejos fueron eutanasiados y se pesó el hígado, testículos, la grasa visceral, escapular y escrotal. Se obtuvieron muestras de tejido hepático y testicular para realizar el análisis histométrico. El grupo con dieta obesogénica presentó diferencias significativas con respecto al grupo testigo, en las variables: peso corporal, índice de masa corporal, peso del hígado y de la grasa visceral (P<0,01). Por otra parte, no hubo diferencias significativas entre ambos grupos para las variables: peso de testículos, grasa escapular y escrotal (P>0,01). En la histometría del hígado el grupo con la dieta obesogénica presentó mayor área total y mayor área del núcleo de los hepatocitos en el lóbulo cuadrado, lóbulo derecho y lóbulo izquierdo segmento medial (P<0,01). En la histometría de ambos testículos del grupo con la dieta obesogénica se encontró mayor grosor del epitelio germinal y perímetro del intersticio intertubular (P<0,01). Se concluye que los conejos Nueva Zelanda machos que recibieron una dieta obesogénica durante 12 semanas presentaron mayor peso corporal, hepático y aumento de la grasa visceral. Además, presentaron cambios histométricos en hígado y testículo. Estos resultados en conjunto confirman que el conejo doméstico es un buen modelo para el estudio del proceso de acumulo de grasa corporal asociado al consumo de una dieta obesogénica y de sus efectos en el hígado y testículos.

The objective of this study was to establish in New Zealand female rabbits, the effect of ordinal number of parturitions on some histological parameters on the day after weaning. Tissue fragments of uterus and vagina were obtained from females of first, second and third parturitions and were processed imbedding them in paraffin in order to do histological cuts. In eight microscope fields captured by a camera connected to an optic microscope, the lumen and glandular endometrial epithelium height, as well as the thickness of vaginal and myometrium epithelium thickness were measured. From the results that were obtained it was concluded that there are significant differences (p<0.05) in histological parameters evaluated in uterus and vagina between does of different parturitions, which indicates that the number of parturitions has an effect on histometric characteristics of genital tract organs in breeder female rabbits.

El objetivo del presente estudio fue determinar en conejas Nueva Zelanda el efecto del número ordinal de partos sobre algunos parámetros histológicos, en el día posterior al destete. A partir de hembras de primero, segundo y tercer parto se obtuvieron fragmentos de tejido uterino y vaginal los que se procesaron mediante la técnica de inclusión en parafina para efectuar cortes histológicos. En ocho campos microscópicos capturados con una cámara conectada a un microscopio óptico se midió la altura del epitelio luminal y glandular del endometrio; el grosor del epitelio de la vagina y del miometrio. A partir de los resultados obtenidos se concluye que existen diferencias significativas (p<0,05) en los parámetros histológicos evaluados en útero y vagina entre las conejas de distintos partos, lo que indica que el número de partos tiene un efecto sobre las características histométricas de los órganos del tracto genital de la coneja.

Most of the neotropical bats reproduce in a seasonal fashion. The purpose of this study was to assess changes in testicular tissue by morphometry, in Tadarida brasiliensis bat, in a south urban zone of Mexico City during summer, autumn, and winter. Three sample collections (February, June, and September) from T. brasiliensis were carried out (n=6). Testicle fragments were obtained for histological studies. Diameter of the seminiferous tubules and interstitial space were measured, cellular populations were identified and counted. June samples showed smaller diameter of seminiferous tubules and larger interstitial space between tubules; also there were less number of germinal epithelium cells and spermatids were absent. Tissues from September and February showed a significant increase (p 0.05) in tubule diameter, germinal epithelium thickness, and number of germinal epithelium cells when compared to June samples. Only February samples showed presence of spermatids. Our results suggest the existence of seasonal variations in the reproductive activity of T. brasiliensis, under conditions in which the study was conducted.

