ABSTRACT This study aimed to investigate the prevalence rate of brucellosis, leptospirosis, and chlamydiosis in the offspring of free-living sea lions (Zalophus californianus) in the Mexican Gulf of California. The work was carried out across six islands where reproduction takes place. Sixty-one blood samples were collected from seemingly healthy sea lions from six to eight weeks old. For diagnosis, serum was obtained by venae cavae puncture. In the search for smooth Brucella spp., based on phenotypic characterization, antigens were detected employing an antigen test for Brucella abortus, strain 1119-3. In the case of leptospirosis, the serological diagnosis was carried out by microscopic agglutination to identify 12 Leptospira interrogans serotypes. Lastly, Chlamydia abortus was identified using commercial ELISA (ID Screen®). All 61 serum samples presented negative results for the B. abortus antigen and the C. abortus ELISA. The serological diagnosis for leptospirosis showed that 29 out of 61 sera were negative (47.5%) for all serotypes, and 32 out of 61 were positive (52.5%) for at least one serotype. After studying the three diseases, results suggest that the presence of antigens against Leptospira is a potential threat to the protected sea lions from the Gulf of California.

Resumen Con el objetivo de determinar la prevalencia de mastitis subclínica mediante el conteo de células somáticas, el aislamiento de Staphylococcus spp. y los factores de riesgo asociados a la ordeña manual y mecanizada en cabras de Comondú, Baja California Sur, México, se evaluaron 12 granjas. Se tomaron 234 muestras de leche de 117 cabras, 90 con ordeña mecanizada y 144 con ordeña manual. La prevalencia de mastitis subclínica fue del 52% (IC del 95%: 44%-60%), siendo de 86% (IC del 95%: 78%-94%) en la ordeña manual y de 33% (IC del 95%: 19%-47%) en la mecanizada. Los grupos de patógenos más prevalentes fueron Staphylococcus coagulasa negativos (SCN) y Staphylococcus aureus. Las probabilidades de mastitis aumentan en cabras con ordeña manual, con falta de higiene en corrales y en las hembras mayores de cinco años (OR: 33.30).

Abstract In order to determine the prevalence of subclinical mastitis, pathogens that cause it, and risk factors in manual and mechanical milking of goats in Comondú, Baja California Sur, Mexico, 12 farms were evaluated. A total of 234 milk samples were taken from 117 goats, 90 from mechanized milking and 144 from manual milking. The prevalence of subclinical mastitis was 52% (95% CI: 44%-60%), being 86% (95% CI: 78%-94%) in manual milking and 33% (95% CI: 19%-47%) in mechanized milking. The most prevalent groups of pathogens were coagulase negative Staphylococcus and Staphylococcus aureus. The chances of mastitis increase in goats milked manually, those with poor hygiene in pens, and those older than five years (OR: 33.30).

ABSTRACT: Chlamydia abortus causes a series of reproductive disorders in ruminants, including abortions, premature births and stillbirths. Additionally, as a zoonosis, it can cause miscarriages or pneumonia in people who come in contact with sick animals or their secretions. The objective of this study was to isolate C. abortus from Mexican goats with a history of abortion and from recently parturient goats with a history of abortion; 186 samples were collected from 49 herds in the states of Coahuila, Jalisco, Puebla, Veracruz and Querétaro. Bacterial isolation of the clinical samples was performed using the mouse fibroblast cell line L929 and molecular identification was achieved by amplification of a 342 bp fragment corresponding to the 16S-23S ribosomal intergenic spacer RNA region. The amplification products were sequenced and compared with the GenBank database. Isolation identified 23.1% of the samples and PCR identified 9.6% as positive. Homology search revealed 100% identity with Chlamydia abortus EF486854, U76710, U68444, among others. The presence of C. abortus was confirmed in goats with a history of abortion in Mexico by bacterial isolation, PCR and sequencing. These findings suggest that C. abortus played a substantial role in goats with a history of abortion in Mexico.

