O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da radiação gama (Co60) na qualidade fisiológica de sementes de arroz. O estudo foi realizado em três ensaios. No primeiro ensaio, sementes de arroz foram irradiadas com doses de 0; 1; 2,5 e 5Gy e, para o segundo e o terceiro ensaio, as sementes foram submetidas a envelhecimento acelerado, antes da irradiação. No segundo ensaio, as sementes foram dividas em úmidas e secas após envelhecimento acelerado e, então, foram irradiadas nas doses 0; 1; 2,5 e 5Gy. No terceiro ensaio, as sementes foram secas após o envelhecimento acelerado e irradiadas com doses de 0, 10, 25 e 50Gy. Para avaliação dos efeitos fisiológicos da radiação gama, foram realizados teste de germinação - TG, índice de velocidade de germinação - IVG e crescimento de plantas (comprimento de parte aérea e sistema radicular e massa seca total), em todos os ensaios. Foram determinadas as atividades enzimáticas da fosfatase ácida e alfa amilase nas sementes secas, no segundo ensaio. Os resultados obtidos nos ensaios indicam que as doses de radiação gama estudadas não afetam a qualidade fisiológica das sementes de arroz.

The objective of this research was to evaluate the effects of the gamma radiation (Co60) on the physiological quality of rice seeds. The research was carried out through three tests; in the first test rice seeds were irradiated at dosages of 0; 1; 2.5 and 5Gy, while for the second and third tests the seeds were subjected to accelerated aging before being irradiated. For the second test the seeds were divided into wet and dry and both groups subjected to accelerated aging previous to irradiation at dosages of 0; 1; 2.5 and 5Gy. For the third test the seeds were dried after being subjected to accelerated aging, and then irradiated at dosages of 0, 10, 25 and 50Gy. To assess the physiological effects of the gamma radiation, all seeds were tested for germination and their germination speed index recorded. Seedling growth was graded through the measurement of the lengths of the first leaf and seminal root system and total seedling dry weight, across all tests. The enzymatic activity of acid phosphatase and alpha-amylase was measured on dry seeds from the second test. The results from all tests indicate that the applied gamma radiation dosages did not cause any changes to the physiological quality of rice seeds.

O objetivo deste trabalho foi desenvolver metodologias, fundamentadas no teste de germinação, para detecção de sementes de arroz mutante tolerante ao herbicida imazethapyr. Foram conduzidos dois experimentos, cada um constituído de duas etapas. No experimento 1, foi utilizada a metodologia do papel umedecido na solução do herbicida. Na primeira etapa, as sementes da cultivar BRS 6 - Chuí e linhagem THI foram submetidas à germinação em papel toalha umedecido em solução com seis concentrações diferentes do herbicida imazethapyr. As avaliações foram realizadas no sétimo e décimo quarto dias. Na segunda etapa, empregando a concentração indicada na etapa anterior, as sementes da linhagem THI e das cultivares BRS 7 - Taim, BRS Pelota, BRS ligeirinho, BR-IRGA 410 e IGRA 417 foram submetidas à germinação em papel toalha umedecido na solução com herbicida imazethapyr a 0,001% (v/v). As avaliações foram realizadas no sétimo dia. No experimento 2, foi empregada a metodologia de imersão das sementes. Na primeira etapa, sementes da cultivar BRS 6 - Chui e da linhagem THI foram hidratadas em solução com diferentes concentrações do herbicida imazethapyr, e a seguir, submetidas à germinação em papel toalha umedecido em água com avaliação no quarto e no sétimo dia. Na segunda etapa, empregando a concentração indicada na etapa anterior, as sementes da linhagem THI e das cultivares BRS 7 Taim, BRS Pelota, BRS ligeirinho, BR IRGA 410 e IRGA 417 foram hidratadas por 4 horas a 25ºC em solução de 0,5% (v/v) e, submetidas ao teste de germinação com avaliação no quarto dia após a semeadura. A metodologia do papel umedecido mostra-se eficiente para detecção de sementes de arroz mutante tolerante ao herbicida imazethapyr e a concentração indicada é de 0,001 % (v/v) do herbicida diluído em água, com germinação a 30 ºC e avaliação aos sete dias após a semeadura. Na metodologia de imersão em solução, a concentração de 0,5% (v/v) do herbicida imazethapyr é adequada para a detecção de sementes de arroz mutante tolerante, com germinação a 30 ºC e avaliação aos quatro dias após a semeadura.

