ABSTRACT Solitary fibrous tumor (SFT) is a benign mesenchymal neoplasm originally described in pleura with a rare presentation in the oral cavity. Herein, we report a case of a 28-year-old male patient who presented an asymptomatic slow-growing mass in the anterior part of the tongue. Intraoral examination revealed a well-circumscribed mass covered by normal mucosa with a fibrous consistency. Due to non-specific clinical findings, the initial diagnostic hypotheses include benign submucosal neoplasms such as leiomyoma, neurofibroma, SFT, and others. An excisional biopsy was performed. Microscopically, the tumor was surrounded by a thick fibrous capsule; hypo and hypercellular areas were arranged in a storiform pattern with a stroma formed by collagen and abundant vascularization. Tumor cells showed immunopositivity for CD34 and STAT-6 and no expression of CD99, AML, S-100, and Ki-67. According to these findings, the diagnosis of SFT was established. After 24 months, the patient is asymptomatic and has no evidence of recurrence. Although oral involvement is rare, SFT should be included in the differential diagnosis of oral submucosal lesions.

Resumo As manifestações orais em pacientes com imunodeficiência comum variável (ICV) têm sido pouco estudadas e com resultados variados. Há escassos dados na literatura sobre os níveis de IgA, IgG e IgM na saliva, e pouco se sabe sobre o impacto clínico da deficiência destes anticorpos sobre a saúde bucal de pacientes com ICV. O objetivo deste estudo foi medir os níveis séricos e salivares de IgA, IgG e IgM em indivíduos com ICV e controles, e associar os níveis de imunoglobulinas com cárie e doença periodontal. Este foi um estudo de caso-controle, envolvendo 51 indivíduos ICV e 50 controles saudáveis. Todos os participantes foram examinados para cárie e doença periodontal. As amostras de sangue e saliva foram coletadas no mesmo dia do exame intraoral. Os níveis de IgA, IgM e IgG foram medidos por turbidimetria, e os títulos salivares de IgA, IgM e IgG foram avaliados através método imunoenzimático (ELISA). As incidências de cáries e gengivite foram significativamente maiores no grupo ICV do que no grupo controle (p<0,05). Os níveis de IgA e IgM salivares e no sangue foram significativamente reduzidos no grupo ICV, porém não houve associação dos níveis de imunoglobulina salivar com doença periodontal ou com a incidência de cárie (p>0,05 para ambos). Embora ICV foi associado com um aumento da susceptibilidade à cárie e gengivite, não estava associado com baixos níveis salivares de IgA e IgM.

Abstract Oral manifestations of common variable immunodeficiency (CVID) are rare, have rarely been studied and have given controversial results. There are few data about IgA, IgG, and IgM antibody salivary levels in the literature, and there are few papers about the clinical impact of antibody deficiencies and CVID on the oral health of such patients. The aim of this study was to measure serum and salivary IgA, IgG, and IgM levels in CVID participants and controls, and to associate immunoglobulin levels with caries and periodontal disease. This was a case-control study involving 51 CVID individuals and 50 healthy controls. All participants underwent examination for dental caries and periodontal disease. Blood and whole saliva samples were collected on the same day of the oral examination. Serum IgA, IgM, and IgG levels were measured by turbidimetry and salivary IgA, IgM, and IgG titers were assessed by enzyme-linked immunosorbent assay. Incidences of caries and gingivitis were significantly higher in the CVID group than in the control group (p<0.05). Salivary and blood IgA and IgM titers were significantly reduced in the CVID group, but there was no association of salivary immunoglobulin levels with periodontal disease or with caries incidence (p>0.05 for both). Although CVID was associated with increased susceptibility to caries and gingivitis, it was not associated with low salivary levels of IgA and IgM.

