Abstract Seeds of Argemone mexicana L. accumulate significative amounts of sanguinarine. The analysis of the distribution of this alkaloid through the tissues of mature seeds revealed that up to 60 % of its contents was found tightly fixed to the different components of the seed external covers where it persisted during seedling germination. Contrastingly, sanguinarine contents in cotyledon accounted for the remaining 40 % and it could have been, at least partially, mobilized to the newly formed hypocotyls during emergence from seeds. Berberine was only detected in immature seeds and in seedlings once cotyledons were totally displayed. These results are discussed as a possible sanguinarine role in the chemical protection during seedlings germination.

Resumen Semillas de Argemone mexicana L. acumulan cantidades elevadas de sanguinarina. Un análisis de la distribución de alcaloides en los diferentes tejidos que componen la semilla reveló que hasta un 60 % del contenido se encontraba fuertemente unido en las capas que forman la cubierta exterior, donde se retuvieron durante la emergencia del hipocótilo. En contraste, los cotiledones presentaron el 40 % restante y parte de ello pudo haber sido movilizado al hipocótilo al emerger. Berberina sólo se observó en semillas inmaduras y en plántulas en desarrollo con los cotiledones desplegados. Estos resultados se discuten en función del posible papel defensivo de la sanguinarina durante la germinación.

ABSTRACT Introduction: Immunoelectrophoresis is a precipitation technique that allows the characterization of complex biological samples. The Immunology Department of the Institute of Basic and Pre-Clinical Sciences “Victoria de Girón” has a hyperimmune antiserum obtained by immunization of sheep against human serum total proteins and it also has an anti-human IgA antiserum obtained from human colostrum. Objective: The aim of this study was to identify IgG, IgM and IgA in human serum and to determine response to anti-human IgM in human colostral IgA with antiserum obtained in sheep. Material and Methods: An observational descriptive cross-sectional study was conducted from November 2017 to June 2018. Immunoelectrophoresis of normal human serum was performed using hyperimmune antiserum. Results: These procedures allowed to identify IgG, IgM and IgA in addition to albumin and other protein fractions and to determine response to anti-human IgM in human colostral IgA with antiserum obtained in sheep. Conclusions: This work allowed us to identify and determine significant anti-class responses of immunoglobulins in the sample studied.

RESUMEN Introducción: La inmunoelectroforesis es una técnica de precipitación que permite la caracterización de muestras biológicas complejas. En el Departamento de Inmunología del Instituto de Ciencias Básicas y Preclínicas “Victoria de Girón” se cuenta con un antisuero hiperinmune obtenido por inmunizaciones de carneros contra proteínas totales séricas humanas y con otro antisuero anti IgA de calostro humano. Objetivo: Identificar IgG, IgM e IgA en suero humano y determinar respuesta anti IgM humana en el antisuero anti IgA de calostro humano obtenido en carnero. Material y Métodos: Se realizó un estudio observacional, descriptivo y transversal desde noviembre de 2017 hasta junio de 2018. Se desarrolló una inmunoelectroforesis de suero humano normal empleando el antisuero hiperinmune. Resultados: Se identificaron IgG, IgM e IgA además de albúmina y otras fracciones proteicas y se determinó respuesta anti IgM humana en el antisuero anti IgA de calostro humano obtenido en carnero. Conclusiones: Este trabajo permitió identificar y determinar la respuesta anticlases mayores de inmunoglobulinas en la muestra de estudio.

ABSTRACT Tetanus is caused by Clostridium tetani, a sporulated Gram+ bacterium that produces a potent neurotoxin. Parenteral vaccines produce protective tetanus antitoxin (anti TT) IgG in multiple induction and reactivation doses; vax-TET® is a Cuban parenteral vaccine adsorbed onto alumina. IgAS (secretory), the main mucosal protective antibody, is only induced by the mucous membrane. The oral route, the induction of IgA and its protective role have not been explored. SinTimVaS is applied by simultaneous mucosal and parenteral route that induces systemic IgG similar to the parenteral route and adds an IgA mucosal response. We evaluated the effect of vax-TET® applied in SinTimVaS in Balb/c mice and we explored the influence of adjuvant on the induction of anti-TT IgA. SinTimVaS induced similar serum anti TT IgG responses to two intramuscular doses of vax-TET®; but higher than one dose. Three doses of oral vax-TET® did not induce serum anti-TT IgG, whereas adjuvanted with adjuvant Finlay Cocleate 1 (AFCo1) did induce it. It was not possible to determine the IgA anti-TT mucous induction with any of the formulations adjuvanted with alumina; but with the formulation AFCo1 + TT it was induced. We can conclude that vax-TET® in SinTimVaS worked in a similar way to the established parenteral immunization, so it would be possible to reduce the multi-dose vaccination schemes with more potent adjuvant formulations and it is confirmed that powerful adjuvants are required to induce mucosal IgA.

