RESUMO O presente trabalho avaliou o papel do baço no armazenamento e na reativação das linhagens de células B, representadas por células IgM positivas imunomarcadas no tecido esplênico, bem como a funcionalidade dessas células, sobre a cinética dos linfócitos e na produção sistêmica de anticorpos em tilápias-do-nilo (Oreochromis niloticus). Foram separados dois grupos: grupo memória, constituído por peixes previamente imunizados com hemácia de carneiro a 2,5%, para a geração da memória imune, e o grupo naive, que recebeu o mesmo volume de solução salina a 0,65%. Após 32 dias, os dois grupos foram submetidos a uma nova dose do antígeno na mesma concentração, volume e via de inoculação. A reativação dos clones de memória foi evidenciada pelo aumento do número de células IgM positivas no baço do grupo memória no dia zero/pré-imune. Além disso, o mesmo grupo apresentou aumento dos títulos de anticorpos séricos no 14º dia e no número absoluto de linfócitos no 21º dia em relação ao grupo naive. Esses resultados sugerem que o baço não seja apenas um local de armazenamento, mas também de reativação de células B de memória em tilápia-do-nilo.

ABSTRACT This work aimed to evaluate the role of the spleen in storage and reactivation of the memory B cells, represented by IgM positive cells and the systemic production of sheep antibodies anti-red cell in Nile tilapia (Oreochromis niloticus). Two groups were established: the memory group, containing fish previously immunized with a 2,5% sheep anti-red cell, to generate the immune memory; and the naive group, containing fish that received a 0,65% saline solution. After 32 days, both groups were subjected to a new dose of the same antigen at the same concentration, volume, and inoculation via. The memory clones reactivation was correlated to the increase of the IgM positive cells in the spleen in the memory group at 0 day. The memory group showed an increase in the absolute number of lymphocytes at 21 days and an increase in the antibodies at 14 days after inoculation when compared to the naive group. The results suggest that the spleen may be a storage and reactivation place of memory B cells in Nile tilapia.

RESUMO Avaliou-se a macroscopia, a microestrutura, a resposta clínica e histopatológica de implantes de acrilonitrila butadieno estireno (ABS) e poliamida em coelhos submetidos à evisceração. Para o estudo experimental, os implantes foram elaborados por meio de prototipagem rápida, com 12mm de diâmetro, pesados e tiveram suas superfícies avaliadas macroscopicamente e por microscopia eletrônica de varredura. Adicionalmente, foi realizado ensaio de compressão para determinar a força necessária para fraturar os implantes. Após a evisceração do olho esquerdo, nove coelhos da raça Nova Zelândia receberam implantes de poliamida e nove outros receberam implantes de ABS. Os animais foram avaliados diariamente nos primeiros 15 dias após a cirurgia e a cada sete dias até o fim do período experimental (90 dias). Avaliação histopatológica foi realizada aos 15, 45 e 90 dias após a cirurgia. Os implantes de ABS pesaram 0,44g, e os de poliamida 0,61g. A microscopia eletrônica de varredura demonstrou que os implantes de ABS eram formados por microporos equidistantes, enquanto os de poliamida apresentavam microporos de vários tamanhos. A força necessária para fraturar os implantes de ABS foi de 14.39±0.60 Mpa, enquanto para os de poliamida foi de 16.80±1.05Mpa. Quinze dias após a cirurgia, foi observada infiltração fibrovascular centrípeta. Os implantes podem ser utilizados para correção de cavidades anoftálmicas por se mostrarem inertes, biocompatíveis e permitirem a infiltração tecidual.

ABSTRACT The purpose of this study was to evaluate acrylonitrile butadiene styrene (ABS) and polyamide implants in rabbits submitted to evisceration at the macroscopic and microstructure level and to assess clinical response and histopathological changes as well. For the experimental study implants of 12mm diameter were prepared by rapid prototyping, weighed and the outer and inner surfaces evaluated macroscopically and by electron microscopy. In addition, a compression test was performed and ultrastructural damage was then determined. After evisceration of the left eyeball, nine New Zealand rabbits received ABS implants and nine others received polyamide implants. The animals were assessed daily for 15 days after surgery and every seven days until the end of the study (90 days). Histopathological evaluation was performed at 15, 45 and 90 days after surgery. The ABS implants weighed approximately 0.44g, while the polyamide ones weighed 0.61g. Scanning electron microscopy demonstrated that the ABS implants had regular-sized, equidistant micropores, while the polyamide ones showed micropores of various sizes. The force required to fracture the ABS implant was 14.39 ±0.60 Mpa, while for the polyamide one, it was 16.80 ±1.05 Mpa. Fifteen days after surgery, we observed centripetal tissue infiltration and scarce inflammatory infiltrate. Implants may be used in the filling of anophthalmic cavities, because they are inert, biocompatible and allow tissue integration.