RESUMEN: Chlamydia abortus causa abortos o nacimientos prematuros en rumiantes; adicionalmente, es una zoonosis que puede causar abortos o neumonías en personas que tienen contacto con animales enfermos o sus secreciones. El objetivo de este estudio fue aislar C. abortus de cabras mexicanas con historial de aborto y de cabras recién paridas con antecedentes de abortos; se recolectaron 186 muestras de 49 rebaños, en los estados de Coahuila, Jalisco, Puebla, Veracruz y Querétaro. El aislamiento bacteriano de las muestras clínicas fue realizado utilizando la línea celular de fibroblastos de ratón L929 y la identificación molecular se logró mediante la amplificación de un fragmento de 342 pb correspondiente a la región 16S-23S espaciador intergénico ribosomal RNA. Los productos de amplificación se secuenciaron y se compararon con la base de datos GenBank. El aislamiento identificó el 23.1% de las muestras y la PCR identificó el 9.6% como positivas. La búsqueda de homologías reveló una identidad del 100% con Chlamydia abortus EF486854, U76710, U68444, entre otras. La presencia de C. abortus se confirmó en cabras con antecedentes de aborto en México mediante aislamiento bacteriano, PCR y secuenciación. Estos hallazgos sugieren que C. abortus jugó un papel sustancial en cabras con antecedentes de aborto en México.

Abstract Goat production in Mexico is concentrated in poorer areas in arid and semi-arid areas of the country’s north and center, particularly in the Mixtec region of Oaxaca, Guerrero and Puebla. Because goats can survive in near desert conditions their production of milk and animals is a valuable nutritional contribution to human diets in these areas. Disease in goats in Mexico has generally received scant attention, however researchers at the INIFAP have studied this species and its pathologies. This review focuses on the main diseases affecting goats in Mexico and the research in this area by the INIFAP. In most of the goat herds studied in Mexico reproductive disorders are often caused by diseases such as brucellosis, leptospirosis and chlamydia, all considered to be endemic and potentially zoonotic. Respiratory and gastrointestinal disorders are the main ailments in kids. High frequencies of arthritic encephalitis, a disease caused by infection with small ruminant lentiviruses, and paratuberculosis and caseous lymphadenitis, both bacterial in origin, have been documented in productive-age goats throughout Mexico. All three are chronic, causing producers to mistakenly assume they have no major impact on productivity. Q fever, a known zoonotic, is currently considered exotic in Mexico, but in other countries is frequently associated with reproductive disorders, abortions and occasional respiratory problems in goats. The INIFAP has addressed all the above diseases. It was instrumental in diagnosing and controlling brucellosis, the principal bacterial zoonosis in Mexico. Researchers at INIFAP have also helped to determine that diseases previously considered exotic in Mexico have become endemic, and then developing the tools needed for their diagnosis. The INIFAP has made vital contributions to understanding the national disease panorama in goats and transferring diagnostic and treatment technologies to livestock laboratories nationwide.

Resumen La importancia de las cabras en México radica en que su producción se concentra en zonas áridas y semiáridas del norte y el centro del país, y particularmente en la región de la Mixteca en los estados de Oaxaca, Guerrero y Puebla, donde prevalece la pobreza y donde la especie, es capaz de sobrevivir y producir leche y cabritos. El estudio de las enfermedades de las cabras en México es escaso; el INIFAP se ha caracterizado por nunca haber dejado de lado la investigación en esta especie. En esta revisión, se abordan las principales enfermedades que afectan a las cabras en México y se describen las investigaciones que sobre ellas ha desarrollado el INIFAP. Los problemas de salud que enfrentan la mayoría de los rebaños caprinos en los que se ha realizado investigación, demuestran que algunos trastornos reproductivos son causados por enfermedades como brucelosis, leptospirosis y clamidiasis, todas éstas consideradas endémicas y con potencial zoonótico. Por otra parte, los problemas de tipo respiratorio y digestivo son los principales padecimientos que afectan a los cabritos. En las cabras en etapa productiva del territorio nacional, se ha demostrado una frecuencia elevada de animales con artritis encefalitis, enfermedad causada por la infección de Lentivirus de los pequeños rumiantes, paratuberculosis y linfadenitis caseosa, estas últimas de origen bacteriano; una particularidad de estas tres enfermedades es su característica de cronicidad, lo que hace pensar de manera equívoca al productor que su presencia no tiene mayor impacto dentro de los rebaños. Finalmente, se ha logrado detectar la presencia de la fiebre Q, una enfermedad zoonotica actualmente considerada exótica en México, y que en otros países es frecuentemente asociada con trastornos reproductivos, abortos y ocasionalmente, problemas respiratorios en los animales. En las aportaciones del INIFAP hay que destacar el diagnóstico y el control de la brucelosis, que es la principal zoonosis bacteriana en nuestro país; además de haber contribuido a que enfermedades consideradas exóticas en México, se determine que ya son endémicas, y se cuente con las herramientas para su diagnóstico, siendo un reto para nuestro instituto realizar la transferencia de estas tecnologías a los laboratorios de diagnóstico de nuestro país.

