Abstract: Quinoa has been recognized as the sole “comprehensive nutritional crop”; however, it is susceptible to pre-harvest sprouting (PHS). While quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-qPCR) has been extensively employed for gene expression level detection, the selection of suitable reference genes is imperative to ensure precise gene expression quantification across diverse conditions. This study aims to identify stable reference genes in quinoa seeds under ABA and GA, in order to provide a basis for subsequent research on PHS. Seeds were subjected to different concentrations of ABA and GA (10 μM, 50 μM, 100 μM, and 200 μM). The most suitable treatment concentration was determined based on seed viability. Here, MON1, GAPDH, EIF3, EF1α, ACT, TUB1, and TUB6 were selected as candidate genes. The suitability of these reference genes under different conditions was assessed using various methods including Ct values, geNorm, NormFinder, BestKeeper, Delta Ct, and RefFinder. Based on the results obtained from the hormone experiments, it was observed that the application of 100 μM ABA and 200 μM GA yielded the most advantageous outcomes. Additionally, the most appropriate reference genes for different treatments are ACT and TUB1 (H2O treatment), EIF3 and MON1 (ABA, GA treatment and also for the combined data set of the three groups). However, GAPDH exhibited the least stability across all treatments. In summary, ACT is recommended as the reference gene for natural quinoa germination, while EIF3 and MON1 should be used for ABA and GA treatments.

Resumo: A quinoa foi reconhecida como a única “cultura nutricional abrangente”; no entanto, é suscetível à germinação na pré-colheita (BHS). Embora a reação em cadeia da polimerase com transcrição reversa quantitativa (RT-qPCR) tenha sido amplamente empregada para detecção do nível de expressão gênica, a seleção de genes de referência adequados é essencial para garantir a quantificação precisa da expressão gênica em diversas condições. Este estudo tem como objetivo identificar genes de referência estáveis em sementes de quinoa tratadas com ABA e GA, a fim de fornecer uma base para pesquisas subsequentes em BPC. As sementes foram submetidas a diferentes concentrações de ABA e GA (10 μM, 50 μM, 100 μM e 200 μM). A concentração de tratamento mais adequada foi determinada com base na viabilidade das sementes. MON1, GAPDH, EIF3, EF1α, ACT, TUB1 e TUB6 foram selecionados como genes candidatos. A adequação destes genes de referência sob diferentes condições foi avaliada utilizando vários métodos, incluindo valores Ct, geNorm, NormFinder, BestKeeper, Delta Ct e RefFinder. Com base nos resultados obtidos nos experimentos com hormônios, observou-se que a aplicação de 100 μM de ABA e 200 μM de GA produziu os resultados mais vantajosos. Além disso, os genes de referência mais apropriados para diferentes tratamentos são ACT e TUB1 (tratamento com H2O), EIF3 e MON1 (tratamento com ABA, GA e para o conjunto de dados combinados dos três grupos). No entanto, o GAPDH exibiu a menor estabilidade em todos os tratamentos. Em resumo, o ACT é recomendado como gene de referência para a germinação natural da quinoa, enquanto o EIF3 e o MON1 devem ser utilizados para os tratamentos com ABA e GA.

Abstract A solution procedure using the Green's function based finite element method (FEM) is presented for two-dimensional nonlinear steady-state seepage analysis with the presence of free surface in isotropic dams. In the present algorithm, an iteration strategy is designed to convert the over-specified free surface problem to a regular partial differential equation problem. Then, at each iteration step, the Green's function for isotropic linear seepage partial differential equation is employed to construct the element interior water head field, while the conventional shape functions are used for the independent element frame water head field. Then these two independent fields are connected by a double-variable hybrid functional to produce the final solving equation system. By means of the physical definition of Green's function, all two-dimensional element domain integrals in the present algorithm can reduce to one-dimensional element boundary integrals, so that versatile multi-node element is constructed to simplify mesh reconstruction during iteration. Finally, numerical results from the present Green's function based FEM with isotropic Green's function kernels are compared with other numerical results to verify and demonstrate the performance of the present method.

Objetivo : A visfatina é uma adipocina recentemente descoberta que contribui com as condições relacionadas à glicose e à obesidade. Até hoje, pouco se sabe da sua resposta à metformina, um agente sensibilizador de insulina, e ao exercício. Nosso objetivo foi investigar o impacto do tratamento com metformina e/ou da natação sobre a visfatina no soro e no tecido adiposo subcutâneo (TAS), tecido adiposo perirrenal (TAP) e músculo esquelético (ME) em ratos com obesidade induzida por dieta com alto teor de gordura. Materiais e métodos : Ratos Sprague-Dawley foram alimentados com uma dieta normal ou com alto teor de gordura por 16 semanas para o desenvolvimento de um modelo de obesidade. Os ratos do modelo de obesidade foram, então, randomizados para a metformina, natação ou terapia de combinação com metformina e natação, além do grupo controle de obesidade induzida por alto teor de gordura e do grupo controle normal. Cada grupo apresentava 10 ratos. Parâmetros zoométricos e glicêmicos, perfil lipídico e níveis de visfatina sérica foram avaliados no momento inicial e após seis semanas de tratamento. Os níveis de visfatina em TAS, TAP e ME foram determinados por Western Blot. Resultados : A metformina e a natação melhoraram o perfil lipídico e aumentaram a sensibilidade à insulina, com redução do peso corporal. Tanto a metformina quanto a natação levaram à regulação para baixo dos níveis de visfatina no TAS e TAP, enquanto a terapia de combinação apresentou os maiores benefícios, mas não foram observadas alterações nos níveis de visfatina no ME. Conclusão : Nossos resultados indicam que a regulação para baixo da visfatina no TAS e TAP pode ser um dos mecanismos pelos quais a metformina e a natação inibem a obesidade.

Objective : Visfatin is a recently discovered adipocytokine that contributes to glucose and obesity-related conditions. Until now, its responses to the insulin-sensitizing agent metformin and to exercise are largely unknown. We aim to investigate the impact of metformin treatment and/or swimming exercise on serum visfatin and visfatin levels in subcutaneous adipose tissue (SAT), peri-renal adipose tissue (PAT) and skeletal muscle (SM) of high-fat-induced obesity rats. Materials and methods : Sprague-Dawley rats were fed a normal diet or a high-fat diet for 16 weeks to develop obesity model. The high-fat-induced obesity model rats were then randomized to metformin (MET), swimming exercise (SWI), or adjunctive therapy of metformin and swimming exercise (MAS), besides high-fat obesity control group and a normal control group, all with 10 rats per group. Zoometric and glycemic parameters, lipid profile, and serum visfatin levels were assessed at baseline and after 6 weeks of therapy. Visfatin levels in SAT, PAT and SM were determined by Western Blot. Results : Metformin and swimming exercise improved lipid profile, and increased insulin sensitivity and body weight reduction were observed. Both metformin and swimming exercise down-regulated visfatin levels in SAT and PAT, while the adjunctive therapy conferred greater benefits, but no changes of visfatin levels were observed in SM. Conclusion : Our results indicate that visfatin down-regulation in SAT and PAT may be one of the mechanisms by which metformin and swimming exercise inhibit obesity.