A bactéria Streptococcus agalactiae é um potente agente causador de surtos por doenças bacterianas em peixes. O estresse provocado pelo manejo zootécnico e pela má qualidade ambiental torna a tilápia susceptível às infecções por essa bactéria. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a resistência de tilápias-do-nilo imunizadas com soro hiperimune anti-S. agalactiae, posteriormente desafiadas com cepa homóloga da mesma bactéria. Após determinação da DL 50 de S. agalactiae, 36 tilápias foram distribuídas em quatro aquários, dois para o grupo controle e dois para inoculação celomática para produção de anticorpos anti-S. agalactiae. No 21° e 28° dias, foi coletado sangue para obtenção de soro hiperimune utilizado na transferência passiva. Em seguida, 30 tilápias foram distribuídas em três aquários e submetidas a três tratamentos: GI: controle; GII: imunizadas com o soro inativado; GIII: imunizadas com soro ativo. Após 48 horas e sete, 14, 21, 28 e 35 dias, foram realizadas coletas de sangue para titulação de anticorpos anti-S. agalactiae utilizando-se o teste de aglutinação direta. Para avaliar a taxa de sobrevivência, outras 30 tilápias foram distribuídas em três aquários e submetidas a três tratamentos (GI: controle; GII: imunizadas com soro inativado; GIII: imunizadas com soro ativo). Após 48 horas da imunização, as tilápias foram desafiadas via celomática com 100µL de S. agalactiae e avaliadas duas vezes ao dia, pelo período de 35 dias. Os resultados dos títulos séricos de anticorpos foram detectados pela aglutinação direta até o 21° dia pós-transferência passiva, e, no mesmo período, houve proteção de 80% entre os grupos imunizados com soro inativado e soro ativo contendo anticorpos anti-S. agalactiae. Ao final, os grupos soro inativado e soro ativo apresentaram 60 e 80% de proteção, respectivamente, enquanto no grupo controle 100% dos peixes adoeceram, apresentando sinais graves da infecção, e foram eutanasiados. Não houve diferença estatística significativa na taxa de proteção entre os grupos imunizados.

The Streptococcus agalactiae bacteria is a potent agent which causes outbreaks of bacterial diseases in fish. The stress caused by management and poor environmental quality makes tilapia susceptible to infections, including by bacterium. The aim of this study was to evaluate the resistance of the Nile tilapia immunized with hyperimmune serum against S. agalactiae subsequently challenged with homologous strain of the same bacteria. After determining the DL 50 of S. agalactiae, 36 tilapias were distributed in 4 aquariums, 2 for the control group and 2 for the group via coelomic, inoculated with the DL 50 for anti-S. agalactiae antibodies production. On the 21st and 28th day blood was collected for the obtainment of hiperimmune serum used in passive transference. Then, 30 tilapias were distributed in 3 aquariums submitted to 3 treatments (GI: control; GII: immunized with inactivated-serum; GIII: immunized with non-inactivated serum). After 48 hours, 7, 14, 21, 28 and 35 days blood collections were done for anti-S. agalactiae antibodies titration using the direct agglutination test. For survival evaluation 30 tilapias were distributed in 3 aquariums and submitted to 3 treatments (GI: control; GII: immunized with inactivated-serum; GIII: immunized with non-inactivated serum). After 48 hours of inoculation tilapias were challenged with 100µL of S. agalactiae and monitored twice a day for 35 days. The results showed that titers of antibodies were detected by direct agglutination until the 21st day after passive transference and during the same period the protection between the groups immunized with inactivated serum and non-inactivated serum contending anti-S. agalactiae antibodies was of 80% after challenge with S. agalactiae. In the end, the serum-inactivated serum and active groups had 60 and 80% protection, respectively, while 100% of the fish in the control group developed severe signs of infection and were euthanized. There was no statistical difference in the survival rate between the immunized groups.