RESUMEN El tétanos es causado por Clostridium tetani, bacteria Gram+ esporulada que produce una potente neurotoxina. Las vacunas parenterales producen IgG antitoxina tetánica (anti TT) protectores en múltiples dosis inductoras y de reactivación; vax-TET® es una vacuna cubana parenteral adsorbida en alúmina. La IgAS (secretora), principal anticuerpo protector mucoso, sólo es inducida por la vía mucosa. La vía oral, la inducción de IgA y su papel protector no han sido exploradas. SinTimVaS se aplica por vía mucosa y parenteral simultánea que induce IgG sistémica similares a la vía parenteral y adiciona de respuesta de IgA mucosa. Evaluamos el efecto de vax-TET® aplicado en SinTimVaS en ratones Balb/c y exploramos la influencia del adyuvante sobre la inducción de IgA anti TT. SinTimVaS indujo similares respuestas de IgG anti TT séricas que dos dosis de vax-TET® intramusculares; pero superiores a una dosis. Tres dosis de vax-TET® orales no indujeron IgG anti TT sérica, mientras que la adyuvación con el adyuvante Finlay Cocleato 1 (AFCo1) sí la indujeron. No se logró determinar la inducción de IgA anti TT mucosa con ninguna de las formulaciones adjuvadas con alúmina; pero si con la formulación AFCo1+TT. Podemos concluir que vax-TET® en SinTimVaS funcionó de forma similar a la inmunización parenteral establecida, por lo que sería posible reducir los esquemas multidosis con formulaciones de adyuvantes más potentes y se confirma que se requieren potentes adyuvantes para inducir IgA mucosa.

ABSTRACT In a neuroinflammatory process a polyclonal and poly-specific activation is produced in cerebrospinal fluid. This activation starts from the first days and may persist for a long time. The clones not related directly against the biological agent do not proliferate by apoptosis. Reibergram determine if part of the immunoglobulins content in cerebrospinal fluid belongs from the blood or it is synthesized in the central nervous system. Antibody index determines if the specific antibodies was synthesized intrathecally. By these tools it can be possible to identify the humoral immune response against some herpes virus in pediatric patients suffering from a central nervous system inflammatory process. Quantification of specific IgG against citomegalovirus, varicella zoster and herpes simplex virus in serum and cerebrospinal fluid was done by ELISA. Specific Antibody index against these viruses were similar for the different age groups, which confirm the early exposure of the population.

RESUMEN En los procesos neuroinflamatorios se produce a nivel de líquido cefalorraquídeo una activación policlonal y poliespecífica. Esta activación se produce desde los primeros días y puede permanecer por períodos prolongados. Luego por mecanismos de apoptosis los clones que no responden directamente contra los agentes biológicos involucrados no proliferan. El Reibergrama permite saber si las inmunoglobulinas presentes en el líquido cefalorraquídeo se sintetizaron o no en el sistema nervioso central (SNC) y el Índice de Anticuerpo (IA) determina la especificidad de las mismas en caso de que exista síntesis intratecal. Con estas herramientas nos propusimos identificar la respuesta neuroinmunológica frente a agentes de la familia herpesvirus en pacientes pediátricos con proceso inflamatorio del SNC a partir de sus respectivos IA. Para lograr esto se cuantificaron los niveles de IgG y albúmina en suero y líquido cefalorraquídeo (LCR) mediante inmunodifusión radial simple y por ensayo inmunoenzimático, con lo cual se construyó el Reibergrama que permitió la selección de 85 pacientes pediátricos con síntesis intratecal de inmunoglobulinas, que se diferenciaron en cuatro grupos según sus edades. Mediante ensayo inmunoenzimático se cuantificaron los niveles de IgG específica contra citomegalovirus, virus varicela zoster y virus herpes simple, tanto en suero como en LCR y se determinó el IA específico. La respuesta contra los virus estudiados fue similar para los distintos grupos de edades, lo cual nos permite afirmar la exposición temprana a los mismos.

