RESUMO Foi comparada a resposta imune de fêmeas suínas adultas imunizadas contra a leptospirose, com vacinas monovalentes produzidas com L.interrogans, sorovar Canicola estirpe LO4, isolada no Brasil. A vacina foi empregada em duas formas: cultura de bactérias totais inativada e acrescida do adjuvante de hidróxido de alumínio (WC-AlOH3) e a do tipo de subunidade constituída apenas por uma fração de lipopolisacarídios (LPS) extraídos do envelope externo da bactéria tendo como adjuvante o monofosforil lipídio A, também extraído da parede da leptospira (LPS-MPLA). O delineamento experimental incluiu: grupo 1 (n = 11): controle não imunizado; grupo 2 (n = 11): imunizado com duas aplicações em intervalo de 30 dias da vacina LPS MFLA; Grupo 3 (n = 11): imunizado com duas aplicações em intervalo de 30 dias da vacina WC-AlOH3. Todos os grupos foram imunizados simultaneamente sem ser considerado o estágio de gestação dos animais. Os níveis de anticorpos pós-vacinais, aglutinantes e neutralizantes foram avaliados, respectivamente, pelos testes de soroaglutinação microscópica com antígenos vivos (SAM) e o de inibição do crescimento de leptospiras in vitro (ICLIV). O monitoramento sorológico foi efetuado a cada 30 dias durante quatro meses após aplicação da primeira dose da vacina. Os animais do grupo controle, não vacinados, não apresentaram anticorpos aglutinantes para o sorovar Canicola durante todo o período experimental. Aos 32 e 68 dias da primo-vacinação, os níveis de anticorpos aglutinantes do grupo 2 (LPS-MPLA) foram significativamente superiores aos observados no grupo 3 (WC AlOH3), respectivamente p = 0,013 e p = 0,031. As diferenças observadas nos níveis de anticorpos inibidores do crescimento de leptospiras in vitro, induzidos pelas duas vacinas, não foram significativas (p > 0,05). A despeito do pico de anticorpos aglutinantes pós-vacinais ter sido registrado aos 68 dias da primeira imunização, os níveis mais elevados de anticorpos inibidores do crescimento de leptospiras já foram observados aos 30 dias da primo-vacinação. A vacina de subunidade apresentou a mesma capacidade de indução de anticorpos neutralizantes que a vacina de bactérias totais.

ABSTRACT It was compared the antibody response of sows immunized with two experimental vaccines produced with L.interrogans, serovar Canicola, strain LO-4, isolated in Brazil.One of the vaccines was the usual bacterin (whole culture inactivated with phenol and adjuvanted with aluminum hydroxide -WC-AlOH3) and the other one was a subunit vaccine produced with a lipopolysaccharide (LPS) fraction extracted from the bacteria outer envelop and with the lipid A, also extracted from the leptospira wall as adjuvant (LPS-MPLA). Experiment was as follows: group 1 (n = 11), not immunized control, group 2, (n = 11): two immunization with 30 days interval of LPS-MPLA vaccine and group 3 (n = 11): two immunization with 30 days interval of WC-AlOH3 vaccine All three groups were simultaneously immunized, independently of pregnancy stage. Both agglutinin and neutralizing post vaccination antibodies levels were measured respectively by the microscopic sera agglutination with live antigens test (MAT) and the in vitro leptospira growth inhibition test (GIT). Sera collections were performed each 30 days during four months after the first vaccination. Non vaccinated control group animals presented no agglutinating antibodies against Canicola serovar during the whole experiment. At 32 and 68 post vaccination days the agglutinating antibodies levels of group 2 (LPS-MPLA) were significantly higher than the observed in group 3 (WC AlOH3), respectively, p = 0.013 and p = 0.031. The differences observed in the growth inhibition antibodies titers of the two vaccines tested were not significant (p > 0.05). Despite the peak of post-vaccination agglutinins have been registered at 68 days after first immunization, higher levels growth inhibition antibodies were detected at 30 days of first vaccination. Subunit vaccine presented the same immunogenic capacity for the production of neutralizing antibodies as the whole culture one.