La mayoría de los murciélagos neotropicales se reproducen de manera estacional. El objetivo de este estudio fue determinar los cambios morfométricos en el parénquima testicular del murciélago Tadarida brasiliensis que habita en un área urbana del sur de la Ciudad de México durante las estaciones de verano, otoño e invierno. Se obtuvieron fragmentos de tejido testicular para su estudio histológico. Se midió el diámetro de los túbulos seminíferos y el espacio interstisial y se identificaron y contaron distintos tipos celulares. En las muestras de junio se encontró un menor diámetro de los túbulos seminíferos y un mayor espacio intersticial entre los túbulos; también hubo un menor número de células del epitelio germinal y no hubo presencia de espermátides. En las muestras de tejido obtenidas en el mes de septiembre y febrero se observó un incremento significativo en el diámetro del túbulo, grosor del epitelio germinal y número de células del epitelio germinal cuando fueron comparadas con las muestras de junio (p 0.05). Solo en las muestras de febrero hubo presencia de espermátides. En conjunto, nuestros resultados sugieren la existencia de variaciones estacionales en la actividad reproductiva de T. brasiliensis, bajo las condiciones en que se realizó el estudio.

The purpose of this study was to analyze the macroscopic morphometry of the ovaries, uterus and vagina in rabbit does in the first, second and third parturition at 24 hours post-weaning in order to determine if there are differences between parturitions. Weaning of the litter was performed at 30 days post-partum and 24 hours later the does were euthanized. Right and left ovaries, uterine horns-cervix and vagina were removed, and the length of each one was measured. Significant differences were found in the average of the right ovary length between the first group with respect to second and third parturition group (P 0.05 and P 0.01). Also, left ovary length was different between the first and second with respect to third parturition group (P <0.001). Average total ovary length increased significantly as the number of parturitions increased in second and third parturition groups (P 0.01 and P0.001). The weight of the left and right ovaries was higher in does in their second and third parturition when compared to those in their first (P 0.5; P 0.01). The average total ovary weight increased significantly as the number of parturitions in second and third parturition groups (P0.001). The length of the left and right uterine horn-cervix of the rabbits after second and third parturition decreased when compared to that of females in their first parturition (P 0.05; P0.001). The average total uterine horns-cervix length decreased significantly as the number of parturitions in second and third parturition groups (P0.001). Furthermore, vagina length in females in their third parturition was greater than that of first and second parturition (P 0.01).The color of the vulva of the majority of females in their first parturition (3/4) was pale pink while. In contrast, the majority of females in their second parturition (3/4) had their vulva intensely red. All of the females (4/4) in the third parturition group had their vulva intensely red. We conclude that in female rabbits the macroscopic morphometric characteristics of ovaries, uterus and vagina, at 24 hours post-weaning vary according to the number of parturitions.

El propósito de este estudio fue analizar la morfometría macroscópica de los ovarios, útero y vagina en conejas de primero, segundo y tercer parto a las 24 horas post-destete con el propósito de determinar si existen diferencias entre los partos. El destete de la camada se realizó a los 30 días después del parto y 24 horas después fueron eutanasiadas. De cada animal se removieron los ovarios derecho e izquierdo, cuernos-cuello uterinos derecho e izquierdo y la vagina y se midió la longitud de cada uno de los órganos genitales. Se encontraron diferencias significativas en la longitud del ovario derecho entre el grupo de primer parto con respecto al de segundo y tercer parto (P 0,05 y P 0,01). Además, la longitud media de ovario izquierdo fue significativamente diferente entre el grupo de primero y segundo parto con respecto al de tercer parto (P <0,001). La longitud total de los ovarios aumentó con el número de partos y fue mayor en los grupos de segundo y tercer parto (P 0,01 y P 0,001). El peso de los ovarios derecho e izquierdo fue mayor en el grupo de segundo y tercer parto al compararlo con el de primero parto (P 0,5; P 0,01). Por otra parte, el peso total de los ovarios aumentó en los grupos de segundo y tercer parto (P 0,001). La longitud del cuerno-cuello uterino izquierdo y derecho de los grupos de segundo y tercer parto disminuyó al compararlo con el de las hembras de primer parto (P 0,05; P 0,001). La longitud total del cuerno-cuello uterino izquierdo y derecho disminuyó significativamente en las hembras de segundo y tercer parto (P 0,001). La longitud de la vagina de hembras de tercer parto fue mayor que la de primero y segundo parto (P 0,01). El color de la vulva de la mayoría de las hembras de primer parto (3/4) fue rosa pálido. En contraste, la mayoría de las hembras en su segundo parto (3/4) presentaron vulva de color rojo intenso. Todas las hembras del grupo de tercer parto (4/4) presentaron vulva de color rojo intenso. Se concluye que las características morfométricas macroscópicas de los ovarios, úteros y vagina de la coneja reproductora a las 24 horas post-destete varían con relación al número de partos.