Avaliaram-se a macroscopia e a microestrutura de esferas compostas por cimento ósseo de alfa-fosfato tricálcico de dupla pega munido de canais de interconexão (alfa-TCP-i) e a integração do implante ao tecido orbital de coelhos através de análise macroscópica e histopatológica. A superfície interna e externa do alfa-TCP-i foi avaliada macroscopicamente e por microscopia eletrônica. Após enucleação do bulbo ocular esquerdo, 12 coelhos da raça Nova Zelândia receberam implantes do alfa-TCP-i com 12mm de diâmetro. A avaliação clínica foi realizada diariamente nos primeiros 15 dias e depois a cada quinze dias até o fim do período de estudo. Para análise morfológica, seguiu-se a exenteração de três animais por período experimental (15, 45, 90 e 180 dias). As superfícies externa e interna do implante mostraram-se compactas, sólidas e lisas, com seis canais que se interconectavam centralmente. A microarquitetura caracterizou-se pela formação de colunas de cristais hexagonais. Sinais de infecção, exposição, deiscência de sutura ou extrusão não foram notados em nenhum dos animais durante o período de estudo. A análise morfológica revelou a presença de fina cápsula ao redor do implante de onde surgiram projeções fibrovasculares que o penetraram através dos canais de interconexão. Nos primeiros dias após a inserção das esferas, notou-se intensa reação inflamatória que se mostrou ausente aos 180 dias. O implante do cimento de alfa-fosfato tricálcico foi bem tolerado em coelhos, mostrou-se relativamente inerte e permitiu a infiltração de tecido fibrovascular através dos canais de interconexão.

The purpose of this study was to evaluate the macroscopy and microstructure of a double setting alpha-tricalcium phosphate bone cement sphere provided with interconnection channels (alpha-TCP-i), as well as the integration of the implant with the rabbits' orbital tissue, through macroscopic analysis and histopathology. The external and internal surfaces of the alpha-TCP-i were evaluated macroscopically and by electron microscopy. Twelve New Zealand rabbits received 12mm implants of alpha-TCP-i following enucleation of the left eye. The clinical assessment was undertaken daily during the first 15 days, followed by fortnightly assessment until the end of the study period. For the morphological analysis, exenteration was performed in 3 animals per experimental period (15, 45, 90 and 180 days). The external and internal surfaces of the implant appeared solid, smooth and compact, with six channels which interconnected centrally. The micro-architecture was characterized by the formation of columns of hexagonal crystals. No signs of infection, exposure, dehiscence of sutures or extrusion of the implant were noted in any of the animals during the entire period of the study. The morphological evaluation demonstrated the presence of a thin capsule around the implant, from whence appeared fibro-vascular projections, which penetrated it through the interconnecting channels. In the first days after the insertion of the implant, an intense inflammatory reaction was noted. At 180 days, however, there were no signs of inflammation. The alpha-tricalcium phosphate cement implant was well tolerated in this rabbit model and appeared to be relatively inert with some fibrovascular ingrowth through the large channels.

Um dos fatores que afetam o desenvolvimento da planta da mandioca é o controle inadequado das plantas daninhas. Objetivou-se com este trabalho avaliar o desenvolvimento da cultura de mandioca sob interferência de plantas daninhas. Foram realizados dois experimentos: no primeiro, os tratamentos foram compostos por períodos de convivência da cultura da mandioca com as plantas daninhas por 25, 50, 75, 100 e 125 dias após plantio e, no segundo, as plantas de mandioca permaneceram livres das plantas daninhas pelos mesmos períodos preestabelecidos. Avaliações de altura de plantas e diâmetro de caule foram realizadas aos 75, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275, 300, 325 e 350 dias após o plantio. Nas colheitas dos experimentos, realizadas aos 330 dias após plantio, avaliou-se o número e o diâmetro das raízes por planta. A convivência por intervalo igual ou superior a 50 dias após o plantio reduziu o diâmetro de caule e a altura das plantas de mandioca, assim como o número e comprimento de raízes tuberosas. O controle das plantas daninhas nessa cultura deve ser iniciado em torno de 25 dias após o plantio.