ABSTRACT Doctors Moises and Alejandro Chediak Ahuayda, whose were born in Cuba and had Lebanese ascendants, made important contributions to Immunology and other medical sciences. Doctor Moises Chediak was director of the Central Clinical Laboratory of the “General Calixto Garcia” Hospital from 1940, the same year when he founded the first blood bank in Cuba. He was Associate Professor of Microscopy and Clinical Chemistry at the University of Havana. The first report in Cuba of a case of Cooley’s anemia in a child, and a new form of a primary immunodeficiency, known as Beguez-Chediak-Higashi syndrome, were among his most relevant papers. He participated in many congressesin America, Europe and Asia; he was an outstanding member of the Cuban Societies of Clinical Pathology, Microbiology and Pediatrics, as well as various international organizations. Alejandro Chediak got the attention of the scientific community when he developed a method that required only a drop of blood in a paper for the serological diagnostics of syphilis. Chediak’s microrreaction was widely evaluated, adopted and modified in the United States, Argentina, Germany, Poland, Mexico, Chile, Brazil and France. He designed a device useful for many laboratory assays, including blood group agglutination, patented in Cuba and the United States. He was professor of Biological Physics at the Faculty of Medicineof theUniversity of Havana. The brothers Chediak Ahuayda, who were trained and obtained their most important professional achievements in our country, have a relevant place in the history of Cuban medicine during XX century.

RESUMEN Los doctores Moisés y Alejandro Chediak Ahuayda, cubanos de ascendencia libanesa, realizaron importantes contribuciones a la Inmunología y otras ciencias médicas. El doctor Moisés Chediak fue director del Laboratorio Clínico Central del Hospital General Calixto García desde 1940, año en que fundó el primer banco de sangre de Cuba. Llegó a ser Profesor Auxiliar de Microscopía y Química Clínica de la Universidad de la Habana. Entre sus artículos se destacan el primer caso de anemia de Cooley en un niño en Cuba, así como el reporte de una nueva forma de inmunodeficiencia primaria conocida como síndrome de Béguez-Chediak-Higashi. Participó en numerosos eventos en América, Europa y Asia, y fue un miembro reconocido de las Sociedades Cubanas de Patología Clínica, Microbiología y de Pediatría, así como de organizaciones internacionales. Alejandro Chediak llamó la atención de la comunidad científica al desarrollar un método que solo requería de una gota de sangre en papel para el diagnóstico serológico de la sífilis. La microrreacción de Chediak fue ampliamente evaluada, adoptada y modificada en Estados Unidos, Argentina, Alemania, Polonia, México, Chile, Brasil y Francia. Diseñó un dispositivo útil para diversas técnicas de laboratorio, como la aglutinación de grupos sanguíneos, el cual fue patentado en Cuba y Estados Unidos. Fue profesor de Física Biológica de la Facultad de Medicina de la Universidad de La Habana. Los hermanos Chediak Ahuayda, quienes se formaron y alcanzaron sus más importantes resultados profesionales en nuestro país, ocupan un lugar destacado en la historia de la medicina cubana del siglo XX.

SUMMARY The distribution of berberine and sanguinarine was analyzed in roots, stems and leaves of mature Argemone mexicana plants, along with that of transcripts corresponding to selected genes involved in both early biosynthetic reactions, which are common to both alkaloids, and in the late specific reactions conducting to the formation of each of them. Roots were the main sites of alkaloid accumulation, though they showed the lowest accumulation of the analyzed transcripts. Results are discussed in terms of the operation of a possible transport mechanism of alkaloids between the aerial tissues and the roots, or the occurrence of different biosynthetic alternative reactions in both parts, aerial and underground tissues, involving different gene products, yet with similar catalytic capacities.

