Devido às falhas encontradas no método de inoculação de begomovírus em plantas de tomateiro, um método eficiente e confiável de inoculação de begomovírus foi desenvolvido utilizando como vetor a mosca-branca (Bemisia tabaci). A aquisição viral foi realizada em uma armadilha ('Tube-cage') feita a partir de um tubo de polipropileno contendo moscas-brancas de um ou dois dias de idade e o ápice de uma planta de tomate infectada com um begomovírus. Após 48 horas de período de aquisição, procedeu-se à inoculação utilizando-se uma armadilha em forma de anel ('Ring-cage') contendo as moscas-brancas virulíferas. A armadilha foi colocada na parte abaxial das folhas de plântulas de tomateiro. Após o período de inoculação de 48 horas, as moscas-brancas foram eliminadas e as plantas inoculadas foram incubadas por 28 dias em casa-de-vegetação. Utilizando-se este método três moscas-brancas virulíferas por planta foram suficientes para causar infecção em tomateiro susceptível cv. Viradoro. Este procedimento foi aplicado para avaliar a resistência de tomateiro linhagem 486-1 (resistente) em comparação com 'Viradoro'. Hibridização por dot-blot confirmou a susceptibilidade de 'Viradoro' e a resistência da linhagem 486-1, mostrando a utilidade deste método na seleção de plantas resistentes. Este método também permitiu a avaliação da presença do vírus nas folhas inoculadas e em folhas superiores não inoculadas, indicando que o mecanismo de resistência da linhagem 486-1 poderá estar atuando nas folhas inferiores inoculadas, não havendo translocação viral para as folhas superiores.

Due to failures of infection after mechanical inoculation of begomovirus on tomato (Lycopersicon esculentum Mill.) plants, an efficient and reliable begomovirus inoculation method was developed using the whitefly vector (Bemisia tabaci). Virus acquisition was carried out using a 'Tube-cage', made of a polypropylene tube, containing one to two day-old whiteflies and a tomato plant apex infected with a begomovirus isolate. After 48 h of acquisition access period, inoculation was done using a 'Ring-cage', containing viruliferous whiteflies, attached to the abaxial side of the leaf of young tomato plants. 48 hours after acquisition, the whiteflies were eliminated and the inoculated plants were incubated for 28 days under greenhouse conditions. Three viruliferous whiteflies per plant were enough to cause infection in susceptible tomato cv. Viradoro. This procedure was applied to test the resistance of tomato line 486-1 (resistant line) in comparison with 'Viradoro' (susceptible cultivar). Dot blot hybridization confirmed the susceptibility of 'Viradoro' and the resistance of the line 486-1, showing the efficiency of this method for screening plants for disease resistance. This method is also a useful tool in detecting the presence of virus in inoculated (lower leaves) and in non-inoculated (upper leaves) in a given plant. Using this procedure, it was observed that the resistance of the line 486-1 probably is expressed in the inoculated leaf without virus translocation to the upper leaves.

A região serrana do Espírito Santo, abrangendo os municípios de Vargem Alta, Venda Nova do Imigrante e Domingos Martins, é importante área produtora de hortaliças no Brasil. Um levantamento foi feito em outubro de 2003 visando verificar a ocorrência e a importância de viroses nas culturas de tomate e pimentão. Cento e trinta e cinco amostras foliares de tomate e pimentão apresentando sintomas semelhantes ao de infecção por vírus foram obtidas nos três municípios e analisadas por meio de sorologia e reação em plantas indicadoras. Os resultados mostraram que o Pepper yellow mosaic virus (PepYMV) é o vírus prevalente ocorrendo como surto epidêmico em diferentes cultivares de tomate e híbridos suscetíveis de pimentão. O Tospovirus Groundnut ringspot virus e o Cucumovirus, Cucumber mosaic virus apresentaram ocorrência esporádica. Não foi detectada em nenhuma amostra a presença de Potato virus Y (PVY), tobamovírus ou outros tospovírus. Apesar da ocorrência da mosca branca na região, não foram observados sintomas típicos de infecção por begomovírus nas lavouras amostradas durante este levantamento.

