RESUMO: Este estudo versa sobre a validação de um questionário aplicado aos licenciandos do primeiro e último ano das licenciaturas em Biologia, Ciências, Física, Química e Pedagogia, sendo selecionadas duas diferentes instituições para cada curso. O instrumento de pesquisa passou pela validação semântica, realizada por seis pesquisadores doutores das áreas de Ensino (Biologia, Física e Química) e a aplicação de um teste piloto com licenciandos do curso de Biologia. Após a análise semântica e o teste piloto, três assertivas foram eliminadas, ficando o questionário final constituído por 81 assertivas. Para avaliar a confiabilidade do instrumento (validação estatística) foi realizado o teste de Alpha de Cronbach, análise fatorial, Kaiser-Meyer-Olklin (KMO) e o de Esfericidade de Bartlett. Após a aplicação dos testes foram eliminadas 30 assertivas, tornando possível a Análise dos Componentes Principais (ACP). O número amostral foi considerado satisfatório para a sistematização e análise dos dados, quando analisado o valor do KMO.

ABSTRACT: The present study concerns the validation of a questionnaire applied to first and last year undergraduate students in Biology, Sciences, Physics, Chemistry and Pedagogy, being selected two different institutions for each course. The research instrument went through the semantic validation, carried out by six PhD researchers in the areas of Teaching (Biology, Physics and Chemistry) and also through a pilot test with Biology students. After the semantic analysis and the pilot test, three questions were deleted so that the final questionnaire became composed of 81 questions. To evaluate the reliability of the instrument (statistical validation) the Cronbach Alpha test, factorial analysis, Kaiser-Meyer-Olklin (KMO) and Bartlett’s Sphericity were carried out. After the application of these tests, 30 assertions were eliminated, making the Principal Component Analysis (PCA) possible. The sample number was considered satisfactory for the systematization and analysis of the data, when the KMO value was analyzed.

RESUMEN: Este estudio versa sobre la validación de un cuestionario aplicado a estudiantes de primer y último año de las licenciaturas en Biología, Ciencias, Física, Química y Pedagogía, para ello fueron seleccionadas dos diferentes instituciones para cada carrera. El instrumento de investigación pasó por una validación semántica, realizada por seis investigadores doctores de las áreas de Enseñanza (Biología, Física y Química), y la aplicación de una prueba piloto con estudiantes de la carrera de Biología. Después del análisis semántico y la prueba piloto, se eliminaron tres aserciones, y el cuestionario quedó constituido por 81 aserciones. Para evaluar la fiabilidad del instrumento (validación estadística), se realizó la prueba de Alpha de Cronbach, análisis factorial, Kaiser-Meyer-Olklin (KMO) y la prueba de esfericidad de Bartlett. Después de la aplicación de las pruebas, se eliminaron 30 aserciones, lo que hizo posible el Análisis de Componentes Principales (ACP). El número de muestreo fue considerado satisfactorio para la sistematización y análisis de los datos, cuando analizado el valor del KMO.

Resumo: Novos conhecimentos científicos e tecnológicos da biologia molecular estão cada vez mais presentes na sociedade, tornando-se necessária a educação científica dos cidadãos. Este artigo analisa os discursos de professores sobre a manipulação genética e o melhoramento humano no contexto de um curso de formação continuada sobre o movimento eugênico ocorrido nos séculos 19 e 20. Os dados, coletados por meio de videogravação, foram transcritos e analisados pela metodologia de Análise de Discurso. Os resultados apontam para uma mudança gradual nos posicionamentos dos professores. No início, os sujeitos apresentam uma visão mais determinista ao aludirem que, por meio da genética, é possível aperfeiçoar a espécie humana. Todavia, ao longo das discussões, observa-se a construção de uma percepção mais contextualizada da ciência e da tecnologia, permeada de influências ideológicas da sociedade e questionamentos acerca das consequências da manipulação genética e da divulgação de padrões humanos idealizados.