OBJECTIVES: Oral mucositis is a complication frequently associated with hematopoietic stem cell transplantation, decreasing a patient's quality of life and increasing the occurrence of opportunistic infections. The purpose of this study was to determine the incidence and severity of oral mucositis and to assess the correlation of this disease with the oral health of an individual at the time of hematopoietic stem cell transplantation. METHODS: Before transplantation, patients' oral health and inflammatory conditions were determined using the gingival index and the plaque index, which are based on gingival bleeding and the presence of dental plaque, respectively. Additionally, the dental health status was determined using the decayed, missing, and filled teeth index. The monitoring of oral mucositis was based on the World Health Organization grading system and was performed for five periods: from Day 0 to D+5, from D+6 to D+10, from D+11 to D+15, from D+16 to D+20, and from D+21 to D+30. RESULTS: A total of 97 patients (56% male and 44% female) who underwent hematopoietic stem cell transplantation at the Hospital das Clinicas da Faculdade de Medicina da Universidade de Sao Paulo between January 2008 and July 2009 were prospectively examined. The incidence of ulcerative mucositis was highest from days +6 to +10 and from days +11 to +15 in the patients who underwent autologous and allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, respectively. CONCLUSION: The data, including the dental plaque and periodontal status data, showed that these oral health factors were predictive of the incidence and severity of oral mucositis in a cohort of patients with similar conditioning regimens before hematopoietic stem cell transplantation.

RESUMO Objetivo: Estudos funcionais in vitro são essenciais para a compreensão do papel de microRNAs, pequenas moléculas de RNA que desempenham papel importante na regulação gênica, no câncer. Neste estudo, analisamos a viabilidade de linhagens celulares derivadas de carcinoma epidermoide de cabeça e pescoço, queratinócitos orais provenientes de culturas primárias e queratinócitos imortalizados, como modelos para estudos funcionais de microRNAs previamente identificados como desregulados nesse tipo de carcinoma. Métodos: Avaliamos a expressão de quatro microRNAs em linhagens celulares e em cultura primária de queratinócitos orais por meio de reações em cadeia da polimerase em tempo real específica. As linhagens celulares de carcinoma epidermoide de boca foram previamente caracterizadas quanto ao seu perfil de sequências de DNA do tipo STR (do inglês short tandem repeats ou repetições curtas em sequência) com o objetivo de confirmar a identidade da linhagem. Avaliamos ainda a possível influência da expressão gênica detectada na camada de sustentação usada no cultivo de queratinócitos no resultado global obtido. Resultados: Nossos resultados apontam diferenças significativas na expressão dos microRNAs entre linhagens celulares passíveis de serem utilizadas como modelos para estudos funcionais em carcinoma epidermoide de cabeça e pescoço. Ressaltam-se diferenças entre linhagens de carcinoma de língua e de faringe, bem como diferenças expressivas entre a linhagem de queratinócitos orais imortalizados e queratinócitos orais normais provenientes de culturas primárias. Conclusão: Culturas primárias de queratinócitos orais bem como linhagens tumorais são obtidas de forma relativamente simples. Entretanto, cada modelo celular possui características particulares que os tornam mais ou menos adequados para um determinado estudo. Conclui-se que a seleção cuidadosa das linhagens é fundamental para estudos funcionais sobre câncer.

ABSTRACT Objective: Functional in vitro studies are fundamental to understand the role of microRNAs, small non coding RNA molecules that function as post-transcriptional regulators, in cancer. The objective of this study was to determine the applicability of head and neck squamous cell carcinoma cell lines and human oral keratinocytes as models for functional studies on microRNAs previously identified as deregulated in head and neck squamous cell carcinomas. Methods: The expression level of four microRNAs was assessed in cell lines and in primary cultures of oral keratinocytes using specific real-time polymerase chain reactions. The identity of oral squamous cell carcinoma cell lines was confirmed by means of STR (short tandem repeats) profiling. The possible impact of feeder-layer gene expression in global microRNA expression results from keratinocyte primary culture was also evaluated. Results: Significant differences in microRNA gene expression were observed among squamous cell carcinoma cell lines, particularly among cells lines from distinct subsites, as well as between primary culture of human keratinocytes and immortalized keratinocyte cell lines. Conclusions: Primary cultures of human keratinocytes and diverse tumor cell lines are relatively easy to obtain. However, each cell model possesses a characteristic phenotype; whereas one may be useful for a specific study, it may be inappropriate for another. Therefore, it is imperative that suitable cell lines are cautiously selected for functional studies in cancer.

