ABSTRACT Purpose: This clinical study compared autologous serum eye drops diluted with 0.5% methylcellulose and 0.9% saline solution. The subjective criteria for symptom improvement and the objective clinical criteria for response to therapy were evaluated. Methods: This longitudinal prospective study enrolled 23 patients (42 eyes) with persistent epithelial defects or severe dry eye disease refractory to conventional therapy who had been using autologous serum 20% prepared with methylcellulose for > 6 months and started on autologous serum diluted in 0.9% saline solution. The control and intervention groups consisted of the same patients under alternate treatments. The subjective criteria for symptom relief were evaluated using the Salisbury Eye Evaluation Questionnaire. The objective clinical criteria were evaluated through a slit-lamp examination of the ocular surface, tear breakup time, corneal fluorescein staining, Schirmer’s test, rose Bengal test, and tear meniscus height. These criteria were evaluated before the diluent was changed and after 30, 90, and 180 days. Results: In total, 42 eyes were analyzed before and after 6 months using autologous serum diluted with 0.9% saline. No significant differences were found in the subjective criteria, tear breakup time, tear meniscus, corneal fluorescein staining, or rose Bengal test. Schirmer’s test scores significantly worsened at 30 and 90 days (p=0.008). No complications or adverse effects were observed. Conclusions: This study reinforces the use of autologous serum 20% as a successful treatment for severe dry eye disease resistant to conventional therapy. Autologous serum in 0.9% saline was not inferior to the methylcellulose formulation and is much more cost-effective.

RESUMO Objetivo: Este estudo comparou o colírio de soro au tólogo manipulado com metilcelulose a 0,5% com solução salina 0,9%. Critérios subjetivos de melhora dos sintomas e critérios clínicos objetivos para resposta à terapia foram avaliados. Métodos: Este estudo prospectivo longitudinal envolveu 23 pacientes (42 olhos) com defeitos epiteliais persistentes ou doença de olho seco grave refratária à terapia convencional que usavam colírio de soro autólogo 20% preparado com metilcelulose por mais de 6 meses e iniciaram soro autólogo diluído em solução salina 0,9%. Os grupos controle e intervenção consistiam dos mesmos pacientes sob tratamentos alternados. Os critérios subjetivos para o alívio dos sintomas foram avaliados usando o Salisbury Eye Evaluation Questionnaire. Os critérios objetivos foram avaliados por meio de exame em lâmpada de fenda incluindo: tempo de ruptura da lágrima, coloração da córnea com fluoresceína, teste de Schirmer, coloração com rosa bengala e altura do menisco lacrimal. Esses critérios foram avaliados antes da troca do diluente e após 30, 90 e 180 dias. Resultados: Um total de 42 olhos foram analisados antes e após 6 meses usando soro autólogo diluído com solução salina 0,9%. Nenhuma diferença significativa foi encontrada nos critérios subjetivos, tempo de ruptura da lágrima, menisco lacrimal, coloração com fluoresceína ou rosa bengala. Os resultados dos testes de Schirmer pioraram significativamente em 30 e 90 dias (p=0,008). Não foram observadas complicações ou efeitos adversos. Conclusões: Este estudo reforça o uso do colírio de soro autólogo 20% como um tratamento de sucesso para a doença do olho seco grave resistente à terapia convencional. O soro autólogo diluído em solução salina a 0,9% não foi inferior à formulação de metilcelulose.