The aim of this work was to develop methods, based on the germination test, for identification of rice seeds tolerant to imazethapyr herbicide. The method that uses wet paper was developed in two stages. In the first stage the seeds of BRS 6 - Chui cultivar and THI lineage were submitted to germination on towel paper soaked in solutions with six different concentrations of the herbicide, containing 106 g/l of the imazethapyr herbicide active ingredient. The evaluations were carried out on day seven and fourteen. In the second stage, we used the concentration indicated in the previous experiment. Seeds of the THI lineage and BRS 7 - Taim, BRS Pelota, BRS Ligeirinho, BR-IRGA 410 and IRGA 417 cultivars were submitted to germination on paper towel soaked in a solution containing imazethapyr herbicide at 0.001% (v/v), diluted in water, and evaluations done on day seven. The method that uses immersion of the seeds was developed in two stages. In the first one, seeds of the BRS 6 - Chui cultivar and THI lineage were hydrated in solution with different concentrations of the imazethapyr herbicide, containing 106 g/l of the active ingredient, for four hours at 25ºC, and then submitted to germination on paper towel soaked in water, with evaluation on days four and seven. In the second stage, using the concentration indicated in the previous stage, seeds of the THI lineage and BRS 7 - Taim, BRS Pelota, BRS Ligeirinho, BR-IRGA 410 and IRGA 417 cultivars were hydrated for four hours at 25ºC in 0.5% solution (v/v), diluted in distilled water, and then submitted to the germination test with evaluation on day four after sowing. The concentration indicated for identification of rice seeds tolerant to imazethapyr herbicide is 0.5% (v/v) diluted in water, and evaluation done on day four.

O presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos de diferentes técnicas de crioconservação na qualidade fisiológica, composição química e índice mitótico de sementes de cebola. Sementes de cebola, cultivar Baia Periforme, foram expostas, durante uma hora, a duas técnicas de crioconservação: (a) sem e (b) com crioprotetor (glicerol 50%), seguidas de três métodos de descongelamento: (1) temperatura ambiente de 25°C, durante duas horas; (2) banho-maria a 37°C, durante cinco minutos; (3) microondas em potência de 70W, durante cinco minutos. Antes e após a crioconservação, foram realizadas as seguintes avaliações: teor de água, germinação, vigor (envelhecimento acelerado, primeira contagem de germinação e comprimento de raiz e de parte aérea das plântulas), composição química (teor de açúcar solúvel, proteínas e amido), análise do ciclo celular e índice mitótico. A imersão em nitrogênio líquido, sem o uso de crioprotetor, é uma técnica adequada para a crioconservação de sementes de cebola, não altera a percentagem de germinação e a composição química das sementes, sendo também o tratamento que proporciona maior número de células em divisão celular após o descongelamento das sementes. O tratamento criogênico, com uso de glicerol 50% como crioprotetor, é prejudicial à qualidade fisiológica e altera a composição química de sementes de cebola. O descongelamento das sementes em microondas é mais adequado do que em temperatura ambiente ou banho-maria, porém este último possibilita maior índice mitótico que os demais tratamentos.