RESUMEN La distribución de berberina y sanguinarina se analizó en raíces, tallos y hojas de plantas adultas de Argemone mexicana, junto con la de los transcritos correspondientes a genes seleccionados involucrados tanto en las reacciones biosintéticas iniciales, que son comunes para ambos alcaloides, como en las reacciones específicas finales que conducen a la formación de cada uno de ellos. Las raíces fueron los sitios de mayor acumulación de alcaloides a pesar de que mostraron la menor acumulación de los transcritos analizados. Estos resultados se discuten en función de la operación de un posible mecanismo de transporte de alcaloides entre los tejidos aéreos y las raíces o bien, de la ocurrencia de alternativas biosintéticas diferentes en tejidos de ambas partes, aéreos y subterráneos, con productos génicos diferentes, pero con similares capacidades catalíticas.

A sensitive, simple, rapid and reliable HPLC-DAD method for the analysis of the benzylisoquinoline alkaloids (BIA's) content in Argemone mexicana (Papaveraceae) is presented. This method allows the simultaneous separation and quantitation of berberine (Bn), chelerythrine (C) and sanguinarine (S) in extracts from A. mexicana tissues, reducing time of analysis in comparison to previous reports. Alkaloids were separated on a C18 Hypersil Gold column using an acetonitrile gradient (20 to 70%) in 1% acetic acid in water. Alkaloids were identified based on retention times and UV spectra and quantified at 254 nm. Linearity between 0.5-20 µg mL-1 was observed for Bn, C and S, with limits of detection (LOD) and quantitation (LOQ) of 0.11 and 0.33 for Bn, 0.10 and 0.30 for C and 0.05 and 0.15 for S, respectively. Maximal intra- and inter-day variation values were < 0.49% in all cases, with alkaloids' recoveries higher than 95%. System suitability tests (SST), including resolution (Rs), retention factor (K'), selectivity (α), tailing factor and number of theoretical plates were performed according to the United States Pharmacopeia (USP), fulfilling recommended values. The method proved to be efficient and reproducible when analyzing different tissues of field-collected A. mexicana plants.

Abstract: Isolated placentas of the highly pungent Capsicum chinense (Habanero pepper), readily transformed ferulic acid and vanillin into capsaicinoids, whereas those from a mild C. annuum cultivar showed a low transformation rate of ferulic acid, in comparison to vanillin. Cell cultures from both species showed low levels of capsaicinoids and exposure to both intermediaries did not increase their amounts. Results suggest that the transformation of ferulic acid to vanillin is a limiting step in capsaicinoids synthesis in C. annuum, but not in C. chinense and thus, may account for its higher pungency.

Resumen: Tejido placentario de frutos de Capsicum chinense (chile habanero) de alto picor transformó eficientemente ácido ferúlico y vainillina en capsaicinoides. Una variedad de pungencia moderada de C. annuum mostró baja transformación de ácido ferúlico, en comparación con la de vainillina. Por su parte, células en suspensión de ambas especies contenían bajos niveles de capsaicinoides y la adición de los precursores no produjo aumentos significativos. Los resultados sugieren que la transformación de ácido ferúlico en vainillina es un paso limitante en la síntesis de capsaicinoides en C. annuum, más no así en C. chinense, lo que podría explicar su mayor grado de picor.

Alkaloid contents in Argemone mexicana cell line AMMiF were analyzed during a 36-day culture cycle. The benzophenanthridine sanguinarine (SA) represented the main alkaloid. Dihydrosanguinarine (DHSA), a SA biosynthetic precursor and a less toxic benzophenanthridine, was also identified, based on chromatographic properties and further confirmed by gas chromatography coupled to mass spectrometry. Along the culture cycle, SA contents increased simultaneously while DHSA decrease, suggesting their biosynthetic conversion. Upon exposure to yeast extract as an inducer of secondary metabolism, there was an increase in SA content, which was preceded by DHS accumulation. However, after a long exposure (72 h), contents of both SA and DHSA were noticeable elevated, with close to 20% of the total alkaloid produced being recovered from the external medium. These results suggest the operation of a cell mechanism to avoid damage inflicted by the excessive accumulation of SA.