Human HOX genes encode transcription factors that act as master regulators of embryonic development. They are important in several processes such as cellular morphogenesis and differentiation. The HOXB5 gene in particular has been reported in some types of neoplasm, but not in oral cancer. OBJECTIVE: The present study investigated the expression of HOXB5 in oral squamous cell carcinoma (SCC) and in non-tumoral adjacent tissues, focusing on verifying its possible role as a broad tumor-associated gene and its association with histopathological and clinical (TNM) characteristics. MATERIAL AND METHODS: RT-PCR was performed to amplify HOXB5 mRNA in 15 OSCCs and adjacent non-tumoral epithelium. A possible association with TNM and histopathologic data was verifed by the chi-square and post-hoc t-test. RESULTS: HOXB5 was amplifed in 60% non-tumoral epithelium and in 93.3% carcinomas. No statistically signifcant differences were found regarding the HOXB5 mRNA expression and TNM or histological grade. CONCLUSION: HOXB5 is expressed in OSCCs and its role in cancer progression should be further investigated.

Previous studies indicated that patients with atherosclerosis are predominantly infected by human cytomegalovirus (HCMV), but rarely infected by type 1 Epstein-Barr virus (EBV-1). In this study, atheromas of 30 patients who underwent aortocoronary bypass surgery with coronary endartherectomy were tested for the presence of these two viruses. HCMV occurred in 93.3% of the samples and EBV-1 was present in 50% of them. Concurrent presence of both pathogens was detected in 43.3% of the samples.

FUNDAMENTOS: A deleção e mutação do gene CDKN2a que codifica um inibidor específico da ciclina dependente de quinase 4, a proteína p16, têm sido implicadas na tumorigênese do melanoma cutâneo. Entretanto, pouco se conhece sobre essas alterações genéticas em melanomas de mucosa oral. OBJETIVOS: Verificar a presença de alterações no gene p16 e sua expressão protéica em melanomas esporádicos orais e cutâneos. MATERIAL E MÉTODOS: Avaliaram-se 36 espécimes de melanoma primário (sete orais e 29 cutâneos). Analisaram-se três exons do gene p16, pela técnica da reação em cadeia da polimerase/polimorfismo conformacional de fita simples do DNA.Verificou-se a expressão tecidual de proteína p16 por técnica imuno-histoquímica. Relacionaram-se os resultados com a espessura dos melanomas cutâneos. RESULTADOS: Cinco dos sete melanomas orais e 17 dos 29 melanomas cutâneos apresentaram indício de alteração no gene p16. Alterações do exon 2 foram as mais freqüentes, sendo 19 casos nos produtos obtidos com o mesmo iniciador. Observou-se expressão tecidual de p16 em apenas um melanoma oral, em 10/13 (76,9%) casos de melanoma cutâneo de espessura até 1mm e em sete de oito (87,5%) casos de espessura superior a 1mm. CONCLUSÃO: A freqüência de indícios de alteração na análise genética de p16 nos melanomas de mucosa oral foi de 71,42% e de 58,6% nos cutâneos. É possível sugerir a participação de alterações do gene p16 na patogenia do melanoma esporádico de mucosa oral. Não houve relação da sugestão de alteração genética do gene p16 e de sua expressão tecidual com a espessura dos melanomas cutâneos de diferentes subtipos histológicos.

BACKGROUND: Deletion and mutation of gene CDKN2a, which encodes a specific inhibitor of cyclin-dependent kinase 4 (CDK4), the protein p16, has been regarded as related to cutaneous melanoma tumorigenesis. However, little is known about those alterations in oral mucosa melanomas. OBJECTIVES: To verify possible p16 gene mutations and its protein expression in sporadic melanomas in oral mucosa and skin. MATERIALS AND METHODS: 36 primary sporadic melanoma paraffin-embedded specimens (seven oral mucosa and 29 skin lesions) were subjected to molecular analysis of exons 1, 2 and 3 of p16 gene using polymerase chain reaction/single strand conformational polymorphism technique. p16 protein expression was demonstrated by an immunohistochemical technique. Data obtained were correlated with tumor thickness. RESULTS: Five out of seven oral melanomas, and 17 out of 29 skin lesions displayed signs of alteration in p16 gene molecular analysis. Alterations in exon 2 of p16 gene were the most frequent. Protein p16 expression was observed in only one oral melanoma and in 10/13 (76.9%) skin melanomas up to 1.0 mm-thick and in 7/8 (87.5%) lesions thicker than 1.0 mm. CONCLUSIONS: Frequency of alterations disclosed by p16 gene molecular analysis in oral mucosa melanomas was 71.42% and 58.6% in cutaneous lesions. The obtained data suggest that p16 gene alterations play a role in the pathogenesis of sporadic melanoma of the oral mucosa. Neither protein p16 expression, nor p16 gene alteration had correlation with tumor thickness.