Morphometric characteristics were determined from female reproductive organs of New Zealand rabbits with different body weight in order to understand the anatomical changes of the various organs of the reproductive tract of this breed in the peripuberal period of transition. Four groups were formed according to a percentage of adult weight (AW), Group A with 2 ± 0.1 kg (40% of AW), Group B with 3 ± 0.1 kg (60% of AW), Group C with 3.5 ± 0.1 kg (70% of AW) and Group D with 4 ± 0.1 kg (80% of AW). The rabbits were euthanized according to the required weight for each group and ovaries, uterine horns, cervix and vagina were removed, in order to measure their length. Ovarian tissue fragments were obtained and processed by paraffin embedding for histological analysis using Masson's trichrome stain. Primordial, primary, secundary and tertiary follicles were counted in the ovarian cortex and medulla. Regarding the length of the left and right ovary there were differences between Group A with respect to B, C and D (P < 0.05). Regarding the length of the uterine horns there were differences between Group A with respect to groups B, C and D in both horns (P < 0.05). Regarding the length of the cervix there was difference between Group B and the others (P < 0.05) and the vagina showed difference between Group A and the other groups (P < 0.05). With respect to the variable number of primordial follicles there was difference between Group A and the other groups (P < 0.05). For primary and secondary follicles there were no differences between the four groups (P > 0.05). In tertiary follicles there were differences between Group A and the others (P < 0.05). Based on the results of this study it is concluded that in New Zealand rabbits the histological and morphometric changes of the reproductive tract associated with body weight, are more dramatic in the transition range from 40% to 60% (groups A and B) of AW, hence, it is a critical period in the maturation of the female reproductive system.

Se determinaron las características morfométricas de los órganos genitales de conejas de la raza Nueva Zelanda con distintos pesos corporales en el periodo de transición peripuberal. Se formaron cuatro grupos de acuerdo con un porcentaje del peso adulto (PA); Grupo A con 2 ± 0.1 kg (40% del PA); Grupo B con 3 ± 0.1 kg (60% del PA); Grupo C con 3.5 ± 0.1 kg (70% del PA) y Grupo D con 4 ± 0.1 kg (80% del PA). A las conejas se les sometió a eutanasia de acuerdo con el peso requerido para cada grupo. Se removieron ambos ovarios, cuernos uterinos, cérvix y vagina con el fin de medir su longitud. Se obtuvieron fragmentos de tejido ovárico que se procesaron por inclusión en parafina para efectuar cortes histológicos que se tiñeron con tricrómica de Masson. Se contaron los folículos primordiales, primarios, secundarios y terciarios presentes en la corteza y médula ovárica. Respecto de la longitud de los ovarios derecho e izquierdo, se encontraron diferencias entre el Grupo A y los grupos B, C y D (P < 0.05). En cuanto a la longitud de los cuernos uterinos, se encontraron diferencias entre el Grupo A y los grupos B, C y D, en ambos cuernos (P < 0.05). En relación con la longitud del cérvix, hubo diferencia entre el Grupo A y los demás grupos (P < 0.05); en la vagina se encontró diferencia entre el Grupo A y el resto de los grupos (P < 0.05). Acerca del número de folículos primordiales, hubo diferencia entre el Grupo A y los otros grupos (P < 0.05). Para los folículos primarios y secundarios no se encontraron diferencias entre los cuatro grupos (P > 0.05). En los folículos terciarios hubo diferencias entre el Grupo A y los demás grupos (P < 0.05). Con base en los resultados obtenidos se concluye que en la coneja Nueva Zelanda los cambios histológicos y morfométricos de los órganos genitales asociados con el peso corporal, son más drásticos en el rango de transición de 40% al 60% (grupos A y B) del PA. Se concluye que se trata de un periodo crítico en el proceso de maduración del aparato reproductor femenino.