Los contenidos de alcaloides en cultivos celulares de Argemone mexicana, línea AMMiF, fueron analizados a lo largo de un ciclo de 36 días. Se encontró que la benzofenantridina sanguinarina (SA) fue el alcaloide principal. La dihidrosanguinarina (DHSA), precursor biosintético de la SA y una forma menos tóxica, también fue identificada con base en sus propiedades cromatográficas y confirmada por cromatografía de gases acoplada a espectrofotometría de masas. A lo largo del ciclo de cultivo, los contenidos de SA aumentaron mientras los de DHSA disminuyeron, lo que sugiere la interconversión biosintética. Tras la exposición al extracto de levadura, como inductor del metabolismo secundario, se observó un aumento en el contenido de SA, que fue precedido por la acumulación de DHSA. Sin embargo, después de una larga exposición (72 h), los contenidos de SA y DHSA fueron notablemente elevados, recuperándose cerca del 20% del total de los alcaloides del medio externo. Estos resultados sugieren la operación de un mecanismo celular para reducir los daños ocasionados por la acumulación excesiva de DHSA.

INTRODUCTION: Following a tripling of tuberculosis incidence in Cuba between 1991 and 1994 (from 4.7 to 14.7 per 100,000), the National TB Control Program was revamped in 1995 and the National Reference Center for Childhood TB and Provincial Childhood TB Commissions were created as a strategy for addressing this emerging health problem. OBJECTIVE: Assess the impact of Cuba's new strategy for TB control in children aged <15 years during the period 1995-2005. METHODS: A descriptive review of health services and systems was conducted in Cuba, examining 157 cases of TB diagnosed in children aged <15 years during the period 1995-2005 and comparing impact and process indicators for selected years (1995, 2000, and 2005). Impact indicators included reduction in: a) incidence; b) serious forms (peritoneal, meningeal, miliary, combined); c) mortality; and d) case outcomes (cure, death, treatment drop-out, treatment failure). Process indicators were proportion of cases with: a) microbiological tests; b) knowledge of infection source; c) diagnoses obtained through adult case contact tracing; d) time to diagnosis <60 days; and e) post-mortem diagnoses. RESULTS: During the period 1995-2005, TB rates in children aged <15 years fell by 50% (from 1.0 to 0.5 per 100,000), more evident in children <10 years. The Havana rate was three times the national rate. Diagnosis was post-mortem in three serious cases (1.9%); there were four deaths (2.5%), none after 2000. Only seven children (4.5%) had serious forms, none after 2002. Except for cases diagnosed post-mortem, all children received treatment directly supervised by health personnel. Cure rate was 99.4%; there were no treatment drop-outs or chronic cases; one relapse was reported (0.6%). Knowledge of infection source increased to 90% over the selected years. Microbiological tests were conducted in 90% of cases, with isolation in 30.9%. No isolate was drug-resistant, nor were there reports of infectious contacts with resistance. We found no HIV coinfection. At the end of the study, time to diagnosis of >60 days persisted in 40% of cases. CONCLUSIONS: Creation of a National Reference Center for Childhood TB and Provincial Childhood TB Commissions has contributed to improved TB diagnosis and control in children aged <15 years, achieving incidence similar to that during the period prior to TB re-emergence and to those of some developed countries. Improvements are needed in the work and systematic training of health personnel, especially at the primary health care level, in order to eliminate TB as a national health problem by 2015.

Eating disorders are now a public health problem, by its increasing incidence; severity of symptoms, its resistance to treatment and its appearance at an increasingly younger age to remain until adulthood. The study analyzes the relationship between risk-taking behaviors and eating disorder, body image and self-esteem in adolescents from secondary education. Instruments: Three instruments were applied: the eating Attitudes Test (EAT-40), the Body Shape Questionnaire (BSQ), the Assessment Questionnaire self-esteem, and a Sciodemographic Questionnaire. The sample were 298 students: 153 girls and 145 boys with an average of 13 years age. The results indícate that the risk of eating disorder is 8% and 10% with the disease installed; being more prevalent in women. Both sexes show dissatisfaction with their body image and low to medium self-esteem levels, with a higher trend in girls, and the cases are increasing with increasing age.