RESUMO Objetivo: Este estudo comparou o colírio de soro au tólogo manipulado com metilcelulose a 0,5% com solução salina 0,9%. Critérios subjetivos de melhora dos sintomas e critérios clínicos objetivos para resposta à terapia foram avaliados. Métodos: Este estudo prospectivo longitudinal envolveu 23 pacientes (42 olhos) com defeitos epiteliais persistentes ou doença de olho seco grave refratária à terapia convencional que usavam colírio de soro autólogo 20% preparado com metilcelulose por mais de 6 meses e iniciaram soro autólogo diluído em solução salina 0,9%. Os grupos controle e intervenção consistiam dos mesmos pacientes sob tratamentos alternados. Os critérios subjetivos para o alívio dos sintomas foram avaliados usando o Salisbury Eye Evaluation Questionnaire. Os critérios objetivos foram avaliados por meio de exame em lâmpada de fenda incluindo: tempo de ruptura da lágrima, coloração da córnea com fluoresceína, teste de Schirmer, coloração com rosa bengala e altura do menisco lacrimal. Esses critérios foram avaliados antes da troca do diluente e após 30, 90 e 180 dias. Resultados: Um total de 42 olhos foram analisados antes e após 6 meses usando soro autólogo diluído com solução salina 0,9%. Nenhuma diferença significativa foi encontrada nos critérios subjetivos, tempo de ruptura da lágrima, menisco lacrimal, coloração com fluoresceína ou rosa bengala. Os resultados dos testes de Schirmer pioraram significativamente em 30 e 90 dias (p=0,008). Não foram observadas complicações ou efeitos adversos. Conclusões: Este estudo reforça o uso do colírio de soro autólogo 20% como um tratamento de sucesso para a doença do olho seco grave resistente à terapia convencional. O soro autólogo diluído em solução salina a 0,9% não foi inferior à formulação de metilcelulose.

ABSTRACT Purpose: This clinical study compared autologous serum eye drops diluted with 0.5% methylcellulose and 0.9% saline solution. The subjective criteria for symptom improvement and the objective clinical criteria for response to therapy were evaluated. Methods: This longitudinal prospective study enrolled 23 patients (42 eyes) with persistent epithelial defects or severe dry eye disease refractory to conventional therapy who had been using autologous serum 20% prepared with methylcellulose for > 6 months and started on autologous serum diluted in 0.9% saline solution. The control and intervention groups consisted of the same patients under alternate treatments. The subjective criteria for symptom relief were evaluated using the Salisbury Eye Evaluation Questionnaire. The objective clinical criteria were evaluated through a slit-lamp examination of the ocular surface, tear breakup time, corneal fluorescein staining, Schirmer’s test, rose Bengal test, and tear meniscus height. These criteria were evaluated before the diluent was changed and after 30, 90, and 180 days. Results: In total, 42 eyes were analyzed before and after 6 months using autologous serum diluted with 0.9% saline. No significant differences were found in the subjective criteria, tear breakup time, tear meniscus, corneal fluorescein staining, or rose Bengal test. Schirmer’s test scores significantly worsened at 30 and 90 days (p=0.008). No complications or adverse effects were observed. Conclusions: This study reinforces the use of autologous serum 20% as a successful treatment for severe dry eye disease resistant to conventional therapy. Autologous serum in 0.9% saline was not inferior to the methylcellulose formulation and is much more cost-effective.

ABSTRACT We report a patient with fungal keratitis caused by a multiresistant Fusarium solani in a tertiary care hospital located in southern Brazil. A 55-year-old man with a history of ocular trauma presented with keratitis in left eye. The patient has a complicated clinical course and failed to respond to local and systemic antifungal treatment, and required eye enucleation. Despite multiple topical, intraocular and systemic antifungal treatments, hyphal infiltration persisted in the corneal transplant causing continuous recurrences. The cultures of corneal biopsy scrapings were positive for Fusarium spp. The organism was identified to species level by multi-locus sequencing for translation elongation factor 1 alpha (EF-1α), and RNA polymerase II subunit (RPB2). In vitro antifungal susceptibility testing of the isolate by the broth microdilution method, according to CLSI M38-A2, disclosed susceptibility to natamycin and resistance to amphotericin B, voriconazole, itraconazole and fluconazole. Considering previous unsuccessful antifungal treatments due to multiple drug resistance, the eye was enucleated. Our case report illustrates that management of fungal keratitis remains a therapeutic challenge. Optimal treatment for F. solani infection has not yet been established and should include susceptibility testing for different antifungal agents.