Abstract: New scientific and technological knowledge of molecular biology are increasingly present in society, becoming necessary in the scientific education of citizens. This article analyzes the teachers' speeches about genetic manipulation and human enhancement in the context of a continuing education course on the eugenics movement in the nineteenth and twentieth centuries. Data were collected by video recording,and were transcribed and analyzed by Discourse Analysis methodology. The results point to a gradual change in the positions of the teachers. Initially, the subjects have a more deterministic view when they mention that, through genetics, it is possible to refine the human species. However, during the discussions, the construction of a more contextualized perception of science and technology is observed, permeated with ideological influences from society and questions about the consequences of genetic manipulation and the dissemination of idealized human standards.

A limpeza clonal seguida de pré-imunização com complexos protetivos do Citrus tristeza virus(CTV) possibilitaram o cultivo comercial da laranja Pêra, variedade de relevante importância para a citricultura brasileira, mas sensível ao vírus. O emprego de isolados fracos protetivos em outras variedades de citros, mesmo com maior tolerância ao CTV, pode ser também de interesse para evitar a dispersão de isolados severos. O objetivo desta pesquisa foi caracterizar, por meio da análise SSCP (Single Strand Conformational Polymorphism) do gene da proteína do capsídeo, isolados de CTV presentes em plantas das cultivares de laranjas doce Pêra, Hamlin e Valência, propagadas de quatro fontes de borbulhas: 1) clones velhos, 2) clones nucelares, 3) clones microenxertados e 4) clones microenxertados pré-imunizados com o isolado fraco protetivo 'PIAC' do CTV. Avaliou-se ainda a correlação dos padrões SSCP obtidos com intensidade de caneluras no lenho, vigor e produção de frutos. Resultados do SSCP demonstraram baixa diversidade genética entre isolados presentes em diferentes plantas da mesma variedade e mesma fonte de borbulhas, e em alguns casos, em diferentes fontes de borbulhas e variedades. Para os sintomas de tristeza, observou-se menores intensidades em plantas dos clones novos, microenxertados e, dos microenxertados pré-imunizados sobre clones velhos das três variedades. Os padrões SSCP e a sintomatologia observados sugeriram que complexos mais fortes do CTV estão infectando as plantas dos clones velhos das três variedades. A estabilidade do complexo protetivo foi observada nos padrões SSCP dos isolados de CTV de alguns dos clones microenxertados e pré-imunizados. Concluiu-se que as alterações detectadas em outros perfis eletroforéticos deste tratamento não provocaram a perda da capacidade protetiva do isolado 'PIAC' de CTV, inoculado na pré-imunização.

Clonal cleaning, followed by pre-immunization with protective complexes of Citrus tristeza virus(CTV), allowed the commercial cultivation of Pêra sweet orange, a variety that has great importance for Brazilian citriculture but is sensitive to the virus. The use of mild protective isolates in other citrus varieties, even those more tolerant to CTV, can also be of interest to prevent the spread of severe isolates. The aim of this study was to characterize, by means of SSCP (Single Strand Conformational Polymorphism) analysis of the coat protein gene, CTV isolates present in plants of the sweet orange cultivars Pêra, Hamlin and Valencia propagated from four budwood sources: 1) old lines, 2) nucellar lines, 3) shoot-tip-grafted lines, and 4) shoot-tip-grafted lines pre-immunized with the mild CTV protective isolate 'PIAC'. We also evaluated the correlation of the obtained SSCP patterns to stem pitting intensity, tree vigor and fruit yield. SSCP results showed low genetic diversity among the isolates present in different trees of the same variety and same budwood source and, in some cases, in different budwood sources and varieties. Considering tristeza symptoms, lower intensity was noted for plants of new, shoot-tip-grafted and pre-immunized shoot-tip-grafted lines, compared to old lines of the three varieties. The observed SSCP patterns and symptomatology suggested that more severe CTV complexes infect the plants of old lines of all three varieties. The protective complex stability was observed in the SSCP patterns of CTV isolates of some shoot-tip-grafted and pre-immunized clones. It was concluded that the changes detected in other electrophoretic profiles of this treatment did not cause loss of the protective capacity of CTV isolate 'PIAC' inoculated in the pre-immunization.