One of the factors affecting the development of the cassava plant is the inadequate control of weeds. Thus, this work aimed to evaluate the development of the cassava plant under weed interference during different coexistence periods. Two experiments were installed in adjacent areas, in Viçosa, Minas Gerais - Brazil. In the first experiment, the treatments consisted of different periods of coexistence between the cassava culture and the weeds (25, 50, 75, 100 and 125 days after planting). In the second experiment, the cassava plants remained weed-free for the same pre-established periods. For both experiments, the 1.0 x 0.5 m spacing was adopted, being the useful portion area constituted by the two central lines, with 1.0 m being left at each extremity as front borders, adding 8.0 m2 up. Plant height and stem diameter were evaluated twelve times after planting at: 75, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275, 300, 325 and 350 days. Plant number, root length and diameter evaluations were carried out 12 months after planting. Coexistence equal or superior to 50 day interval after planting caused drastic reduction in the stem diameter and height of the cassava plants. Weed control in cassava crop should be initiated around 25 days after planting.

Avaliaram-se os efeitos do transplante de células tronco autógenas do limbo esclerocórneo de cães, sobre lesões córneo-limbais. Empregaram-se 18 cães, distribuídos em dois grupos, GI e GII. Nos animais do GI (n=12), foram realizados transplantes de limbo, após 30 dias da destruição das células tronco-límbicas. Nos do GII (n=6), realizou-se apenas a destruição do limbo (controle). Aos 3, 7, 15, 30, 60 e 120 dias do transplante de limbo (GI) e aos 33, 37, 45, 60, 90 e 150 dias da destruição do limbo (GII), os olhos foram coletados por enucleação subconjuntival, para estudos em microscopia de luz. A destruição do limbo resultou em completa excisão das células tronco, com perda da transparência corneal. O transplante do limbo evitou a conjuntivalização na área em que foi realizado. Os animais do grupo-controle manifestaram conjuntivalização em 360º e vascularização corneal. Na anatomopatologia, em nenhum dos períodos foi possível distinguir o enxerto do epitélio corneal normal. As células caliciformes foram observadas nos animais do GII, nos períodos 33, 37, 60, 150 dias. No GI, apenas um cão manifestou células caliciformes de forma discreta, aos 60 dias do transplante. O transplante autógeno foi eficiente em possibilitar a melhoria da transparência córnea, sem intercorrências oculares.

The effects of sclerocorneal limbal stem cell autograft transplantation in dogs with corneal wounds were studied. Eighteen dogs were divided in two groups (GI and GII). The animals of GI (n=12) underwent limbal transplantation 30 days after the destruction of limbal stem cells. The dogs of GII (n=6) only underwent destruction of stem cells (control group). Light microscopy examination of the right eye was performed on days 3, 7, 14, 30, 60, and 120 after limbal transplantation (GI), and on days 33, 37, 44, 60, 90, and 150 after limbal destruction (GII). Results showed a complete destruction of limbal stem cells with loss of corneal transparency. Limbal transplantation prevented conjunctivalization in grafted area. Corneal vascularization and a 360º corneal conjunctivalization were noted in the control dogs (GII). Corneal transparency was restored from day 60th after surgery. Histological examination did not distinguish the transition between the graft and the normal corneal epithelium at anytime. Goblet cells were found in control animals (GII) on 33, 37, 60, and 150 days, whereas a single grafted dog (GI) presented a few goblet cells on day 60th post-transplantation. Limbal autograft transplantation was effective in restoring corneal clarity with no development of ocular complications.

Realizaram-se 25 artrodeses em 21 casos, quatro em gatos e 17 em cães, utilizando hidroxiapatita sintética como substituto ao enxerto ósseo autógeno esponjoso fresco, sendo oito na articulação do carpo, 10 na articulação do tarso, seis na do cotovelo e uma na do joelho. As avaliações radiográficas foram realizadas aos 30 dias em um animal, aos 45 dias em outro e aos 60 dias nos 19 casos restantes. Visibilizou-se união óssea em 24 artrodeses e a não-união em um cotovelo foi atribuída a falha na estabilização. O retorno à função do membro foi classificado de bom a excelente em 22 casos. A hidroxiapatita foi capaz de viabilizar o crescimento ósseo e mostrou-se factível para utilização na prática cirúrgica rotineira em pequenos animais.

Twenty-five arthrodeses were performed in four cats and 17 dogs using synthetic hydroxyapatite as fresh autogenous graft cancellous bone substitute. Arthrodesis was performed in the carpal joint in eight cases, in the tarsal joint in 10, in the elbow joint in six, and in the knee joint in one case. The mean radiographic follow-up time was 30 days in one animal, 45 days in another animal and 60 days in the 19 remaining cases. Bone union was observed in 24 arthrodeses. Non-union of one elbow arthrodesis was due to failure of stabilization. Restoration of limb functionality was classified as good to excellent in 22 cases. Hydroxyapatite was able to promote bone growth and is suitable for using in routine surgical procedures for small animals.

