The azoles are the class of medications most commonly used to fight infections caused by Candida sp. Typically, resistance can be attributed to mutations in ERG11 gene (CYP51) which encodes the cytochrome P450 14α-demethylase, the primary target for the activity of azoles. The objective of this study was to identify mutations in the coding region of theERG11 gene in clinical isolates of Candidaspecies known to be resistant to azoles. We identified three new synonymous mutations in the ERG11 gene in the isolates of Candida glabrata (C108G, C423T and A1581G) and two new nonsynonymous mutations in the isolates of Candida krusei - A497C (Y166S) and G1570A (G524R). The functional consequence of these nonsynonymous mutations was predicted using evolutionary conservation scores. The G524R mutation did not have effect on 14α-demethylase functionality, while the Y166S mutation was found to affect the enzyme. This observation suggests a possible link between the mutation and dose-dependent sensitivity to voriconazole in the clinical isolate of C. krusei. Although the presence of the Y166S in phenotype of reduced azole sensitivity observed in isolate C. kruseidemands investigation, it might contribute to the search of new therapeutic agents against resistant Candida isolates.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a mutagenicidade, genotoxicidade e citotoxicidade de amostras de água provenientes do Córrego Arara no município de Rio Brilhante, MS, Brasil, por meio de testes toxicológicos utilizando biomarcadores. Para avaliar a mutagenicidade utilizou-se o teste de micronúcleo, para a genotoxicidade o ensaio cometa, ambos com Astyanax altiparanae, e para analisar a citotoxicidade utilizou-se o teste de Allium cepa. As coletas foram realizadas nos meses de abril e junho de 2013, em três pontos distintos (pontos 1, 2 e 3) do Córrego Arara e no Tanque de Irrigação da UFGD (ponto 4). Os resultados indicaram aumento significativo na frequência de micronúcleos pisceos na coleta do mês de junho quando comparada com a realizada em abril. No teste de Allium cepa, o efeito citotóxico apresentou-se significativamente maior na coleta de abril, porém a genotoxicidade das águas não apresentou diferença estatística entre os meses de coleta. O maior número de danos no ensaio cometa ocorreu no ponto 4, em ambos períodos de coleta. A análise química da água indicou níveis de cádmio, cromo, cobre, chumbo e níquel, com valores superiores ao permitido pela legislação vigente. A presença de metais acima dos níveis permitidos nas amostras de água analisadas do Córrego Arara indica possíveis potenciais mutagênicos, genotóxicos e citotóxicos aos organismos devido a esses poluentes derivados ou não de ações antrópicas. Assim sendo, este trabalho pode contribuir como ferramenta adicional ao controle da qualidade da água do Córrego Arara, considerando sua utilização e importância para a região.

This study evaluated the mutagenicity, genotoxicity and cytotoxicity of water samples from the Arara Stream in the city of Rio Brilhante, MS, Brazil, by means of toxicological tests using biomarkers. The micronuclei test was used to evaluate mutagenicity, and the comet assay was used to evaluate genotoxicity; both tests used Astyanax altiparanae. The Allium cepa test was used to analyze cytotoxicity. The collections were performed in April and June, 2013, at three different points (points 1, 2 and 3) of the Arara Stream and at the Irrigation Tank of UFGD (point 4). The results indicated greater frequency of piscine micronucleus in the June collection than in that of April. In the Allium cepa test, the cytotoxic effect was significantly greater in the collection of April, but the genotoxicity of water showed no statistical difference between the months of collection. The greatest amount of damage in the comet assay occurred at point 4, in both collection periods. The chemical analyses revealed that the levels of cadmium, chromium, copper and nickel were higher than the values allowed by legislation. The presence of pollutants above the permitted level in the analyzed samples of the Arara Stream shows possible potential mutagenic, genotoxic and cytotoxic effects to the water bodies due to these pollutants which may or may not be caused by human action. This work may thus contribute an additional tool to the quality control of water of the Arara Stream, considering its use and importance to the city.

Background The aim of the present study was to assess the genetic diversity of Pantaneiro sheep, using microsatellite markers, in order to assist maintenance and management plans, enhance mating systems and reduce the inbreeding rate. A total of 127 animals were genotyped at eight microsatellite loci. They belonged to populations from the Experimental Farm of the Universidade Federal da Grande Dourados (UFGD) (Dourados/MS/Brazil) and Embrapa Pantanal (Corumbá/MS/Brazil). Results The population of Pantaneiro sheep from the UFGD exhibited a high mean number of alleles (11.13) and allelic richness (10.66). The polymorphic information content was highly informative in the locus studied, resulting in a mean value of 0.71. Observed heterozygosity was lower than expected for all molecular markers assessed. The analysis of molecular variance showed a differentiation rate of 5.2% between populations. Conclusions The results of the statistical parameters indicated that populations of Pantaneiro sheep require special attention on herd management, and it's further necessary to implement breeder exchange programs in order to preserve the genetic variability of these populations. Furthermore, the maintenance of those populations in their typical habitats is rather required to allow different responses from the herds to the interactions between genotype and environment.