The highland area of the State of Espírito Santo is an important area for vegetable production comprising the counties of Vargem Alta, Venda Nova do Imigrante and Domingos Martins. A survey for viruses occurrence in the tomato and the sweetpepper crops was done in October, 2003. One hundred and thirty five leaf samples from tomato and sweetpepper showing virus-like symptoms were analyzed by serology and indicator hosts. Epidemics of Pepper Yellow mosaic virus, was observed in tomato and susceptible sweetpepper hybrids. Groundnut ring spot virus the only tospovirus species detected, and Cucumber mosaic virus was sporadically occurred. Potato virus Y, tobamoviruses and other tospoviruses were not detected in any of the analyzed leaf samples. Although high populations of the whitefly Bemisia argentifolii were present in tomato and sweetpepper no begomovirus-like symptoms were observed.

O "print-capture (PC) Polymerase chain reaction (PCR) " foi avaliado como um método inovativo de detecção de vírus de plantas. Plantas de tomate (Lycopersicon esculentum) infetadas com begomovírus e moscas-brancas virulíferas foram usadas para estudar a eficiência do método. Os passos de captura do DNA foram realizados usando filtros de náilon não carregados ou papel-filtro como suporte sólido. Fragmentos de DNA amplificados de tamanho esperado foram consistentemente obtidos por PCR de plantas infetadas cultivadas em casa de vegetação, após aplicação direta dos materiais fixados na mistura para PCR. Entretanto, para a detecção de vírus feita de uma mosca-branca e de amostras de tomateiros cultivados no campo foi necessário um tratamento a alta temperatura do material fixado antes da amplificação por PCR. Na comparação entre o filtro de náilon e papel-filtro como suporte sólido, o filtro de náilon apresentou maior eficiência de detecção. A aplicação do PC PCR reduz as chances de ocorrência de resultados falsos-positivos pela diminuição de passos de manipulação durante a preparação do DNA-alvo. Este método mantém todas as vantagens da diagnose por PCR, como a alta sensibilidade sem a necessidade de uso de reagentes radioativos.

Print-capture (PC) Polymerase chain reaction (PCR) was evaluated as a novel detection method of plant viruses. Tomato (Lycopersicon esculentum) plants infected with begomovirus (fam. Geminiviridae, gen. Begomovirus) and viruliferous whiteflies were used to study the efficiency of the method. Print-capturing steps were carried out using non-charged nylon membrane or filter paper as the solid support for DNA printings. Amplified DNA fragments of expected size were consistently obtained by PCR from infected plants grown in a greenhouse, after direct application of printed materials to the PCR mix. However, virus detection from a single whitefly and from field-grown tomato samples required a high temperature treatment of printed material prior to PCR amplification. Comparison of nylon membrane and filter paper as the solid support revealed the higher efficiency of the nylon membrane. The application of print-capture PCR reduces the chances of false-positive amplification by reducing manipulation steps during preparation of the target DNA. This method maintains all the advantages of PCR diagnosis, such as the high sensitivity and no requirement of radioactive reagents.