Abstract A cross-sectional study that included seven bucks and 132 goats with recent parturition or abortion was conducted to assess the prevalence of chlamydiosis in a caprine herd showing abortion issues in Central Sinaloa, Mexico. Additionally, 32 out of the 135 goats were selected to perform a longitudinal study throughout two consecutive periods of kidding/abortions. Chlamydia abortus was detected by bacterial isolation and the positive samples were confirmed by PCR. In does, chlamydiosis prevalence was 55.6 % (75/135; 69 parturitions and six abortions). Ten out of 75 positive isolations were confirmed by PCR. In bucks, two out of seven samples tested positive for bacterial isolation. In the longitudinal study, the likelihood of showing a positive result increased 41.6 times (OR=0.024, 95 % CI: 0.002 to 0.299) during the second period of evaluation. According to multivariate analysis, chlamydiosis positivity, lower age of goats, and a reduced number of parturitions were associated. The results presented herein represent the first report of C. abortus in a caprine herd in the state of Sinaloa. More studies focused on the prevalence and distribution of C. abortus in Mexico are needed to improve the knowledge regarding the impact of chlamydiosis on animal health and production.

Resumen Para determinar la prevalencia de clamidiosis en un rebaño caprino con problemas de aborto en el centro de Sinaloa, México, se realizó un estudio transversal que incluyó a siete machos y 135 hembras con parto o aborto reciente. Adicionalmente, 32 de las 135 hembras fueron seleccionadas para realizar un estudio longitudinal por dos períodos consecutivos de partos/abortos. Chlamydia abortus se identificó mediante aislamiento y las muestras positivas se confirmaron mediante PCR. La prevalencia de clamidiosis fue de 55.6 % en las hembras (75/135), en las cuales se presentaron 69 partos y seis abortos. Únicamente ١٠/75 muestras positivas fueron confirmadas por PCR. En los machos, 2/7 muestras resultaron positivas mediante aislamiento. En el estudio longitudinal, se incrementó en 41.6 veces la posibilidad (OR=0.024, IC 95 %: 0.002-0.299) de tener un resultado positivo durante el segundo período de evaluación. De acuerdo con el análisis multivariado, se presentó una asociación entre la positividad a clamidiosis, la edad de las hembras y el número de partos. Estos resultados representan el primer reporte de C. abortus en un rebaño caprino del estado de Sinaloa. Se requieren más estudios que evalúen la prevalencia y distribución de C. abortus en México para comprender mejor el impacto de la clamidiosis sobre la salud y producción animal.

ABSTRACT Brucellosis, leptospirosis, bovine viral diarrhea (BVD) and infectious bovine rhinotracheitis (IBR) are abortive diseases that compromise productive efficiency in cattle. In different municipalities of Oaxaca, Mexico, reproductive problems suggestive of these diseases have been observed. This study determined the frequency of BVD, IBR, brucellosis and leptospirosis in dual-purpose cattle herds in different regions of Oaxaca, Mexico. A total of 2,691 blood samples were collected from 127 bovine herds to diagnose brucellosis serologically using the Rose Bengal and Rivanol tests; microscopic agglutination test (MAT) with a battery of six Leptospira serovars; ELISA by blocking and indirect for BVD and IBR respectively. The apparent overall frequency of herd was brucellosis: 2.3%, leptospirosis: 86.6%, IBR: 65.4% and BVD: 56.7%. The real frequency for brucellosis, leptospirosis, IBR and BVD was -9.1% (CI95=-10.1, -7.9%), 64.3% (CI95 = 62.5, 66.1%), 40.1% (CI95 = 38.2, 41.9%) and 33.2 % (CI95 = 31.4, 35.0%) respectively. In Costa region, the highest percentage of animals with antibodies against Leptospira, IBR and BVD was observed. The present study showed serologically the presence of antibodies against brucellosis, IBR, BVD and six serovars of Leptospira in bovine herds’ double purpose of Oaxaca State, Mexico.

