Se estandarizó un ELISA para la detección de anticuerpos monoclonales a las proteínas E y NS1 del virus dengue. Se aplicó un ELISA indirecto utilizando como fuente de antígeno células C6/36 inoculadas con la cepa A-15 aislada durante la epidemia de dengue 2 en 1981. Estas células fueron fijadas en placas ELISA a una concentración de 200 000 células/pozo. Se utilizó un control celular en condiciones similares. Para normalizar el sistema se emplearon anticuerpos monoclonales específicos a ambas proteínas. Se realizaron estudios a diferentes tiempos de incubación para determinar el momento de mayor expresión de estas proteínas en la membrana celular. Los resultados muestran una respuesta máxima a las 72 horas posinoculación para ambas proteínas, se obtuvo una sensibilidad para la detección de NS1 de 14,7 ng/mL y para la E de 1,43 ng/mL. Este sistema permite el tamizaje primario de anticuerpos monoclonales a las proteínas E y NS1 del virus dengue 2.

Se realizaron determinaciones de anticuerpos neutralizantes en sueros de pacientes con neuropatía epidémica y de grupos de personas aparentemente sanas, a la cepa 47/93 IPK (CA9) y la 590 productora de efecto citopático ligero (ECP-L), así como a las cepas de referencia de CA9 y CB1-6, por la técnica de microneutralización. Los enfermos y sus contactos mostraron porcentajes significativamente superiores de anticuerpos neutralizantes a la cepa 47/93 que el grupo considerado control y los residentes en municipios de baja tasa de la enfermedad. Esta diferencia también se comprobó en los títulos promedio geométrico (TPG) con las cepas de referencia de CA9 y CB2-4. Se comprobó un incremento de la circulación de la cepa 47/93 en la población infantil desde 1981 a 1993. Los enfermos mostraron porcentajes y TPG significativamente menores de anticuerpos neutralizantes a la cepa 590 que el grupo control, a pesar de que en 25/28 se habían aislado agentes con ECP-L. Se plantea la posibilidad de 2 mecanismos de neutralización y se formula una hipótesis sobre el mecanismo por el cual estos virus puedan participar en la fisiopatología de la enfermedad.

En el presente trabajo se reportan las características físico-químicas presentadas por los agentes aislados en muestras de pacientes con neuropatía epidémica. Los Enterovirus aislados se comportaron en la forma descrita para estos virus. Los agentes productores de efecto citopático ligero (ECP-L) se comportaron en forma variable en lo que se refiere a la sensibilidad al cloroformo, por otra parte no fueron sensibles al ácido fosfonoacético (PAA) ni al cloruro de guanidina (GHCl) y crecieron en células previamente tratadas con bromodeoxiuridina (BDUR). Estos resultados sugieren la presencia de 2 agentes que recuerdan a los Enterovirus y a virus envueltos. Se necesita continuar profundizando en los estudios de caracterización de estos agentes.

En el presente estudio se demuestra la presencia de 2 agentes con características culturales diferentes, tanto de una cepa de Cox A9, como en una productora de efecto citopatogénico ligero (ECP-L), ambas aisladas de pacientes con neuropatía epidémica. Mediante neutralización del Cox A9 con su suero hiperinmune homólogo se desarrolló en la dilución 10-4 un ECP-L que se propagó en pases sucesivos. Se realizó un gradiente de sacarosa a una cepa productora de ECP-L, y de una de las fracciones pasada en cultivo de tejido en presencia de ácido fosfonoacético (PAA) se desarrolló un ECP típico de Enterovirus. Se discute el posible rol patogénico de éstos.

En el presente reporte se describen algunos factores que influyen en el crecimiento del agente productor del efecto citopático (ECP) ligero aislado a partir de líquido cefalorraquídeo de pacientes de neuropatía epidémica. Se demostró que la concentración de NaHCO3 fue decisiva para la aparición del ECP. Concentraciones determinadas de MnCl2 permitieron la visualización del ECP e incrementaron el rendimiento viral.

En el presente reporte se presentan las condiciones necesarias para el desarrollo de placas en los agentes productores de efecto citopático ligero que fueron aislados de muestras de líquido cefalorraquídeo de pacientes con neuropatía epidémica.

A technique was applied to detect early fluorescent antigens (DEFA) of cytomegalovirus (CMV) using the E13 monoclonal antibodies in 52 immunocompromised patients hospitalized in the Nephrology Institute of Havana. Of the 75 urine or blood (buffy coat) samples taken, 15 were found positive to CMV. Using classical diploide human fibroblast isolation technique, 12 CMV strains were isloation of previously detected positive samples by DEFA. In addition, CMV was isolated from one sample reported to be negative by DEFA. A coincidence of 80% was found between both techniques. With the ELISA test, all the sample studied have IgG antibodies to CMV.

Se aplicó la técnica de detección de antigenos precoces fluorescentes (DAPF) usando el anticuerpo monoclonal E-13 McAb, mediante el cual se lograron detectar 15 casos positivos a CMV de 75 muestras de orina o sangre ("buffy coat") tomadas de 52 pacientes inmunocomprometidos ingresados en el Instituto de Nefrología de ciudad Habana. Aplicando las técnicas clásicas de aislamiento en fibroblastos humanos diploides (MRC-5), se lograron aislar 12 cepas de CMV de casos previamente positivos por DAPF; lográndose además un aislamiento en una muestra reportada negativa por fluorescencia. Se observó una coincidencia de un 80% entre ambas técnicas. Se detectó la presencia de anticuerpos IgG contra CMV en todos los casos estudiados, utilizando para ello la técnica ELISA.