Los trastornos en la conducta alimentaria constituyen un problema de salud por su creciente incidencia, gravedad de la sintomatología asociada, resistencia al tratamiento y porque se presenta en edades más tempranas. Se estudió la relación entre las conductas de riesgo de trastorno alimentario, la imagen corporal y autoestima en un grupo de adolescentes de Secundaria. Se aplicaron tres instrumentos: el Test de Actitudes Alimentarias (EAT-40), Cuestionario de la figura corporal (BSQ), Cuestionario de Evaluación de la Autoestima y un Cuestionario de datos sociodemográficos a 298 alumnos: 153 mujeres y 145 hombres, con una edad promedio de 13 años. Se encontró riesgo de trastorno alimentario (8%) y en un 10% la patología instalada, con mayor prevalencia en las mujeres; ambos sexos presentan preocupación por su imagen corporal, niveles medios y bajos de autoestima y una mayor tendencia a presentar trastornos alimentarios en las mujeres. Los casos se incrementan con la edad.

An experimental analysis was conducted to determine iron content, ferritin gene activity and ferritin protein content, in different plant organs and growth stages of four common bean cultivars. Ferritin mRNA expression, determined by quantitative PCR, showed differential expression among cultivars and was not stable across growth stages and plant organs. Ferritin protein content was significantly higher in seeds (65.6-271.1 mg kg-1 fresh weight), whereas pods, roots, stems and leaves had significant lower levels (3.7-26.7 mg kg-1 fresh weight). Iron content in leaves was found in outstanding amounts (643 mg kg-1), up to 12 times higher than in seeds (52 mg kg-1); no relationship was found between ferritin transcriptional levels and ferritin protein contents with iron content. Results indicated that ferritin gene regulation is non-iron dependent in common bean.

Se condujo un análisis experimental para determinar el contenido de hierro, actividad del gen ferritina y contenido de la proteína codificada por el gen en diferentes órganos y etapas de crecimiento de cuatro cultivares de frijol común. La expresión de mRNA de ferritina por PCR cuantitativo mostró expresión diferencial entre cultivares y no fue estable a través de diferentes etapas de desarrollo y tipos de órganos. El contenido de la proteína ferritina fue significativamente superior en semillas (65.6-271.1 mg kg-1 peso fresco), mientras que en vainas, raíces, tallos y hojas los valores fueron significativamente menores (3.7-26.7 mg kg-1peso fresco). El contenido de hierro en hojas tuvo niveles sobresalientes (643 mg kg-1), representando niveles hasta 12 veces superiores a los encontrados en semilla (52 mg kg-1). No se encontró relación entre los niveles transcripcionales de ferritina y los contenidos de proteína con el contenido de hierro. Los resultados indican que la regulación del gen ferritina en frijol común no depende del contenido de hierro.

The use of bone grafts as an alternative to reconstruct osteal congenital or caused defects, such as traumatisms, oncological and infectious sequelae, is aimed at restoring the anatomical and functional integrity of an altered structure. During decades, investigators have tried to find in grafts certain characteristics that response to each of the reconstruction needs. This fact has led to the study and comparison of the benefits of some osteal structures that are potential donors and may increase the chances of success and considerably reduce the possible risks and complications during the graft taking. Likewise, diverse implantation materials have been studied, but they do not have the natural capacity to induce the osteal regeneration process, which makes them inert biocompatible "filling" materials that do not substitute the characteristics of the grafts, but they can improve the results if they are used together. The present paper recommends the use of bone grafts as a viable, effective and current alternative as regards reconstruction.

El empleo de injertos óseos como alternativa de reconstrucción de defectos óseos, ya sean congénitos u ocasionados como traumatismos, secuelas oncológicas e infecciosas, tienen como finalidad restablecer la integridad anatómica y funcional de una estructura alterada. Durante décadas, los investigadores se han dado a la tarea de encontrar en los injertos ciertas características que respondan a cada una de las necesidades de reconstrucción; este hecho a llevado a estudiar y comparar los beneficios de algunas estructuras óseas potencialmente donadoras, que incrementen las probabilidades de éxito del tratamiento y disminuyan considerablemente los posibles riesgos y complicaciones durante la toma del injerto. De igual manera, se han estudiado diversos materiales implantológicos, sin embargo, estos no poseen la capacidad natural de inducir el proceso de regeneración ósea, haciendo de ellos materiales inertes biocompatibles de "relleno", que no sustituyen las características de los injertos, pero utilizados conjuntamente si así se requiere, pueden mejorar los resultados. El presente trabajo plantea la utilización de injertos óseos como una alternativa viable, efectiva y actual en materia de reconstrucción.