RESUMO A soroprevalência e os possíveis fatores de risco para a infecção por Brucella spp. foram estimados em 2.109 vacas do Município de Monte Negro, Rondônia. De cada animal selecionado foi coletado soro sangüíneo e para as propriedades envolvidas foi preenchido um questionário. As amostras coletadas foram analisadas pelas provas de Antígeno Acidificado Tamponado corado com Rosa Bengala, Soroalgutinação Lenta em Tubos e 2-Mercaptoetanol. A prevalência total da infecção por Brucella spp. em vacas no Município de Monte Negro foi de 15%, sendo 54 (63%) fazendas com animais reagentes. A regressão logística sugeriu que rebanhos com mais de 25 vacas (OD = 2,8; P = 0,02) e a presença de suínos (OD = 2,5; P = 0,04) foram fatores associados a soropositividade dos bovinos. Outras variáveis associadas à infecção pelo teste do Qui-Quadrado foram repetição de cio e nascimento de bezerros enfermos (P < 0,05).

ABSTRACT The seroprevalence of Brucella spp. and the possible associated risk factors were estimated for 2,109 adult cows in Monte Negro county, State of Rondônia, Brazil. A questionnaire was completed for each farm where cattle were sampled. Laboratory tests were Rose-Bengal Agglutination, Standard Tube agglutination, and Mercaptoethanol. The adjusted overall prevalence of Brucella spp. seropositive cows for Monte Negro county was 15% and at least 54 herds (63%) were positive. A logistic regression analysis suggested that the herd size of more than 25 cows and the presence of pigs were significant factors associated with the seropositivity (herd size: OD = 2.8; P=0.02; presence of pigs: OD = 2.5; P =0.04). Other significant variables associated to the infection, analysed by Chi-Square were the presence of seropositivity cows with the herd that were repeat breeders and birth of weak calves (P < 0.05).

Foram testados, pela técnica de soroaglutinação microscópica aplicada à leptospirose, 329 cães provenientes do município de Monte Negro, RO, dos quais 156 eram da área urbana e 173 da área rural. Simultaneamente foi aplicado questionário para verificar a existência de possíveis fatores de risco pela regressão logística. Abordaram-se questões referentes a idade, sexo, dieta, tipo de criação, ambiente, contato com outras espécies e hábito de caça. Foram detectadas reações com títulos >100 em 27,3%, com 90 cães positivos ao agente, das quais 23,7% eram da área (37/156) urbana e 30,6% (53/173), da área rural (P>0,05). Os sorovares predominantes, reatores com títulos mais elevados, foram Autumnalis (22%), Pyrogenes (12%), Canicola (10%) e Shermani (7,5%). Cães com idade acima de 12 meses apresentaram maior ocorrência de anticorpos quando comparados aos cães mais jovens (P<0,05). Dentre os fatores de risco analisados, foram significativos a alimentação (dieta à base de ração comercial - odds ratio: 3,3; intervalo de confiança: 95%: 1,2 - 9,2; P=0,02) e o sexo (macho - odds ratio: 2,3; intervalo de confiança: 95%: 1,3 - 3,9; P=0,003). Ressalta-se a ocorrência de reações para sorovares mantidos na natureza por animais silvestres.

The microscopic agglutination test was applied to 329 samples taken from 156 dogs from urban area and 173 from rural areas of Monte Negro County, Rondônia State, Brazil, to determine anti-Leptospira spp. antibodies. A survey was concomitantly done to detect eventual risk factors thru the use of logistic regression. Studied variables were age, sex, diet, management, environment, contact with other species and hunting habit. Titers >100 were detected in 27.3% (90/329) of the dogs, being 23.7% (37/156) urban and 30.6% (53/173) rural dogs. The most frequent serovars were Autumnalis (22.0%), Pyrogenes (12.0%), Canicola (10.0%) and Shermani (7.5%). Dogs older than 12 months showed higher positive frequencies than younger animals (P<0.05). Risk factor were associated with commercial food as compared to homemade food (odds ratio: 3.3; 95% confidence interval : 1.3 - 3.9; P=0.02) and associated with sex, with higher occurrence in males than in females (odds ratio: 2.3; 95% confidence interval: 1.3 - 3.9; P=0.003). It was emphasized the serological occurrence of serovars kept and spread in nature by wild animals.