Híbridos envolvendo as espécies Pseudoplatystoma corruscans vs.Pseudoplatystoma reticulatum são amplamente comercializados por apresentarem maior docilidade e precocidade quando comparados aos parentais. Neste trabalho objetivou-se identificar, por meio de técnicas moleculares, a existência de surubins híbridos em rios do estado do Mato Grosso do Sul. Pseudoplatystoma corruscans, Pseudoplatystoma reticulatum e 'Surubim' híbrido foram identificados utilizando as técnicas de PCR multiplex e PCR-RFLP dos genes nucleares RAG2, GLOBINA, EF1α, 18S rRNA e mitocondrial 16S rRNA. Os resultados demonstraram a presença de híbridos F1 em rios e a ocorrência da introgressão genética, evidenciada pelos híbridos Pós-F1. Além disso, foram observadas discrepâncias entre a identificação morfológica e genética, demonstrando a eficácia da utilização de diversos marcadores moleculares para identificação correta destes híbridos. Torna-se evidente a necessidade da implantação de projetos de manejo e conservação, a fim de manter a integridade genética de populações de espécies nativas em rios do estado do Mato Grosso do Sul, que encontram-se ameaçadas pela hibridação.

Hybrids of the species Pseudoplatystoma corruscansvs.Pseudoplatystoma reticulatum are extensively traded because they are more docile and precocious compared to their parents. This study aimed to identify the occurrence of hybrid 'Surubim' in rivers of the State of Mato Grosso do Sul, applying molecular techniques. Pseudoplatystoma corruscans, Pseudoplatystoma reticulatum and hybrid 'Surubim' were detected using multiplex PCR and PCR-RFLP in RAG2, GLOBIN, EF1α, 18S rRNA nuclear genes, and mitochondrial 16S rRNA gene. The results revealed the presence of F1 hybrids in rivers and the occurrence of genetic introgression, evidenced by the Post-F1 hybrids. Furthermore, discrepancies between the morphological and genetic identification were observed, demonstrating the effectiveness of using different molecular markers for the correct identification of these hybrids. The necessity of implementation of management and conservation projects to maintain the genetic integrity of native species populations threatened by hybridization in the rivers of Mato Grosso do Sul State is evident.

O sequenciamento de Sanger, ou identificação das bases moleculares do DNA por terminação da cadeia, é um dos métodos amplamente utilizados para estudos moleculares. O uso da região citocromo b do DNA mitocondrial como marcador molecular se justifica pela presença de regiões conservadas e variáveis que podem ser sequenciadas e utilizadas em análises filogenéticas em diferentes níveis taxonômicos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a variação do DNA mitocondrial por meio de sequenciamento de Sanger. Para tanto, amostras de tecido sanguíneo de ovinos do grupamento genético Pantaneiro (n=14), Bergamácia (n=4), Dorper (n=5) e Ile de France (n=5) foram utilizadas para extração de DNA. Logo em seguida as amostras foram submetidas a procedimentos de amplificação, purificação e sequenciamento. As análises estatísticas foram realizadas nos programas BioEdit 7.3.1.0 e MEGA 5.10. A utilização de primers internos e externos possibilitou o sequenciamento de 86% da região do citocromo b, o que indicou menor perda de nucleotídeos que acontece na reação de sequenciamento com apenas um par de primers. Os cálculos de diversidade média da região sequenciada permitiram observar baixa variação genética na população, evidenciando a natureza conservada do DNA herdado maternalmente. O sequenciamento parcial da região do citocromo b foi capaz de mostrar a variação do DNA mitocondrial em ovinos de 4 raças diferentes e proporcionou gerar dados para a realização de estudos futuros de origem e evolução dos animais.

We used four microsatellite loci (Fca08, Fca45, Fca77 and Fca96) from the domestic cat, Felis catus, to investigate genetic variability in specimens of Herpailurus yagouaroundi (jaguarundi, otter cat, eyra), Puma concolor (cougar, mountain lion, puma) and Panthera onca (jaguar) held in various Brazilian zoos. Samples of DNA from the cats were PCR amplified and then sequenced before being analyzed using the CERVUS program. Our results show a mean polymorphic information content (PIC) of 0.83 for H. yagouaroundi, 0.66 for P. concolor and 0.69 for P. onca and a mean of 10.3 alleles for the Fca08 locus, 5.3 for Fca 45, 9 for Fca 77 and 14 for Fca 96. These results indicate a relatively high level of genetic diversity for the specimens studied.