RESUMEN La brucelosis, leptospirosis, diarrea viral bovina (DVB) y rinotraqueítis infecciosa bovina (IBR), son enfermedades abortivas que comprometen la eficiencia productiva en hatos bovinos. En diferentes municipios de Oaxaca, México, se han observado problemas reproductivos sugestivos a estas enfermedades. El objetivo del estudio fue determinar la frecuencia de DVB, IBR, brucelosis y leptospirosis en bovinos de doble propósito criados en diferentes regiones de Oaxaca. Se colectaron 2,691 muestras sanguíneas a partir de 127 hatos bovinos para diagnosticar serológicamente brucelosis mediante las pruebas de tarjeta al 8% y Rivanol; aglutinación microscópica (MAT) con una batería de seis serovariedades de Leptospira; ELISA por bloqueo e indirecta para DVB e IBR respectivamente. La frecuencia general aparente de hato fue brucelosis: 2.3%, leptospirosis: 86.6%, IBR: 65.4% y DVB: 56.7%. La frecuencia real para brucelosis, leptospirosis, IBR y DVB fue de -9.1% (IC95= -10.1, -7.9%), 64.3% (IC95= 62.5, 66.1%), 40.1% (IC95= 38.2, 41.9%) y 33.2% (IC95= 31.4, 35.0%) respectivamente. En la región Costa se observó el mayor porcentaje de animales con anticuerpos contra Leptospira, IBR y DVB. El presente estudio evidenció serológicamente la presencia de anticuerpos contra brucelosis, IBR, DVB y seis serovariedades de Leptospira en hatos bovinos doble propósito del estado de Oaxaca, México.

Abstract This study aimed to evaluate the individual and flock serological frequency and detect the risk factors of C. abortus infection in seven Mexican sheep producing states. It was performed a multifactor, cross-sectional, and stratified study with an analysis of 5,321 serological samples from 323 flocks in 61 municipalities. Serology frequency was determined using a commercial ELISA kit. The risk factors associated with the disease were determined through surveys and statistical analyses with a squared Chi test and a 95% confidence interval. Of the 5,231 serum samples, 581 (10.92 %) had positive ELISA test results. The results, by state, of positive sera were: Tlaxcala 13.08 % (73/558); Sonora 12.45 % (102/819); Chihuahua 11.56 % (107/925); Hidalgo 11.34 % (97/855); Chiapas 10.15 % (60/591); Querétaro 9.69 % (79/815); Estado de México 7.09 % (63/758). The frequency of seropositive herds was 43.34 % (140/323). The results, when grouped by state, were the following: Hidalgo 67.39 % (31/46), Querétaro 67.18 % (43/64); Sonora 40.92 % (19/47); Tlaxcala 33.33 % (12/36); Chiapas 31.57 % (12/38); Estado de México 25.45 % (14/55), and Chihuahua 24.32 % (9/37). The main risk factors that favor the presence of ovine enzootic abortion are gestation, 37 to 48 mo of age, and an intensive production system. These serology studies identified the presence of ovine enzootic abortion in Mexico and some of the risk factors associated with this infection.

Resumen El objetivo fue evaluar la frecuencia serológica individual y de rebaño, así como detectar los factores de riesgo de C. abortus, en siete estados donde se realiza la producción ovina en México. Se efectuó un estudio multifactorial, transversal y estratificado, con análisis de 5,321 muestras serológicas en 323 rebaños de 61 municipios. Se realizó ELISA con un kit comercial. Los factores de riesgo asociados con la enfermedad se determinaron mediante cuestionarios y análisis estadísticos con una prueba de Ji cuadrada con un intervalo de confianza del 95%. Del total de 5, 231 muestras de suero que fueron colectadas, 581 (10.92 %) dieron positivas a la prueba de ELISA. Los resultados por estado de sueros positivos fueron: Tlaxcala 13.08% (73/558); Sonora 12.45 % (102/819); Chihuahua 11.56 % (107/925); Hidalgo 11.34 % (97/855); Chiapas 10.15 % (60/591); Querétaro 9.69 % (79/815); Estado de México 7.09 % (63/758). La frecuencia de hatos seropositivos, fue de 43.34 % (140/323). Los resultados al ser agrupados por estado fueron los siguientes: Hidalgo 67.39 % (31/46), Querétaro 67.18 % (43/64); Sonora 40.92 % (19/47); Tlaxcala 33.33 % (12/36); Chiapas 31.57 % (12/38); Estado de México 25.45 % (14/55) y Chihuahua 24.32 % (9/37). Los principales factores de riesgo que favorecen la presencia del aborto enzoótico de las ovejas, fueron que estuviesen gestantes, que tuviesen una edad entre los 37 a los 48 meses y que el sistema de producción fuese intensivo. Estos estudios serológicos identificaron la presencia del aborto enzoótico de las ovejas en México, así como algunos de los factores de riesgo que inciden para favorecer su presencia.