The use of tolerant rootstocks and preimmunization has satisfactorily controlled losses associated with the Citrus tristeza virus (CTV). Several researchers have shown that CTV mild isolates that are selected in the same region where they are used are superior to isolates obtained from other areas. Thus, budwoods of 20 outstanding citrus trees were collected in north and northwestern Paraná state (Brazil) citrus-producing areas and established to be used in a preimmunization program. These budwoods were tested to evaluate the potential protection of the inherently present viral complex. Based on biological indexing and molecular characterization of the capsid protein gene by RFLP (restriction fragment length polymorphism, which indicated that the plants were infected with mild isolates of CTV), some of the selected plants could be used in a preimmunization program. These potentially mild and protective isolates were challenged with severe 'Rolândia' isolate inoculations by grafting and by the brown citrus aphid (Toxoptera citricida Kirkaldy) vector, which was faster in transmitting the virus. Some isolates had a better protective value than others, particularly when challenged with the severe CTV isolate. The SSCP (single strand conformational polymorphism) molecular analysis was an excellent complementary tool for monitoring the performance of the experiments and the stability of the viral complex present in the plants. Isolate number 1, collected in the municipality of Cruzeiro do Sul (CS-1), was the most promising for protecting commercial Pêra sweet orange (C. sinensis L.) orchards in northern and northwestern Paraná. The Rolândia severe CTV isolate was stable and had a high genetic divergence among the severe isolates used as a control (Capão Bonito and Barão B) and all of the isolates tested.

Plants of Pera sweet orange on Rangpur lime rootstocks, from orchards of the northwest and north of Paraná state, Brazil, were evaluated for severity of symptoms and genetic diversity of Citrus tristeza virus. The severity of symptoms was evaluated by the development of tree, fruit size and stem pitting symptoms. Isolates that infect these plants were compared with known mild and severe isolates by analysis of restriction fragments length polymorphism (RFLP) of the coat protein nucleotide sequences (CPNS), amplified by the polymerase chain reaction (PCR) and undergone digestion with the restriction enzymes Hinf I and Rsa I. The severity of symptoms showed that the analyzed plants from the northwest orchards presented mild to moderate tristeza symptoms, while the plants from the north orchards exhibited moderate to severe symptoms. The RFLP analysis revealed that the CTV isolates are constituted by haplotype mixtures. Rsa I was the enzyme that best discriminated the genetic diversity among the analyzed isolates of CTV. Two main groups were generated by the UPGMA analysis. The isolates from the northwest orchards grouped with most of the mild isolates used as control, and a great part of the isolates from the north orchards, was correlated with the severe isolate Capão Bonito. Correlation between the stem pitting intensity and RFLP patterns, was demonstrated with some exceptions. The failure of protection of some isolates and the contamination of the rootstocks by the severe isolates, in field nursery conditions, before grafting with scions with mild isolates, were the hypotheses considered to explain the occurrence of severe CTV isolates in the North area of Paraná State.

O experimento teve como objetivo caracterizar biológica e molecularmente os isolados de CTV, obtidos de árvores de laranja Pêra em pomares das regiões Norte e Noroeste do Paraná, visando selecionar isolados fracos do Citrus tristeza virus com capacidade protetiva para pré-imunização. Os resultados apontaram sintomas fracos a moderados de caneluras e revelaram similaridade genética da maioria dos isolados analisados e o isolado fraco controle, sugerindo que as plantas selecionadas estão infectadas por haplótipos fracos de CTV, com potencial para serem utilizadas como plantas matrizes.

A cross-protection program citrus tristeza disease, caused by Citrus tristeza virus (CTV) has been developed in the Parana State, to obtain Pera orange mother plants. Thus, 20 plants were selected in the orange commercial fields of the North and Northwest region. Comparisons between mild and severe recognized isolates were made. The results showed mild-to-moderate stem pitting symptoms and the great majority of the isolates grouped up with the mild control isolate. These results suggest that the plants selected were infected by CTV mild haplotypes showing that they have mother plant potential.