No estudo da interação de um begomovírus isolado de tomateiro (Lycopersicon esculentum) em Anápolis-GO, denominado GO-ANPL (taxonomicamente relacionado ao Tomato rugose mosaic virus, ToRMV) com o vetor Bemisia tabaci biótipo B, determinaram-se o período de acesso de aquisição do vírus (PAA), o período de acesso de inoculação (PAI), o período de latência (PL), a sua retenção e transmissão à progênie. Nos experimentos empregaram-se plantas de tomateiro 'Santa Clara' e cinco insetos por planta. Constatou-se um PAA mínimo de 15 min com o qual 6% dos tomateiros foram infetados. Este percentual aumentou para 65% quando o PAA foi estendido para 24 h. O PAI mínimo foi de 30 min registrando-se 18% de infecção, o qual foi elevado para 67% com 24 h de PAI. Observou-se o término do PL 16 h após o vetor adquirir o vírus. Na detecção do GO-ANPL no vetor via PCR, testes com mais de 2.500 espécimens constataram o vírus em ninfas desenvolvidas em tomateiro infetado, em adultos com diferentes PAAs, mas não em ovos de fêmeas avirulíferas ovipositados em planta infetada. Observou-se a passagem transestadial em 100% dos adultos testados que transmitiram o vírus em 33% dos casos. Evidenciou-se a transmissão à progênie pela detecção do vírus em ovos, ninfas e adultos provenientes de fêmeas virulíferas, contudo, a transmissão do vírus pelos adultos não foi observada. Os resultados obtidos indicam que a interação vírus-vetor é estabelecida desde a fase inicial do desenvolvimento do inseto e podem ser considerados relevantes para os estudos epidemiológicos dos begomovírus associados ao biótipo B de B. tabaci no país.

A begomovirus named GO-ANPL (taxonomically related to the Tomato rugose mosaic virus, ToRMV), obtained from tomato (Lycopesricon esculentum) plants in Anápolis, state of Goiás, was used to study virus/vector (Bemisia tabaci biotype B) interaction. The acquisition access period (AAP), the inoculation access period (IAP), and the latent period (LP) were determined by transferring five whiteflies per tomato seedling cv. Santa Clara. The minimum AAP was 15 min resulting in 6% infected plants, which reached 65% as the length of AAP increased to 24 h. At a minimum IAP of 30 min, 18% of plants were infected; this increased to 67% after an IAP of 24 h. The end of the LP in the vector occurred 16 h after virus acquisition. To detect the GO-ANPL in the vector by PCR, more than 2,500 specimens were tested. The virus was found in adults under different AAPs from the 1st to the 4th instar grown on infected plants. No virus was found in the eggs that were laid on infected plants by aviruliferous females. The GO-ANPL isolate was transmitted to the progeny of viruliferous females, since the virus was detected in eggs, all instars and adults. However, no virus transmission was observed from these adults. A high frequency of viral detection was observed in newly emerged adults from immature forms reared on virus-infected plants. These adults infected 33% of tomato plants in virus transmission assays. The results indicate that the interaction between begomovirus and B. tabaci biótipo B starts at early stages of insect development. This is important information for epidemiological studies of begomovirus in this country.

Doenças causadas pelos vírus do gênero Tospovirus são de grande importância em culturas de hortaliças e ornamentais no Brasil. No entanto, são escassos os estudos dos insetos que transmitem estes vírus no campo, os tripes. Pouco se sabe sobre as espécies de tripes que ocorrem no Brasil e quais as responsáveis pela ampla disseminação destas doenças. Com objetivo de estudar os aspectos epidemiológicos dos vírus, diferentes populações de tripes, potenciais vetores de tospovírus, foram coletadas no DF. Quatro espécies foram identificadas, Frankliniella occidentalis Pergande, F. schultzei Trybom, Thrips palmi Karny e T. tabaci Lindeman. Este é o primeiro relato da presença de F. occidentalis e T. palmi no DF. A metodologia de criação das quatro espécies de tripes é descrita.

The disease caused by the viruses belonging to the genus Tospovirus is a serious problem in horticultural and ornamental crops in Brazil. In the field, this virus group is transmitted by the insect vector, thrips. Little is known about the thrips species occurring in Brazil, and which species are important for the dissemination of these diseases. For the study of epidemiology of this virus group, different thrips populations, which may have the capacity to be vectors of tospoviruses, were collected in the Federal District. Four species were identified: Frankliniella occidentalis Pergande, F. schultzei Trybom, Thrips palmi Karny and T. tabaci Lindeman. This is the first report of the occurrence of F. occidentalis and T. palmi in the Federal District. A methodology for the rearing of these four thrips is described in this report.