O papilomavírus humano (HPV) constitui um grupo de vírus associados com lesões benignas e malignas do epitélio da pele e das mucosas. Alguns tipos de HPV, ditos oncogênicos, especialmente os HPVs 16 e 18, estão fortemente correlacionados com os cânceres cervical e anogenital, e também têm sido implicados na gênese do carcinoma epidermóide de boca. O objetivo deste estudo foi investigar a incidência de infecção pelo HPV, em 40 casos de carcinoma epidermóide de boca emblocados ou não em parafina, utilizando-se para isso a amplificação do DNA viral por PCR. Foram utilizados os iniciadores GP5+/GP6+, que amplificam parte da região L1 do vírus, comum a mais de 22 tipos de HPVs. Como controle positivo para as reações, foi utilizado um caso de condiloma, o qual foi positivo para os HPVs 16 e 18 na hibridização in situ. A amplificação para o HPV foi constatada apenas no controle positivo; nenhum dos casos de carcinoma epidermóide em estudo mostrou amplificação para o DNA viral. A ausência de amplificação de DNA do HPV nos casos de carcinoma epidermóide estudados sugere que esse vírus nem sempre participa do processo de carcinogênese. Essa diferença em relação a outros estudos provavelmente se dá por questões populacionais, ou mesmo de metodologia entre os diferentes trabalhos citados na literatura.

Human Papilomaviruses (HPV) are a group of viruses associated with benign and malignant lesions of cutaneous and mucosal epithelia. Some "high risk" HPV types, especially HPV 16 and 18, are strongly correlated with cervical and anogenital cancers and are also related to the genesis of oral squamous cell carcinomas (OSCC). The aim of this work was to investigate the incidence of HPV infection in 40 paraffin-embedded or fresh specimens of OSCC, using PCR amplification of the viral DNA. Literature based primers (GP5+/GP6+) were used in order to amplify HPV DNA from the L1 gene, present in more than 22 types of HPV. A condyloma case with HPV 16 and 18 detected by in situ hybridization was used as a positive control. Amplification of HPV was observed only in the positive control. No squamous cell carcinoma cases showed DNA viral amplification. Absence of HPV DNA amplification by PCR in the analyzed specimens of OSCCs suggests that this virus not always plays a role in the carcinogenesis process. Discrepancy with some studies found in the literature may be related to methodology or population differences.

A leucoplasia pilosa (LP) é uma lesão associada ao comprometimento do sistema imune e seu diagnóstico é determinado pela demonstração da presença do vírus Epstein-Barr (EBV) no tecido lesionado. O objetivo deste trabalho foi desenvolver uma metodologia simples para auxiliar no diagnóstico da LP, utilizando-se a técnica da PCR como uma alternativa para evidenciar o EBV em esfregaços da lesão. Amostras de DNA foram obtidas por meio de raspado de borda lateral de língua, de 38 pacientes adultos, sendo estes: 29 pacientes HIV positivos (4 com evidência clínica de leucoplasia pilosa, 4 que haviam apresentado LP previamente, mas não no momento da coleta, e 21 sem evidência clínica de leucoplasia pilosa) e 9 voluntários sadios para o grupo controle. O DNA foi extraído do material obtido por raspagem e amplificado pela PCR utilizando-se iniciadores específicos para o EBV. Dos 29 casos de pacientes portadores do vírus HIV, 22 (75,86%) foram positivos para o EBV, sendo: 2 de pacientes com evidência clínica de LP, 4 de pacientes que haviam apresentado LP previamente e 16 de pacientes sem sinais clínicos de LP. No grupo controle, as amostras de 5 (55,56%) indivíduos clinicamente sadios mostraram amplificação para o EBV. Concluímos que o uso da PCR em esfregaços sugere uma alta sensibilidade e baixa especificidade no diagnóstico da leucoplasia pilosa.