OBJETIVOS: Avaliar a incidência de positividade de culturas de halos doadores córneo-esclerais preservados em Optisol GS, identificar os patógenos envolvidos, a sensibilidade dos mesmos à gentamicina e a ocorrência de infecções em olhos receptores. MÉTODOS: Foram analisadas retrospectivamente 163 culturas de halos córneo-esclerais cujos botões corneanos foram utilizados em transplantes de córnea no Hospital de Clínicas de Porto Alegre entre janeiro de 2001 e janeiro de 2003. Os halos foram divididos em dois segmentos, metade inoculada em meio Sabouroud e a outra metade em tioglicolato, com posterior semeadura em ágar-sangue, ágar-chocoloate e meio de MacConkey, conforme necessidade para identificação dos patógenos. Os prontuários dos pacientes receptores foram revisados. RESULTADOS: Dos 163 halos analisados, 11 apresentaram culturas positivas, correspondendo a 6,7% do total. Destes, quatro foram por Staphylococcus epidermidis, um por Staphylococcus aureus, um por Serratia sp, um por Pseudomonas aeruginosa e os outros quatro por diferentes subtipos de Candida (dois por Candida sp, um por Candida albicans e um por Candida parapapilosis). No antibiograma, todas as bactérias apresentaram-se resistentes à gentamicina. Nenhum olho que recebeu córnea com cultura positiva apresentou infecção após a cirurgia. CONCLUSÕES: Baixos índices de positividade de cultura de halos utilizados em transplantes de córnea no Hospital de Clínicas de Porto Alegre foram encontrados. Os patógenos mais freqüentemente identificados não apresentam boa cobertura pelos antimicrobianos presentes nos meios de preservação. A cultura de halos corneanos é recomendada para auxílio no tratamento de possível infecção ocular pós-cirúrgica.

PURPOSE: To determine the incidence of positive corneoscleral rim cultures preserved in Optisol GS medium, to identify pathogens involved and possible recipient eye infection. METHODS: A hundred sixty-three corneoscleral rim cultures penetrating keratoplasties performed from January 2001 to January 2003 in the Hospital de Clínicas de Porto Alegre were reviewed. Enucleations and corneal storage were done as aseptic as possible and gentamicin 0.3% was instilled. Corneoscleral rim was divided into two segments, half was inoculated into Sabouraud broth and the other half into thioglycolate broth; inoculation into blood agar, chocolate agar and MacConkey agar was done later if necessary for pathogen identification. The receiver's eye data were reviewed. RESULTS: There were eleven positive cultures (6.7%) out of 163 evaluated corneoscleral rim cultures. Of these, four were Staphylococcus epidermidis, one was Staphylococcus aureus, one was Serratia sp., one was Pseudomonas aeruginosa and the other four were different subtypes of Candida (two Candida sp., one Candida albicans and one Candida parapapilosis). All pathogens were resistant to gentamicin. None of the eleven cases of positive corneoscleral rim cultures resulted in ocular infection at the receiver's eyes (six months follow-up). CONCLUSIONS: We found low rates of positive corneoscleral rim cultures after penetrating keratoplasty at the Porto Alegre Clinical Hospital. The most frequent involved pathogens were Staphylococcus sp and Candida sp. Although we did not identify any postoperative infection at the receiver's eyes, we recommend corneoscleral rim culture for guidance of postoperative infection, a rare but possible devastating ocular event.

OBJETIVOS: Verificar a aderência bacteriana a lentes intra-oculares de silicone e de polimetilmetacrilato como possível fator de risco no desenvolvimento de endoftalmite pós-operatória, utilizando-se um modelo in vitro com três microrganismos potencialmente patogênicos. MÉTODOS: As análises foram realizadas com cepas de Staphylococcus aureus ATCC 29213, Staphylococcus epidermidis (amostra clínica) e Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 incluindo a determinação de curvas de crescimento, testes para verificação de produção de cápsula, avaliação da hidrofobicidade, testes de aderência a diferentes materiais, microscopia óptica, microscopia eletrônica de varredura e microscopia de força atômica. RESULTADOS: A produção de cápsula e a aderência das três diferentes cepas não mostraram qualquer relação com a quantidade de microrganismos; em relação às lentes intra-oculares de polimetilmetacrilato e de silicone, não houve diferença estatisticamente significativa na aderência de S. aureus e S. epidermidis; P. aeruginosa foi o microrganismo mais aderente a ambos os materiais. A microscopia eletrônica de varredura confirmou estes achados em relação à aderência, ao peso que a microscopia de força atômica evidenciou a produção de biofilme pelas cepas de S. aureus, S. epidermidis e P. aeruginosa. CONCLUSÕES: Constatou-se, in vitro, que os materiais analisados não diferiram com relação à taxa de aderência bacteriana, porém, P. aeruginosa apresentou maior eficiência de adesão entre as bactérias testadas. Todas as cepas produziram biofilme. Silicone foi o material mais hidrofóbico, quando comparado ao polimetilmetacrilato.