RESUMO O meio de Middlebrook 7H11 modificado foi comparado ao meio de Stonebrink, a fim de se avaliar a sensibilidade e o tempo de detecção de micobactérias em amostras de leite, experimentalmente inoculadas com Mycobacterium bovis (estirpe AN5), em uma diluição 10-2, e submetidas a duas diferentes técnicas de processamento: gordura (técnica 1) e sedimento (técnica 2), descontaminadas pelo método de Petroff modificado (adicionado de Tween 80), confrontadas com a técnica do leite total submetida ao método de Petroff tradicional. Os resultados destas técnicas (1 e 2) foram comparados entre si pelos testes não paramétricos de Wilcoxon e de MannWhitney e demonstraram que as técnicas 1 e 2 forneceram maior recuperação de micobactérias e proporção de cultivos positivos nos meios de Stonebrink e Middlebrook 7H11; o meio de Middlebrook 7H11 permitiu a visualização precoce das micobactérias, podendo ser utilizado como uma técnica de diagnóstico rápida da tuberculose bovina, em amostras de leite, para fins de vigilância epidemiológica.

ABSTRACT The modified Middlebrook 7H11 cultivation technique was comparedwith the tradicional culture techniqueby using the Stonebrink medium. The purpose of this comparison was to to evaluate the sensitivity and the time for the detection of positive cultures of mycobacteria in milk samples experimentally inoculated with Mycobacterium bovis (strain AN5), at a dilution of 10-2 , and submitted to two types of procedures: technique 1 (skin milk) and technique 2 (pellet), decontamined by modified the Petroff´s method, added with Tween 80, and compared with total milk samples submitted to tradicional Petroff method in the same media types. The results of the two tecniques were compared with each other by the non-parametric Wilcoxon test and Mann-Whitney. The results obtained from this experiment showed that: techniques 1 and 2 produced great number of colonies and higher proportion of positive culture than the tradicional one by using total milk; the time needed for the detection of mycobacteria colonies was slightly shorter by the thin layer technique than by the tradicional culture method; in order to improve the epidemiological surveillance, this technique should be used as a complementary method to the tradicional one in the diagnosis of bovine tuberculosis.

Avaliou-se o perfil sorológico de 17 bezerras búfalas vacinadas nos dias zero, 30 e 210 com bacterina pentavalente comercial contra leptospirose, empregando-se a prova de soroaglutinação microscópica com antígenos vivos, durante o período de 360 dias. Utilizaram-se quatro bezerras-controle, e todos os animais foram negativos no dia zero. Nos animais vacinados, foram observadas reações aos 60 dias para todos os sorovares, associadas a títulos máximos para Canicola, Grippothyphosa e Pomona. No 90° dia, houve declínio acentuado dos títulos para todos os sorovares e ausência de títulos para Hardjo. Nos dias 120º, 150º, 180º e 210º, ocorreram oscilações de títulos para todos os sorovares. No 240º dia, foram encontrados títulos máximos para Hardjo, elevação para os outros sorovares e ausência de título para Canicola. Nos dias 270º, 300º e 330º, foi observado declínio gradativo dos títulos. No 360º dia, foram encontrados títulos residuais para Icterohaemorrhagiae, Grippothyphosa e Pomona e ausência de reação para os outros sorovares. Inferiram-se a reduzida persistência dos títulos vacinais mesmo após o reforço e revacinação e a baixa interferência da vacinação no diagnóstico sorológico.

The serological profile of 17 buffalo calves vaccinated at zero, 30 and 210 days of age using a commercial pentavalent bacterin against leptospirosis was evaluated using microscopic seroagglutination, during 360 days post-vaccination (PV). Four non-vaccinated buffalo calves were used as control. All animals studied showed a negative reaction at day zero. In the vaccinated animals, the serological responses for all serovars were detected at the 60th day PV, with maximum agglutinin levels for Canicola, Grippothyphosa and Pomona. The antibody levels decreased for all serovars at day 90 with zero titters for Hardjo serovar. At days 120, 150, 180 and 210 PV were observed oscillations of titters for all serovars. At day 240, maximum antibody levels for Hardjo, an increase of titters for others serovars and no reaction for Canicola were found. At days 270, 300 and 330 a gradual decrease of antibody levels were observed. At day 360 residual titters for Icterohaemorrhagiae, Grippothyphosa and Pomona, and no reaction for the other serovars were observed. The results indicate a short persistency of seric agglutinin levels induced by vaccination, even after improvement and preparation of the vaccine reinforcement, and low interference of vaccination with serodiagnosis.