Abstract Caseous lymphadenitis of small ruminants causes economic losses worldwide. To date, no effective vaccine has been developed against the causative agent of this disease, Corynebacterium pseudotuberculosis. The objective of the present work was to evaluate an aroA mutant gene strain of C. pseudotuberculosis in cellular and murine models, for attenuation and the ability to stimulate an immune response. The intracellular survival of the aroA mutant strain and the wild type strain (WT) of C. pseudotuberculosis was evaluated in J774A.1 murine macrophages using a multiplicity of infection (MOI) of 1:1 with the following infection times: 30 min, and 1, 2, 4, 8, 12, and 24 h. The largest difference in the intracellular survival of the mutant was observed 30 min post-infection. After subcutaneous skin vaccination, the subcutaneous lesion progression observed on the 14th day was more severe in those animals that were vaccinated with the WT strain. An analysis of the residual virulence in the murine model did not reveal any bacteria in mice vaccinated with the aroA strain on day 28 post-vaccination. Mice vaccinated with the mutant showed 50 % protection against the intraperitoneal challenge, exceeding that of the control group (41.67 %). We conclude that the virulence of the aroA mutant was significantly attenuated in both cellular and murine models according to the residual virulence detected in mice. However, vaccination with the mutant failed to confer at least 80 % protection, which is desirable for an immunogen. Hence, this study contributes to the knowledge of the immune response against Corynebacterium pseudotuberculosis.

Abstract: Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) is the causative agent of Johne’s disease. The mechanisms by which MAP is able to adapt to the innate host response are still unclear. We examined Ferroportin 1 (FPN1) mRNA expression levels via real-time PCR of the mouse macrophage cell line J774 that was incubated in the presence of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) or MAP crude protein extract. Infection with live MAP decreased FPN1 mRNA levels in a multiplicity of infection (MOI)-dependent fashion. Macrophages infected with MOIs of 20:1 and 15:1 did not show any change in FPN1 gene expression, whereas MOIs of 10:1 and 5:1 induced a decrease of 50 and 80%, respectively. Macrophages treated with 50, 100, 150 and 200 µg/mL of MAP crude extract (ATCC19698) decreased FPN1 mRNA expression by 25%. Additionally, up-regulation of FPN1 mRNA by an iron overload treatment of 400 µM of ferric nitrilotriacetate (FeNTA) was abrogated by live MAP (MOI 20:1) by approximately 70%. Our data revealed an inhibitory effect of MAP on FPN1 mRNA and suggested a bacterial mechanism that may play a role in host iron regulation.

Resumen: El Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) es el agente causal de la enfermedad de Johne. Los mecanismos por los cuales MAP es capaz de adaptarse a la respuesta natural del huésped aún no están claros. A través de la PCR en tiempo real, se examinaron los niveles de expresión del ARN de la ferroportina 1 (FPN1) en células de macrófagos de ratón J774 infectados con Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis o con el extracto crudo de proteína (ECP) de MAP. La multiplicidad de infección (MOI) con MAP dependió de la disminución de los niveles del ARNm de la FPN1. Los macrófagos infectados con las MOI de 20:1 y 15:1 no mostraron cambio alguno en la expresión del gen FPN1, mientras que en las MOI de 10:1 y 5:1, disminuyó en un 50% y 80%, respectivamente. En los macrófagos tratados con 50, 100, 150 y 200 μg/mL de ECP de MAP (ATCC19698), la expresión del ARNm de FPN1 disminuyó 25%. La sobreexpresión del ARNm de FPN1 en macrófagos J774 tratados con una sobrecarga de hierro de 400 μM de nitrilotriacetato férrico (FeNTA) se suprimió cerca de un 70% por la infección con MAP viva (MOI 20:1). Estos datos revelaron que MAP inhibe la expresión del ARNm de FPN1, lo que sugiere que existe un mecanismo bacteriano que participa en la regulación del hierro del huésped.

Brucella abortus S19 is an intracellular vaccine strain against bovine brucellosis. Rabies is a lethal disease in cattle. Plasmids encoding the G glycoprotein from the rabies virus induce a protective immune response in different animal species. A vector called pBBR4-CMV-Ggp-SV40+, which encodes the G gene, regulated by the cytomegalovirus eukaryotic expression promoter, and which can be used to transform the B. abortus S19 vaccine strain, was constructed. The stability of the transformant strain was tested both in vitro and in vivo. In the in vitro assays, B. abortus S19 pBBR4-CMV-Ggp-SV40+ was grown for 5 sequential passages, and for the in vivo assays, female BALB/c mice were infected. Colony-forming unit counting and plasmid identification were performed in each passage and in the spleens at 7 days post-infection. To test the plasmid stability in the strain, all parameters were determined with and without antibiotic. The bacterial concentration was lower with antibiotic than without it, but the bacterial growth was more homogeneous. The plasmid was identified in antibiotic- and non-antibiotic-treated isolated colonies under both in vitro and in vivo conditions. The plasmid construct was also transfected into BHK-21 cells, which express the G glycoprotein. The B. abortus S19 pBBR4-CMV-Ggp-SV40+ strain showed stability, representing a suitable candidate vector for developing a bivalent vaccine against brucellosis and rabies. This is the first time that a Brucella species has been transformed with a eukaryotic expression plasmid.