The present paper aimed to evaluate the effects in the physiological, chemical and cellular quality of cryopreserved seeds through different techniques. Onion seeds of the Baia Periforme cultivar were submitted, for one hour, to two cryopreservation techniques. (a) immersion in N2 fluid (-196°C) with cryoprotector (glycerol 50%) and (b) immersion in N2 fluid. After the cryogenization period of time, the seeds were submitted to three thawing methods: (1) room temperature of 25ºC for two hours; (2) water bath (double-boiler) at 37ºC for five minutes; (3) microwave the 70W power for five minutes. Before and after the cryopreservation, the following parameters were assessed: water content, germination, vigour (accelerated aging, first counting, length of root and of the air parts of the plantules), chemical composition (soluble sugar, proteins and starch contents) and analysis of the cell cycle and mitotic index. The immersion in fluid nitrogen, without the use of cryoprotector, is an adequate technique for the cryopreservation of onion seeds that does not alter the germination nor the chemical composition of the seeds, and it was also the treatment that presented the highest number of cells in cell division of all of the melting methods. The cryogenic treatment with the use of glycerol 50% as cryoprotector damaged the physiological quality and altered the chemical composition of the onion seeds. The thawing of the seeds in the microwave is more adequate than thawing at room temperature or in a water bath. However, the last one presented higher mitotic rate than the other treatments.

Pesquisas tem sido conduzidas visando determinar métodos de detecção de organismos geneticamente modificados (OGM), devido, principalmente, à importância sobre a atividade comercial. Atualmente, são utilizados bioensaios, que avaliam características fenotípicas das plântulas, testes de ELISA e Kits, que possibilitam identificar proteínas transgênicas específicas de DNA. O objetivo deste trabalho foi comparar a eficiência dos métodos para detectar sementes de soja Roundup Ready (RR). Amostras de sementes de soja geneticamente modificada (GM) resistente ao glifosato e de sementes do parental suscetível foram submetidas a bioensaios (pré-embebidas, umedecidas em substrato, imersas em solução contendo glifosato e pulverização de plântulas), Kit Trait Test e detecção pelo método da PCR. Os bioensaios são métodos mais eficientes comparando a relação custo/benefício na detecção de sementes de soja GM, sendo o método de pré-embebição o mais indicado e a análise das características morfológicas de plântulas é importante nos bioensaios para detecção de sementes de soja GM.

Due to the great importance of the trade business, there are significant world efforts in establishing GMO detection methods. Currently, bioassays that analyse seedling phenotype, the ELISA test and kits that enable specific transgene protein identification, and PCR to detect specific DNA sequences are frequently used. The aim of this study was to compare the efficiency of different methods to detect RR soybean. Genetically modified seed samples, tolerant to glyphosate and susceptible parental seeds were submitted to bioassays (pre-imbibed, imbibed and immersion in herbicide solutions and seedling spraying), the Kit trait test and PCR detection. Bioassays were shown to be more efficient, comparing the ratio cost/benefit. The seedling visual analysis is a very important parameter to be considered in GM soybean seeds detection.

Avanços na engenharia genética permitiram a obtenção de plantas geneticamente modificadas tolerantes a determinados herbicidas. O uso de sementes de plantas geneticamente modificadas está aumentando rapidamente, havendo a necessidade de desenvolver métodos de identificação e detecção rápidos, práticos e de baixo custo, que possam ser padronizados.O objetivo desta pesquisa foi desenvolver um método bioquímico de deteccção de soja tolerante ao glifosato. Foram comparados dois genótipos de soja, um tolerante ao glifosato e seu parental não geneticamente modificado. As sementes foram submetidas a tratamentos de pré-embebição por 16 horas, em água e em solução de herbicida contendo 0,6% do ingrediente ativo e, mantidas a seguir em germinador à temperatura de 25°C por sete dias. Após, foi realizada a extração e a determinação da atividade da enzima peroxidase pela avaliação dos eletroforegramas e de reação colorimétrica. Os resultados obtidos permitiram concluir que é possível diferenciar cultivares de soja quanto à tolerância ao herbicida glifosato através da reação colorimétrica. Há diferença nos eletroforegramas de atividade da enzima peroxidase entre os cultivares tolerante e suscetível ao glifosato.