Um protocolo simples, rápido e fácil foi padronizado para extração de DNA total da bactéria Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli. O DNA obtido por esse método foi de ótima qualidade e quantidades suficientes para reações de RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) com "primers" randômicos e PCR (Polymerase Chain Reaction) com "primers" do gene de hipersensibilidade e patogenicidade (hrp). O DNA obtido não apresentou nenhuma contaminação por proteínas ou carboidratos, sendo a razão 260 nm/ 380nm entre 1,7 a 1,8. O agrupamento do gene hrp (reação de hipersensibilidade e patogenicidade) é requerido através do patogeno bacteriano de planta para produzir sintomas nos hospedeiros suscetíveis e reação hipersensível em hospedeiros resistentes é encontrado em diferentes bactérias e também em Xanthomonas campestris pv. vesicatoria (9). Os primers RST21 e RST22 (9) foram usados para ampliar o gene de hrp de nove diferentes isolados de Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli, sendo oito de Botucatu, São Paulo, Brasil, e um de "Davis" (EUA). Foi encontrado o produto de PCR amplificado em todos os isolados testados e todos eram patogênicos ao feijão. A presença do gene em isolados patogênicos de Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli foi discutido geneticamente.

A simple, quick and easy protocol was standardized for extraction of total DNA of the bacteria Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli. The DNA obtained by this method had high quality and the quantity was enough for the Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) reactions with random primers, and Polymerase Chain Reaction (PCR) with primers of the hypersensitivity and pathogenicity gene (hrp). The DNA obtained was free of contamination by proteins or carbohydrates. The ratio 260nm/380nm of the DNA extracted ranged from 1.7 to 1.8. The hrp gene cluster is required by bacterial plant pathogen to produce symptoms on susceptible hosts and hypersensitive reaction on resistant hosts. This gene has been found in different bacteria as well as in Xanthomonas campestris pv. vesicatoria (9). The primers RST21 and RST22 (9) were used to amplify the hrp gene of nine different isolates of Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli from Botucatu, São Paulo State, Brazil, and one isolate, "Davis". PCR amplified products were obtained in all isolates pathogenic to beans.

O presente trabalho teve como objetivo identificar 11 isolados de Guignardia citricarpa, agente causal da mancha preta dos citros (MPC), obtidos de frutas cítricas sintomáticas de diferentes regiões geográficas, por meio da PC R e caracterização morfofisiológica das estruturas propagativas, esporulação e crescimento micelial em diferentes meios de cultura, temperaturas e regimes de luz, nas condições de laboratório. Pelo teste de PCR, todos os isolados foram identificados como o patógeno G. citricarpa. Os isolados caracterizados foram submetidos às temperaturas de 20, 25 e 30ºC, em regime de luz contínua, escuro contínuo e fotoperíodos de 12 horas, durante 24 dias. Utilizaram-se os meios de cultura aveia-ágar (AA), batata-dextrose-ágar (BDA) e cenoura-dextrose-ágar (CDA). Os resultados mostraram que ocorreu interação entre os diferentes meios de cultura, temperaturas e fotoperíodos. O meio de cultura que melhor estimulou o crescimento micelial foi o CDA a 25ºC sob o fotoperíodo de 12h. A maior produção de esporos (conídios) foi verificada no meio BDA a 20ºC, no fotoperíodo de 12 horas. No meio CDA, não ocorreu esporulação de nenhum isolado. Sob a temperatura de 30ºC, foi verificada apenas a produção de hifas e picnídios para a maioria dos isolados, em todos os meios de cultura e fotoperíodo testados.

The present work aims to identify 11 isolates of Guignardia citricarpa, the causal agent of the citrus black spot (CBS), obtained from affected fruit in different geographical regions, through PC R and morphophysiological characterization of propagative structures, sporing and mycelial growth in different means of culture, temperatures and photoperiods, under laboratory conditions. Through the PCR test, all isolates were identified as being the G. citricarpa pathogen. The characterized isolates were subjected to evaluations at temperatures of 20, 25 and 30ºC, in continuous light, continuous darkness, and alternating 12 hours light and 12 hours darkness, during 24 days. The study used oat-agar (OA), potato-dextrose-agar (PDA) and carrot-dextrose-agar (CDA) as means of culture. The results showed an interaction between the different means of culture, temperatures and photoperiods. The mean of culture that best stimulated mycelial growth was CDA at 25ºC under the 12-hour photoperiod. The greatest spore (conidia) production was verified in PDA at 20ºC in the 12-hour photoperiod. There was no sporing of any isolate in the CDA mean of culture. Under the 30ºC temperature, the study verified only the production of hyphae and picnids in most isolates, in all means of culture and photoperiods.