RESUMO Com o objetivo de determinar a freqüência de aglutininas anti-leptospiras, foi realizado um inquérito sorológico em 164 matrizes de uma granja suína de ciclo completo localizada no Município de Ibiúna, Estado de São Paulo, Brasil. Para a detecção de anticorpos anti-leptospiras, foi utilizada a técnica de soroaglutinação microscópica (SAM), utilizando-se culturas vivas de 22 sorovares patogênicos e dois sorovares saprófitos de Leptospira spp. Para a determinação do sorovar mais provável, foram considerados o título de aglutininas e a freqüência de soros reagentes, e soros que apresentaram títulos iguais para dois ou mais sorovares foram excluídos desta análise. Das 164 matrizes suínas, 27 (16,5%) foram soropositivas para pelo menos um dos sorovares empregados. O sorovar mais provável foi o Hardjo (Hardjobovis), com 13 (54,2%) soros reagentes. Também foram constatadas reações sorológicas para os seguintes sorovares: Shermani (16,6%), Bratislava (12,5%), Autumnalis (12,5%) and Icterohaemorrhagiae (4,2%).

ABSTRACT A serologic survey was conducted among 164 sows from a single farrow-to-finish swine herd located in the Ibiúna municipality, state of São Paulo, Brasil, to determine the frequency of antileptospires agglutinins. For detection of anti-leptospires antibodies, the microscopic serumagglutination test (MAT) was carried out using live cultures of 22 pathogenic and two saprophytic Leptospira spp. serovars. The most frequent serovar was found crossing the results of frequency and titer of agglutinins, and sera presenting equal titers for two or more serovars were not considered for this analysis. Of the 164 sows, 27 (16.5%) were seropositive for at least one Leptospira spp. serovar. The most frequent serovar was Hardjo (Hardjobovis), with 13 (54.2%) reactant sera. Other reactant serovars and respective frequency were: Shermani (16.6%), Bratislava (12.5%), Autumnalis (12.5%) and Icterohaemorrhagiae (4.2%).

Investigou-se a prevalência de leptospirose em cães da cidade de Campina Grande, PB, e realizou-se um estudo de fatores de risco para a infecção. Foram examinadas 285 amostras de soro sangüíneo de cães colhidas durante a campanha de vacinação anti-rábica animal, conduzida em setembro de 2003. O diagnóstico da leptospirose foi realizado pela técnica de soroaglutinação microscópica, utilizando-se uma coleção de 22 sorovares. Para a caracterização do sorovar mais provável, levou-se em conta a titulação e a freqüência. A prevalência encontrada foi de 21,4% (IC 95% = 16,8%-26,6%), com maior freqüência dos sorovares autumnalis (7,4%), copenhageni (6%) e canicola (2,1%). A análise de regressão logística multivariada mostrou que os fatores de risco para a leptospirose foram: idade superior a um ano (odds ratio = 3,00; P = 0,006), raça não definida (odds ratio = 4,02; P = 0,011) e ocorrência de enchentes (odds ratio = 2,32; P = 0,039).

The prevalence of leptospirosis was investigated in dogs from Campina Grande city, State of Paraíba, Brazil, and the risk factors for infection were analyzed. Two hundred and eighty five blood samples were collected from dogs during the rabies vaccination campaign, in September 2003. The diagnostic method run for leptospirosis was the microscopic agglutination test, using a batch of 22 leptospiral serovars. The most prevalent serovar was found crossing the results of frequency and titer of agglutinins. The prevalence was 21.4% (95% CI = 16.8%-26.6%) and most frequent reactant serovars were autumnalis (7.4%), copenhageni (6%) and canicola (2.1%). The multivariate logistic regression analysis showed that the risk factors for leptospirosis were: age older than one year (odds ratio = 3.00; P = 0.006), mixed breed (odds ratio = 4.02; P = 0.011) and occurrence of floods in the area (odds ratio = 2.32; P = 0.039).