Brucella abortus S19 es una cepa vacunal intracelular contra la brucelosis bovina. La rabia es una enfermedad letal en el ganado. Plásmidos codificantes de la glicoproteína G del virus de la rabia inducen una respuesta protectora en diferentes especies animales. En este trabajo se construyó el vector pB-BR4-CMV-Ggp-SV40+, para transformar la cepa vacunal B. abortus S19 y que codifica el gen G regulado por el promotor de citomegalovirus para la expresión eucariótica. Se evaluó la estabilidad de la cepa transformante tanto in vitro como in vivo. Para los ensayos in vitro, la cepa B. abortus SI9 pBBR4-CMV-Ggp-SV40+ se hizo crecer durante cinco pasajes secuenciales y para los ensayos in vivo se infectaron ratones BALB/c hembras. Se determinaron las unidades formadoras de colonia y se identificó el plásmido en cada uno de los pasajes, así como en los bazos a los siete días post infección. Para probar la estabilidad del plásmido en la cepa, todos las variables se midieron con y sin antibiótico. La concentración bacteriana fue más baja con antibiótico que sin él, pero el crecimiento de la bacteria fue más homogéneo. El plásmido se identificó en colonias aisladas en medios con y sin antibiótico tanto en condiciones in vitro como in vivo. Las células BHK-21 se transfectaron con el plásmido construido y expresaron la glicoproteína G. La cepa B. abortus S19 pBBR4-CMV-Ggp-SV40+ mostró estabilidad y representa un candidato adecuado como vector para desarrollar una vacuna bivalente contra brucelosis y rabia. Esta es la primera vez que se transforma una especie de Brucella con un plásmido de expresión eucariota.

Although Chlamydia abortus is classified as an exotic agent in Mexico, there is increasing evidence of its presence. The objective of this study was to isolate C. abortus in dairy goat herds with problems of abortion in the state of Guanajuato, Mexico, and to develop appropriate diagnostic methods for its detection. Serological samples and vaginal swabs were taken from 6 dairy goat herds. The ELISA revealed a seropositivity of 9.60% for C. abortus. The PCR test based on the vaginal mucus samples resulted in 30 of 126 positive animals (23.8%). Chlamydia spp. were isolated in 34 of the 126 animals tested (26.98%). The 3 diagnostic methods tested were valuable and complementary in zones where Chlamydia is suspected to cause abortions. We demonstrated that the bacteria are present in dairy goat herds of Mexico; thus, Veterinary Sanitary Authorities should consider this disease endemic to establish sanitary procedures to control the spread of the disease and to prevent human transmission.

Chlamydia abortus se clasifica como un agente exótico en México; sin embargo, existe cada vez más evidencia de su presencia en los rebaños caprinos. El objetivo de este estudio fue aislar a C. abortus en cabras lecheras de rebaños con problemas de abortos en el estado de Guanajuato, México, y desarrollar pruebas diagnósticas adecuadas para su detección. Se tomaron muestras de suero e hisopos vaginales de seis rebaños caprinos. La prueba ELISA mostró 9.60% de animales seropositivos a C. abortus. El PCR a partir del ADN de moco vaginal dio como resultado 30 animales positivos de 126 (23.8%). Se aisló Chlamydia spp. en 34 de 126 animales muestreados (26.98%). Los tres métodos diagnósticos probados resultaron complementarios y de gran valor ya que se pueden aplicar en las zonas donde se sospecha que Chlamydia está causando abortos. En el trabajo se demostró que este patógeno está presente en los rebaños lecheros de México, por lo que las autoridades sanitarias veterinarias deberían considerar la clamidiosis como endémica, con la finalidad de establecer los procedimientos sanitarios apropiados para evitar que la enfermedad se propague y evitar también el contagio a los humanos.