Progress in genetic engineering allow the production of genetically modified plants tolerant to the use of certain herbicides. The use of seeds of genetically modified plants is increasing quickly, and fast, practical and low cost detection methods need to be developed. The objective of this research was to establish a method for detection of soybean tolerant to glyphosate. Two soy cultivars were compared, one tolerant to glyphosate and its genetically unmodified parent. The seeds were submitted to treatments of pre-imbibition for 16 hours, in water and herbicide solution containing 0,6% of the active ingredient at the temperature of 25°C for seven days. Afterwards, the extraction and the determination of the activity of the enzyme peroxidase were carried out through the evaluation of the eletroforesis and of color reaction. The obtained results allowed the conclusion that it is possible to differentiate soy tolerance to herbicide glyphosate through color reaction. Differences were observed in the enzyme peroxidase activity tolerant and susceptible to glyphosate cultivars.

Esta pesquisa teve por objetivos ajustar as metodologias de bioensaios para detecção de sementes de soja tolerante ao herbicida glifosato, estabelecendo o tempo mínimo necessário para uma avaliação segura, bem como a caracterização dos sintomas causados pelo herbicida nas plântulas não geneticamente modificadas. Foram conduzidos três bioensaios, baseados no teste de germinação. No Ensaio 1, as sementes foram pré-embebidas durante 16 horas em substrato umedecido com solução do herbicida. No Ensaio 2, o substrato foi mantido permanentemente umedecido em solução do herbicida. No Ensaio 3, as sementes foram imersas em solução do herbicida. Os parâmetros de avaliação foram: percentagem e velocidade de germinação, comprimentos da plântula, do hipocótilo e da raiz primária, percentagem de plântulas com raízes secundárias e caracterização morfológica. Concluiu-se que os bioensaios permitem detectar sementes de soja geneticamente modificada, tolerante ao glifosato, no prazo de cinco dias. As metodologias da semeadura em substrato umedecido com solução do herbicida, na concentração de 0,03% da formulação 480 g/L de i.a. e a da pré-embebição das sementes durante 16 horas, com solução contendo 0,4% e 0,6% de glifosato da formulação 480 g/L de i.a. são as recomendadas para utilização em rotina de Laboratório de Análise de Sementes. O glifosato causa anormalidade em plântulas de soja não geneticamente modificada. As plântulas apresentam engrossamento, estrias longitudinais e amarelecimento gradativo do hipocótilo, inibição do desenvolvimento da raiz primária e da emissão de raízes secundárias, sendo o hipocótilo proporcionalmente maior do que a raiz primária.

The objective of this study was to adjust methodology to detect soybean seeds tolerant to glyphosate, to characterize the symptoms, to establish the necessary minimum time capable to allow safe and possible evaluation of being reproduced. Three independent assays were done, based on the germination test. In study 1, seeds were pre-imbibed in a substrate containing herbicide solution for 16 hours. In study 2 the substratum was imbibed with the herbicide. In the study 3, seeds were immersed in solution of the herbicide. The standard germination test, speed of germination, length of seedling root and shoot and percentage of seedling secondary roots were used as evaluation parameters. Evaluations were made in the fourth day, until the final count, on the eighth day. All three methods allowed detection of soybean seeds tolerant to the herbicide glyphosate, in the period of five days. The most recommended methodlogies for routine use in seed analysis laboratory were sowing in substratum moistened with solution of the herbicide, at the concentration of 0,03% (480 g/l active ingredient) and pre-imbibing of the seeds for 16 hours, with solution containing 0,4% and 0,6% of glyphosate (480 g/l active ingredient) because they allow germination and the normal development of the aerial parts and root system of genetically modified seedlings. The following symptoms were observed in non GM seedlings : thickened points, longitudinal grooves and with yellowing of the hypocotyl, inhibition of the development of the primary root and of the emission of secondary roots, and the hypocotyl was proportionally larger than the primary root.