PURPOSE: To evaluate bacterial adherence to silicone and polymetylmethacrylate (PMMA) intraocular lenses as a risk factor for postsurgery endophthalmitis by using an in vitro model with three potentially pathogenic microorganisms. METHODS: In vitro experiments were carried out with the Staphylococcus aureus ATCC 29213, Staphylococcus epidermidis (clinical isolate) and Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 strains including growth curves, tests to verify capsule production, hydrophobicity and adherence to different materials as well as optical microscopy, scanning electronic microscopy (SEM) and atomic force microscopy (AFM). RESULTS: No relation between capsule production, adherence of the strains tested and amount of microorganisms was observed; no statistically significant differences were detected between S. aureus and S. epidermidis adherence to polymetylmethacrylate and silicone intraocular lenses; P. aeruginosa was the most adherent microorganism to both materials. This adherence pattern was confirmed by SEM, while biofilm production by the three strains was visualized by AFM. CONCLUSIONS: In vitro experiments showed no differences of bacterial adherence between PMMA and silicone lenses, but P. aeruginosa displayed a greater level of adherence in relation to staphylococci. All three strains were shown to produce biofilm. Silicone was shown to be more hydrophobic when compared to polymethylmethacrylate.

A partir de material ocular coletado de 46 pacientes submetidos à cirurgia de catarata foram realizados isolamento, identificação e teste de susceptibilidade de microrganismos frente a antimicrobianos, utilizando-se suabes e lentes intraoculares (LIO). Foram obtidos 76 isolados e identificados 7 tipos de microrganismos. Estafilococos coagulase-negativos (CNS) foram os microrganismos mais freqüentemente detectados de suabes (71,4% dos casos), lentes de PMMA (81,3%) e lentes de silicone (77,8%). Isolados de CNS apresentaram elevada resistência à penicilina G, seguida por tetraciclina, cloranfenicol e aminoglicosídeos. No entanto, estes isolados mostraram grande sensibilidade à vancomicina, cefalotina e ofloxacina. Com exceção da penicilina G, os isolados de Staphylococcus aureus foram bastante sensíveis aos agentes antimicrobianos, incluindo a oxacilina. Entre as gram-negativas, Proteus mirabilis foi a bactéria mais freqüente e também se mostrou bastante resistente à tetraciclina e ao cloranfenicol. Os isolados de Enterococcus se mostraram sensíveis à vancomicina.

Bacterial isolation, identification and antimicrobial susceptibility tests were carried out in ocular material collected with swab and polimethylmethacrylate (PMMA) or silicone intraocular lenses (IOL) from forty six patients submitted to cataract surgery. Seventy six isolates and seven different microorganisms were identified. Coagulase-negative staphylococci (CNS) were the predominant microorganisms isolated from swabs (71.4% of cases), PMMA lenses (81.3%) and silicon lenses (77.8%). Coagulase-negative staphylococci isolates revealed high resistance to penicillin G followed by tetracycline, chloramphenicol and aminoglicosides. However, these isolates displayed great susceptibility to vancomycin, cephalothin and ofloxacin. Except for penicillin G, Staphylococcus aureus was very sensitive to the antimicrobial agents including oxacillin. Among Gram-negatives, Proteus mirabilis was prevalent and presented high resistance to tetracycline and chloramphenicol. Enterococcus isolates were vancomycin sensitive.