The virulence of 12 Listeria monocytogenes strains from goat and goat by-products was evaluated. Variable virulence levels were found when compared the relative virulence (mortality, %) and the ability to grow infect the spleen of BALB/c mice inoculated intravenously or intragastrically. Two strains from feed produced 100 % mortality, by either inoculation route and seven strains, including those from feed, infected the spleen with both inoculation routes. A strain inoculated intravenously without causing death in the mice produced spleen counts similar to those obtained in dead mice, this could indicate that a high count of the microorganism in the spleen not necessarily ensures its virulence. We also tested the capacity to infect J774 macrophages and Caco-2 epithelial cells, finding higher invasion and intracellular growth in Caco-2 with respect the macrophages and showing quadratic growth kinetics in both cell lines. Only the two feed strains did not show a significant difference from the control strain (P>0.05) regarding kinetic parameters and invasion percentage in both cell lines. Although all isolates were able to invade Caco-2 cells, not all isolates were able to invade the spleen after the intragastrically inoculation. Two goats feed strains were the most virulent, representing a risk for animal and human health.

Se evaluó la virulencia de cepas de Listeria monocytogenes todas de serotipo 4b procedentes de cabras y sus derivados. Se observaron niveles de virulencia variables cuando se comparó la virulencia relativa (porcentaje de letalidad) en ratones BALB/c inoculados vía intravenosa o intragástrica y su capacidad para infectar macrófagos J774A.1, y células epiteliales Caco-2. Dos cepas obtenidas de alimento de cabras produjeron 100 % de letalidad por ambas vías de inoculación y no mostraron diferencia significativa con la cepa testigo (P>0.05) respecto al porcentaje de invasión y a los parámetros de la cinética de crecimiento cuadrática observada en ambas líneas celulares. Si bien todas las cepas lograron invadir las células Caco-2, solamente algunas consiguieron invadir el bazo después de la inoculación por vía intragástrica. Las dos cepas provenientes de alimento de cabras fueron las más virulentas, representando un riesgo para la salud humana y animal, ya que pueden ser diseminadas en el hato y de este a otras explotaciones o a las instalaciones donde se elaboran alimentos.

Objective. To identify the risk of brucellosis in the state of Tlaxcala, Mexico. Materials and methods. A diagnosis of social type was conducted in the municipalities of Huamantla, Ixtenco and Teacalco, located in the eastern region of the state. The seroprevalence of brucellosis in goats and humans was determined. Results. 46.9% of producers know the programs of vaccination against brucellosis; 19.7% apply the vaccine and 80.3% do not apply the vaccine. Huamantla had the highest seroprevalence of animal brucellosis in 66.8%; San Jose Teacalco distributes unpasteurized cheeses to a distance of 270 km, increasing the risk of infection with brucellosis. Ixtenco recorded the highest prevalence of brucellosis in humans, with 1.51%. Conclusion. The municipalities studied present risks of infection and spread of brucellosis.

Objetivo. Identificar los riesgos de la brucelosis en el estado de Tlaxcala, México. Material y métodos. Se realizó un diagnóstico de tipo social en los municipios de Huamantla, Ixtenco y Teacalco, localizadas en la región oriente del estado. Se determinó la seroprevalencia de brucelosis en cabras y humanos. Resultados. El 46.9% de productores conoce los programas de la vacunación contra brucelosis; 19.7% aplica vacuna y 80.3% no aplica vacuna. Huamantla presentó la mayor seroprevalencia de brucelosis animal en 66.8 por ciento. San José Teacalco distribuye y comercializa quesos no pasteurizados en una distancia mayor de 270 km, lo que amplía los riesgos de contagio por brucelosis. Ixtenco registró la mayor prevalencia de brucelosis en humanos con 1.51 por ciento. Conclusión. Los municipios estudiados presentan riesgos de contagio y propagación de la brucelosis.

Objective. To identify the risk of brucellosis in the state of Tlaxcala, Mexico. Materials and methods. A diagnosis of social type was conducted in the municipalities of Huamantla, Ixtenco and Teacalco, located in the eastern region of the state. The seroprevalence of brucellosis in goats and humans was determined. Results. 46.9% of producers know the programs of vaccination against brucellosis; 19.7% apply the vaccine and 80.3% do not apply the vaccine. Huamantla had the highest seroprevalence of animal brucellosis in 66.8%; San Jose Teacalco distributes unpasteurized cheeses to a distance of 270 km, increasing the risk of infection with brucellosis. Ixtenco recorded the highest prevalence of brucellosis in humans, with 1.51%. Conclusion. The municipalities studied present risks of infection and spread of brucellosis.