As conseqüências da completa remoção do epitélio do limbo esclerocorneano foram avaliadas, bem como o modelo utilizado para tal, em que se empregou o n-heptanol e a ceratectomia superficial. O n-heptanol e a ceratectomia associados possibilitaram a completa excisão das células-tronco. Da destruição dessas células decorrem alterações tectônicas significativas factíveis para estudos dos transplantes de córnea.

The consequences of complete removal of the sclerocorneal limbus epithelium were evaluated, as well as the model for such, in which n-heptanol and superficial keratectomy were used. The association of n-heptanol and keratectomy allowed a complete excision of stem cells. Moreover, the destruction of these cells led to significant tectonic alterations that could be employed as a feasible model for clinical experimentation of corneal transplantation.

OBJETIVO. Identificar correlação entre duração do tratamento dialítico, gravidade da doença renal cística adquirida (DRCA) medida pelo tamanho dos cistos e seu efeito sobre a correção espontânea da anemia. MATERIAL E MÉTODOS. Foram selecionados dez pacientes, seis do sexo masculino e quatro do feminino, com mais de cinco anos em tratamento dialítico. Nenhum paciente selecionado tinha doença renal policística bilateral como doença primária. A avaliação renal foi feita com ultra-sonografia. DRCA foi caracterizada pela presença de quatro ou mais cistos em cada rim. Os maiores cistos foram medidos para efeito de correlação. O diagnóstico da anemia foi estabelecido pelo valor do hematócrito e da hemoglobina séricos. Foram analisados, também, uréia, creatinina, albumina, ferro, capacidade total de combinação do ferro e o percentual de saturação da transferrina séricos. RESULTADOS. Os pacientes estavam adequadamente dialisados (uréia e creatinina séricas = 98,7 ± 35mg/dL e 9,7 ± 2,7mg/dL, respectivamente), com bom estado nutricional (albumina sérica = 4,5 ± 0,5g/dL), e tinham razoável reserva de ferro (ferro sérico = 80 ± 34mg/dL). A prevalência de DRCA foi de 80%. Não detectamos nenhum sinal ultra-sonográfico de malignidade nesses cistos. Houve correlação significante entre tempo de diálise e hematócrito (R = 0,70; p < 0,05). O tamanho dos cistos teve correlação direta e significante com os valores do hematócrito (R = 0,74; p < 0,05). CONCLUSÕES. Os resultados mostram que a melhora espontânea da anemia observada nos pacientes em diálise crônica se correlaciona de forma significante com a gravidade da doença renal cística adquirida. Isso sugere uma atividade funcional dos cistos renais na produção de eritropoetina.

OBJECTIVE - To identify a correlation between dialysis treatment duration and severity of acquired cystic disease of the end-stage kidney measured by cyst sizes; and assess its effect on spontaneous improvement of anemia. MATERIALS AND METHODS - Ten patients, 6 males and 4 females were selected, who have been on hemodialytic treatment for more than 5 years. There was no patient selected with autosomal dominant polycystic kidney disease. The renal evaluation has been made through ultrasonographic studies. Acquired cystic disease of the end-stage kidney was characterized by finding four or more cysts in both kidneys. The largest cysts were measured for correlation effect. The diagnosis of anemia was established by hematocrit and hemoglobin serum values. It has also been analyzed serum urea, creatinine, albumin, iron, total iron-binding capacity and the per cent saturation of serum transferrin were tested. RESULTS - The patients were properly dialysed (serum urea and creatinine = 98.7 ± 35mg/dL e 9.7 ± 2.7mg/dL, respectively). They were in good nutritional shape (serum albumin = 4.5 ± 0.5g/dL) and had normal serum iron level (serum iron = 80 ± 34 mg/dL). The prevalence of acquired renal cystic disease was 80%. No finding of malignancy has been detected in these cysts. There was a significant correlation between time on dialysis treatment and hematocrit values (R=0.70; p<0.05). Cyst sizes had a direct and significant correlation with hematocrit levels (R = 0.74; p < 0.05). CONCLUSION - These results show that spontaneous improvement on anemia seen in patients on chronic dialysis has a significant correlation with the severety of acquired cystic disease of the end-stage kidney. Our data suggest a functional role of acquired kidney cysts on endogenous erithropoietin production