O presente trabalho teve como objetivo verificar a sensibilidade de cultivares de arroz ao herbicida glufosinato de amônio.Foram conduzidos dois ensaios baseados no teste de germinação de sementes das cultivares BRS-Taim, BRS-Chuí e BRS-Firmeza. No ensaio 1 foi empregado substrato umedecido com herbicida e no ensaio 2, embebição das sementes em solução contendo o herbicida. No ensaio 1 utilizou-se concentrações de 0,0; 0,04 ; 0,08; 0,12 e 0,16 do princípio ativo glufosinato de amônio e no ensaio 2 de 0,0; 0,04; 0,08; 0,12; 0,16; 0,2; 0,4; 0,6; 1,0 e 2,0 . Foram avaliados a germinação e os comprimentos da raiz, da parte aérea e das plântulas normais. Conclui-se que: a) cultivares de arroz apresentam variabilidade quanto à sensibilidade ao herbicida glufosinato de amônio, b) concentrações do herbicida glufosinato de amônio de 0,04% em substrato umedecido e de 1,0% na solução de embebição, inibem a germinação de sementes de arroz.

This research aimed to detect the sensitivity of rice varieties to ammonium gluphosinate herbicide. Two assays were conducted based on the germination test of the Varieties: BRS-Chuí, BRS-Taim and BRS-Firmeza. In the first assay moist germination paper with herbicide was used and in the second assay, the seeds were imbibed in a solution containing herbicide. In the first assay, ammonium gluphosinate concentrations: 0,0; 0,4; 0,008; 0,12; 0,16% were tested and in the second, the concentrations were: 0,0; 0,04; 0,08; 0,12; 0,16; 0,2; 0,4; 0,6; 1,0 and 2,0%. The following parameters : germination %; roots and shoots length of normal seedlings and total seedling length were analyzed after 7 and 14 days. It was concluded: a) there is a variation in the cultivar sensitivity to ammonium glufosinate, b) the germination of rice seeds is inhibited when, the concentration of ammonium glufosinate is 0,04% in moist germination paper, or 1,0% when imbibing the seeds in herbicide solution.

O presente trabalho teve como objetivo avaliar a técnica do bioteste , em análise de rotina, para a detecção de sementes de arroz (Oryza sativa L.) geneticamente modificado, resistente ao herbicida glufosinato de amônio. Foram conduzidos dois ensaios baseados no teste de germinação. No Ensaio 1 foi empregado substrato umedecido com herbicida e no Ensaio 2, embebição da semente em solução contendo o herbicida. Foram utilizadas sementes de arroz da cultivar BR-IRGA 410 e da linhagem geneticamente modificada ABR 15, que contém o gene bar. No Ensaio 1 utilizou-se concentrações de zero a 0,2% do princípio ativo glufosinato de amônio e na embebição da semente (Ensaio 2), de zero a 2,0%. Foram medidos os comprimentos das plântulas normais aos sete e quatorze dias. Conclui-se que a técnica do bioteste utilizando o substrato umedecido com herbicida e a embebição das sementes em solução aquosa do herbicida no teste de germinação são eficientes na identificação de sementes de arroz resistente ao herbicida glufosinato de amônio.

This research aimed to analyze the biotest technique as a routine procedure for testing genetically modified rice (Oryza sativa L.) seeds that are resistant to ammonium gluphosinate. Two assays were conducted based on the germination test. In the first assay moist germination paper with herbicide was used and in the second assay, the seeds were imbibed in herbicide solution. The seeds used were BR-IRGA 410 and the genetically modified line ABR 15 which contains the gene bar. In the first assay, ammonium gluphosinate concentrations between 0,0 and 0,2% were tested and in the second, the concentrations between 0,0 and 2,0%. The length of normal seedlings was analyzed after 7 and 14 days. It was concluded that both biotest techniques are efficient to identify in the germination test genetically modified seeds that are resistant to ammonium gluphosinate.