Objetivo: pesquisar a freqüência de mutação pontual no códon 12 do gene K-ras, em espécimes cirúrgicos de pacientes portadoras de carcinoma ductal invasivo de mama. Material e Métodos: foram utilizados cortes de 50 espécimes cirúrgicos incluídos em blocos de parafina, de pacientes portadoras de carcinoma ductal invasivo de mama, com graus histológicos II e III. Os cortes destinados ao estudo foram desparafinizados e submetidos a extração do DNA, por meio do emprego da proteinase K. Para a amplificação do fragmento a ser analisado, utilizou-se a reação em cadeia da polimerase, seguida por clivagem com o emprego de enzima de restrição de comprimento variável (RFLP). A verificação da presença de mutação nas amostras foi feita com o emprego de eletroforese em gel de agarose, com marcador de peso molecular "Ladder 123" (GIBCO-BRL), e a documentação dos resultados, mediante fotografia, utilizando-se luz ultravioleta transmitida. Resultados: em cinco dos 50 carcinomas ductais invasivos de mama estudados (10%) constatou-se a presença de mutação no códon 12 do gene K-ras, sendo todas elas polimórficas para esse caráter. As afetadas pelos tumores, que apresentavam a referida mutação, encontravam-se na pós-menopausa. Em quatro dos cinco casos em que se constatou a mutação, o grau histológico dos tumores era II e no caso restante III.

Purpose: the frequency of point mutation at codon 12 of the K<FONT FACE=Symbol>¾</FONT>ras gene was determined in paraffin blocks of surgical specimens from patients who had ductal invasive breast cancer. Material and Methods: Fifty surgical specimens blocked in paraffin from patients with ductal invasive breast cancer, with histological degree II and III, were used. The polymerase chain reaction (PCR) was used for amplification of DNA fragments studied. The material cleavage was obtained with restriction fragment length polymorphisms (RFLP). The electrophoresis in agarose gel, with Ladder 123 (GIBCO-BRL) marker, was employed to verify if some mutation had occurred. The results were shown using ultraviolet beam and recorded by photos. Results: mutations at codon 12 of K-ras gene were found in five samples (10%) and all of them were polymorphic for this caracter. The five patients whose tumors expressed mutation were in the postmenopausal period. Four patientes had tumors of histological degree II and one, III.

Muitos dos oncogenes detectados em neoplasias malignas humanas pertencem à família do gene ras. Mutações nos códons 12, 13 ou 61 em um dos tres genes ras; H-ras, K-ras e N-ras, convertem esses genes em oncogenes ativos. Ensaios rápidos para detecção dessas mutações pontuais, tais como a reação em cadeia de polimertização têm sido desenvolvidos nas últimas décadas e usados para investigar o papel dos genes ras mutados na patogênese de tumores humanos. As mutações no gene ras podem ser encontradas numa variedade de tipos de tumores. Incidências mais altas aparecem em adenocarcinomas do pâncreas (90%) e cólon (50%). Analisamos 11 amostras de tumores primários de pâncreas com diferentes metástases, três amostras de cistadenoma mucinoso e dois casos de ausência de tumor de material incluído em parafina, de onde extraímos o DNA para realização das amplificações. Os resultados mostraram que todos os casos de tumores apresentaram a banda de 135 pares de bases correspondente ao gene mutado e para os normais, a banda característica de 106 pares de bases. Nos três casos de cistadenoma mucinosos, não detectamos a banda de 135 pares de bases , apenas a banda de 106 pares de bases.

Mutations at codons 12, 13, or 61 of the H-ras, K-ras, and N-ras have been detected in human neoplasias by a variety of techniques. Some of these techniques are very sensitive and can detect K-ras mutation in 90% of the cases of pancreatic adenocarcinomas. We analyzed 11 samples of pancreatic adenocarcinoma, three samples of pancreatic mucinous cystadenoma, and two samples without tumors in formalin-fixed paraffin embedded tissue sections. K-ras mutations at codon 12 were detected by a two-step PCR-enriched technique in all the samples of pancreatic adenocarcinoma, but not in cystadenoma or control samples. This technique may be useful for early detection of pancreatic cancer.