Dog overpopulation is a major health problem in developing countries due to the existence of some zoonotic diseases in which dogs act as reservoirs, besides the aggressive events to humans. Distribution, behavior patterns and combined methodologies are needed aspects in the design of successful dog population control programs. Coumestrol is a phytoestrogen which induces alterations in the reproductive male system, when bind to alpha and beta estrogen receptors acting as an agonist or antagonist fashion. Both receptor types also exist in central nerve regions governing sexual behavior of those animals such as the preoptic area, ventro medial nucleous, the amygdala and the olfactory bulb. In this study, 300 μg/kg coumestrol was orally administered to male dogs, once a week for a 4 week period. Dogs were freed for 5 min in a 9 m² area having a recipient containing vaginal discharges from estrous dog females and other similar vessel containing sterile saline solution. Smelling latency time for each recipient, smelling frequency and territory marking in response to stimulus, was recorded. At the end of the test, semen was collected and evaluated. A significative difference (P < 0.005) in smelling latency time and smelling frequency to the vaginal discharge was found; sperm count decreased from 518.4 ± 215.4 × 10(6) to 57.6 ± 50.4 × 10(6) at week 4 and the abnormal sperm morphology increased from 14.7 ± 3.3% at 0 week to 60.0 ± 20%. In conclusion, 300 μg/kg coumestrol given orally to male dogs for 4 weeks induces alterations in the olfactory behavior along with an oligo and teratospermic effect.

La sobrepoblación canina es un problema importante de salud pública debido a la transmisión de enfermedades zoonóticas y las agresiones hacia el humano. En el diseño de programas para controlar la población canina se requiere del conocimiento de su distribución, comportamiento y metodologías combinadas para tener éxito. El coumestrol es un fitoestrógeno que induce alteraciones en el aparato reproductor de los machos al unirse a los receptores estrogénicos alfa y beta, en donde actúa de manera dosis-dependiente como agonista o antagonista. Estos receptores también existen en las estructuras del sistema nervioso que regulan el comportamiento sexual, como la región preóptica, núcleo ventromedial, la amígdala y el bulbo olfatorio. En este estudio se administró coumestrol (300 μg/kg) por vía oral a perros machos, una vez por semana durante cuatro semanas; los perros se colocaron durante cinco minutos en un área aislada de 9 m² en donde se colocó un frasco conteniendo secreciones vaginales obtenidas de perras en estro y otro con solución salina estéril. Se registró el tiempo de latencia de los perros para olfatear cada frasco, su frecuencia de respuesta y la frecuencia con que se presentó conducta de marcaje en respuesta al estímulo. Una vez concluido el experimento, se obtuvo semen y se evaluó. Se encontró diferencia significativa (P < 0.005) en el periodo de latencia y frecuencia con la que el macho se acercó a oler las secreciones vaginales y el conteo espermático disminuyó de 518.4 ± 215.4 × 10(6) al inicio del estudio a 57.6 ± 50.4 × 10(6) en la semana cuatro y el porcentaje de anormalidades espermáticas aumentó de 14.7 ± 3.3 puntos en la semana 0 a 60.0 ± 20.0% en la semana cuatro. Se concluye que el tratamiento de perros con coumestrol durante cuatro semanas ocasiona alteraciones en la conducta de exploración olfatoria y tiene un efecto oligospérmico y teratospérmico.