Oral hairy leukoplakia (OHL) is a lesion associated with a compromised immune system, and its diagnosis is determined by the demonstration of the presence of Epstein-Barr virus (EBV) in lesional tissue. The purpose of this article was to develop a simple technique to help the diagnosis of OHL, using PCR as an alternative technique to evidence EBV in scrapings. DNA samples were obtained by scraping the lateral border of the tongue of 38 adult patients: 29 HIV-positive patients (4 with clinical evidence of OHL; 4 with history of OHL, but without lesion at the moment the samples were collected; and 21 without clinical evidence of OHL), and 9 healthy volunteers for the control group. DNA was extracted from scrapes and amplified by PCR using specific primers for EBV. Of the 29 cases of HIV-positive patients, 22 (75.86%) were positive for EBV: 2 patients with clinical evidence of OHL, 4 patients with history of OHL, but without lesion at the moment the samples were collected, and 16 patients without clinical evidence of OHL. In the control group, samples of 5 (55.56%) healthy volunteers presented amplification for EBV. We concluded that the use of PCR in oral scrapes suggests a high sensitivity but low specificity for the diagnosis of OHL.

A saliva é usualmente depositada em marcas de mordida encontradas em homicídios, agressões e outros crimes. Neste estudo, a saliva obtida de voluntários foi depositada na pele, recuperada para extração e tipagem do DNA, para avaliação de sua utilização e sua contribuição na odontologia legal. Vinte amostras de saliva foram coletadas de diferentes doadores e utilizadas como amostras de suspeitos. Cinco dessas amostras foram sorteadas e depositadas (250 µl) na pele. A saliva foi coletada da pele usando-se a técnica do duplo esfregaço. O DNA da saliva e das amostras de saliva depositadas sobre a pele foi extraído pelo método fenol-clorofórmio. As amostras de DNA foram amplificadas por PCR para a tipagem do DNA usando-se um grupo de 15 STRs. O DNA recuperado da saliva depositada na pele foi de 14 a 10 vezes menor que o DNA das 20 amostras de saliva. O perfil do DNA foi demonstrado em 4 de 5 amostras de saliva depositadas, e a razão de verossimilhança das amostras baseada em dados da população brasileira foi 1:11, 1:500, 1:159,140 e 1:153,700,123. Nossos resultados indicam que procedimentos padronizados utilizados para coleta e extração de DNA de saliva depositada podem ser utilizados como um método para recuperar DNA de saliva em casos forenses; entretanto, é importante observar que amostras forenses podem apresentar problemas na recuperação do DNA em quantidades adequadas. Este estudo sugere que a análise de saliva depositada sobre a pele pode ser incorporada ao conjunto de provas de um inquérito criminal já que possui um grande poder discriminatório.

Saliva is usually deposited in bite marks found in many homicides, assault and other criminal cases. In the present study, saliva obtained from volunteers was deposited on skin and recovered for DNA extraction and typing in order to evaluate its usefulness for practical case investigation and discuss the contribution of forensic dentistry to saliva DNA typing. Twenty saliva samples were colleted from different donors and used as suspects' samples. Five of these samples were randomly selected and deposited (250 µl) on arm skin. Saliva was collected from skin using the double swab technique. DNA from saliva and skin-deposited saliva samples was extracted by the phenol-chloroform method. DNA samples were amplified by PCR for DNA typing using a set of 15 STRs. The recovery of DNA from saliva deposited in the skin was 14 to 10 times lower than DNA quantity from saliva samples. DNA typing was demonstrated in 4 of 5 deposited saliva samples, the likelihood ratios estimated for these samples based on data of the Brazilian population were 1:11, 1:500, 1:159.140 and 1:153.700.123. Our results indicate that standardized procedures used for DNA collection and extraction from skin-deposited saliva can be used as a method to recover salivary DNA in criminal cases. However, it is important to observe that DNA recovery in forensic samples can be difficult. This study suggests that the analysis of saliva deposited on skin be incorporated into a criminal investigation since it may have great discriminatory power.