Objetivo. Identificar los riesgos de la brucelosis en el estado de Tlaxcala, México. Material y métodos. Se realizó un diagnóstico de tipo social en los municipios de Huamantla, Ixtenco y Teacalco, localizadas en la región oriente del estado. Se determinó la seroprevalencia de brucelosis en cabras y humanos. Resultados. El 46.9% de productores conoce los programas de la vacunación contra brucelosis; 19.7% aplica vacuna y 80.3% no aplica vacuna. Huamantla presentó la mayor seroprevalencia de brucelosis animal en 66.8 por ciento. San José Teacalco distribuye y comercializa quesos no pasteurizados en una distancia mayor de 270 km, lo que amplía los riesgos de contagio por brucelosis. Ixtenco registró la mayor prevalencia de brucelosis en humanos con 1.51 por ciento. Conclusión. Los municipios estudiados presentan riesgos de contagio y propagación de la brucelosis.

Transmission of Brucella abortus to female calves from positive and negative cows was determined in the first week and third month of age. Two herds were used. Herd 1 consisted of 670 milking cows with a brucellosis seroprevalence of 21.6% (145/670). In this herd, groups of positive and negative cows were formed using the card and radial immunodifussion (RID) tests with native hapten. Blood samples were taken from female calves on two occasions: at one week of age and before animals were vaccinated against B. abortus. Of the 22 calves from the positive group, two (9.1%) were positive in the first week of life, but no more positive calves were found at three months of age. In the group of female calves born to negative cows, there were no positive animals at one week of age, but four out of 22 were found positive with the RID test at three months of age. A prevalence rate of 13.6% of positive calves for B. abortus in the third month of age was calculated. Twenty milk samples were obtained from this herd and B. abortus was isolated from all of them (100%). Using PCR, the strains found were confirmed to be field strains and not vaccine strains. Herd 2 consisted of 1800 milking cows, participating in the National Campaign against Animal Brucellosis, that had a seroprevalence of 1.94% (35/1800) detected from January to December 2009. In this herd, 1 170 records were analyzed using the results of the card and rivanol tests obtained from female calves younger than three months of age, of which 24 (2.1%) were found positive for B. abortus from January 2009 to June 2010. It is concluded that the diagnosis of brucellosis is necessary in female calves born in dairies to cows that have the disease, in order to prevent positive animals from remaining in the herd. Vaccine-induced antibodies will avert disease detection, but brucellosis will later manifest itself through abortions during first pregnancies, thus perpetuating the disease in dairies.

La transmisión de Brucella abortus a becerras de vacas positivas y negativas se determinó a la primera semana de vida y al tercer mes de edad. Se trabajó con dos hatos: el hato 1, con 670 vacas en producción, presentaba una seroprevalencia a brucelosis de 21.6% (145/670). En este hato se formaron dos grupos: vacas positivas y vacas negativas, como resultado de las pruebas de tarjeta y de inmunodifusión radial (IDR) realizadas con hapteno nativo. Se tomaron pruebas de sangre de las vacas en dos ocasiones, a la semana de edad y antes de que los animales fueran vacunados contra B. abortus. De las 22 vacas del grupo positivo, 2 (9.1%) becerras resultaron positivas a la primera semana de vida, pero no se encontraron vacas positivas a los tres meses de edad. En el grupo de becerras nacidas de vacas negativas no se encontraron animales positivos a la semana de vida, pero a los tres meses de edad, 4 de las 22 becerras resultaron positivas con la prueba de IDR. La tasa de prevalencia de vacas positivas a B. abortus fue de 13.6% a los tres meses de edad. De las 20 muestras de leche obtenidas de este hato se aisló B. abortus (100%). Mediante PCR se confirmó que estas cepas correspondían a cepas de campo y no a cepas vacunales. El hato 2, con 1800 vacas en producción, estaba inscrito en la campaña nacional contra la brucelosis animal y presentaba una seroprevalencia de 1.94% (35/1800) detectada de enero a diciembre de 2009. Se analizaron 1 170 registros usando los resultados de las pruebas de tarjeta y rivanol aplicada en becerras menores de tres meses de edad, de las que 24 (2.1%) resultaron positivas a B. abortus de enero de 2009 a junio de 2010. Se concluye que es necesario realizar el diagnóstico de brucelosis en becerras nacidas en establos donde se ha presentado la enfermedad, para prevenir que permanezcan animales positivos en el hato, ya que los anticuerpos posvacunales impedirán detectar la enfermedad, pero posteriormente se manifestará mediante abortos durante la primera gestación, perpetuando así la brucelosis en el establo.