Vários estudos mostram que a perda da função do gene TP53 desempenha um importante papel na gênese de diversas neoplasias, incluindo as neoplasias de glândula salivar. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a presença de mutações no gene TP53 em neoplasias de glândula salivar. Para isso, DNA genômico foi extraído de casos de adenoma pleomórfico (AP), carcinoma em adenoma pleomórfico (CAP), carcinoma mucoepidermóide (CME), carcinoma adenóide cístico (CAC) e adenocarcinoma polimorfo de baixo grau de malignidade (APBG) emblocados em parafina. Foi realizada amplificação pela técnica da PCR dos exons 5 a 8 e em seguida a SSCP (análise de conformação de fita simples). Foi observada alteração na mobilidade das bandas em 9 das 18 neoplasias estudadas, principalmente nos exons 5 e 8. Esses achados sugerem que mutações no gene TP53 estão relacionadas à patogênese das neoplasias de glândula salivar e que os exons 5 e 8 estão mais freqüentemente envolvidos.

Many studies have demonstrated that loss of TP53 gene function has an important role in the genesis of many neoplasms, including salivary gland neoplasms. The purpose of this study was to examine the mutation profile of the TP53 gene in salivary gland neoplasms. Genomic DNA was extracted from paraffin-embedded tissues of pleomorphic adenoma, carcinoma in pleomorphic adenoma, mucoepidermoid carcinoma, adenoid cystic carcinoma and polymorphous low grade adenocarcinoma. Exons 5 to 8 of the TP53 gene were amplified by polymerase chain reaction (PCR) to perform single-stranded conformational polymorphism (SSCP) analysis. Band shifting was observed in exons 5, 6 and 8 in 9 out of 18 neoplasms. The results of this study suggest that mutations in TP53 gene are related to salivary gland neoplasms pathogenesis and that exons 5 and 8 are most frequently involved.

Homeobox genes are regulatory genes encoding nuclear proteins that act as transcription factors, regulating aspects of morphogenesis and cell differentiation during normal embryonic development of several animals. Vertebrate homeobox genes can be divided in two subfamilies: clustered, or HOX genes, and nonclustered, or divergent, homeobox genes. During the last decades, several homeobox genes, clustered and nonclustered ones, were identified in normal tissue, in malignant cells, and in different diseases and metabolic alterations. Homeobox genes are involved in the normal teeth development and in familial teeth agenesis. Normal development and cancer have a great deal in common, as both processes involve shifts between cell proliferation and differentiation. The literature is accumulating evidences that homeobox genes play an important role in oncogenesis. Many cancers exhibit expression of or alteration in homeobox genes. Those include leukemias, colon, skin, prostate, breast and ovarian cancers, among others. This review is aimed at introducing readers to some of the homeobox family functions in normal tissues and especially in cancer.

Os genes homeobox são genes reguladores que codificam proteínas nucleares as quais atuam como fatores de transcrição, regulando vários aspectos da morfogênese e da diferenciação celular durante o desenvolvimento embrionário normal de diversos animais. Os genes homeobox de vertebrados podem ser subdivididos em duas famílias: os agrupados, ou HOX, e os não agrupados, ou divergentes. Durante as últimas décadas, vários genes homeobox, agrupados e não agrupados, foram identificados em tecidos normais, em células malignas e em diferentes doenças e condições metabólicas. Os genes homeobox estão envolvidos, por exemplo, no desenvolvimento normal do dente e em agenesias dentárias de ocorrência familiar. O desenvolvimento normal e o câncer têm muito em comum, já que ambos envolvem proliferação celular e diferenciação. A literatura tem mostrado um número cada vez maior de trabalhos relacionando os genes homeobox à oncogênese. Muitos tipos de câncer exibem expressão ou alteração nos genes homeobox. Eles incluem leucemias, câncer de cólon, pele, próstata, mama e ovário, entre outros. Esta revisão objetiva levar os leitores a conhecer algumas das funções da família homeobox nos tecidos normais e especialmente no câncer.